ubaiii biologia molecular bioogia molecular 1º ano 2015/2016

UBAIII Biologia MolecularBioogia Molecular

1º Ano2015/2016

7/out/2015UBAIII e Biologia Molecular MJC

Sumário: Capítulo III. Transcrição

Aspectos gerais da transcrição Características gerais das RNA polimerases Reacções de adição de nucleótidos

O processo da transcrição Em bactérias Em eucariotas

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Fluxo de informação numa célula eucariota

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Transcrição?

Tradução?

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Aspectos gerais da transcrição – bactérias

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Aspectos Gerais da transcrição

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Aspectos Gerais da transcrição

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Métodos para estudar a transcrição

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Transcrição em bactérias

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Transcrição em bactérias

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Transcrição em bactérias

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Transcrição em bactérias

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PROMOTOR

Transcrição em eucariotas

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Enzima RNA sintetizadoRNA polimerase I rRNA (28S, 18S, 5,8S)RNA polimerase II mRNA, snRNA, snoRNA,

microRNA, RNA telomérico

RNA polimerase III tRNA, 5S rRNA, U6 snRNA e outros pequenos RNAs

RNA polimerase IV,V (apenas em plantas)

siRNA12

Comparação das RNA polimerases

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+FATORES DE TRANSCRIÇÃO

Bibliografia

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Capítulo 5 secção 5.1 e 5.2.

Capítulo 29 e 30

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Capítulo 13

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Sumário: Capítulo IV. Síntese e processamento do RNA

ribossomal e de transferência

a. Síntese e processamento dos percursores de rRNA

b. Síntese e processamento do 5S rRNA

c. RNA de transferência

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O QUE É PRODUZIDO DURANTE A

TRANSCRIÇÃO?

RNAs mRNA tRNA rRNA

Todos são processados antes da forma madura (funcional)

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• Unidade de Transcrição RNA

polimerase

• Transcripto primário• Associaçã

o com proteínas

snoRNAsnoRNP

• RNA funcional

Rea-ções de

“cut & paste

”

Transcrição do rRNA eucariota > 80% do RNA da célula. Unidades de transcrição aglomeradas em 5

“clusters” repetitivos em cromossomas diferentes.

Visíveis na interfase celular como nucléolos

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Transcrição de rRNA

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TandemZonas espaçadoras

Onde é o início da transcrição?

QUE RNA POLIMERASE?

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Constituição do ribossoma eucariota

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DE QUE COMPONENTES TEMOS

ESTADO A FALAR?

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MJCT0321

Unidades Svedberg e rRNA

Subunidade Ribossómica

Coeficiente de Sedimentação

Nº de nucleótidos

Grande 28S 5 000

Pequena 18S 2 000

Grande 5.8S 160

Grande 5S 120

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Transcrição de rRNA

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FALTA ALGUM?

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Metilação e Alteração da uridina

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Os transcriptos 1ºs de rRNA são diferentes:

• Pseudouridina (cerca de 95)• Grupos metilo (mais de 100)

QUE FUNÇÃO TÊM ESTAS ALTERAÇÕES?

QUE MOLÉCULAS FAZEM ESTAS ALTERAÇÕES?

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Processamento do rRNA

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QUE MOLÉCULA FAZ OS CORTES?

snoRNAs

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METILAÇÃO PSEUDO-URIDINAÇÃO

snoRNARNA alvo

snoRPs

(Box C/D) (Box A/H)

snoRNAs Existem mais de 200 moléculas diferentes

específicas para cada alteração. De onde originam os snoRNAs?

São codificados nos intrões dos genes.

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Metilação e Box C/D snoRNAs

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Pseudouridinação e Box A/H snoRNAs

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Montagem das subunidades do Ribossoma

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No nucléolo

PROTEÍNAS:1 - RIBOSSOMAIS2 - PROCESSADORAS

HELICASES (ASSOCIAÇÃO E DISSOCIAÇÃO)

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Síntese e processamento do 5S rRNA Síntese fora do nucléolo Genes em repetições tandem mas fora do

nucléolo Transcrito pela RNA polimerase III Reconhecimento do promotor dentro da zona

transcrita Após transcrição é trazido para o nucléolo

para sofrer processamento e ser montado o ribossoma.

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RNA polimerase III

Transcreve tRNA e snoRNAs além do 5S RNA

No caso dos snoRNA o reconhecimanto é diferente - é a montante da zona transcrita

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II

Quais os efeitos de apagar 1?

Quais os efeitos de apagar II?

Quais os efeitos de alterar a posição de II?

I

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Genes de tRNA Há cerca de 50 genes de tRNAs em células

animais Repetidos cerca de 1300 vezes em humanos

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Processamento de tRNA1. Corte do transcripto primário

1. Ribonuclease P2. Splicing de intrões3. Adição do tripleto CCA no terminal 3’4. Modificação de bases

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Bibliografia

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Capítulo 5 secção 5.3

Capítulo 30

Capítulo 13