biochimia clinica 2010 usasddaadsad

7/26/2019 Biochimia Clinica 2010 Usasddaadsad

http://slidepdf.com/reader/full/biochimia-clinica-2010-usasddaadsad 1/88

DiagnosticDiagnostic

clinicclinic

de laboratorde laborator

Biochimia clinicBiochimia clinicăă

http://kipmed.towernet.ru/med/cat/neovac.php



Diagnosticul clinic de laboratoDiagnosticul clinic de laborato––este o disciplină medico-ştiinţifcă, care :este o disciplină medico-ştiinţifcă, care :•studiază interdependenţa între stareastudiază interdependenţa între starea

fziologică (patologică) a organismuluifziologică (patologică) a organismuluişi modifcarea în compoziţia celulelorşi modifcarea în compoziţia celulelor

şi lichidelor biologiceşi lichidelor biologice•elaborează metode de cercetareelaborează metode de cercetareobiecti!ă a componenţei celulare şiobiecti!ă a componenţei celulare şi

chimice a ţesuturilor şi lichidelorchimice a ţesuturilor şi lichidelorbiologicebiologice



• determinarea de!ierilor de la normă,determinarea de!ierilor de la normă,

• determinarea diagnozei, prognozeideterminarea diagnozei, prognozeimaladiilor,maladiilor,

• estimarea efcacităţii tratamentului,estimarea efcacităţii tratamentului,

• e"ectuarea controlului asuprae"ectuarea controlului asupra

terapiei medicamentoase,terapiei medicamentoase,• profla#ia patologiilor$profla#ia patologiilor$

Diagnosticul clinic de laboratoDiagnosticul clinic de laborato

––utilizează datele obţinute pentruutilizează datele obţinute pentru ::



Diagnosticul clinic deDiagnosticul clinic delaboratorlaborator include mai multe direcţiiinclude mai multe direcţii

:: %iochimie clinică, hematologie clinică,%iochimie clinică, hematologie clinică,citologie, imunologie, microbiologie,citologie, imunologie, microbiologie,micologie, parazitologie, to#icologie clinică$micologie, parazitologie, to#icologie clinică$

• 75%75% din toate in!estigaţiile clinice în prezentdin toate in!estigaţiile clinice în prezentse e"ectuează cu aplicarea metodelor dese e"ectuează cu aplicarea metodelor debiochimie clinicăbiochimie clinică, deoarece a "ost, deoarece a "ostdemonstrat, că la baza patogeniei ma&orităţiidemonstrat, că la baza patogeniei ma&orităţiimaladiilor staumaladiilor stau dereglări primare saudereglări primare sau

secundare ale metabolismuluisecundare ale metabolismului$$

• 'etodele biochimice şi fzico-chimice sunt'etodele biochimice şi fzico-chimice suntmult mai di!erse, iar deseori şi semnifcati!mult mai di!erse, iar deseori şi semnifcati!mai in"ormati!e dect cele microscopice$mai in"ormati!e dect cele microscopice$



biectele debiectele de cercetarecercetare clinico-clinico-

biochimicăbiochimică

sunt:sunt:

•*ichidele biologice: sngele,*ichidele biologice: sngele,lichidul ce"alorahidian,lichidul ce"alorahidian,transudatele, e#udatele,transudatele, e#udatele,urina, sali!aurina, sali!a

• +esuturile$ +esuturile$



Etapele investigaţiilorde laborator

Preanalitică Analitică Postanalitică



EtapeleEtapeleinvestigaţiilor de laboratorinvestigaţiilor de laborator



Etapa preanaliticăEtapa preanalitică

includeinclude::• Selectarea i solicitarea investigaţiei deSelectarea i solicitarea investigaţiei delaboratorlaborator!!

• Alegerea termenilor optimali pentruAlegerea termenilor optimali pentru

e"ectuarea investigaţieie"ectuarea investigaţiei!!• Pregătirea pacientului către recoltareaPregătirea pacientului către recoltarea

probei biologiceprobei biologice!!

• #ecoltarea adecvată a probei biologice#ecoltarea adecvată a probei biologice!!• Prelucrarea primară a probeiPrelucrarea primară a probei$$

transportul i păstrarea eitransportul i păstrarea ei



2. Faza preanalitică în interiorul

laboratorului 37%

1. Faza preanalitica în exteriorullaboratorului 20%

Indicarea testelor Obţinerea biomaterialului

Transportarea

Înregistrareaşi păstrarea

Centrifugarea

Repartizarea pe aparate

Pregătirea probelor

Etapa preanaliticăEtapa preanalitică ::



Etapa analiticăEtapa analitică constă &nconstă &n::

•Prelucrarea preliminară specialăPrelucrarea preliminară specialăa probei biologicea probei biologice!!

•E"ectuarea testului deE"ectuarea testului delaboratorlaborator!!

•'ontrolul calităţii investigaţiilor'ontrolul calităţii investigaţiilor



Etapa postanaliticăEtapa postanalitică

includeinclude::•PrimireaPrimirea re(ultatelor investigaţieire(ultatelor investigaţieide către medicul)cliniciande către medicul)clinician!!

•*nterpretarea re(ultatelor*nterpretarea re(ultatelorobţinuteobţinute!!

•+uarea deci(iei re"eritor la+uarea deci(iei re"eritor lanecesitatea testărilornecesitatea testărilorsuplimentaresuplimentare!!

