teljeskÖrŰvÉdelem 3 betegsÉg ellen egyetlen … · innovax nd-ibd –vakcinÁzÁsi elŐirat 17...
Post on 17-Jan-2020
1 Views
Preview:
TRANSCRIPT
TELJESKÖRŰ VÉDELEM 3 BETEGSÉG ELLEN
EGYETLEN KELTETŐI OLTÁSSAL
DR CSERÉP TIBOR
DVM MRCVS
ÁTTEKINTÉS
A rekombináns vakcinák bemutatása
rHVT-ND IBD
Üzemi körülmények során szerzett tapasztalatok
Szerológia
REKOMBINÁNS VEKTORVAKCINÁK BAROMFI VÉDELMÉRE
3
• A vakcinák új generációja géntechnológián alapszik
• Elsődleges célok : biztonságosság és kényelem
DEVELOPMENT OF RECOMBINANTS VACCINES
Biztonságosság
• A hagyományos vakcinák használatakor jelentkező oltási reakciók kiküszöbölése
• ND, ILT
• Elkerülhető a lappangás, horizontális terjedés , virulencia visszatérésének lehetősége ILT
Kényelem
• Több keltetői vakcinázás végezhető, és nem szükséges ismétlő vakcinázása telepeken
• Elkerülhető a maternális immunitás zavaró hatása, Deventer formula
• Könnyű alkalmazhatóság – tojásba oltás, bőr alá, automatizálás
REKOMBINÁNS VAKCINÁK: ELŐNYÖK
DEVELOPMENT OF RECOMBINANTS VACCINES
• rHVT- ND
• rHVT- ILT
• rHVT- IBD
• rHVT- AI
1° generációs rHVT egyszeres génbeültetéssel
DEVELOPMENT OF RECOMBINANTS VACCINES
• rHVT- ND-IBD
• rHVT- ND-ILT
2° generációs rHVT kettős génbeültetéssel
PULYKAHERPESZ VÍRUS
• Nagyon nagy vírus • A DNS felelős a vírus replikációjáért
és glikoproteinjeinek kódolásáért• A glikoproteinek felelősek a
gazdasejtekhez való tapadásért és behatolásért
• Az immunrendszer felismeri azantigéneket és immunválaszt ad
PULYKAHERPESZ VÍRUS
• Nagyon nagy DNS – ideális gén
eltávolított mutánsok létrehozására,
a virus reprodukciós képességének
elveszítése nélkül
• Genomjának vannak olyan szakaszai
amelyeknek nincs lényeges
funkciójuk, ahova gének helyezhetők
be
REKOMBINÁNS VEKTOR VAKCINÁK BAROMFI RÉSZÉRE
9
• Kizárólag a kulcs –protektív - donor
gén(ek) kerülnek behelyezésre a
vakcina vírus vektorba
• A donor vírus nem kívánt
mellékhatásai elkerülhetők
REKOMBINÁNS VEKTOR VAKCINÁK BAROMFI RÉSZÉRE
10
• Amikor a vektor vírus replikálódik, kifejezi
saját védő antigénjeit és a donor gének által
kódolt – protektív- antigén(ek)t.
• Elértük a célt :
protektív immunválasz
mind a donor mind a vektor
vírusokra
11
REKOMBINÁNS VAKCINÁK HÁTRÁNYAI
• Az immunitás kialakulása függ a vektor vírus replikációjától HVT replikáció
• Változások a szerológiai ellenőrzésben inzert által kiváltott immunválasz
• A korai védettség kialakulása érdekében , segíthet az élő, attenualt vakcinák használata ND
• A hagyományos élő vakcinákhoz képest drága
rHVT VEKTOR VAKCINÁK BAROMFI RÉSZÉRE
12
• Fagyasztott Marek vakcinák folyékony nitrogénben
tárolás, szállítás , beoltás
• Tojásba vagy napos korban oltás
nem terjed horizontálisan !
