ผลของปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ

ตอจาํนวนจุลนิทรีย

และการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้ํานมดิบ

โดยชุดทดสอบ

สุรียวรรณ พันธนรา พรศรี ชัยรัตนายุทธ ประวีร วิชชุลตา สมจิต สุรพัฒน อทุัย คนัโธ และวงศอนันต ณรงควาณิชการ

ระบบแลคโตเพอรออกซิเดส (LPS)

- Natural antimicrobial factor

- ประกอบดวย

- เอนไซมแลคโตเพอรออกซิเดส (LP)

- ไฮโดรเจนเพอรออกไซด (H2O2 )

- ไธโอไซยาเนท (SCN)

ไธโอไซยาเนท (SCN)

- แหลง - เนื้อเยื่อสัตว และ ซีรัม

- สารคัดหลั่ง เชน น้ํานม น้ําลาย และน้ําตา

- ปสสาวะ

- ปกติในน้ํานมโคมี 1-10 ppm

- ปริมาณ SCN ในรางกายขึน้อยูกับอาหารที่โคกนิ

สารตั้งตนของ SCN

cyanogenic glycosidesพบในมันสําปะหลัง มันฝรั่ง ขาวโพด ถัว่ ออย และเปลือกของผลไมหลายชนิด cyanogenic glycosides HCN

glucosinolates

การกาํจัดพิษ HCN ในรางกายโคการกาํจัดพิษ HCN ในรางกายโค

S2O32- + CN- SCN- + SO3

2-Rhodanese

Thiocysteine + CN- Rhodanese + CysteineSCN-

lactoperoxidase system

โดยโดย

2SCN- + H2O2 + 2H+ (SCN)2 + 2H2O PeroxidasePeroxidase

(SCN)2 + H2O HOSCN + SCN + H+

HOSCN

หรือหรือ

SCN- + H2O2 OSCN- + H2O PeroxidasePeroxidase

Milk SCN

H+ + OSCN-

-- ??????????

ใบมันสําปะหลังใบมันสําปะหลังมันเสนมันเสน

การกระตุนระบบการกระตุนระบบ LP LP ในน้ํานมดิบในน้ํานมดิบ ดวยดวย SCNSCN

-- ใหโคกนิอาหารที่มีสารตั้งตนของใหโคกนิอาหารที่มีสารตั้งตนของ SCNSCN

การทดลองที่ 1

ศกึษาผลของปริมาณไธโอไซยาเนท

ตอจํานวนจุลินทรียในน้ํานมดิบ

วิธีการวิธีการ

1. แผนการทดลอง

- RCBD

- น้ํานมดิบ 3 บล็อก

- ปจจัยศึกษา SCN 4 ระดับ คือ 0, 5, 10 และ15 ppm

- คาสังเกตคือ SPC และ coliform count ในน้ํานม

2. วิธีการ

- วิเคราะห SPC , coliform, LP และ SCN กอนการทดลอง

- แบงน้ํานมดิบ จํานวน 4 ขวด

- ขวดที่ 1ไมเติม SCN (control, 0 ppm)

- ขวดที่ 2, 3 และ 4 เติม SCN 5, 10 และ 15 ppm ตามลําดับ

- วิเคราะห SCN

- แบงน้ํานมทุกตัวอยางเปน 2 สวน เก็บที่ 25 และ 4 OC

- ตรวจนับ SPC และ coliform ที่เวลา 2, 4, 6, 8 และ 10 ชั่วโมง

วิธีการวิธีการ

วิธีการวิธีการ

3. การวิเคราะหขอมลูทางสถติิ

- วิเคราะหความแปรปรวน และเปรียบเทียบความแตกตาง

คาเฉลี่ยระหวางกลุม โดยวิธี Tukey

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

- ปริมาณ LP ในน้ํานมดบิ

- LP เฉลี่ย 7.55 unit/ml (1.2 – 19.4 unit/ml)

SCN ที่เติม (ppm) SCN ที่วัดได (ppm)

00 5.165.16

+ 5+ 5 11.1111.11

+10+10 15.4815.48

+15+15 19.8919.89

- ปริมาณ SCN ในน้ํานมดิบ

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

จํานวนจลุินทรียเริ่มตนในน้าํนมดิบ

- TPC 3.31x105 CFU/ml (400,000 CFU/ml)

- Coliform count 1.34x103 CFU/ml

(10,000 CFU/ml)

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

TPC ในน้ํานมดิบ ที่ 25 oC

0

0 2 4 6 8 10

Time (hr.)

TPC ( х 10 8 CFU/ml)50

45

40

35

30

25

20

15

10

5

control

SCN 5 ppm

SCN 10 ppm

SCN 15 ppm

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

TPC ในน้ํานมดิบ ที่ 4 oC

20

30

40

50

60

70

0 2 4 6 8 10

control

SCN 5 ppm

SCN 10 ppm

SCN 15 ppm

Time (hr.)

