ubaiii biologia molecular e biologia molecular 1º ano 2014/2015

UBAIII Biologia Molecular e Biologia Molecular

1º Ano2014/2015

Sumário:Capítulo V. Síntese e processamento do RNA mensageiro.

Implicações evolutivas dos intrões e splicing Capítulo VI. RNAs não codificantes e de interferência

Micro RNAs e a descoberta de novas formas de regulação: iRNA, miRNA, piwiRNA

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Processamento do mRNA

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Intrões do grupo II – Self-splicing

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Splicing do grupo II

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Spliceossoma – Splicing mediado por snRPs

Animação

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Splicing

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Splicing

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Splicing

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Splicing

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Splicing

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Spliceossoma

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Splicing

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Splicing

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Estrutura de uma snRNP

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Síntese e Processamento de mRNA

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Processing the ovomucoid pre-mRNA as determined by northern blot

Splicing de RNA

• O RNA é uma molécula que pode assumer as funções estruturais e de catálise.

• As funções de catálise são assumidas pelas riboenzimas.

• Estas reações pelas quais se cortam e colam mRNAs pode o denominado “Exon shuffling” dá origem a novidade genética

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Cor das petúnias e siRNA Tentativa de

aumentar pigmento em petúnias Inserção de cópias do gene para o pigmento

Resultado inesperado de não produção de NENHUM pigmento.

PTGS (Post-transcriptional gene silencing). 29/out/2015MJC-T06

siRNA e silenciamento de genes Greeen Fluorescence

Protein. Injecção de (+)

mRNA Injecção de (-) mRNA

Injecção de ds mRNA Denominado de RNA

de interferência RNAi

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RNAi is part of a broader phenomenon of RNA silencing, in which small RNAs inhibit gene expression in various ways.

The steps involved in RNAi include: dsRNA is cleaved into

small interfering RNAs (siRNAs) by an enzyme called Dicer.

The small dsRNAs are loaded into a complex named RISC that bind siRNA to a target RNA.

Small Regulatory RNAs & RNA Silencing PathwaysFormation & mechanism of action of siRNAs-miRNAs

The formation

and mechanism of action of siRNAs and

miRNAs

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Actuação do iRNA nas células

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Nativo e regulador de

expressãoUsado

laboratorialmente ou inserido por vírus ou transposão

Destino do RNAi na célula

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VERMES PLANTAS

Aplicações terapêuticas de siRNA

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Micro RNA e regulação da expressão génica

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micro RNA

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piRNA (piwiRNA) Maiores que os mi/siRNA (24-32 pbs) Codificados por zonas muito extensas do

genoma. Não envolve a formação de dsRNA ou a

clivagem por DICER . Mecanismo de actuação ainda muito

desconhecido. Associado a células de linhas germinativas.

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Bibliografia

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Capítulo 5 secção 5.4 e 5.5

Capítulo 30 Lippincott’s