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´´Recuento globular, hematocrito, dosaje de hemoglobina, constantes corpusculares y velocidad de sedimentación en vertebrados´´
Trujillo – Perú
Alumna: Roman Reyes Cinthia Natali
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
INTRODUCCIÓN
El volumen de sangre de los adultos se correlaciona con la masa corporal (libre
de grasa) y representa en las mujeres 3.5 L y en los hombres 4.5 L. La sangre
está formada por una parte corpuscular (células sanguíneas) y una parte
líquida (plasma). De la parte corpuscular aproximadamente el 90%
corresponde a glóbulos rojos (Rodak, 2004).
Entre las funciones de la sangre destacan entre otras el transporte de
numerosas sustancias (O2, CO2, nutrientes, productos del metabolismo,
vitaminas, electrólitos, etc.), el transporte de calor (calentamiento,
enfriamiento), la transmisión de señales (hormonas), el amortiguamiento y
defensa frente a las sustancias extrañas y microrganismos (Silbernagl y
Despopoulus, 2000).
Estas funciones son realizadas por las células sanguíneas, de las que las más
numerosas son los eritrocitos encargados del transporte de O2 y de parte del
taponamiento del pH. Entre los leucocitos, los granulocitos neutrófilos se
encargan de la defensa inmunitaria inespecífica y los monocitos y linfocitos de
las reacciones inmunitarias específicas. Las plaquetas (o trombocitos)
intervienen de forma decisiva en la coagulación de la sangre (Silbernagl y
Despopoulus, 2000).
Debido a la importancia de estas funciones y a la cantidad de células
sanguíneas que participan en estos procesos, se toman medidas que nos
indican valores normales de parámetros como: Tiempo de coagulación,
velocidad de sedimentación, hematocrito, hemoglobina, recuento de glóbulos
rojos, recuento de glóbulos blancos, volumen corpuscular medio, etc.
Por eso decidimos realizar esta práctica de laboratorio, donde determinaremos
el valor de las siguientes constantes corpusculares: Tiempo de coagulación,
velocidad de sedimentación, hematocrito, hemoglobina, recuento de glóbulos
rojos, recuento de glóbulos blancos, volumen corpuscular medio, hemoglobina
corpuscular media, concentración media de hemoglobina corpuscular. Y como
objetivo comparar los resultados obtenidos con los parámetros normales.
II. MATERIAL Y MÉTODOS
Obtención de la muestra
La sangre se extrajo típicamente de una vena, de la parte interior
del codo. El sitio se limpia con un desinfectante (alcohol). Se
envolvió una banda elástica alrededor de la parte superior del
brazo con el fin de aplicar presión en el área y hacer que la vena
se llene de sangre. Luego, se introdujo suavemente una aguja en
la vena y se recogió la sangre en un frasco conteniendo
anticoagulante. La banda elástica se retiró del brazo. Una vez
recogida la muestra de sangre, se retiró la aguja y se cubrió el
sitio de punción para detener cualquier sangrado.
Tiempo de coagulación:
Se coloca una gota de sangre en una lámina porta objeto, con un
alfiler se mueve lentamente la gota de sangre hasta observar la
formación de un delgado hilo en la punta del alfiler que vendría a
ser la fibrina formada producto de la transformación del fibrogeno.
Calculando el tiempo desde que se coloco la gota de sangre hasta
la aparición de dicho hilo. El cual seria el tiempo de coagulación.
Velocidad de sedimentación:
Colocamos el tubo de Wintrobe en la gradilla de sedimentación
cuidando que esté perfectamente bien nivelada. Con la ayuda de
la pipeta Pasteur llenamos el tubo de Wintrobe hasta la marca de
10 ó 1 con sangre previamente homogenizada. Dejamos reposar
durante una hora evitando cualquier movimiento. Hicimos la
lectura de los milímetros (mm) sedimentados en una hora.