Innovax ND IBD
A legelső kettős génbeépítésű HVT vakcina
A legelső kettős génbeépítésű HVT vakcina
15
B ,T lymphocytes~ 20 nap replikálódás
fehérje expresszálódás
Ellenanyagok
és sejthez kötött
(celluláris)
immunválasz
A HVT REKOMBINÁNS VAKCINÁK MŰKÖDÉSI MODELLJE
HVT
IBD VP2
ND F
rHVT
1 vektor – 3 betegség elleni védelem
16
rHVT - ND-IBD
Marek betegség Baromfi pestis Gumboró betegség
INNOVAX ND-IBD – VAKCINÁZÁSI ELŐIRAT
17
17
• Sejthez kötött élő rekombináns pulykaherpeszvírus (HVP360 törzs), ami a sejtekkel a
baromfipestis vírus fúziós fehérjéjét és a fertőző burzitisz (Gumboro) VP2 fehérjéjét
termelteti.
• Cél állatfaj: Házityúk
• A védettség kezdete: Baromfipestis: 4. hét, Gumboro: 3. hét, Marek: 9. nap
• A védettség tartama: Baromfipestis: 8 hét !, Gumboro: 8 hét !, Marek: a kockázatos
időszak teljes tartama alatt
• Uj adatok – Rispens
• Naposcsibék (tojásba oltás) aktív immunizálására
• Adható ugyanazon a napon, de nem keverhető a Nobilis ND Clone 30 vagy Nobilis ND
C2, Nobilis IB Ma5 vagy Nobilis IB 4-91 vakcinákkal.
MAREK BETEGSÉG
18
18
ND (NCD): BAROMFIPESTIS
19
19
képek: N Lameda
20
20
IBD: FERTŐZŐ BURZITISZ (GUMBORO)
E. Leffer
L. Newman
EREDMÉNY …
21
21
22
22
REGISZTRÁLÁST MEGELŐZŐ VIZSGÁLATOK
EU. PHARMACOPOEIA ( Ph.Eur.)
23
23
rHVT ND-IBD BIZTONSÁGOSSÁGA
• A vakcina túladagolva is biztonságos (bőr alá (105.6 PFU)
tojásba oltva (105.1 PFU) ) dózisokban
– Nincs hatással a keltethetőségre
– Nem veszélyes a csirkére (120 nap ellenőrzési időszak)
• Nem nő a virulencia5. passzázs után sem veszélyes a csirkére (120 nap ellenőrzési időszak)
5. passzázs után is genetikailag stabil (genotípusosan és fenotípusosan)
• A rekombináns HVT állatról állatra terjedése nagyon hasonló az
eredeti HVT törzshöz
24
24
REGISZTRÁLÁST MEGELŐZŐ HATÉKONYSÁGI VIZSGÁLATOK
Baromfipestis elleni védelem• NDV Genotípus GII – GIV – GVII
• Klinikai védelem és a vírus ürítésének csökkenése
Gumboró elleni védelem• STC (Aphis USA), vvIBD CS89(EU), Variant E (USA)
• Klinikai védelem és a Bursa lymphoid sejtjeinek kiürülése elleni védelem (immunszuppresszió)
Marek-féle betegség elleni védelem• vvMDV RB1B, vMDV Ga5
• Klinikai védelem
Hatékonysági vizsgálatok ráfertőzéssel
26
26
VÉDELEM BAROMFIPESTIS ELLEN
27
27
BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM TESZTELÉSE
Ráfertőzés
izomba oltott, 105
EID50/dózisú
NDV challenge törzs Herts
33/56
A baromfipestisre jellemző tünetek klinikai
ellenőrzése
(megbetegedések és elhullás)
Vakcinázás bőr
alá (vagy
tojásba oltva)
1. nap x. nap x. nap +14 nap
-------------->ellenőrzés
BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM – DO sc.
