CALIDAD MICROBIOLOGICA DE LAS QUEBRADAS QUINCEAERA Y BRISAS DEL HUALLAGA

CALIDAD MICROBIOLOGICA DE LAS QUEBRADAS QUINCEAERA Y BRISAS DEL HUALLAGASERNANPPARQUE NACIONAL TINGO MARIA

INTRODUCCIONEl Parque Nacional Tingo Mara se localiza en la ecorregin selva alta del Per, en el departamento de Hunuco, provincia de Leoncio Prado, distrito de Mariano Dmaso Beran, su zona de amortiguamiento se ubica en el Distrito de Rupa Rupa. La superficie del PNTM, es de 4, 777,80 hectreas.El Parque Nacional Tingo Mara es una de las reas ms importantes a nivel nacional, encargada de conservar la biodiversidad y ecosistemas que conforman la ecorregin selva alta, razn de existencia del rea natural protegida, por consiguiente se tiene que proteger las nacientes de agua ubicadas dentro de esta rea. En cumplimiento de esto se analiz durante los meses de Enero y Febrero la calidad de agua de dos captaciones, Alania y Brisas del Huallaga que por definicin implica que esta debe encontrarse libre de organismos patgenos, sustancias qumicas, impurezas y cualquier tipo de contaminacin que cause problemas a la salud humana (O.M.S, 2003); sin embargo el agua encontrada en estado natural nunca est en estado puro, sino que presenta sustancias que pueden limitar, de modo igualmente natural, el tipo de usos del agua.Estas quebradas que proveen de agua en forma artesanal no presentan indicadores de contaminacin fecal; sin embargo si contienen contaminantes microbiolgicos naturales como hongos, microorganismos aerobios viables, staphylococos, etc.

OBJETIVOS

Objetivo General Analizar la calidad microbiolgica del agua en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga.Objetivo Especifico Determinar la presencia de coliformes totales y fecales en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga. Determinar la presencia de Microorganismos aerobios viables en las Alania y Brisas del Huallaga. Determinar la presencia de Mohos y Levaduras en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga. Determinar la presencia de Staphyloccus y Streptococcus fecales en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga. Determinar la presencia de Vibrio cholerae y Salmonella en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga.

DESCRIPCION DE LA ZONA ESTUDIOEl Parque Nacional Tingo Mara es un bosque hmedo pre montano tropical, se caracteriza por tener Clima hmedo - Clido, con temperatura media anual variable entre 22C y 24C; y la precipitacin pluvial total, promedio anual, entre 2 200 y 3 000 milmetros. Es un bosque siempre verde.La zona donde se ubica la captacin del sector Quezada se encuentra impactada por las actividades humanas (agricultura migratoria y turismo), est ubicada en la zona de uso especial del Parque, la vegetacin caracterstica esta predominada por especies arbreas y arbustivas. En esta zona an se puede encontrar aves, insectos, etc. Aunque con mucha dificultad.La zona donde se ubica la captacin para el AA HH Brisas del Huallaga ha sido poco impactada ya que se encuentra en zona de proteccin estricta, las afectaciones existentes se deben a la construccin de esta captacin con su respetivo reservorio, la vegetacin es densa, encontrndose especies arbreas de gran altura, especies herbceas y arbustivas. El bosque se presenta cubierto de musgos, lquenes, bromelias y otras epfitas. En esta zona todava se pueden observar monos, pavas, entre otras especies representativas de la fauna del Parque.

PERIODO DE INVESTIGACIONSe evalu la calidad microbiolgica del agua en las captaciones de agua del sector Quezada y AA HH Brisas del Huallaga, poca de lluvias (Enero y Febrero).