Total plate count ( х 10 4 CFU/ml )

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

จํานวนโคลิฟอรมในน้ํานมดิบ ที่ 25 oC

0

5

10

15

25

30

0 2 4 6 8 10 Time (hr.)

Colif

orm

coun

t(х

10

7CF

U/m

l.)

20

control

SCN 5 ppm

SCN 10 ppm

SCN 15 ppm

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

จํานวนโคลิฟอรมในน้ํานมดิบ ที่ 4 oC

0

5

10

15

20

25

30

0 2 4 6 8 10 Time (hr.)

Col

ifor

mco

un

t(C

FU/m

l.)

control

SCN 5 ppm

SCN 10 ppm

SCN 15 ppm

การทดลองที่ 2

การศึกษาผลของปริมาณ SCN ในน้ํานม

ตอการตรวจสอบสารปฏชิีวนะตกคางในน้ํานมดิบ

โดยชุดทดสอบ

การตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้าํนมดิบการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคางในน้าํนมดิบ

โดยชุดทดสอบโดยชุดทดสอบ

DelvotestDelvotest AMAM--TestTest DMS Test kitsDMS Test kits

การอานและบันทึกผลการอานและบันทึกผล

- detection

การอานและบันทึกผลการอานและบันทึกผล

+ detection

การอานและบันทึกผลการอานและบันทึกผล

+/- detection

วิธีการทดลองวิธีการทดลอง

แผนการทดลอง

- 2x3 Factorial Experiments in RCBD

- ปจจัยศึกษา 2 ปจจัย

- ปริมาณไธโอไซยาเนท 2 ระดับ (0 และ 15 ppm)

- ชุดทดสอบ 3 ชนิด (Delvotest,AM-Test และ DMS)

- ตัวอยางนมดิบ จํานวน 10 บล็อก

วิธีการวิเคราะหตัวอยาง

Milk SCN

+

0 ppm SCN+

15 ppm SCN

Milk SCN

+

0 ppm SCN

+15 ppm SCN

82±2OC 3 min

82±2OC 3 min

การวิเคราะหขอมูลทางสถิติ การวิเคราะหขอมูลทางสถิติ

- วิเคราะหความแปรปรวน และเปรียบเทียบความ

แตกตางโดยวธิี Duncan

ปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ ปริมาณไธโอไซยาเนทในน้ํานมดิบ

- ปริมาณ Milk SCN เฉลี่ย 4.76 ppm

- เติม conc. SCN 15 ppm

- Milk SCN เฉลี่ยเปน 18.98 ppm

ผลการทดลอง ผลการทดลอง

Table 2 Results of antibiotic residues test in non-heat

treated raw milk by antibiotic residues test kits

Table 2 Results of antibiotic residues test in non-heat

treated raw milk by antibiotic residues test kits

0 ppma 15 ppmb

Milksample Delvotestx AM-Testy DMSx Delvotestp AM-Testq DMSp

- 8(80%) 3(30%) 7(70%) 3(30%) 1(10%) 2(20%)

+ 0(0%) 1(10%) 0 (0%) 1(10%) 5(50%) 1(10%)

+/- 2(20%) 6(60%) 3(30%) 6(60%) 4(40%) 7(70%)

Table 3 Results of antibiotic residues test in heat treated

raw milk by antibiotic residues test kits

Table 3 Results of antibiotic residues test in heat treated

raw milk by antibiotic residues test kits

0 ppm 15 ppmMilk

samples Delvotesta AM-Testb DMSa Delvotestx AM-Testy DMSx

- 10(100%) 8(80%) 10(100%) 10(100%) 8(80%) 10(100%)

+ 0 0 0 0 0 0

+/- 0 2(20%) 0 0 2(20%) 0

- ในน้าํนมดิบที่ไมผานความรอน SCN ทําใหเกิดผลบวกเท็จ และสงสยับวกเท็จ ตอการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคาง ในน้ํานมดิบ ดวยชุดทดสอบ

- ความรอนทําลายสารตอตานจุลินทรียตามธรรมชาติในน้ํานม ทําใหลดการเกิดผลบวกเท็จ และสงสัยบวกเท็จได

- ในน้าํนมดิบที่ไมผานความรอน SCN ทําใหเกิดผลบวกเท็จ และสงสยับวกเท็จ ตอการตรวจสอบสารปฏิชีวนะตกคาง ในน้ํานมดิบ ดวยชุดทดสอบ

- ความรอนทําลายสารตอตานจุลินทรียตามธรรมชาติในน้ํานม ทําใหลดการเกิดผลบวกเท็จ และสงสัยบวกเท็จได

- ปริมาณ SCN เพิ่มขึ้น ประสิทธิภาพ LPS เพิ่มขึ้น สามารถลดจํานวนจุลินทรียทั้งหมด และโคไลฟอรม ในน้ํานมดิบได

สรุปผลการทดลอง สรุปผลการทดลอง