source: A new double construct HVT-vaccine (rHVT-F-VP2) containing inserts for ND and IBD, Rik Koopmam, presentation 2017 AAAP congres Indianapolis
Vé
det
tsé
g, %
Életkor ráfertőzéskor (hetek )
* A védelmet a ráfertőzést követő 14 napon át vizsgálták és a madarakat pozitívnak minősítették, ha a Baromfipestisre jellemző klinikai tüneteket mutattak úgymint, mozgáskoordináció hiánya, bénulás és/vagy elhullás
29
29
TOJÁSBA OLTÁS - VÉDELEM BAROMFIPESTIS ELLEN
• Amerikai tanulmány Texas GB (genotype II)
Teszt dozis 104 ELD50/madár
•EU tanulmány
Herts 33/56 (genotype IV)
Teszt dózis 105 EID50
Vé
det
tség
, %
Baromfipestis ráfertőzés 4 élethetesen (Texas GB)
Vé
det
tség
, %
Baromfipestis ráfertőzés 4 élethetesen
Vé
det
tség
, %
Baromfipestis ráfertőzés 8 élethetesen
30
30
BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM - EGYIPTOMI VELOGÉN NDV, GENOTÍPUS VIIKLINIKAI VÉDELEM ÉS VÍRUSÜRÍTÉS CSÖKKENÉSE
Csoportszám
Izol.SPF
madarakdb
Életkor: 1 nap Ráfertőzés : 12 naposan 15. nap 20 . nap 22. nap 28. nap
VakcinázásNDV genotípus VII
Ráfertőzés
Kloáka tampon - madarak száma
Ráfertőzést követő
0. nap 3. nap 7. nap 10. nap 14. nap
1 A06 5 Nincs Nincs 5 5 5 5 5
2 A07 20 rHVT ND-IBD (sc) AG-1502 (im) 20 20 20 20 all
3 A08 20rHVT ND-IBD (sc) + ND C2
(oc)AG-1502 (im) 20 20 20 20 all
4 A09 20rHVT ND-IBD (sc) +ND
Clone30 (oc)AG-1502 (im) 20 20 20 20 all
5 A10 20 rHVT-ND + IC 2512 IBD (sc) AG-1502 (im) 20 20 20 20 all
6 A12 10 Nincs AG-1502 (im) all all all all all
Adatok: MSD Animal Health.
Hasonló vizsgálati terv a 20 és 28 napos ráfertőzésre
Ráfertőzés dózisa: 105 ELD50
BAROMFIPESTIS ELLENI VÉDELEM – NDV, GENOTÍPUS VII
source: A new double construct HVT-vaccine (rHVT-F-VP2) containing inserts for ND and IBD, Rik Koopmam, presentation 2017 WVPA congres Edinburgh
rHVT-ND-IBDday 1
Vé
det
tsé
g, %
A ráfertőzést követő 15. napon megfigyelt Baromfispestisre utaló klinikai tünetek
Ráfertőzött
kontrol
csoport
Negatív
kontrol
Ráfertőzés 12 naposan20 naposan28 naposan
32
32
Klinikai védelem NDV virus, Genotípus VII rHVT ND-IBD, C2 vagy Cl 30 vakcinákkal
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Innovax ND IBD Innovax ND IBD +Nobilis ND C2
Innovax ND IBD +Nobilis ND Clone30
rHVT-ND + IC IBDV Challenged controls
Pe
rce
nt
Pro
tect
ion
(Su
rviv
al)
12 day-old
20 day-old
28 day-old
Data on file. MSD Animal Health.
Nem fertőzött
kontrol csoport
12 napos20 napos28 napos
Vé
det
tség
, % (
túlé
lés)
GUMBORO BETEGSÉG ELLENI
VÉDELEM
33
rHVT ND-IBD HATÉKONYSÁGA ERŐSEN VIRULENS IBD (CS89) ELLEN
Klinikai védelem & Lymphoid depléció (kórszövettan)10 dpc megfigyelt időszak post mortem 10 dpc
Csoport Isolator SPFcsibékszáma
Vakcinázás1.napon
SC
Very virulent IBDCS89 100 CID50/dose,ocular
D21 D28
1 A30 10 Neg control none none
2 A31 10 Pos control CS89 CS89
3 A32 20 rHVT-ND-IBD CS89 CS89
4 A33 20 rHVT-ND + IC 2512 IBD CS89 CS89
5 A35 20 rHVT-IBD CS89 CS89
Data on file. MSD Animal Health.
rHVT ND-IBD - vvIBDV elleni klinikai védelem:
OOI és DOI - SPF állomány, Ráfertőző törzs: CS-89
9095 100 100 100
0 0 0 0 00
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
2 weeks 3 weeks 4 weeks 6 weeks 8 weeks
% V
éd
etts
ég
Challenge Age
Innovax ND-IBD HVT only
Data on file. MSD Animal Health. Report 2015; GNI/0067/15.