Hematocrito:
Según el Método de Wintrobe, la sangre con anticoagulante debe
ser llevada mediante una pipeta Pasteur, hacia el tubo de
Wintrobe, co0menzando desde el fondo hasta la marca de
100mm. , teniendo cuidado de no formar espuma.
Tapar el tubo con un tapón de goma para evitar evaporación.
Centrifugar a 3000rpm. por 30 minutos.
Transcurrido el tiempo observar y medir directamente el nivel de
la columna de glóbulos rojos.
Microhematocrito:
Tomar la muestra en capilares con anticoagulante.
Debe llenarse aproximadamente 70 – 80% del capilar.
Ocluir un extremo del capilar con plastilina.
Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una
centrifuga de microhematocrito, con el extremo ocluido, adherido
al reborde extremo de la plataforma.
Centrifugar por 5 minutos entre 10000 – 12000 rpm.
Hemoglobina:
La sangre tomada se diluye en 5ml de hidróxido de amonio el cual
causa hemolisis de los hematíes.
Por medio de la pipeta de Sahli se toma exactamente 0.02 ml de
sangre total, limpiar luego la punta con papel absorbente, y verter
en un tubo de ensayo el cual contiene el hidróxido de amonio.
Dejar en reposo por espacio de 5 a 15 minutos. Luego llevar a un
espectrofotómetro con filtro verde a 540 nm. y leer la
absorbancia.
Realizar los cálculos, multiplicando la absorbancia por el factor
que es 0.1063, y así obtener la concentración de hemoglobina por
unidad de volumen (gr/dL).
Cantidad de Glóbulos rojos:
Llenar la pipeta de Thoma para eritrocitos (roja) con sangre hasta
la marca de 0.5 con ayuda una boquilla. Secar el exceso de
sangre con una gasa limpia.
Sin dejar caer alguna gota de sangre, llenar con el líquido
diluyente de Hayem hasta la marca de 101 sin pasar de la marca.
Mezclar el contenido en el agitador para pipetas de Thoma
durante 1 min. Desechar las primeras 3 gotas. Dejar caer una
gota en la cámara de NEUBAUER, cubrir con una laminilla.
Contar las células con el objetivo 40X en las cinco cuadrículas
secundarias con la ayuda de un contador mecánico. Calcular el
número de eritrocitos/mm3 multiplicando el valor obtenido por
10000
Cantidad de Glóbulos blancos:
Llenar la pipeta de Thoma para leucocitos (blanca) con sangre
hasta la marca de 0.5 con ayuda una boquilla. Secar el exceso de
sangre con una gasa limpia.
Sin dejar caer alguna gota de sangre, llenar con el líquido
diluyente de Turck hasta la marca de 101 sin pasar de la marca.
Mezclar el contenido en el agitador para pipetas de Thoma
durante 1 min. Desechar las primeras 3 gotas. Dejar caer una
gota en la cámara de NEUBAUER, cubrir con una laminilla.
Contar las células con el objetivo 40X en las cinco cuadrículas
secundarias con la ayuda de un contador mecánico. Calcular el
número de eritrocitos/mm3 multiplicando el valor obtenido por
10000
Volumen corpuscular medio (VCM):
Resulta de multiplicar el valor del hematocrito en porcentaje por
10, divido todo esto entre el número de Glóbulos Rojos contados
en millones por mm3. Arroja el volumen promedio de cada GR, en
micras cubicas o femtolitros (fL).
Hemoglobina Corpuscular Media (HCM):
Se determina mediante el cociente entre el valor de la
concentración de hemoglobina de sangre total (gr/dL) multiplicado
por 10 y el número de hematíes en un mm3. Se expresa en µg.
Concentración Corpuscular Media de hemoglobina (CMHC):
Se obtiene de la multiplicación de la concentración de la
hemoglobina de la sangre total por 100, todo esto divido entre el
valor del hematocrito en porcentaje.
