A ti l i tAnticuerpos en el paciente trasplantado

Dra. Monica TambuttiServicio de Histocompatibilidad e Inmnunogenetica

Hospital Italiano de Bs. As   monica tambutti@hospitalitaliano org armonica.tambutti@hospitalitaliano.org.ar   

Sistema HLASistema HLAMoléculas HLA Clase IMoléculas HLA Clase I

aa bb

cc dd

Janeway C, Travers P: Immunobiology. The immune system in health and disease. Robertson M, Lawrence E (eds). New York, 1996. Janeway C, Travers P: Immunobiology. The immune system in health and disease. Robertson M, Lawrence E (eds). New York, 1996.

Sistema HLASistema HLA Moléculas HLA Clase IIMoléculas HLA Clase II

aa bb

cccc dd

Janeway C, Travers P: Immunobiology. The immune system in health and disease. Robertson M, Lawrence E (eds). New York, 1996. Janeway C, Travers P: Immunobiology. The immune system in health and disease. Robertson M, Lawrence E (eds). New York, 1996.

ALLORECONOCIMIENTO DIRECTOALLORECONOCIMIENTO DIRECTO

T ThTcCD8+

ThCD4+

Clase I Clase II

CPA allogeneica(estimuladora)(estimuladora)

Hernandez Fuentes et al; Rev. Immunogenetics 1999: 1; 282-296

ALLORECONOCIMIENTO INDIRECTOALLORECONOCIMIENTO INDIRECTO

Célulaallogeneica

TcCD8+

ThCD4+

Las moléculas MHCLas moléculas MHCson procesadas por

las CPAs propiasPéptidos derivados

de allo-MHC sonpresentados por MHCpropias a las células T

Hernandez Fuentes et al; Rev. Immunogenetics 1999: 1; 282-296

Inducción de la respuesta inmune

Introduccion a la inmunologia humana. Fainboim L. y Geffner J. 5ª Edición. Ed. Medica Panamericana. Bs. As.

TRASPLANTETRASPLANTE

RTA. INM. AL ALLOGENEICARTA. INM. AL ALLOGENEICA AcomodaciónAcomodación

Rechazo Rechazo RechazoRechazo RechazoRechazo

HiperagudoHiperagudo Agudo CrónicoAgudo Crónico

((AlloAllo--Ac preformados) (Ac preformados) (AlloAllo--Ac “de Ac “de novonovo”) (”) (AlloAllo--AcAc

preformados o “de preformados o “de novonovo”) ”)

??

Antecedentes inmunológicos pre trasplante

- sin anticuerpos preformados

PACIENTE TRASPLANTADO - Cross match contra donante: Neg

- sin eventos sensibilizantessin eventos sensibilizantes

Tiene anticuerpos???

CROSS MATCH CONTRA PANELCROSS MATCH CONTRA PANEL

• Investiga la presencia de anticuerpos en el g p psuero del receptor dirigidos contra antígenos HLA

• Informa el grado de sensibilización de un• Informa el grado de sensibilización de un individuo

• Debe realizarse periódicamente o luego de algún evento sensibilizante

CROSS MATCH CONTRA PANELTÉCNICASTÉCNICAS

CITOTOXICIDAD COMPLEMENTO DEPENDIENTE (CDC)A li f it T BAc a-linfocitos T y B

Técnicas de fase sólida:Técnicas de fase sólida:

ELISA Ac a-HLA I y II

LUMINEX Ac a-HLA I y IIy

COMPARACION ENTRE LAS DISTINTAS TECNICAS

Técnica Sensibilidad Especificidad

CDC + +CDC + +

ELISA ++ ++

LUMINEX +++ +++

CROSS MATCH contra PANEL

• 0% ausencia de anticuerpos

• 1-69 % paciente Sensibilizado

• 70-100 % paciente Hipersensibilizado

Tiene Anticuerpos específicosTiene Anticuerpos específicos contra el donante (DSA)???