ÁTLAGOS KLINIKAI VÉDELEM IBD CS89 RÁFERTŐZÉS UTÁN: D21 & D28
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
D21 D28
neg control
pos control
Innovax ND-IBD
rHVT-ND + IC 2512 IBD
rHVT-IBD
IBD pontozásos módszer (napi pontozás):0:Nincs IBDV-re utaló tünet1:IBDV-re utaló elváltozások2:IBDV ráfertőzés miatti elhullás2#:Euthanasia erős IBDV fertőzés miatt
BURZAKÁROSÍTÓ HATÁS - LYMPHOID DEPLÉCIÓ IBD CS89 RÁFERTŐZÉS
UTÁN D21 &D28
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
4,5
D21 D28
neg control
pos control
Innovax ND-IBD
rHVT-ND + IC 2512 IBD
rHVT-IBD
LD
Score
Lymphoid depletion
LD score: 0= normal bursa; 1= 1-25% LD; 2= 26-50% LD; 3= 51-75% LD; 4=76-100% LD; 5= 100% LD*LD Lymphoid Depletion** LD score <31) LD score at 3 days post challenge
38
• US vizsgálat: STC (klasszikus
törzs) IBDV ráfertőzés/US
Pharmacopeia szerint
GUMBORO ELLENI VÉDETTSÉG IN OVO OLTÁS ESETÉN
EU vizsgálat CS89 vvIBDV
ráfertőzés: 3 és 8 héttel vakcinázás után (EU. Ph.)
CS89 100 CID50/doseocular
39
MAREK-FÉLE BETEGSÉG ELLENI
KLINIKAI VÉDELEM
rHVT ND-IBD DO sc. -vvRB1B ráfertőzés 9 napos korban
87,8
00
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Innovax ND-IBD Unvaccinated controls
Véd
etts
ég%
Data on file. MSD Animal Health. Report 2015; GNI/0039/15
A védettségnek min.80%-nak kell lennie…
rHVT ND-IBD DO sc, in ovo - ráfertőzés vGA5 TÖRZS (US)
8395
10
85
30
20
40
60
80
100
In ovo In ovo In ovo SC SC
Ráfertőzés: 5 napos korban
placebo placebo
Védettség %
2019 március 21. CVMP pozitiv vélemény
42
MAREK-FÉLE BETEGSÉG ELLENI VÉDELEMRISPENS + rHVT ND-IBD
Marek védelem - Rispens + rHVT ND-IBD
SPF állomány –vvMDV RB1B-vel ráfertőzve és megfigyelve 77 napig
csoport Vakcina 1 Vakcina 2 Alkalmazás módja
RáfertőzésIM
kor védelem
vakcina adag vakcina adag
1 rHVT-ND-IBD 103.3
PFU/ dose
Rispens 103.0 PFU/ dose
SubcutanD1
RB1B 5 nap 93%(28/30)
2 rHVT-ND-IBD 103.3
PFU/ dose
Rispens 103.0 PFU/ dose
SubcutanD1
RB1B 5nap 100%(30/30)
3 nem vac/fertőzöttcontrol
NA nem vac/fertőzöttcontrol
NA - RB1B 5 nap 0(0/30)
4 Nem vac/nem fertőzött
NA Non vac/nem fertőzött
NA - - - egészséges(6/6)
Monitoring : Klinikai megfigyelés 77 napig + Post mortem vizsgálat minden elhullott egyedből
ND védelem – Rispens + rHVT ND-IBDráfertőzés: ND Herts
Group Vakcina 1 Vakcina 2
Alkalmazás módjaRáfertőzés
IMkor
Védettség (%)Name Dose Name Dose
1 rHVT-ND-IBD103.3 PFU/
doseRispens
103.0 PFU/ dose
SubcutaneousD1 ND Herts
10 5.3
Log10 ELD50
28nap
90(19/21)
2nem vac/
fertőzött controlNA
nem vac/fertőzött control NA -