•Prescrierea tratamentuluiPrescrierea tratamentului



Etapa preanaliticăEtapa preanalitică::)) pentru a selecta i a solicitapentru a selecta i a solicita investigaţiile deinvestigaţiile delaboratorlaborator este necesareste necesar::

• A e"ectua o anali(ă clinică comple,ăA e"ectua o anali(ă clinică comple,ă aa

stării pacientuluistării pacientului

• A determina care investigaţii de laboratorA determina care investigaţii de laboratorsunt necesare de a - e"ectuate &n scopulsunt necesare de a - e"ectuate &n scopul

obţinerii unei in"ormaţii ma,imal utileobţinerii unei in"ormaţii ma,imal utile

• A completa corect buletinul de trimitereA completa corect buletinul de trimitere



roflulroflul %iochimia s%iochimia sngeluingelui..

/este biochimice standard /este biochimice standard$$ ermit de a depista laermit de a depista la

timp de!ierile în starea organismului, de a punetimp de!ierile în starea organismului, de a punediagnoza şi de a elabora programul tratamentului$diagnoza şi de a elabora programul tratamentului$0e recomandă de e"ectuat o dată la &umătate de an$0e recomandă de e"ectuat o dată la &umătate de an$

• ..ll./ 0Alanin aminotrans"era./ 0Alanin aminotrans"era(a(a11

• ..

ss./ 0 Aspartat aminotrans"era./ 0 Aspartat aminotrans"era

(a1(a1

• ProteinProteinaa totaltotalăă• 2racţiile proteice2racţiile proteice 0Serum Protein Electrophoresis10Serum Protein Electrophoresis1• BilirubinBilirubinaa totaltotalăă• BilirubinBilirubinaa directdirectăă• 3amma)glutam3amma)glutamiil trans"eral trans"era(a(a 0334103341

• 2os"ata(a alcalină2os"ata(a alcalină 6600 Potassium1$ a6Potassium1$ a600Sodium1$ 8l)Sodium1$ 8l)00'loride1'loride1• 'reatinin'reatininaa• 9rea9rea• 3luco3luco(a(a• 'olesterol total'olesterol total



roflrofl 1ardiorisc1ardiorisc.. /este biochimice, ce permit de a aprecia a"ectarea /este biochimice, ce permit de a aprecia a"ectarearecentă a miocardiocitelor, precum şi risculrecentă a miocardiocitelor, precum şi risculdez!oltăriidez!oltării patologiilor cardio-!asculare în !iitorpatologiilor cardio-!asculare în !iitor$$

• +D+D 0+actat deh;drogena0+actat deh;drogena(a(a11• +D)<+D)<• ..ll./ 0Alanin aminotrans"era./ 0Alanin aminotrans"era(a(a11

• ..ss./ 0 Aspartat aminotrans"era./ 0 Aspartat aminotrans"era(a1(a1• 6600 Potassium1$ a6Potassium1$ a600Sodium1$ 8l)Sodium1$ 8l)00'loride1'loride1• 'reatin =ina('reatin =ina(aa• 'reatin >ina'reatin >ina(a(a)?B)?B• ProtrombinProtrombinaa

• Proteina ')reactivăProteina ')reactivă 0'#P10'#P1• 4rigl4rigliicerideceride• 2ibrinogen2ibrinogen• 'olesterol total'olesterol total• D+ 'olesterolD+ 'olesterol

• +D+ 'olesterol+D+ 'olesterol



rofl *ipidicrofl *ipidic..• /este biochimice, utilizate în diagnosticul /este biochimice, utilizate în diagnosticul

aterosclerozei şi aprecierea riscului complicaţiiloraterosclerozei şi aprecierea riscului complicaţiilor(boala ischemică a cordului, in"arct miocardic,(boala ischemică a cordului, in"arct miocardic,patologii !asculare ale ence"alului)patologii !asculare ale ence"alului)$$

• 4rigl4rigliicerideceride• 'olesterol total'olesterol total

• D+ 'olesterolD+ 'olesterol

• +D+ 'olesterol+D+ 'olesterol



roflulroflul 2n!estigaţii hepatice :2n!estigaţii hepatice :screening.screening.


• ..ss./ 0 Aspartat aminotrans"era./ 0 Aspartat aminotrans"era(a1(a1

• BilirubinBilirubinaa totaltotalăă• BilirubinBilirubinaa directdirectăă

• 3amma)glutam3amma)glutamiil trans"eral trans"era(a(a 0334103341

• 2os"ata(a alcalină2os"ata(a alcalină



roflulroflul 2n!estigaţii hepatice :2n!estigaţii hepatice :completcomplet..

/este /este biochimice, ce permit de a depista şi de abiochimice, ce permit de a depista şi de acaracteriza gradul de a"ectare a celulelor hepaticecaracteriza gradul de a"ectare a celulelor hepatice,,de a aprecia starea "uncţională a fcatuluide a aprecia starea "uncţională a fcatului ,, de ade aelucida cauzele posibile ale patologieielucida cauzele posibile ale patologiei$$


• ..ss./ 0 Aspartat aminotrans"era./ 0 Aspartat aminotrans"era(a1(a1• ProteinProteinaa totaltotalăă• 2racţiile proteice2racţiile proteice 0Serum Protein0Serum Protein

Electrophoresis1Electrophoresis1

• BilirubinBilirubinaa totaltotalăă• BilirubinBilirubinaa directdirectăă• 3amma)glutam3amma)glutamiil trans"eral trans"era(a(a 0334103341• 2os"ata(a alcalină2os"ata(a alcalină• ProtrombinProtrombinaa

• 'olinestera'olinestera(a(a



roflulroflul 2n!estigaţii renale2n!estigaţii renale.. /este biochimice pentru aprecierea stării /este biochimice pentru aprecierea stării

"uncţionale a rinichilor şi depistarea patologiilor"uncţionale a rinichilor şi depistarea patologiilorrenalerenale$$

• 'reatinin'reatininaa• 9rea9rea• 6600 Potassium1$ a6Potassium1$ a600Sodium1$ 8l)Sodium1$ 8l)00'loride1'loride1• 'a'a 00'alcium total1'alcium total1

• @g@g 00?agnesium1?agnesium1• PP 02os"or neorganic02os"or neorganic11• Anali(a generală a urinei 0cu microscopiaAnali(a generală a urinei 0cu microscopia

sedimentului1sedimentului1



rofl diabeticrofl diabetic..