Especificidad de Ac a-HLA por LUMINEX

Esta foto de Autor desconocido está bajo licencia CC BY SA

Microesferas rellenas de una mezcla de fluoróforos que emiten una única señal espectral en el rojo e infrarrojo Sobre la

está bajo licencia CC BY-SA

una única señal espectral en el rojo e infrarrojo. Sobre la superficie se unen distintas moléculas.

Especificidad de Ac a-HLA por LUMINEX

Indica contra que moléculas HLA están dirigidos los anticuerposp

l f ó d lSi se conoce la tipificación HLA  COMPLETA del donante se pueden identificar los DSA

Especificidad de anticuerpos anti HLA

Epitope Analysis Specificity TP FN Mean (Raw) of Positives Class I B39 1 0 7268 B38 1 0 6108 B8 1 0 5221

B67 1 0 4928 B67 1 0 4928 B42 1 0 4685 B18 1 0 4613 B76 1 0 4470 B7 1 0 4200 B64 1 0 4129 B71 1 0 4126 B41 1 0 4123 B27 1 1 4118 B45 1 0 3997

B62 1 0 3985 B62 1 0 3985

Que titulo de anticuerpos anti HLA tiene???tiene???

Especificidad de Ac a-HLA por LUMINEXSuero diluido

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Microesferas rellenas de una mezcla de fluoróforos que

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emiten una única señal espectral en el rojo e infrarrojo. Sobre la superficie se unen distintas moléculas.

Tiene Anticuerpos DSA fijadores deTiene Anticuerpos DSA fijadores de Complemento???

Especificidad de Ac a-HLA por LUMINEX fijadores de C1qfijadores de C1q

Complemento

Microesferas rellenas de una mezcla de fluoróforos que

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qemiten una única señal espectral en el rojo e infrarrojo. Sobre la superficie se unen distintas moléculas.

ANTICUERPOS ANTI HLA  Tecnica: LUMINEX

C1q negativo

no DSA     C1q positivo   

INJURIA RENALAc anti HLA 

C1 tiC1q negativoDSA 

C1q positivoC1q positivo

Ac no DSA con epitopes compartidos

¿Que Ac representan una amenaza para la función y sobrevida del órgano?

‐ Ac anti HLA clase I : HLA A, B, C

‐ Ac anti HLA clase II: HLA DR, DQ, DP

‐ Ac Anti células endoteliales                                                     RIESGO DE RECHAZO

‐ Ac tejido especifico

‐ Ac anti MICAAc anti MICA        

‐ Ac anti TR1                                        

Anticuerpos irrelevantes:

‐ Ac  anti linfocitarios no HLA                                   Ac anti linfocitarios no H A‐ Ac inespecíficos                          ‐ Autoanticuerpos

MONITOREO POST TRASPLANTE

*Al mes 1, 3, 6 y 12 post tx*Anualmente *L d t ibili t*Luego de evento sensibilizante*Sospecha de episodio de rechazo

‐‐CROSS MATCH CONTRA PANEL POR LUMINEX 

Si da positivo

‐‐ESPECIFICIDAD DE ANTICUERPOS ANTI HLA PORLUMINEX   

Si d i i

* IDENTIFICACION DE DSA           ESPECIFICIDAD DE ANTICUERPOS CON SUERO DILUIDO

Si da positivo

* ESPECIFICIDAD DE ANTICUERPOS CON SUERO DILUIDO*ANTICUERPOS ANTI HLA FIJADORES DE C1Q

MONITOREO POST TRASPLANTE

*Al mes 1, 3, 6 y 12 post tx*Anualmente *Luego de evento sensibilizanteLuego de evento sensibilizante*Sospecha de episodio de rechazo

CROSS MATCH CONTRA PANEL POR LUMINEXCROSS MATCH CONTRA PANEL POR LUMINEX 

Y   

ESPECIFICIDAD DE ANTICUERPOS ANTI HLA PORLUMINEX   

* IDENTIFICACION DE DSA

Si da positivo

* ESPECIFICIDAD DE ANTICUERPOS CON SUERO DILUIDO         *ANTICUERPOS ANTI HLA FIJADORES DE C1Q