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Sibele Borsuk [email protected] / [email protected] Protozoários

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Sarcodina Protozoa Mastigophora Ciliata Sporozoa

Trematoda Helminta Cestoda Nematoda

Artropoda Insecta

Classificação

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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Protozoários

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

- Protos = antes; zoário = animal

- Organismos unicelulares, eucariontes e heterótrofos

- ~ 65.000 espécies são conhecidas

- ~ 10.000 espécies parasitam animais vertebrados ou

invertebrados

- Tamanho, de 1 a 150µm, apresentam alto índice de reprodução

- A classificação dos protozoários se dá pela forma e localização de

suas organelas especializadas

- Induzem boa resposta imune e também apresentam mecanismos

de escape longos períodos de parasitismo.

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Morfologia

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

trofozoíto

gametas

cisto

Variada - fase do ciclo e meio

Formas típicas: trofozoíto, cisto e gametas

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Morfologia

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

•Estrutura básica Membrana celular lipoproteica

Citoplasma aspecto mitocôndrias, ribossomas vacúolos reservas alimentares produtos metabólitos

Núcleo membrana nuclear, nucleoplasma e cromatina forma, posição tamanho, número

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Morfologia

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Locomoção

Nutrição

Proteção

Sustentação

Relacionadas a:

•Organelas

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Morfologia

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

•Organelas de locomoção

Flagelos Membrana ondulante

Cílios Mionemas

Pseudópodes

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•Organelas de nutrição

Pseudópodes Vacúolos digestivos

Citóstoma

Morfologia

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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axóstilo

•Organelas de sustentação e fixação

Disco suctorial

Morfologia

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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•Assexuada

Biologia- Reprodução

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Fissão binária -Esquizogonia-Merogonia

longitudinal transversal

meronte merozoítos (célula mãe) (céls. filhas)

merogonia (produz merozoítos), gametogonia (produz microgametas) esporogonia (produz esporozoítos).

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•Sexuada

Biologia- Reprodução

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

• Singamia • Gametogonia : Apicomplexa

isogametas ou fecundação zigoto heterogametas

• Conjugação: união temporária de dois indivíduos, com troca mútua de materiais nucleares- Ciliophora

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Protozoários- Classificação

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Sarcodina

Classes Mastigophora

Ciliophara

Apicomplexa

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Protozoários

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Protozoa Eucarioto Unicelular

Sarcomastigophora Locomoção

por pseudópodes e/ou flagelos

Apicomplexa Deslizamento

Ciclo Intracelular reprodução sexuada

e assexuada

Ciliophora Locomoção

por cílios

Microspora Reprodução

assexuada

Sarcodina Movimentos

amebóides por pseudópodes

Mastigophora Apresenta um

ou mais flagelos

Coccidia Parasita células

epiteliais reprodução sexuada

e assexuada

Pirosplamidia Parasita células

sanguíneas Vetor: carrapato

(reprodução sexuada)

Haemosporidia

Parasita células sanguíneas

Vetor: dípteros hematófagos

(reprodução sexuada

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1908 – Brasil – Splendore, SP – coelhos de laboratório 1908 – Tunísia – Nicolle e Manceaux Ctenodactylus gondii

1909 – Nicolle e Manceaux - Toxoplasma gondii

toxon = arco plasma = forma

gondii = homenagem ao roedor

Década de 70 – HD, HI (Dubey)

1981 – Toxoplasma x AIDS

Apicomplexa- T. gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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Toxoplasmose

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

• zoonose mais difundida do mundo •25 a 60% da população humana mundial é soropositiva • pouca especificidade parasitária (mais de 200 espécies) • animais domésticos e silvestres • riscos da transmissão congênita • caráter oportunista em pacientes imunocomprometidos

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Toxoplamose

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Zoonose mais difundida do mundo

• todas as fases são infectantes • pouca especificidade parasitária • grande poder de infecção do HD • várias vias de infecção

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Filo Apicomplexa

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

mitocôndria

micronemas

conóide

extremidade apical roptrias

retículo endoplasmático

grânulos densos Golgi

• Morfologia

Toxoplasma gondii

Filamentos contráteis

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Apicomplexa

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

• Morfologia

Complexo apical: •Anéis polares – são dois, permitem a passagem do conteúdo parasitário •Conóides – definem a extremidade apical e têm motilidade •micronemas – organelas secretoras, auxiliam na adesão e invasão celular •roptrias – organelas secretoras, auxiliam na invasão •grânulos densos – organelas secretoras, necessárias para multiplicação