/estul de bază pentru diagnosticul diabetului /estul de bază pentru diagnosticul diabetuluizaharatzaharat$$ /estul este important în alegerea terapiei şi /estul este important în alegerea terapiei şimonitoringul tratamentuluimonitoringul tratamentului$$ 3n monitoringul3n monitoringuldiabetului se utilizează şi teste, ce dau o in"ormaţiediabetului se utilizează şi teste, ce dau o in"ormaţieretrospecti!ă despre starea metabolismuluiretrospecti!ă despre starea metabolismului

glucidic$glucidic$

• 3luco3luco((aa• emoglobina glico(ilatăemoglobina glico(ilată 0bA<8$0bA<8$

3l;cated emoglobin13l;cated emoglobin1• ')Peptid')Peptidulul• 2ructo2ructo((aminaminaa



roflulroflul 4iagnostilul4iagnostilulosteoporozeiosteoporozei..

/este biochimice /este biochimice destinate pentru aprecierea generalădestinate pentru aprecierea generalăa metabolismului minerala metabolismului mineral,, reglării lui, precum şireglării lui, precum şipentru aprecierea conţinutului mar5erilorpentru aprecierea conţinutului mar5erilormetabolismului ososmetabolismului osos$$

• 'a'a 00'alcium total1'alcium total1• PP 02os"or neorganic02os"or neorganic11• ormonul paratiroid 0ormonul paratiroid 0Parath;roid hormone$ P41Parath;roid hormone$ P41

• 'reatinin'reatininaa• )steocalcin)steocalcinaa• De(o,ipiridinolinaDe(o,ipiridinolina 0&n urină10&n urină1

# li i t t#

li i t t && l

l



#eguli importante#eguli importante & & nn alegereaalegereatermenilor optimali pentru e"ectuareatermenilor optimali pentru e"ectuarea

investigaţiei de laboratorinvestigaţiei de laborator ::

•#ecoltarea probelor biologice se#ecoltarea probelor biologice see"ectuea(ă de obicei &ntre orelee"ectuea(ă de obicei &ntre orele 77ii dimineaţadimineaţa

•#ecoltarea probelor#ecoltarea probelor sesee"ectuea(ă dupăe"ectuea(ă după C)<C)< ore deore de

inaniţieinaniţie

00 &n stare ba(ală &n stare ba(ală

11



•#ecoltarea probelor se e"ectuea(ă#ecoltarea probelor se e"ectuea(ă &nainte de procedurile diagnostice i &nainte de procedurile diagnostice i

terapeutice$ capabile să inuenţe(eterapeutice$ capabile să inuenţe(ere(ultatele testelorre(ultatele testelor

•Fn ca(ul administrării medicamentelorFn ca(ul administrării medicamenteloreste necesar de a lua &n consideraţieeste necesar de a lua &n consideraţieposibilele e"ecte ale preparatului asupraposibilele e"ecte ale preparatului asupraparametrului testat i de a alegeparametrului testat i de a alegeperioada de timp cGnd aceste e"ecteperioada de timp cGnd aceste e"ecte

sunt minimesunt minime

•Hbligatoriu se indică timpul e,act deHbligatoriu se indică timpul e,act derecoltare a probei &n documentelerecoltare a probei &n documentelecorespun(ătoarecorespun(ătoare



Etapa preanaliticăEtapa preanalitică::

la alegerea termenilor optimali pentrula alegerea termenilor optimali pentrue"ectuarea investigaţiei de laboratore"ectuarea investigaţiei de laboratoreste necesar de a lua &n consideraţieeste necesar de a lua &n consideraţiecă:că: conţinutul di"eritor compui &n sGngeconţinutul di"eritor compui &n sGnge

varia(ă &n dependenţă devaria(ă &n dependenţă de::

-ritmul circadianritmul circadian 00diurndiurn$$ se(onierse(onier

-"a(ele ciclului menstrual"a(ele ciclului menstrual 00lala"emei"emei11



arametrii sanguiniarametrii sanguini,, ni!elul cărorani!elul cărora!ariază esenţial în decursul zilei:!ariază esenţial în decursul zilei:

ormoni:

Adrenalina

Aldosterona4estosterona

A'4Somatotropina

'orto(olulProlactina4iro,ina

oradrenalina

Electroliţii:

2e

a

>

2os"aţii

Elemente-gurate:

Eritrocite

Eo(ino-le



arametrii sanguiniarametrii sanguini,, ni!elul cărorani!elul cărora!ariază esenţial în dependenţă de!ariază esenţial în dependenţă de

"azele ciclului menstrual"azele ciclului menstrual ::ormonul "oliculostimulatorormonul "oliculostimulator

ormonul luteini(antormonul luteini(ant

aldosteronaaldosterona

Sporesc &nainte de ovulaţie




"azele ciclului menstrual"azele ciclului menstrual ::ProgesteronaProgesteronaEstrogenii




