lteo(ArmstrongetaI.,1983).Deve-secon-sideraraqualidadedoscorposlteosquantoa morfologiaea coloraoe,emprincpio,evitarusarqualquerpossvelreceptoraqueapresenteumou maisfolculosdetamanhogrande,luteinizadoouno.Essetipodefol-culoresponsvelporumperftlhormonalat-picoconformedescritoporBariletalo(1993).

Consideraes FinaisA TE constitui-sedeumasucessodeeta-

pastcnicasbemdefinidas.Os rendimentosparciaisdecadaetapasendosatisfatriospo-demlevaraonascimentodedoisaseispro-dutosoriundosdetransfernciapordoadoratratada.A complexidadedomtodo,associa-doaesseresultadofinal,relativamentemo-destoquantoa produodecrias,limitaointeresseeconmicodaTE emcaprinos.

A etapastcnicassendoadequadas,aefi-cinciadasmesmasficacondicionadaper-feitarealizaoprtica.A equipedevertercompletocontroledecadaetapadacadeia,pois umaboaformaotericae prticaum pr-requisitoparaconstituiodeumaequipedeTE. Ressalta-sequeo sucessodaTE tambm,guardarelaopositivacomacondiocorporaleasadedasdoadorasereceptoras.Finalmente,o desenvolvimentodenovasbiotcnicas,taiscomoa sexagem,aclonagemeatransgneseofereceroTEumamaiorabrangnciadesuasaplicaes,favorecendo ampliaodo usodestem-tododereproduoemcaprinos.

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Captulo 1O

Produo in vitro de Embries

PauloBayardDiasGonalves,JosAntnioVisintin,MarcosAntnioLemosdeOliveira,MarceloMarcosMontagner,

LusFabianoSantosdaCosta

Introduo .A produoin vitrodeembries(PIV)

envolveasetapasdecolheita,maturao(MIV) efecundao(FIV)deocitos,bemcomocultivoouco-cultivo(CIV)dezigotoseestruturasembrionrias.umabiotcnicautilizada,alternativamente,paraaceleraraproduodeanimaisgeneticamentesupe-rioreseimpedir,pelaaspiraoin vivodefolculosguiadaporultra-sonografia,espe-cialmenteembovinos,o descarteprecocedefmeasgeneticamenteprivilegiadaspor-tadorasdealteraesadquiridasqueimpe-demquea reproduoocorrede formanaturalouatmesmopelatransfernciadeembries.Almdessesaspectos,a PIVtambmpermiteoaprofundamentodosco-nhecimentosrelativosaosprocessosfi-siolgicos,bioqumicosebiotecnolgicosdaespciedeinteressedoestudo,sema ne-cessidadede extrapolarresultadosper-tinentesaanimaisdelaboratrio.

EstecaptulotemafinalidadedeabordarasdiferentesetapasdaPIV e depropiciarumanoogeraldosprocessosfisiolgicosdamaturaoedafecundaodeocitosne-cessriosparaaimplementaodessabiotc-nica,ressaltando-sequeserdadamaiorn-

faseespciebovinaemconseqnciadasuaimportnciaeconmico-zootcnica.Entre-tanto,algunstpicosseroexaminadoscombaseemestudosconduzidoscomanimaisde

laboratrio,assimcomoserocitadosalgunsaspectosdaPIV emsunoseovinos.Ao finaldocaptulo,asfasescrticasparaoentendi-mentodosmecanismosedastcnicasbsi-casconhecidasparaPIV terosidodiscutidasdemaneiraapossibilitarsuaexecuo,sen-dooportunorelatarquemuitasetapasdesseprocessoaindanosobemcompreendidaseque,poressemotivo,torna-sedifcilman-terumsistemadePIV queproduzaembriesdeformaeficientee regular.

