aplicação de bombas osmóticas intra-peritoneais:
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Aplicação de bombas osmóticas intra-peritoneais:. Estudo do efeito de endotoxina na microestrutura da glândula supra-renal do rato. Estudos experimentais com a glândula supra-renal. Estudos in vitro Estudos in vivo. Estudo de células e tecidos integrados no organismo. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
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Aplicação de bombas osmóticas intra-peritoneais:Estudo do efeito de endotoxina na microestrutura da glândula supra-renal do rato
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Estudos experimentais com a glândula supra-renal
Estudos in vitro
Estudos in vivoEstudo de células e tecidos integrados no organismo
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Administração de substâncias a estudar
Vias de administração aguda: intra-peritoneal intra-muscular sub-cutânea endovenosa per os (oral)
Vias de administração crónica: Normalmente as mesmas, excepto a endovenosa. É comum o uso de bombas osmóticas que são uma forma de administração intra-peritoneal.
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Bombas osmóticas
As bombas osmóticas são pequenos reservatórios implantáveis usados para a pesquisa em ratos e outros animais. Estas bombas de infusão libertam continuamente drogas, hormonas, fármacos e outros agentes cujos efeitos se pretendam testar. A libertação ocorre em taxas controladas, sem necessidade de repetidas manipulações e de um controlo constante da quantidade de substância a administrar.
www.alzet.com
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Bombas osmóticas
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Porquê usar ratos nos estudos?
Mamífero de pequeno porte Metabolismo semelhante ao
humano Resistência elevada Rápida procriação Genoma bem conhecido e
manipulável (ratos knock-out) 40% da sequência genómica
conhecida é semelhante à humana
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Objectivos do trabalho
• Adquirir prática de manuseio de animais de experiência
• Estabelecer um problema e organizar um método de abordagem para o resolver.
• Conhecer técnicas e procedimentos usados frequentemente em animais de laboratório (anestésicos e cirúrgicos entre outros) e aplicá-los na resolução do problema.
• Estabelecer hipóteses que visem explicar os resultados encontrados.
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Objectivos do trabalho
• Estabelecer um problema e organizar um método de abordagem para o resolver.
A GSR está envolvida nos mecanismos de resposta ao stress.
Que alterações estruturais nela provoca um estímulo stressante como é a endotoxina (ETX) da E. coli ?
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Material e Métodos• Conhecer técnicas e
procedimentos usados frequentemente em animais de laboratório (anestésicos e cirúrgicos entre outros) e aplicá-los na resolução do problema.
Ratos machos Wistar pesando ~300g divididos em 2 grupos.
Ao primeiro, administrou-se endotoxina de E.coli 0127:B8 i.p. por bomba osmótica na dose de 12 μg/h durante 7 dias.
Ao segundo, administrou-se volume igual de SF.
http://www.psych.usyd.edu.au
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Anestesia para colocação das bombas osmóticas: Indução com sevoflurano a 5% em mistura de O2 a 40%. Manutenção com sevoflurano a 2-3% na mesma mistura.
www.straightdope.com
Material e Métodos
www.abbott.co.th
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Material e Métodos
Técnicas cirúrgicas: Laparotomia mediana por
planos Introdução de bomba
osmótica na cavidade peritoneal
Encerramento da parede Ao fim de 7 dias, sacrifício do
animal e colheita de GSR para morfologia conforme já referido
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Na data do sacrifício, os animais de ambos os grupos encontravam-se em boa condição física aparente.Em relação aos controles, os animais do grupo ETX tinham perdido peso. A sua cavidade peritoneal possuía fluido evidente. Nos controles, a extremidade da bomba estava rodeada por uma brida peritoneal; nos do grupo ETX havia diversas bridas a rodear a bomba às quais estavam aderentes ansas intestinais.
Resultados
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ResultadosAnimais controle
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Resultados
Animais administrados com endotoxina: era aparente um aumento de macrófagos no tecido e um aumento de corpos densos (lisossomas) nas células parenquimatosas
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Conclusões
A anestesia com sevoflurano é simples e rápida. A administração de endotoxina por bomba osmótica é um procedimento tecnicamente fácil
A dose empregue provoca alterações peritoneais semelhantes às das doenças infecciosas Os dados morfológicos até agora obtidos, sugerem a activação de processos inflamatórios e de lise celular no
córtex SR dos animais tratados com ETX.
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Bibliografia
Alberts B., Bray D., Lewis J., Raff M., Roberts K., Watson J.D. 2002. Molecular Biology of the Cell 4th edition Garland Science
Almeida, H. Rat Genomics IBMCNews 2004 - Year 8 nºIII IBMC/INEB
Munford R. S., Andersen J. M., Dietschy J. M. 1981. Sites of Tissue Binding and Uptake In Vivo of Bacterial Lipopolysaccharide-High Density Lipoprotein Complexes J. Clin. Invest. 58: 1503-1513
Arnold et al. 1989. Energy balance and brown adipose tissue thermogenesis during chronic endotoxemia in rats. J Appl Physiol 66: 1970-75
www.endotext.com
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Michel