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Apicomplexa

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

• Morfologia

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Oocistos

Eliminado pelos felideos

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Taquizoitos

Fase aguda-móvel de multiplicação rápida

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Bradizoitos

TODAS AS FASES SÃO INFECTANTES

A TODOS OS HOSPEDEIROS

Fase crônica -brady-lento - Vacúolo parasitoforo

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Hospedeiros

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Ciclo

Vacúolo parasitóforo

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

•Processo ativo que envolve reconhecimento de receptores conservados de

membrana: laminina, integrina, glicosamino glicans, proteoglicans – são receptores para MIC2 e molécula P30.

•Uma vez aderido, o conóide é projetado e os micronemas descarregam seu conteúdo – MIC2 e outras proteínas •A membrana plasmática da célula hospedeira realiza um movimento de englobamento do parasita a partir do sítio de adesão para formar o vacúolo parasitóforo

•O conteúdo das roptrias é lançado e suas proteínas incorporam-se aos componentes de membrana do recém criado vacúolo parasitóforo

•Dentro do vacúolo parasitóforo os grânulos densos despejam seu conteúdo modificando o ambiente do vacúolo parasitóforo, impedindo a acidificação e facilitando a replicação do parasita. Não há fusão de lisossomos.

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Ciclo

heteroxeno facultativo

Sexuada e Assexuada

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

CICLO BIOLÓGICO

infectante por 12 a 18 meses

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Terço

inicial

Terço médio

Terço final

15%

Graves,

aborto

25 – 55%

Em 15 a 30%, graves

com natimortos ou

Tétrade de Sabin

65%

Subclínico

(leve deficit inte-

lectual, retinoco-

roidite bilateral)

Infecção dos

fetos

Consequências

Fase

gestacional

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Tétrade de Sabin

- macro ou microcefalia - retinocoroidites - calcificações cerebrais - retardo mental

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Oocisto esporulado

• água • saladas cruas • frutas • contaminação de mãos na terra (jardinagem, hortas)

• hospedeiros de transporte • rações, pastos, grãos

INGESTÃO • Formas de infecção

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Bradizoitos

• predação • carnes cruas ou mal cozidas • órgãos transplantados

INGESTÃO TRANSPLANTES

• Formas de infecção

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Toxoplasma gondii

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

• manipulação de carnes • transfusão de sangue • predação • leite in natura • transplacentária

Taquizoítos

INGESTÃO CONTATO

TRANSFUSÃO

• Formas de infecção

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Toxoplasma gondii - Controle

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

• Evitar a infecção humana com cistos e taquizoítos

• não ingerir carnes/embutidos crus ou mal cozidos

• congelar (freezer) as carnes antes do consumo

• lavar bem as mãos após manusear carnes cruas

• não provar tempero de carne crua

• rigorosa higiene dos utensílios de cozinha (água quente)

• controle rigoroso de doadores de sangue

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Toxoplasma gondii - Diagnóstico

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Diretos (parasito)

- Oocistos - fezes de gatos - concentração (Sheather)

confirmação - inoculação em camundongos

- Taquizoítos - líquidos teciduais – fase aguda

- Cistos teciduais microscopia: histopatologia, imunohistoquímica

- PCR - líquido amniótico* - humor vítreo e aquoso - líquido cérebro-espinhal - urina e sangue (generalizada)

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Toxoplasma gondii - Diagnóstico

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Exames indiretos (anticorpos)

- RIFI

- ELISA

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Toxoplasma gondii - Diagnóstico

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

Exames indiretos (anticorpos)

-Títulos crescentes de IgG OU elevados títulos de IgM

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Toxoplasma gondii -Diagnóstico e Controle

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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Toxoplasma gondii -Diagnóstico e Controle

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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Toxoplasma gondii -Diagnóstico Molecular

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

•PCR- gene b1(rRNA)

Spalding et al.2002./J. Bras. Patol. Med. Lab. 38:05-110.

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Toxoplasma gondii –Caracterização Molecular

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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Toxoplasma gondii - Caracterização Molecular

Caracterização Molecular de Agentes Infecciosos

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