bovine spongiform encephalo pathy bse mad cow disease doenÇa da vaca louca encefalopatia...
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BOVINE SPONGIFORM ENCEPHALO PATHY
• BSE• MAD COW DISEASE
• DOENÇA DA VACA LOUCA• ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME
BOVINA
BOVINE SPONGIFORM ENCEPHALO PATHY
• BSE• MAD COW DISEASE
• DOENÇA DA VACA LOUCA• ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME
BOVINA
Prof.Dr. Leonardo J. RichtzenhainVPS/FMVZ/USP
Agente sem ácido nucléico
Proteína infecciosa
Constituinte do hospedeiro
Não induz resposta de anticorpos
Resistência elevadíssima
Kuru – Papua Nova Guiné1957
Daniel Carleton GajdusekNobel de Medicina 1976
Mulheres e crianças8 x mais comumque nos homens
•Período de incubação prolongado (meses/anos)
•Doença neurológica debilitante sempre fatal
•Microscopia eletrônica extratos de cérebro tratado com detergente SAF scrapie associated fibrils
•Alterações patológicas restringem-se ao SNC incluindo vacuolização
•O agente transmissível não induz resposta imune detectável no hospedeiro
ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISSÍVEIS Geral
ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISSÍVEIS Geral
ENCEFALOPATIAS TRANSMISSÍVEISHUMANAS (Prusiner,1995)
ENCEFALOPATIAS TRANSMISSÍVEISHUMANAS (Prusiner,1995)
?
KURU(CJ)
CREUTZFELDT-JAKOB
GERSTMANN-STRÄUSSIER-SCHEINKER
INSÔNIA FAMILIAR FATAL
AQUISIÇÃO
CANIBALISMO
DISTRIB.
? (ESPORÁDICA)
10-15% HERED. MUT. PrP
Raramente IATROGÊNICA
HERED. MUT. PrP
HERED. MUT. PrP
PAPUA N.GUINÉFIM 1958
ESPORÁD. 1/ 1.000.000
100 FAMÍLIAS IDENT.
80 CASOS IDENTIFICADOS
Duração Doença
FREQ. 1 ANOVARIANDO DE
1 MES A 10 ANOS
50 FAMÍLIASIDENTIFICADAS
9 FAMILIASIDENTIFICADAS
TIPICAM.1-2 MESES
TIPICAM.1 ANO
ENCEFALOPATIAS TRANSMISSÍVEISANIMAIS (Prusiner,1995)
ENCEFALOPATIAS TRANSMISSÍVEISANIMAIS (Prusiner,1995)
• SCRAPIE DAS OVELHAS
• ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
• DOENÇA CRÔNICA DEBILITANTE DOS ALCES E VEADOS
Scrapie1700
Transmission summaryPrions (PrPSc) are shed from sheep and goats in birth fluids, feces and other excrement. The concentration of the prions is uncertain, but is not directly proportional to infectivity. Sheep ingest soil, so soil represents a plausible environmental reservoir of scrapie, which can persist in the environment for years. Longevity of the prions and the attachment of soil particles likely influences the persistence and infectivity of prions in the environment.Effective methods to inactivate prions in the soil are currently lacking, and the effects of natural degradation mechanisms on prion infectivity are largely unknown. An improved understanding of the processes affecting the mobility, persistence and bioavailability of prions in soil is needed for the management of prion-contaminated environments. A system for estimating the prion-binding capacity of soil on farms using simple soil analysis may allow an estimate of the prion risk in the environment, and whether prion binding by the use of soil amendments or top dressings may help to mitigate the infectious prions. Lichens, Lobaria pulmonaria, may have potential for reducing the number of prions because some species contain proteases that show promise in breaking down the prion. Further work to clone and characterize the proteases, assess their effects on prion infectivity, and determine which organism or organisms present in
lichens produce or influence the protease activity is warranted and is currently under investigation. [26]
Chronic Wasting Disease
EpidemiologyThe origin and mode of transmission of the prions causing CWD is unknown, but recent research indicates that prions can be excreted by deer and elk, and is transmitted by eating grass growing in contaminated soil. [6][7] Animals born in captivity and those born in the wild have been affected with the disease. Based on epidemiology, transmission of CWD is thought to be lateral (from animal to animal). Maternal transmission may occur, although it appears to be relatively unimportant in maintaining epidemics. Research has recently shown that an infected deer's saliva is able to spread the CWD prions. [8]
BSE – UK1986
BSE – UK1986
Grande importância econômica e social
Creutzfeldt-JacobVariante
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
•Descrita 1a vez na Grã Bretanha em1986•Mais de 178.000 casos descritos•Embora já tenha sido descrita em gado nativo Bélgica Dinamarca França Irlanda Irlanda do Norte Luxemburgo Liechtenstein Holanda Portugal Suiça
95% de todos os casosGrã Bretanha
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
'Mad cow' disease found in California dairy cow
14/04/2012
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
SINAIS CLÍNICOS EM BOVINOS
•Alterações de comportamento: nervosismo, agressividade, postura anormal incoordenação, dific. levantar
•Queda na produção de leite e carne embora apetite mantido.