"azele ciclului menstrual"azele ciclului menstrual ::

colesterolulcolesterolul

Scade la ovulaţie

2os"aţii2os"aţii-erul-erul

Scad la menstruaţie



2actorii2actorii$$ ce inuenţea(ă asuprace inuenţea(ă asuprare(ultatelor investigaţiilor dere(ultatelor investigaţiilor de

laboratorlaborator::Iariabile intrinseci

ParticularităţileParticularităţileindividuale aleindividuale alepacientuluipacientului::

vGrstavGrsta

se,ulse,ul

rasarasa



N PARAMER! "#R$A &RA'( FEME(

1. AlA) !*l 0+100 0+,1 0+31

2. A-A) !*l 0+1011+100 1+/00+37 1+/00+31

3. γγ +lutailtran-eraza 0+100 12+/, +3/

4. ala+Ailaza) !*l 0+100 4+3

5. 5ipaza) !*l 0+100 0+/0

6

Fo-atazaalcalina) !*l0+1714+100

0+,,40+24

7. 56) !*l 0+12+100

0+000+,40




4. 8reatino-o9inaza 0+12+100

2,+222,+1

2,+170

. Proteina totală:*l

0+11+23+1,1+/0

/1+100

1+73/+7/0+40/,+43

/2+4110. Aci;ul uric)

<ol*l0+1,1+100

10+,,021,+,,4

10+3/3137+3/3

11. 8reatinina)<ol*l0+12+/+1714+/0/1+0

1+100

4+1/27+/2,,+4440+1171+11

44+10

14+327+/2,,+443+73+10/

3+11





12. ri:liceri;ele)ol*l

0+/+1112+1

1/+120+230+3,0+,0+100

0)3,+0)70)3+1)220),1+1)/

0),+1)4,0)+2)00)+3)210)/3+3)370)7+3)2

0)3/+1)120),+1)20),/+1)/

0),+1),0),+1),0),3+1)410)+2)10)/2+2)7

13. 8ole-terol total)ol*l

0+,+11+1

20+2,2+230+3,3+3,0+,,

,+70

2)+)13)1+)23)1+),

3)2+)/3),+/)33)/+/)/3)4+/)3)+7)0

,)1+7)2

3)1+)23)2+)23)2+)/

3)3+)43),+/)03)/+/)33)4+/)3)+/)7

,)2+7),




1. lucoza)

ol*l

0+/

7+120+/0/1+100

,)1+7)0

3)+)3)+/),,)/+/),

1/. Albuina) :*l 0+1,1+141+/0

/1+0

34+,32+,34+1

32+,/




17. 8alciu)

ol*l

0+1,1+100

1)7/+3)22)1+2)7

14. Fo-or)ol*l

0 + 12 + 3, + /

7 + 10 + 1213 + 11/ + 141 + 100

1)1 + 2)11)00 + 1)1)0 + 1)4

0) + 1)71)0 + 1)40) + 1)/0)4 + 1)/00)4, + 1),

1. Fier) <ol*l 0 + 12 + 1213 + 22/ + ,0

,1 + 100

/ + 24, + 2,7 + 24/ + 30

7 + 22

/ + 24, + 2,7 + 30, + 2,

7 + 24




20. Ma:neziu)

ol*l

0 + 1

2 + 1714 + 100

0),4 + 1)0

0)/0 + 0)0)73 + 1)0/

21. =n) <ol*l 0+11+/+10+131,+120+100

10+2010+1412+1/

12+1 12+14 10+14 +1 7+23



*nuenţa rasei asupra re(ultatelor*nuenţa rasei asupra re(ultatelorinvestigaţiilor de laboratorinvestigaţiilor de laborator::

Europeni

egri

*ndieni

'reatin=ina(a

Amila(a

http://www.shelkotrafaret.narod.ru/dnl/putin14.jpg



2actorii2actorii$$ ce inuenţea(ă asuprace inuenţea(ă asuprare(ultatelor investigaţiilor de laboratorre(ultatelor investigaţiilor de laborator::

ParticularităţParticularităţileile

alimentaţieialimentaţiei

ParticularităţParticularităţileile

alimentaţieialimentaţiei

E"ort -(ic iE"ort -(ic istresstres

emoţionalemoţional

E"ort -(ic iE"ort -(ic istresstresemoţionalemoţional

2umatul$2umatul$alcoolulalcoolul$$

co"einaco"eina$$droguriledrogurile

2umatul$2umatul$alcoolulalcoolul$$

co"einaco"eina$$droguriledrogurile

ProceduriProceduridiagnostice idiagnostice i

terapeuticeterapeutice00roentgenogra-roentgenogra-

aa$$colonoscopiacolonoscopia$$

proceduriproceduri

-(ioterapeutice-(ioterapeutice11

ProceduriProceduridiagnostice idiagnostice i

terapeuticeterapeutice00roentgenogra-roentgenogra-aa$$

colonoscopiacolonoscopia$$proceduriproceduri

-(ioterapeutice-(ioterapeutice11

?edicamente?edicamente

lele

?edicamente?edicamente

lele

Iariabile e,trinseci



2n6uenţa inaniţiei asupra2n6uenţa inaniţiei asupraparametrilor biochimici sanguiniparametrilor biochimici sanguini::

arametrularametrul /ipul e"ectului /ipul e"ectului

*naniţie*naniţie

JC oreJC ore

%ilirubina%ilirubina 0porire0porire

*naniţie*naniţie

7 ore7 ore

7lucoza7lucoza

/rigliceride /rigliceride

8cizi graşi liberi8cizi graşi liberi

0cădere0cădere

0porire0porire



2n6uenţa alimentaţiei asupra2n6uenţa alimentaţiei asupraparametrilor biochimici sanguiniparametrilor biochimici sanguini ::