0(0/12)
3nem vac/nem
fertőzött controlNA
nem vac/nemfertőzött control
NA - non - 100
Monitoring: Klinikai megfigyelés 14 napig (naponta 2x, a 2. és 3. nappal a ráfertőzés után: baromfipestisre utaló tünetek, elhullás, kórboncolás
Gumboro védettség: Rispens + rHVT ND-IBD IBD ráfertőzés: vvIBD CS89
csoport Vakcina 1 Vakcina 2
Alkalmazás módjaRáfertőzésszemcsepp
korVédettség
(%)Neve Adag Neve Adag
1 rHVT-ND-IBD103.3 PFU/
doseRispens
103.0 PFU/ dose
SubcutaneousD1
IBD CS8930 CID50
21nap
100(22/22)
2nem vac/
fertőzött controlNA
nem vac/fertőzött control NA -
0(0/11)
3nem vac/nem
fertőzött controlNA
nem vac/nemfertőzött control
NA - nem - 100
Monitoring: klinikai monitoring a ráfertőzés után 10 napig: IBDV-re utaló tünetek vagyelhullás, kórboncolás10 nappal a ráfertőzés után: az életben maradt egyedek kiirtása, Bursa makroszkóposvizsgálata és kórszövettani vizsgálat.
• A Rismavac nem befolyasolja hátrányosan az Innovax ND IBD hatékonyságát
• A kombináció életre szóló védettséget biztosít Marek-féle betegség, Baromfipestis és Gumboro ellen a hosszú élettartamú madaraknak is (tenyész és tojó)
3 in 1
rHVT –ND- IBD ÜZEMI TAPASZTALATOK
PERU
48
ND
•velogenic
• lentogenic
IBDV
•Variant,
•Classical
•Very virulent
Lima
Arequipa rHVT-ND-IBD Control
InnovaxND-IBD +NDC2, DO
InnovaxND+NDC2 –IC 2512, DO
rHVT-ND +2512 IC
kakasjérce
A BURSÁK KÓRBONCTANI ÉRTÉKELÉSE A 38. NAPON
Normális Enyhe atrophia Súlyosfokú atrophia
10/14 3/14 1/14
0/14 2/14 12/14rHVT-ND + 2512 IC
rHVT-ND-IBD
rHVT-ND-IBD
TERMELÉSI EREDMÉNYEK ÖSSZEGZÉSE 5 TELEPRŐL:
50
(Innovax ND + C2) + 2512 IC Innovax-ND-IBD + C2
#1 #2 #3 #4 #5 Average #1 #2 #3 #4 #5 Average
Mean end weights per bird (kg)* 2.915 2.943 2.855 3.160 2.910 2.956 2.914 2.882 3.028 3.15 3 2.994
Age 42.25 42.21 42.6 41.89 41.38 42.06 41.68 41.18 41.7 41.13 41.02 41.34
ADWG (g/day)* 69.01 69.73 67 75.59 70.32 70.33 69.93 69.99 72 76.58 73.14 72.32
Mortality (%) 2.61 2.86 3.82 2.21 2.91 2.88 2.5 3.09 4.95 1.66 3.5 3.14
Feed conversion** 1.68 1.65 1.66 1.67 1.74 1.68 1.65 1.56 1.66 1.66 1.71 1.64
EPI 399 404 388 433 383 401 410 431 415 443.48 401.88 420
BW
+38g
$3,800
FCR
4pt (40g)
$2,790
Cost Vaccination
$20 - $15
$500
Difference
$6,090 / cycle
~ $36,500 / year
ROI1:12
Difference in 100,000 birds
Meat 1 $/kg $ 232.50/ton
• rHVT- ND IBD
• rHVT-IBD
• IC 2512 IBD
FCR TOTAL MORTALITY(%) FINAL WEIGHT (KG) AVERAGE DAYS
TREATMENT COSTPER CHICKEN (€)
A 1,82 5,45 2,86 43,2 0,0275
FCR TOTAL MORTALITY(%) FINAL WEIGHT (KG) AVERAGE DAYS