Histrico

H maisdeumsculo,foiobservada,pelaprimeiravez,a fecundaodeum vulodeestreladomarcomaposteriorformaodaprimeiracluladofuturoembrio.Os inver-tebradosmarinhosforamobjetosdasprimei-ras investigaesporque,ao contrriodosmamferos,a fecundaoocorreexterna-menteaosistemareprodutordafmea.Nosmamferos,aindano finaldadcadade20,surgiuoprimeirorelatosobreapossibilidadedesecultivarembriesdecoelhosdesdeos

195

primeirosestdiosdeclivageme nadcadaseguintefoi registradaa primeiraevidnciadonascimentodelparosresultantesdocul-tivoin vitrodeembries.Todavia,somentenadcadade50,marconahistriadaFIV,quefoiregistradoonascimentodoprimeiroanimal(coelho)geradoa partirda FIY. Noqueconcerneaosanimaisdeproduo,ape-nasno finaldosanos70quesurgiuo pri-meiroinformesobreaMIV eFIV deocitos

bovinosej no inciode80constatava-seonascimentodoprimeiroanimaldessaesp-cie.A PIV embovinosrecebeugrandeimpul-soaindanofinaldadcadade80portersido

Tabelo1O.1. EvoluodosMerentesetapasdo produoin vilTode embries.

verificadoquepoderiaserintegralmentevia-bilizadasobcondiesartificiais.Nessames-ma dcada,massemgranderepercusso,houveramtambmrelatosdenascimentodeoutrasespciesruminantescomoovinosecaprinos.Portodopotencialdeaplicaoquea PIV representaparaasespcieshumanaeanimal,comopelasuaexpressividadetantoparaacinciabsicaquantoparaaaplicada,temsidomuitodifundidaeutilizadaemdi-versospases,inclusivedeformadestacadano Brasil,apartirdadcadade90.A tabela10.1contmumasntesedetodaevoluodessabiotcnica.

EPISDIO1f

-Penetroodeespermotozideemocitodeestrelodomare formoodoprimeiroclulaembrionrio. Desenvolvimentodeembriodecoelhoin vitroato estdiodeblastocisto

. Nascimentodecoelhoresultantedeembriocultivadoin vitro

- Nascimentode coelho oriundo de ocito cultivado in vitro

-Nascimentodo primeirocoelho originado de ocito fecundado in vitro

- Maturoo e fecundao in vitrode ocito bovino

. Louise Brown, primeiro beb nascido de fecundao in vitro em humano.

- Noscimento de bezerro provenientede ocito fecundado in vitro, vencendo a copacitao

espermticaem bovinos

-CompletoprocessodePIVembovinos- maturooe fecundaodeocitos,assimcomodesenvolvimentoembrionrio

-Estabelecimentodastcnicosdeproduoinvitrodeembriesembovinos. Utilizaodastcnicosde produodeembriesin vitroparapesquisae multiplicaodematerial

genticono produoanimal

Aplicaes e limitaes da PIVAstcnicasdePIV tmsidoutilizadasnos

diferentesseguimentosdareproduoassis-tidadasreashumanaeanimal.Inicialmente,essastcnicasforamempregadasunicamentenapesquisafundamentalcomoinstrumentoparaestudarfenmenosfisiolgicosrelacio-nadosaosgametasfemininoemasculino.Es-sesestudospermitiramo melhorentendi-mentodosfenmenosdecrescimento,matu-

196 .

raoefecundaodeocitos,dacapacita-oespermtica,bemcomododesenvolvi-mentoembrionrioprecoceedeseusmeca-nismosderegulao.Apesardoelevadon-merodetrabalhosquecontriburamparaelu-cidarmuitosquestionamentoscientficos,poucoseconhecesobrearegulaodessesfenmenosfisiolgicos,principalmentenombitomolecular.Assimsendo,a PIV temsidoimportanteinstrumentonoesclareci-

ANO AUTORES

1800 HermanFoi

1929 Lewis & Gregory1935 Pincus & Enzmann1955 Chang1959 Chang1977 Iritani&Niwa1978 Steptoe& Edwards

1982 Brockettet01.

1987 Luet01.

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