arametrularametrul /ipul e"ectului /ipul e"ectuluiProduseProdusebogate &nbogate &n

lipidelipide

99


;os"ataza;os"atazaalcalinăalcalină

0porire0porire

ProduseProdusebogate &nbogate &n

proteine iproteine ipurinepurine0carnea10carnea1

8cid uric8cid uric

<reea<reea0porire0porire




arametrularametrul /ipul e"ectului /ipul e"ectuluiProduseProdusebogate &n aci(ibogate &n aci(igraigrai

nesăturaţinesăturaţi

1olesterol1olesterol 0cădere0cădere

ProduseProdusebogate &nbogate &nserotoninăserotonină

0banane$0banane$tomate$ etctomate$ etc11

8cid8cid =-=-o#io#i--indolilaceticindolilacetic

0porire0porire




arametrularametrul /ipul e"ectului /ipul e"ectuluiProduseProdusebogate &nbogate &npigmenţipigmenţi0rodii$0rodii$portocaleportocale11

%ilirubina%ilirubina 0porire0porire

'o"eina'o"eina 7lucoza7lucoza

8cizi graşi liberi8cizi graşi liberi0porire0porire



2n6uenţa asupra parametrilor2n6uenţa asupra parametrilorbiochimici sanguinibiochimici sanguini ::

arametrularametrul /ipul e"ectului /ipul e"ectuluiAlcoolAlcool *actat*actat

8cid uric8cid uric


γγ--glutamiltrans"erazaglutamiltrans"eraza

7lutamatdehidrogenaz7lutamatdehidrogenazaa

/ransaminazele /ransaminazele

0porire0porire

?or-na?or-na αα--amilazaamilaza

*ipaza*ipaza

0porire0porire




arametrularametrul /ipul /ipule"ectuluie"ectului

E"ort -(icE"ort -(ic *actat*actat

7lucoza7lucoza


/ransaminaze /ransaminaze ((8*8/8*8/,,>>00>?)>?)

1reatin5inaza1reatin5inaza*actatdehidrogenaza*actatdehidrogenaza ((*4@*4@))

8ldolaza8ldolaza

0porire0porire

2umatul2umatul 8cizi graşi liberi8cizi graşi liberi 0porire0porire




arametrularametrul /ipul /ipule"ectuluie"ectului

StresulStresul *actat*actat

7lucoza7lucoza


;;iierulerul

0porire0porire

SchimbareSchimbare

a bruscă aa bruscă apo(iţieipo(iţieicorpuluicorpului

AnzimeAnzime

roteina totală şi "racţiileroteina totală şi "racţiileproteiceproteice

%ilirubina%ilirubina

1olesterol1olesterol


0porire0porire

'edicamente ce in6uenţează'edicamente ce in6uenţează



'edicamente ce in6uenţează'edicamente ce in6uenţeazărezultatele testelor biochimice derezultatele testelor biochimice de

laboratorlaborator

arametrularametrul 'edicamentul'edicamentul /ipul e"ectului /ipul e"ectului

αα--amilazaamilaza reparatereparatecolinergicecolinergice

0porire0porire

%ilirubina%ilirubina "enobarbital"enobarbital 0cădere0cădere

1alciu1alciu 1ontracepti!e1ontracepti!ehormonalehormonale

8ndrogeni8ndrogeni

1orticosteroizi1orticosteroizi

0porire0porire

0cădere0cădere

' di i 6 ă




laboratorlaboratorarametrularametrul 'edicamentul'edicamentul /ipul e"ectului /ipul e"ectului

1olesterol1olesterol 81/@81/@

@eparina@eparina

/iro#ina /iro#ina

0porire0porire

0cădere0cădere

1reatin5inaza1reatin5inaza 4e#ametazona4e#ametazona

4igo#ina4igo#ina;enobarbital;enobarbital

0porire0porire

1reatinina1reatinina 8ntibiotice8ntibiotice 0porire0porire

'edicamente ce in6uenţează'edicamente ce in6uenţează




laboratorlaborator

arametrularametrul 'edicamentul'edicamentul /ipul e"ectului /ipul e"ectului

7lucoza7lucoza ;urosemid;urosemid

81/@81/@

8drenalina8drenalina

0porire0porire

roteinaroteinatotalătotală

1orticosteroizi1orticosteroizi

0teroizii anabolici0teroizii anabolici0porire0porire

>>**>?>?>>00>?>?

8mpicilana8mpicilana7entamicina7entamicina

#acilina#acilina

piaţiipiaţii

0porire0porire

ă i i l i ă



Pregătirea pacientului cătrePregătirea pacientului cătrerecoltarea probei biologicerecoltarea probei biologice

*nstruireapacientului

cu privire la dietă$regim i procedurile

de recoltare

#ecoltarea#ecoltarea materialului biologicmaterialului biologic



#ecoltarea#ecoltarea materialului biologicmaterialului biologicprimar pentru investigareprimar pentru investigare

Fn calitate de material biologic pentru investigaţiileFn calitate de material biologic pentru investigaţiileclinice de laborator cel mai "recvent este utili(atclinice de laborator cel mai "recvent este utili(atsGngele #ecoltarea sGngelui se e"ectuea(ă prinsGngele #ecoltarea sGngelui se e"ectuea(ă prin::

• IenepuncţieIenepuncţie!!

