tehnik analisa kromatografi sederhana · kroma= zat warna. •prinsip yg memungkinkan tehnik...
Post on 21-Mar-2019
240 Views
Preview:
TRANSCRIPT
TEHNIK ANALISA
KROMATOGRAFI SEDERHANA
KROMATOGRAFI
• ADALAH SUATU TEHNIK PEMISAHAN, YG
PERTAMA KALI DIPAKAI MEMISAHKAN ZAT-2
WARNA TANAMAN. KROMA= ZAT WARNA.
• PRINSIP YG MEMUNGKINKAN TEHNIK
KROMATOGRAFI DIPAKAI DLM AHP ADALAH:
MEMANIPULASI SIFAT-2 FISIK ZAT-2 YG
MENYUSUN SUATU CAMPURAN
PANGAN/ZAT PENYUSUN BAHAN PANGAN.
MANIPULASI SIFAT FISIK ZAT
PENYUSUN BHN PANGANS ADL:
1. TENDENSI MOLEKUL DARI SUATU ZAT UTK
LARUT DLM SUATU PELARUT/CAIRAN.
2. TENDENSI MOLEKUL DARI SUATU ZAT UTK
DAPAT TERADSORPSI PADA BUTIR-2 ZAT
PADAT YG HALUS DGN PEMUKAAN YG
LUAS
3. TENDENSI MOLEKUL DARI SUATU ZAT
UNTUK MASUK KE FASE UAP/MENGUAP.
• KRN PERBEDAAN SATU/LEBIH DAI SIFAT-2
FISIK TADI, CAMPURAN BERBAGAI ZAT
DAPAT DIPISAHKAN DALAM SUATU SISTEM
YG BERGERAK SECARA KONTINYU.
• DPT PULA DIKATAKAN TIDAK ADA DUA ZAT
ATAU LEBIH YG MEMILIKI SIFAT FISIK YG
SAMA. OLEH SEBAB ITU PEMISAHAN SUATU
CAMPURAN ZAT DAPAT SELALU
DILAKUKAN.
CONTOH:
• GLUKOSA, FRUKTOSA DAN SUKROSA
ATAU GULA SEDERHANA LAINNYA
SELALU DAPAT DIPISAHKAN DLM
SUATU CAMPURAN ZAT YG
MENGANDUNG GULA SEDERHANA
TSB DGN TEHNIK KROMATOGRAFI.
DEMIKIAN PULA UTK SUATU ZAT
CAMPURAN/SENYAWA CAMPURAN
LAINNYA.
POLARITAS DLM ILMU
KROMATOGRAFI• ARTI POLARITAS: ADANYA
PEMISAHAN KUTUB MUATAN POSITIF
DAN NEGATIF DARI SUATU MOLEKUL
AKIBAT TERBENTUKNYA
KONFIGURASI TERTENTU DARI ATOM-
2 YG MENYUSUNNYA.
• POLARITAS DLM KROMATOGRAFI
DIPAKAI SEBAGAI PETUNJUK SIFAT
PELARUT, ADSORBEN DAN SOLUTE.
POLARITAS ZAT PELARUT
KONSTANTE
DIELEKTRIK
NAMA ZAT PELARUT
1,890 PE, HEKSAN, HEPTAN
2,023 SIKLOHEKSAN
2,238 KARBON TETRAKLORIDA,TRIKLOROETILEN, TOLUEN
2,284 BENZENE, DIKLOROMETANE
4,806 KLOROFORM
4,340 ETIL ETER
6,020 ETIL ASETAT
20,700 ASETON, n.PROPANOL
24,300 ETANOL
33,620 METANOL
80,370 AIR
ADSORBENT= ZAT
PENYERAP/PENGIKAT• ADSORBENT DAPAT BERSIFAT POLAR ATAUPUN
NON-POLAR
• ADSORBEN POLAR: SILIKA GEL, ALUMINA
• NON-POLAR: ARANG ATAU CHARCOAL
• PROSES ADSORPSI SAMA DGN PROSES
TERLARUTNYA SOLUTE DALAM PELARUT YAITU:
LIKE DISSOLVES LIKE
• CONTOH: ALKOHOL TERIKAT > KUAT d.p. eter
TERHADAP ADSORBEN SILIKA GEL, SEBALIKNYA
ETER >TERIKAT KUAT PADA CHARCOAL d.p.
