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Post on 08-Dec-2015
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Capítulo 1: Técnicas histológicas básicas
-La histología es la rama de la anatomía que estudia los tejidos de animales y plantas
-Existen distintas etapas para preparar tejidos: fijación, deshidratación y aclaramiento, inclusión, sección, montaje y tinción.
❏ Fijación : Evitan la putrefacción del tejido. Los agentes fijadores formalina y fijador de Bouin, que permiten el entrecruzamiento de proteínas permaneciendo la configuración normal del tejido.
❏ Deshidratación y aclaramiento : Se realizan baños del alcohol desde el 50% hasta el 100% para deshidratar. Luego se añade xileno, que miscible en parafina, para realizar aclaramiento del tejido.
❏ Inclusión: El tejido se debe incluir en un medio apropiado. Se sumerge en parafina hasta que se integre por completo en el tejido hasta formar bloques.
❏ Sección : Para cortar láminas finas, se utiliza un micrótomo. Se puede también cortar muestras congeladas.
❏ Montaje y tinción : Las muestras se montan en portaobjetos. La tinción se realiza mayormente con colorantes hidrosolubles. Primero es necesario eliminar la parafina, se rehidrata y se tiñe el tejido. El tejido nuevamente se deshidrata para la fijación permanente con el cubreobjeto
-Existen tres tipos de colorantes:
*Colorantes que diferencian componentes ácidos y básicos de la célula: La tinción hematoxilina y eosina es la más frecuente. La hematoxilina es una base que tiñe los ácidos nucleicos. Se tiñen de un color azul oscuro y estos componentes se denominan basofílicos. La eosina es un ácido que tiñe las bases de color rosado, denominándose acidófilos. Predomina este color en el citoplasma.
*Colorantes especializados en detectar componentes fibrosos de la matriz extracelular: El azul de toluidina tiñe de azul los tejidos, excepto los que tienen muchos polianiones, que se tiñen de color púrpura (matriz de cartílago y gránulos de células cebadas).
* Sales metálicas que precipitan en los tejidos
Para el microscopio electrónico se usa el glutaraldehído, paraformaldehído, tetróxido de osmio y permanganato de potasio.
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