• #ecoltarea sGngelui capilar#ecoltarea sGngelui capilar

SGngele venos constituie materialul biologicSGngele venos constituie materialul biologicpre"erenţial pentru investigaţiilepre"erenţial pentru investigaţiile biochimicebiochimice$$hormonalehormonale$$ serologiceserologice$$ imunologiceimunologice$$ precumprecumi pentru investigaţiile hematologicei pentru investigaţiile hematologice

" >i "A8!EE



Dezinfectăm locul puncţiei şi

aplicăm garoul

Cu atenţieamestecăm sângele

coatem garoul şi colectăm sângel

!n eprubetele necesare "fectuăm #enepuncţia

coatem acul

Colapsul #enei $ârful acului este lipitde peretele #enei

%cul a străpuns #ena

"enepunc>ie "A8!EE

Optimal

Cauzele !ntreruperii getului de sânge !n timpul #enepuncţiei

l# l i l l i bi l ii l l i bi l i



#ecoltarea#ecoltarea materialului biologicmaterialului biologicprimar pentru investigareprimar pentru investigare

#ecoltarea sGngelui venos se e"ectuea(ă cu#ecoltarea sGngelui venos se e"ectuea(ă cuaKutorul unor sisteme speciale cu vacuumaKutorul unor sisteme speciale cu vacuum$$care:care:

• e,clud complet contactul cu materialul biologice,clud complet contactul cu materialul biologici asigură securitatea atGt a pacientului$ cGt ii asigură securitatea atGt a pacientului$ cGt iaa personalului medical$personalului medical$

• e,clud contactul sGngelui cu mediul e,tern$e,clud contactul sGngelui cu mediul e,tern$• pre&ntGmpină destrucţia celulelor sanguine$pre&ntGmpină destrucţia celulelor sanguine$

• asigură un raport optim sGngeasigură un raport optim sGngeLLstabili(atorstabili(ator$$

) aceasta) aceasta permite de a evita de"ecte alepermite de a evita de"ecte alematerialului biologic$ contribuie la stabilitateamaterialului biologic$ contribuie la stabilitateaanaliţilor i obţinerea unui re(ultat corect alanaliţilor i obţinerea unui re(ultat corect altestului de laboratortestului de laborator

SistemulSistemul IA'94A*E#IA'94A*E#



SistemulSistemul IA'94A*E#IA'94A*E#constă din trei componenteconstă din trei componente

::

1.1. Ac special Ac special bidirecţionat cu o supapăbidirecţionat cu o supapă protectoare protectoare

<



2.2. holder holder VACUTAINERVACUTAINER



3.3. Eprubetă sterilăEprubetă sterilă

cu conţinut doat de !acuu"cu conţinut doat de !acuu"..

M

Priorităţile "aţă dePriorităţile "aţă de



Priorităţile "aţă dePriorităţile "aţă desistemele deschise:sistemele deschise:

• durata recoltării sGngelui se reduce cudurata recoltării sGngelui se reduce cuMN)JN%MN)JN%$ constituind doar$ constituind doar 7)<N7)<N secsec

• se reduc ca(urile de hemoli(ăse reduc ca(urile de hemoli(ă 00de lade la 5)5)CC lala %1%1 datorită evitării destrucţieidatorită evitării destrucţieimecanice a eritrocitelormecanice a eritrocitelor

• Se minimi(ea(ă "ormarea micro)Se minimi(ea(ă "ormarea micro)cheagurilorcheagurilor$$ deoarece sGngeledeoarece sGngelecontactea(ă imediat cucontactea(ă imediat cu

anticoagulantulanticoagulantul





• Perioada de timp &ntre recoltarea sGngeluiPerioada de timp &ntre recoltarea sGngeluii contactului său cu anticoagulantul estei contactului său cu anticoagulantul este

&ntotdeauna constantă! &ntotdeauna constantă!

• Este constant i raportulEste constant i raportulsGngesGngeLLanticoagulant deoarece:anticoagulant deoarece:

)) volumul anticoagulantului este do(atvolumul anticoagulantului este do(ate,act &n procesul de producere a eprubeteie,act &n procesul de producere a eprubetei!!

)) volumul sGngelui recoltat este determinatvolumul sGngelui recoltat este determinatde volumulde volumul do(at dedo(at de vacuum din eprubetăvacuum din eprubetă





•#educerea timpului de aplicare a#educerea timpului de aplicare agaroului$ deoarece la recoltarea &ngaroului$ deoarece la recoltarea &n

eprubete cu vacuum garoul seeprubete cu vacuum garoul sepoate scoate "oarte rapidpoate scoate "oarte rapid

•SterilitateSterilitate

*nuenţa duratei de aplicare a*nuenţa duratei de aplicare a



*nuenţa duratei de aplicare a*nuenţa duratei de aplicare agaroului la venepuncţiegaroului la venepuncţie asupraasupra

re(ultatelor testelor de laboratorre(ultatelor testelor de laborator

Parametrul Durata aplicării garoului, min.

0 2 4 6

Calciu, mmol/l 2,3 2,45 2,52 2,5

Proteina totală, g/l 72 74 77 0

!l"umina, g/l 3# 40 42 43

'H



'apacele i etichetele'apacele i etichetele eprubeteloreprubetelor suntsuntcolorate &n di"erite culoricolorate &n di"erite culori &n &n

dependenţă de tipul eprubeteidependenţă de tipul eprubetei

Succesiunea de recoltare aSuccesiunea de recoltare a





Succesiunea de recoltare aSuccesiunea de recoltare asGngelui &n di"erite tipuri desGngelui &n di"erite tipuri deeprubete:eprubete:& Eprubeta

Material

biologic Investigaţiile Culoarea

1.