ALKOHOL
KROMATOGRAFI PARISI &
ADSORPSI• PEMISAHAN SCR KROMATOGRAFI PARTISI
ATAUPUN ADSORPSI SANGAT DIPENGARUHI OLEH:
• PERBEDAAN POLARITAS SOLUTE YG DIPISAHKAN.
CHROMATOGRAPHY PAPER
TLC PLATES
PEMISAHAN JENIS GULA
• PERSIAPAN SAMPEL: LAKUKAN SAMA
SPT PENETAPAN GULA REDUKSI
• LARUTAN STD: LAR. GLUKOSA,
LAKTOSA, MANNOSA DSB 1%
• PELARUT/FASE MOBIL:
PELARUT/FASE MOBIL:
• 1. n-butanol:asam asetat:air: 4:1:5 (v/v)
• 2. n-butanol:asam asetat:eter:air: 9:6:3:1
(v/v)
• 3. isopropanol:piridin:air:asetat:8:8:4:1
• 4.butanol:etanol:air:40:11:19
• 5.etil asetat:asetat:air:3:3:1
• 6.etil asetat:piridin:air:10:4:3
PENDETEKSI:
• LARUTAN ANILIN-FTALAT: LAR.1.669 G
ASAM 0-FTALAT &0,91 ML ANILIN DLM
CAMPURAN 48 ML n-BUTANOL, 48 ML ETER
& 4 ML AIR. SEMPROTANPD
KROMATOGRAM KERING, PANASKAN PADA
105-110 0C selama 5 – 7 MENIT.
• PEREAKSI RESORSINOL:
• PEREAKSI ANILIN DIFENILAMIN:
PENGUKURAN DGN
KROMATOGRAFI KERTAS
• PERSIAPAN KERTAS KROM.: 25X25 CM,
GARIS 3 CM DR SATU SISI, TANDAI GRS TSB
DGN PENSIL JARAK 2,5 CM, BERI TANDA
• SPOTTING: ISI BEJANA DGN 50-100 ML DGN
FASE MOBIL BIARKAN BEJANA JENUH,
SAMBIL NUNGGU TETESKAN SAMPEL &
LAR. STD PD TITIK-2NYA.
LANJUTAN KROM. KERTAS
• BESARNYA SPOT TETESAN 2 CM
• BIARKAN KERING ATAU PERCEPAT KERING DGN HAIR-DRYER
• KERTAS DIBENTUK SILINDER, JEPIT, LETAKKAN DLM BEJANA JENUH, LAKUKAN FASE DEVELOPING.
• BIARKAN FASE MOBIL MEMBASAHI KERTAS SAMPAI ¾ KERTAS, ANGKAT KERTAS KERINGKAN
• DETEKSI & PENGUKURAN Rf
• SEMPROT SPOT DGN LAR. PENDETEKSI
DETEKSI & PENGUKURAN Rf
• SEMPROT SPOT DGN LAR.
PENDETEKSI, KERINGKAN, WARNA
SPOT TERBENTUK, KERTAS
PANASKAN 105 0C, tandai bag. Tengah
spot dgn pensil ukur & bandingkan dgn Rf
spot std.
• Rf = jarak start-spot/jarak start-finish.
TLC ACCECORIES
TLC REAGENT SRP
F.M SPRAY BOTTLE
GLASS CC
Alat pelapis adsorben
Cara pengembangan
Hasil pengembangan ganda
Al.kromatografi atsorbsi
• PRINSIP PROSEDUR ANALISA:
PEMISAHAN PEWARNA MAKANAN SCR
KROMATOGRAFI KERTAS
• PEMISAHAN ASAM AMINO DARI
SAMPEL DGN CARA KROMATOGRAFI
LAPIS TIPIS.
top related