•Não há tratamento: letalidade 100%
•Período de incubação : 2 a 8 anos
•Curso da Doença: 2 semanas a 6 meses
•Maioria dos bovinos acometidos na Grã Bretanha: leiteiros 3 a 6 anos de idade
Number of cases of bovine spongiform encephalopathy (BSE) reported in the United Kingdom
Updated: 21.11.2002
Year Alderney Great Britain
Guernsey Isle of Man2
J ersey Northern Ireland
Total United
Kingdom 1987 and before(4)44 0 442 4 0 0 0 446
1988(4)44 0 2 469 34 6 1 4 2 514 1989 0 7 137 52 6 4 29 7 228 1990 0 14 181 83 22 8 113 14 407 1991 0 25 032 75 67 15 170 25 359 1992 0 36 682 92 109 23 374 37 280 1993 0 34 370 115 111 35 459 35 090 1994 2 23 945 69 55 22 345 24 438 1995 0 14 302 44 33 10 173 14 562 1996 0 8 016 36 11 12 74 8 149 1997 0 4 312 44 9 5 23 4 393 1998 0 3 179 25 5 8 18 3 235 1999 0 2 274 11 3 6 7 2 301 2000 0 1 355 13 0 0 75 1 443 2001 0 1,113 2 0 0 87 1,202
2002(5) 0 695 0 0 0 60 755
ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISSÍVEIS
ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISSÍVEIS
LESÕES DEGENERATIVAS DO S.N.C.VACÚOLOS
APARÊNCIA ESPONJOSA NO HISTOPATOLÓGICO (ESPONGIOSE)?
Fig. 1 A, B, CSpongiform change is characterised by diffuse or focally clustered small round or oval vacuoles in the neuropil. A spectrum of intensity may be observed, ranging from no change (A) to slight or moderate (B) to severe changes (C). Hematoxylin and eosin stain. © H. Budka 2000
Fig. 3Variant CJD (vCJD) with prominent "florid" plaques (fibrillary amyloid plaques surrounded by spongiform vacuoles)
well visible already in this hematoxylin and eosin stain . Paraffin block given by courtesy of Dr. J. W. Ironside, Edinburgh.
© H. Budka 2000
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
ETIOLOGIA
Stanley PrusinerNobel de Medicina
1997
PRIONS “Proteinaceous infectious particles”
PRIONS “Proteinaceous infectious particles”
PROTEÍNA(INFECCIOSA)
DNA
RNA
?
PRIONSPRIONS
DNA RNAm PROTEINA
DNA RNAm PROTEINA
RNA PROTEINA
RNA RNAm PROTEINA
EUCARIOTOSE
PROCARIOTOS
VIRUS
RNA DNA RNAm PROTEINA
TR
PRIONSPRIONS
TERMINOLOGIA PROPOSTA POR STANLEY PRUSINER(PRONUNCIA-SE PRION , INGLÊS= “PREEON”) Proteinaceous infectious particles
+
PrPn PrPs MUTAÇÃO
INFECÇÃO
MODIFICAÇÃO DA PrP NORMAL
MODIFICAÇÃO DA PrP NORMAL
PrP PrPs
Menor solubilidade / Maior resist. proteólise
PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP
PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
APARECIMENTO GRÃ BRETANHA:
MODIFICAÇÕES PROCESSO PRODUÇÃO DE FARINHA DE OSSO E CARNE
•CALOR (MENOR 134o C POR 18 min.•DIMINUIÇÃO DE SOLVENTES DE GORDURA
EVIDÊNCIAS•CRONOLÓGICAS (época das modificações do processode produção)•GEOGRÁFICAS (fábricas que mantiveram processo de produção
Isle of Man
CAUSAS APARECIMENTOBSE
CAUSAS APARECIMENTOBSE
FÁBRICASFARINHAS DE OSSOFARINHA DE CARNE
MUDANÇAS
•TEMPERATURA 134 C / 18 MIN•REDUÇÃO DE SOLVENTES
CAUSAS APARECIMENTOBSE
CAUSAS APARECIMENTOBSE
Ovino - Scrapie
BSE
Farinha Carne e Osso
Resistência dos prions
!!!!!!!
