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BIOQUÍMICA I1º ANO MESTRADO INTEGRADO EM MEDICINA2009-2010
Seminário Orientado 2
Métodos de identificação de biomoléculas e análise de proteínas:• principais biomoléculas• métodos de análise de proteínas• estudo de proteínas para o diagnóstico em Medicina
07-10-2009
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BIOMOLÉCULAS Lípidos Insoluvéis em água e solúveis em solventes
apolares;
Ésteres de ácidos gordos ou amidas de ácidos gordos;
Funções biológicas: estruturas membranares, reserva energética, mensageiros (hormonas);
Classificação: Apolares Polares Lípidos complexos
Lípido - triglicerídio
• Proteínas Polímeros de aminoácidos ligados por
ligações peptídicas; Funções: estruturais, defesa, hormonal,
energética e enzimática; Propriedades das proteínas; As proteínas são construídas a partir de 20
aminoácidos; Organização estrutural: primária, secundária,
terciária e quaternária;
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Ácidos nucleicos DNA e RNA: sequências de nucleótidos;
Componentes dos nucleótidos: pentose, grupo fosfato e base nitrogenada;
Funções dos nucleótidos: armazenamento e transmissão da informação genética, transporte de energia, constituição de co-enzimas e mensageiros químicos;
Tipos de RNA.
Estrutura do DNA e do RNA;
•Hidratos de Carbono
constituidos por grupo hidroxilo (OH)funções: metabolismo energetico, reservas, estrutura, reconhecimento celular;Classificação: monossacarídeos (açucar simples); oligossacarídeos; polissacarídeos(celulose, glicogenio);
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MÉTODOS DE IDENTIFICAÇÃO DE PROTEÍNASBaseiam-se na sua carga, solubilidade, tamanho e afinidade de ligação.
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CROMATOGRAFIAConsiste na passagem de macromoléculas
através de uma coluna fixa (fase estacionária) que é desenhada para reter ou diminuir a velocidade de passagem da fase móvel em função de uma dada propriedade química.
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Cromatografia por filtração em gel – separação por um critério de tamanho.
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Cromatografia por troca iónica – separação por um critério de carga global proteica.
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Cromatografia por afinidade – separação por um critério de bioreconhecimento.
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ELECTROFORESE
É uma técnica de separação de moléculas que consiste na migração de moléculas com carga, numa solução, em função da aplicação de um campo eléctrico.
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Electroforese em gel: separação por um critério de massa molecular
Electroforese por Focalização Isoeléctrica – separação por um critério de radicais ácido/base.
Electroforese Bidimensional – separação por um critério de radicais ácidos/básicos e de massa molecular; permite cruzamento de dados.
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OUTROS MÉTODOS
• Ultracentrifugação
• Western blotting
• Diálise
• Salting out
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APLICAÇÕES NA MEDICINA
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3. PROTEÍNAS NO DIAGNÓSTICO MÉDICO
3.1 Avaliação quantitativa
• Hiperproteinémia: Hiperproteinémia:
PCR (Proteína C-reactiva) ↔ Infecção, Inflamação.• Hipoproteinémia: Hipoproteinémia:
Hipoalbuminémia ↔ Insuficiência renal de último grau, Síndrome nefrótico, Insuficiência hepática grave.
FMUC | Bioquímica I – SO2 | 7 de Outubro de 2009
3.2 Avaliação qualitativa
• Ex.1: HEx.1: Hemoglobina S ↔ Anemia falciforme
• Ex.2: Ex.2: Amilóide ↔ Amiloidose
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BIBLIOGRAFIA e NETGRAFIA
ALBERTS, Bruce; JOHNSON, Alexander; LEWIS, Julian; RAFF, Martin; ROBERTS; Keith; WALTER, Peter, Molecular biology of the cell, 4ª edição Garland Science, New York 2002
STRYER, Lubert; BERG, Jeremy M.; TYMOCZKO, John L., Biochemistry, 5ª edição International Edition, New York 2002
“Técnicas de análise de proteínas”,Faculdade de Medicina do Porto
http://preview.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16534226?
itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVD
ocSum&ordinalpos=12
http://en.wikipedia.org/wiki/C-reactive_protein
http://anatpat.unicamp.br/taamiloidose.html
http://pt.wikipedia.org/wiki/Amiloidose
MURRAY, Robert; GRANNER, Daryl; MAYES, Peter; RODWELL, Victor,
Harper’s Ilustrated Biochemistry, twenty-sixth edition, 2003, pps. 580-584
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Trabalho realizado por:Amélia Fernandes
Ana Carolina MartinsAna Carolina Figueiredo
Ana Carolina PadilhaAna Carlota CaetanoAna Catarina Cunha
Ana Catarina QuintasAna Catarina Lai