Eprubetă fără aditivi, cu

aditivi sau cu activatori

ai coagulării

Ser biochimice,

serologice

Roşie

2. Eprubetă cu citrat de Na Plasma coagulograma Albastră

3.Eprubetă cuLi-heparină

sau heparină

Sânge

integru

/plasma

imunologice,

electroliţi, EAB

Verde

4. Eprubetă cu EDTA Sângeintegru

/plasma

Hematologice,PCR

Violetă

5.Eprubetă cu inhibitor al

glicolizeiPlasma glucoza, lactat Sură

Aditivi polimeriAditivi polimeri pentrupentru



Aditivi polimeriAditivi polimeri pentrupentru eprubeteeprubete cu vacuumcu vacuum

00pentru separarea seruluipentru separarea serului1:1:• 3ranule de polisterol pentru3ranule de polisterol pentru

coagularea rapidă a sGngelui icoagularea rapidă a sGngelui i"ormarea unui cheag compact"ormarea unui cheag compact

• 3el polietesteric3el polietesteric pentrupentrusepararea elementelorsepararea elementelor

-gurate ale sGngelui i-gurate ale sGngelui i

serului la centri"ugareserului la centri"ugareAditivii polimeri 0granulele deAditivii polimeri 0granulele depolisterol i gelul poliesteric1polisterol i gelul poliesteric1uurea(ă separarea seruluiuurea(ă separarea seruluiLLplasmeiplasmei



Durata i condiţiile de păstrare aDurata i condiţiile de păstrare a



ţ p ţ psGngelui recoltat:sGngelui recoltat:

• Se permite doar un singur ciclu de congelare)decongelare a seruluiSe permite doar un singur ciclu de congelare)decongelare a serului

• Se inter(ice congelarea sGngelui integruSe inter(ice congelarea sGngelui integru

• ?aterialul biologic se păstrea(ă cu atGt mai bine cu cGt este mai Koasă temperatura de păstrare?aterialul biologic se păstrea(ă cu atGt mai bine cu cGt este mai Koasă temperatura de păstrare



1ele mai "rec!ente cauze1ele mai "rec!ente cauze

ale alterării materialuluiale alterării materialuluibiologic după recoltarebiologic după recoltare::

– emoli(aemoli(a

– ?etabolismul celulelor sanguine?etabolismul celulelor sanguine – #eacţiile chimice#eacţiile chimice din serdin serLLplasmăplasmă– Acţiunea microorganismelorAcţiunea microorganismelor –

Evaporarea apeiEvaporarea apeiLLsublimareasublimarea– Procese osmoticeProcese osmotice – Acţiunea luminiiAcţiunea luminii – Di"u(ia ga(elorDi"u(ia ga(elor

?etode?etode &&n biochimian biochimia



?etode?etode & & n biochimian biochimiaclinicăclinică

• 'etodele principale sunt'etodele principale sunt metodemetode-(ico)chimice-(ico)chimice de analiză:de analiză:

–'etode optice'etode optice

–'etode cromatografce'etode cromatografce–Alectro"orezaAlectro"oreza

? t d? t d && bi hi ibi hi i



• 'etodele optice'etodele optice se bazeaza pese bazeaza pemasurarea proprietatilor opticemasurarea proprietatilor opticeale substanteiale substantei şi sunt bazate peşi sunt bazate pe

înregistrarea modifcărilor razei înregistrarea modifcărilor razeide lumină la trecerea ei prinde lumină la trecerea ei prinsoluţia e#aminatăsoluţia e#aminată$$

• 'etode "otometrice sunt:'etode "otometrice sunt:– re"ractometriare"ractometria– polarimetriapolarimetria

– "otometria"otometria

?etode?etode & & n biochimian biochimiaclinicăclinică

;/'A/C28;/'A/C28

http://ru.science.wikia.com/wiki/%D0%A4%D0%B0%D0%B9%D0%BB:Light_dispersion_conceptual.gif



;/'A/C28;/'A/C28D$D$ ;otometrie de absorbţie;otometrie de absorbţie ––

a)a) spectro"otometriaspectro"otometria --metodele bazate pemetodele bazate pemasurarea absorbtiei luminii de catre substantelemasurarea absorbtiei luminii de catre substantelecoloratecolorate

b)b) ne"elometriane"elometria -- măsoarămăsoară absorbtia luminii de catreabsorbtia luminii de catre

corpurile necolorate a6ate in suspensie se numesccorpurile necolorate a6ate in suspensie se numescturbidimetriceturbidimetrice

c)c) turbidimetriaturbidimetria - măsoară- măsoară dispersia luminii dedispersia luminii decatre particulele care se precipita, suspendate incatre particulele care se precipita, suspendate in

solutie, lucrandu-se cu precipitat colorat sausolutie, lucrandu-se cu precipitat colorat saunecolorat$necolorat$

E$;otometrie de emisie –E$;otometrie de emisie – a) 6uorimetriaa) 6uorimetria

2H4H?E4#*A2H4H?E4#*A



2H4H?E4#*A2H4H?E4#*Ade absorbţiede absorbţie

• +egea+egea BugherBugher OO +ambert+ambert OO BeerBeer FF lege fzicălege fzică,, con"ormcon"ormcăreia are loc micşorareacăreia are loc micşorarea intensităţii razei de luminăintensităţii razei de lumină

monocromatică la trecerea ei prin mediul de absorbţiemonocromatică la trecerea ei prin mediul de absorbţie $$

entru cercetări sunt utilizate "otocolorimetrele încare 6u#ul luminos cu intensitatea 2G este trimis printr-o cu!a sau printr-o eprubeta care contine solutia deanalizat$ ;lu#ul cu intensitatea 2, care a reusit satreaca prin cu!a "ara sa fe absorbit, cade pe o celula"otoelectrica$ 1elula "otoelectrica trans"orma energialuminoasa in energie electrica, care se masoara cu un

gal!anometru sensibil$



http://megasklad.ru/data/photoes/395764.jpg

http://megasklad.ru/data/photoes/395764.jpg



ME?6A P8R

#N 6(AN?$(8



•#eacţia polimera(ică &n lanţ#eacţia polimera(ică &n lanţ FF metodă a biologiei molecularemetodă a biologiei moleculare,,care permite de a obţine ocare permite de a obţine oamplifcare semnifcati!ă aamplifcare semnifcati!ă aanumitor sec!enţe specifce deanumitor sec!enţe specifce de84H84H$$