III. RESULTADOS
Tabla Nº 1:
ANÁLISIS LECTURA
Tiempo de coagulación 4´2”
Velocidad de sedimentación 10mm/h
Hematocrito 48%
Microhematocrito 48%
Hemoglobina 15.48g/dL
Recuento de Glóbulos rojos 2410000 /mm3
Recuento de Glóbulos blancos 5560 mm3
Volumen corpuscular medio(VCM)
Hemoglobina corpuscular media(HCM)
Concentración media de Hb. Corpuscular(CMHC)
IV. DISCUSIÓN
El número de leucocitos depende de muchos factores como, edad, peso, etc.
Para adultos los valores de referencia oscilan entre 4 500 / mm3 y 11 500 /
mm3 (Ruiz, 2003). Los valores obtenidos para recuento de glóbulos blancos en
la tabla 1 dan un número de 5560 mm3 de sangre, encontrándose dentro de
los parámetros ideales.
La referencia para hemoglobina es variable y depende del sexo, altura del sitio
de residencia, etc. Las cifras inferiores normales de hemoglobina en adultos
sanos son de 12 g/dL para mujeres y de 14 g/dL para varones. Las
cuantificaciones de Hb inferiores a las mencionadas permiten establecer el
diagnóstico de anemia. Las cifras de hemoglobina superiores a 15 g/dL para
mujeres y 18 g/dL para varones permiten establecer el diagnóstico de
eritrocitosis o polisemia (Ruiz, 2003). Por lo tanto concentración de
hemoglobina en mujer, hallada en el laboratorio (15.48 g/dL), se encuentra por
encima del limite superior, lo que no indicaría el diagnóstico de eritrocitosis o
polisemia; sino debido a al error propio de la inexperiencia de los estudiantes
en estas pruebas.
El valor encontrado del Hto se encuentra en el rango dispuesto por Rodak,
2004, el cual oscila entre 35 y 49 % para mujeres.
El Tiempo de coagulación indica el estado de los factores plasmáticos que
intervienen en el mecanismo de la coagulación (globulina antihemofílica,
protrombina, fibrinógeno, etc.) o que la dificultan (antitrombina, etc), aunque
hay que resaltar su escaso valor, pues es normal en muchos casos en los que
estos factores están alterados (M. Donado, 2005). En la práctica este tiempo
fue de 4’ 2”, valor ligeramente bajo; ya que el tiempo de coagulación normal es
de 5 a 10 minutos. Sólo si es superior a 12’ puede considerarse patológico
(Rodak, 2004).
La velocidad de sedimentación globular (VSG) es útil para monitorizar la
evolución de una enfermedad inflamatoria o diferenciar enfermedades
similares. La VSG es afectada por los eritrocitos, el plasma y factores
mecánicos y técnicos. Los eritrocitos normalmente son pequeños, sedimentan
despacio y tienen una carga superficial neta negativa, por consiguiente tienden
a repelerse entre sí (Rodak, 2004). Caso que ocurre en la VSG hallada en el
laboratorio de práctica, el cual está dentro del rango establecido por Ruiz,
2003, el cual va desde los 15 mm/h a 20 mm/h.
V. CONCLUSIÓN
Los resultados obtenidos para las diferentes pruebas, dan resultados dentro de
los parámetros establecidos, por lo que se los puede considerar como
normales, con excepción de algunos valores que varían.
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS
GANONG W. 1996. Fisiología médica. El Manual Moderno.
RODAK, F. 2004. HEMATOLOGÍA: Fundamentos y Aplicaciones Clínicas.
Editorial Médica Panamericana. España. pág. 155-168.
RUIZ ARGUELLES, G. J. 2003, FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGÍA,
Editorial Médica Panamericana S.A. España., pág. 45-60.
SILBERNAGL, S. DESPOPOULUS, A. 2000. Atlas de bolsillo de fisiología.
Ediciones Harcourt. España. pág. 88.