analisi delle acque per uso potabile con la tecnica della membrana filtrante (dpr 24/05/88 n.236)...
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ANALISI DELLE ACQUE PER USO POTABILE CON LA TECNICA DELLA MEMBRANA FILTRANTE(DPR 24/05/88 N.236)
I.P.I.A. “E. Rosa” Sarnano Mc
Classe 4° Tecnico Chimico e Biologico a.s. 2008/2009
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Questa tecnica permette di determinare il numero di microrganismi presenti in un determinato campione e l’individuazione degli indici di contaminazione fecale dell’acqua destinata al consumo.
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•Si filtrano 100 ml di campione attraverso membrane sterili con una porosità di 0,45 μm.
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• Si pongono tali filtri sulla superficie di terreni in piastra.
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• Dopo incubazione, si otterranno colonie isolate che potranno essere contate.
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TERRENI DI COLTURAM-ENDO AGAR, M-FAECAL COLIFORM AGAR, SLANETZ BARTLEY AGAR.
MATERIALI E STRUMENTIApparato per la filtrazione (cilindro graduato con tappo,supporto poroso, beuta codata), contacolonie, pinza di bloccaggio, termostato, cappa sterile, pompa da vuoto, bunsen, pinzette, membrane filtranti, penna vetrografica, terreno di coltura.
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METODICA
Individuazione di coliformi totali •Montare l’apparato di filtrazione inserendo tra l’imbuto e il setto poroso, la membrana filtrante.
•Collegarlo ad una pompa da vuoto.
•Filtrare 100 ml di campione.
• Prelevare sterilmente la membrana e depositarla sulla superficie del terreno Endo Agar.
•Incubare a 36 +- 1°C per 24 ore.
Dopo incubazione contare le colonie rosse con riflesso metallico.
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METODICA
Individuazione dei coliformi fecali
•Montare l’apparato di filtrazione inserendo tra l’imbuto e il setto poroso, la membrana filtrante.
•Filtrare 100 ml di campione. •Prelevare sterilmente la membrana e depositarla sulla superficie del terreno MFC Agar.Incubare a 44°C per 24 ore.
•Dopo incubazione contare le colonie blu.
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METODICA
Individuazione degli Streptococchi fecali
•Montare l’apparato di filtrazione inserendo tra l’imbuto e il setto poroso, la membrana filtrante.
•Filtrare 100 ml di campione.
•Prelevare sterilmente la membrana e depositarla sulla superficie del terreno Slanetz Bartley Agar.
•Incubare a 37°C per 48 ore.
•Dopo incubazione contare le colonie rosse.
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Bibliografia
•“Microbiologia, Immunologia e Laboratorio” Fabio Fanti Calderini-Edagricole
•Il reportage fotografico è stato effettuato presso il Laboratorio di Biologia dell’ IPIA E. Rosa.
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Chi sono gli streptococchi fecali?
Sono cocchi Gram + con tendenza a disporsi a catena in terreni liquidi; sono aerobi ed anaerobi facoltativi.
Appartengono al genere Streptococcus, gruppo sierologico D di Lancefield.
Indicatori di contaminazione fecale recente. Resistono ai trattamenti con cloro. La loro presenza nelle acque delle piscine
trattate con cloro è indice di un trattamento insufficiente.
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Chi sono i coliformi fecali?
Gruppo di microrganismi a forma bastoncellare Gram -, aerobi ed anaerobi facoltativi, non sporigeni e che fermentano il lattosio con produzione di gas e acido alla temperatura di 44 °C in 24 ore.
La loro presenza costituisce un indice di contaminazione fecale dell’acqua esaminata. Il principale rappresentante è l’Escherichia coli che produce indolo in terreni contenenti triptofano.
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Chi sono i coliformi totali?
Gram -, a forma di bastoncelli, aerobi ed anaerobi facoltativi, non sporigeni, fermentano il lattosio con produzione di gas e acido alla temperatura di 37°C in 48 ore.
Appartengono alla famiglia delle Enterobacteriaceae.
Sono però anche presenti nel suolo, nelle piante, nell’aria e nell’ambiente acquatico;
Generi: Escherichia, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter ( solo Escherichia coli ha come habitat il tratto intestinale).