• 'etoda este bazată pe copierea'etoda este bazată pe copierea

selecti!ă multiplă a unui anumitselecti!ă multiplă a unui anumit"ragment specifc de 84H (sau 8CH) cu"ragment specifc de 84H (sau 8CH) cua&utorul enzimelora&utorul enzimelor in !itroin !itro$$ 8re loc8re loccopierea numai a sec!enţei de 84Hcopierea numai a sec!enţei de 84H,,care are o anumită consecuti!itate datăcare are o anumită consecuti!itate datăa bazelor azotate şi numai în cazul, cnta bazelor azotate şi numai în cazul, cntel este prezent în materialul cercetatel este prezent în materialul cercetat$$



'omponentele reacţiei'omponentele reacţiei

• 84H-matricea84H-matricea

• raimeriraimeri

• 84H-polimeraza termostabilă84H-polimeraza termostabilă• 0ubstrate –0ubstrate –

dezo#iribonucleotidtri"os"aţidezo#iribonucleotidtri"os"aţi

• 2oni2oni 'g'gE:E:

• 0olu0oluţie-tamponţie-tampon

rincipiulrincipiul



rincipiulrincipiul1C1C• DenaturareaDenaturarea matricea bicatenară dublumatricea bicatenară dublu

heli# de 84H este încălzită laheli# de 84H este încălzită la IJIJ--IKL1IKL1 pentrupentruca catenele să se despiralizeze şi să se separeca catenele să se despiralizeze şi să se separe$$

• AnnealingAnnealing)) unirea complimentară a matriceiunirea complimentară a matriceicu praimerul – la apro#$cu praimerul – la apro#$ =JL1$=JL1$

• ElongareaElongarea-- 84H84H--polimeraza sintetizeazăpolimeraza sintetizeazăcatena complimentară, polimeriznd bazelecatena complimentară, polimeriznd bazeleazotate suplimentate în mediul de reacţieazotate suplimentate în mediul de reacţie /aM /aM--polimeraza este ma#imal acti!ă lapolimeraza este ma#imal acti!ă la NEL1$NEL1$

Atapele e"ectuării 1CAtapele e"ectuării 1C::



Atapele e"ectuării 1CAtapele e"ectuării 1C::D$D$ prelucrarea materialului biologicprelucrarea materialului biologic$$



1entri"ugarea materialului biologic1entri"ugarea materialului biologic



E$E$ A#tragereaA#tragerea 84H84HOO8CH8CH

4ermostat

'entri"uga

Iorte,

QA?ES4E'A#EP

D$ *a sediment se adaugă soluţia pentru e#tragerea 8

M Fncăl(ire a cGte min la 55 R 5 8

J 'entri"ugarepentru obţinerea supernatantului cu AD

QQ regătirea probelor pentruregătirea probelor pentru



Q$Q$ regătirea probelor pentruregătirea probelor pentruamplifcareamplifcare:: introducerea în eprubetă a probelorintroducerea în eprubetă a probelor

biologice, primerilor, polimerazei, substratelor pentrubiologice, primerilor, polimerazei, substratelor pentrupolimerizarea 84H$polimerizarea 84H$

robele pregătite pentrurobele pregătite pentru



robele pregătite pentrurobele pregătite pentruamplifcareamplifcare

J$J$



8mplifcarea8mplifcarea

Ampli-cator

8mplifcator pentru real time8mplifcator pentru real time



8mplifcator pentru real-time8mplifcator pentru real-time1C1C

== Alectro"orezaAlectro"oreza



=$=$ Alectro"orezaAlectro"oreza-- pregătirea gelului pentru camera depregătirea gelului pentru camera de

electro"orezăelectro"oreză



1ameră pentru electro"oreză cu soluţie1ameră pentru electro"oreză cu soluţie

tampontampon



7elul după electro"oreză7elul după electro"oreză

N$$ nregistrarea rezultatelornreg strarea rezu tate or laatransiluminatortransiluminator ((in luminăin lumină



transiluminatortransiluminator ((in luminăin lumină

ultra!ioletăultra!ioletă))

1itirea r1itirea rezultatelezultateloror



1C1C• rezenţa unei benzi luminoase strict la ni!elulrezenţa unei benzi luminoase strict la ni!elulcontrolului poziti! în proba de analizat semnifcăcontrolului poziti! în proba de analizat semnifcă

prezenţa agentului patogen respecti! în proba dată$prezenţa agentului patogen respecti! în proba dată$• *ipsa bandei luminoase la ni!elul controlului poziti!*ipsa bandei luminoase la ni!elul controlului poziti!

în proba de analizat semnifcă lipsa agentului în proba de analizat semnifcă lipsa agentuluipatogen respecti! în proba dată$patogen respecti! în proba dată$

>6 ) control po(itiv>) ) control negativ

<$$7$$<N$<< probe clinice cu re(ultate po(itive

M$J$5$$C$< probe clinice cu re(ultate negative

biochimia clinica 2010 usasddaadsad

Documents