TREATMENT COSTPER CHICKEN (€)
B 1,91 5,95 2,645 42,53 0,036
FCR TOTAL MORTALITY(%) FINAL WEIGHT (KG) AVERAGE DAYS
TREATMENT COSTPER CHICKEN (€)
Γ 1,85 5,16 2,30 42,46 0,037
ÜZEMI EREDMÉNYEK - Görögország és Cyprus
1,821,85
1,91
1,75
1,80
1,85
1,90
1,95
INNOVAX TRANSMUNE VAXXITEK
Average Values Test 2 & Test 3
FCR
INNOVAX
ND-IBD
IC 2512 IBD HVT-IBD
66,20
54,1762,20
0,00
10,00
20,00
30,00
40,00
50,00
60,00
70,00
INNOVAX TRANSMUNE VAXXITEK
Average Values Test 2 & Test 3
ADG(g)
INNOVAX IC 2512 IBD HVT-IBD
ÜZEMI EREDMÉNYEK - Görögország és Cyprus
5,45 5,165,95
4,505,005,506,006,50
INNOVAX TRANSMUNE VAXXITEK
Average Values Test 2 & Test 3
TOTAL MORTALITY(%)
INNOVAX IC 2512
IBD
HVT-IBD
2,862,30
2,65
0,00
1,00
2,00
3,00
4,00
INNOVAX TRANSMUNE VAXXITEK
Average Values Test 2 & Test 3
FINAL WEIGHT (KG)
INNOVAX IC 2512 IBD HVT-IBD
ÜZEMI EREDMÉNYEK - Görögország és Cyprus
ROI rHVT-ND-IBD vs
rHVT-IBD: 8.36:1
ROI rHVT-ND-IBD vs
IC 2512 IBD: 2.97:1
ÜZEMI EREDMÉNYEK - Görögország és Cyprus
rHVT-ND-IBD
SZEROLÓGIAI MONITORING NL
Monitoring• 3 tojó előnevelő cég, 12 nevelő telep
• 2018 február-március
Vakcinázás:
- D0: rHVT-ND-IBD, sc
- D42: ND élő, spray
- W12: APV-IB-ND-EDS inaktivált vakcina
Mintázás:
- 4, 6, 9, 12 és 15 hetes korban
- 30 vérminta/ól/mintavételenként
Vizsgálatok (GD, Deventer):
- ND HAG
- IBD ELISA Idexx (standard)
- IBD VP2 ELISA (vektor vakcina specifikus )
ND HAG titer
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
7,0
8,0
4 6 9 12 16
átla
gtit
er
kor (hét)
Baromfipestis: átlagos HAG titerek 12 telepről
average
GUMBORO: ELISA titer
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
12,0
4 6 9 12 16
átla
gtit
er
Kor/hét
IBD ELISA VP2: átlagtiter 12 telep
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
12,0
4 6 9 12 16át
lagt
ite
r
Kor/hét
IBD ELISA ( Idexx): átlagtiter 12 telep
Összegzés: szerologiai monitoring
0
1
2
3
4
5
6
7
8
NCD (HAR)
Tite
r cs
op
ort
Átlagos ND titerek- 12 telep
Week 4
Week 6
Week 9
Week 12
Week 15
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
HVT-VP2 (ELISA)Ti
ter
cso
po
rt
Átlagos VP2 titerek- 12telep
Week 4
Week 6
Week 9
Week 12
Week 15
Következtetés:
• ND HI teszt: jól mérhető áthangolódás
• Gumboro ellenanyagok: a VP2 ellenanyagok gyors emelkedése a maternális ellenanyagok ellenére -> nincs rés a védettségen
2019
• Uj diagnosztika - NGS
• Szerológiai vizsgálatok rHVT ND-IBD utódállományokban
• További üzemi kipróbálások broiler, tenyészés tojó állományokban is
62
HTTP://WWW.INNOVAX-VACCINES.COM/
top related