A BARREIRA DE ESPÉCIESA BARREIRA DE ESPÉCIES
PrP sOVELHA
PrP nCAMUND.
PrP sCAMUND.
DIFÍCIL
BARREIRA DE ESPÉCIESBARREIRA DE ESPÉCIES
PrPs HAMSTER
CAMUNDONGO TRANSGÊNICO
+
RARAMENTE ADOECE
CAMUNDONGO
PrPs CAMUND. PrPs HAMSTER
ADOECE EM2 MESES
(EXPRESSA PrP HAMSTER)
knock out de PrPknock out de PrP
ADOECE
CAMUNDONGO COM GENE DE PrP
PrPs CAMUND.
CAMUNDONGO SEM GENE DE PrP
+
NÃO ADOECE
+
DIFERENÇAS DE PrP NAS ESPÉCIESDIFERENÇAS DE PrP NAS ESPÉCIES
HAMSTER X CAMUNDONGO 16 CODONS / 254
BOVINO X OVINO 7 CODONS
BOVINO X HUMANO 30 CODONS
CAMUNDONGO X HUMANO 28 CODONS
? PONTO CRÍTICO
*
*
*
TransmissãoTransmissão
•Hereditária (Mutação transmitida)
•InfecçãoOralParenteralIatrogênica
Mais comum
TransmissãoTransmissão
PrP s
Placas de PeyerNervos PeriféricosSNC
Resistente suco gástrico, enzimas intestinais,Proteases bacterianas do rúmenOral
Chegada ao SNC:•Medula•Ponte•Cortex
Proibição deVisceras
no Reino Unido
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
Transmissão da EEB
•Nào há evidencias de transmissão horizontal por contato
•A transmissão vertical parece ocorrer em baixa frequência 9% mais de casos de EEB em bezerros de mães com EEB dúvida se isso é genético ou real transmissão
•Oral (visceras com PrPsc) = maiores evidencias
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
POTENCIALZOONÓTICO
BSE
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
EEB x Creutzfeldt Jacob Disease (CJD)
•Março de 1996 Comite de Experts de Encefalopatia Espongiforme relata a identificação de 10 casos de uma forma variante de CJD com a doença iniciando entre 1994 e 1995:
• A forma variante (vCJD) caracterizava-se: * Pacientes muito mais jovens (média CJD= 63 anos / vCJD = 28 anos) * Curso mais longo (CJD= 6 meses vCJD = 13 meses) * Eletroencefalograma da vCJD difere da CJD * Histopatologia vCJD com placas de proteinas prionicas maiores.
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
EEB x Creutzfeldt Jacob Disease (CJD)
•Moira Bruce / Edingburgh Escócia 1997 Inoculação de camundongos com : *BSE *vCJD *CJD
•BSE e vCJD * mesmo período de incubação * mesmos sinais clínicos * mesmas lesões cerebrais
CJD Padrão distinto
ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINAENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA
Camundongos transgênicos expressando PrP bovina:
* altamente suscetíveis a EEB * altamente suscetíveis a vCJD * características das doenças indistinguíveis
BSE x vCJD Reino Unido
DIAGNÓSTICODIAGNÓSTICO
•HISTOPATOLÓGICO
•PESQUISA SAF MICROSC. ELETRÔNICO
•Imunohistoquímica
•ELISA
•WESTERN BLOT
E
DIAGNÓSTICODIAGNÓSTICO
Histopatologia
Pesquisa SAF Microscopia Eletrônica
Imunohistoquímica
?
Monoclonais disponíveiscomercialmente
ELISAELISA
PrPs
Extração proteases(PrPs é resistente)
PrPs
0,5 g
PrPs MabsObs:Mabs contra PrPsartificialmenteproduzidos em condiçõesexperimentais
WESTERN BLOTWESTERN BLOT
PrPs + ...ETC
PAGE
W.BLOT
Po
DAB
(PrPs é resistente)Prot. K
PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP
DOENÇA DE AUJESZKY
PRO PROF. DR. LEONARDO J. RICHTZENHAIN VPS/FMVZ/USP
FI VE VT SuPE
BSE
10. CONTROLE
Animais doentes
Fonte de Prions
Alimentos
Medicamentos
Fômites
•Carcaças•SNC (principalmente)
Restrições
•Alimentação Ruminantes•Fômites•Uso parenteral de POA•Proibir importação POA de países com casos da doença