CALIDAD DEL AGUAEl trmino calidad del agua se aplic originalmente para la de consumo humano, despus para la de uso agrcola e industrial. Con base en la composicin del agua y en consecuencias de sus caractersticas, se puede clasificar para diversos usos. Los estndares de calidad ambiental establece las siguientes categoras de uso de agua: poblacional y recreacional, actividades marino costeras, riego de vegetales y bebida de animales, conservacin del ambiente acutico (MINAM, 2008).Sin embargo el agua encontrada en estado natural nunca est en estado puro, sino que presenta constituyentes orgnicos e inorgnicos. Estos pueden limitar, de modo igualmente natural, el tipo de uso del agua.Segn la CONAGUA (2004), los principales contaminantes del agua son: Los agentes patgenos, bacterias, virus, protozoarios, parsitos que entran al agua, provenientes de desechos orgnicos de origen natural o antropogenico.La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) en sus Guas para la calidad del agua potable, y otras normas internacionales, establecen o recomiendan que el agua es apta bacteriolgicamente para consumo si se encuentra exenta de microorganismos patgenos de origen entrico y parasitario intestinal. Ellos transmiten enfermedades tales como salmonelosis (Salmonella), shigelosis (Shigella), colera (Vibrio Cholerae), amebiasis (Entamoeba histolytica), alteraciones gastrointestinales (Aeromonas mesfilas, Helicobacter pylori, Campylobacter); giardiasis (Giardia lamblia), cristosporidiosis (Crystosporidium), esquistosomiasis (Schistosoma), desrdenes hepticos (virus de hepatitis), etc.La presencia de microorganismos patgenos en el agua de bebida es un riesgo que se incrementa en las reas rurales sin disponibilidad de agua potable. La seguridad que un agua contaminada puede ser causal de enfermedades, ha conducido a la necesidad de monitorear la calidad microbiolgica de muestras de diversos orgenes.

COLIFORMES TOTALES Y FECALESEn los cuerpos de agua habitan, normalmente, muchos tipos de bacterias, las cuales son importantes, pues ellas se alimentan de materia orgnica, y por consiguiente son las principales responsables por el proceso de autodepuracin. Coliformes totales: se encuentran comnmente en el medio ambiente (por ejemplo, en el suelo y las plantas) y generalmente no causan enfermedades.Coliformes fecales: es un subgrupo de bacterias coliformes totales que se encuentran en grandes cantidades en los intestinos y excremento de los humanos y animales. Su presencia indica que el agua est contaminada con materia fecal, y tiene el potencial de causar enfermedades (CAMPOS, 1999).MICROORGANISMOS AEROBIOS VIABLESMicroorganismos aerobios mesfilos son aquellos microorganismos que se desarrollan en presencia de oxgeno libre y a una temperatura comprendida entre 20C y 45C con una zona ptima entre 30C y 40C. Por lo general este grupo de microorganismos indican contaminacin ambiental; un nmero elevado de estos no necesariamente significa presencia de patgenos (INEN, 2006).

MOHOS Y LEVADURASLos mohos son hongos filamentosos que viven como saprofitos en el suelo y agua donde contribuyen a la descomposicin de la materia orgnica y al reciclado de materia orgnica. Se encuentran distribuidos ampliamente en la naturaleza y algunos son causantes de alergias.Las levaduras son clulas nicas, por lo general de forma esfrica a elipsoide. Algunas especies son hongos dimorfos capaces de crecer como levaduras o mohos segn las condiciones del ambiente, normalmente no son patgenas a excepcin de la Candida albicans, en su forma filamentosa puede causar infecciones vaginales y pulmonares.Las levaduras se distinguen de los mohos en que son unicelulares, no suelen formar filamentos (GRANADOS y VILLAVERDE, 2003).

STAPHYLOCCUS Y ESTREPTOCOCUSLos Staphylococcus son microorganismos relativamente extendidos en el medio ambiente, pero se encuentran principalmente en la piel y las mucosas de los animales y humanos. Es anaerobio facultativo y crece bien en manitol a 37C. Los Staphylococcus pueden ser liberados por contacto humano en las aguas naturales de uso recreativo, tambin se ha detectado en aguas de consumo, aunque su presencia se controla con facilidad mediante tratamientos y desinfeccin convencionales.Los Streptococcus son bacterias integrantes de la flora normal de los animales homeotrmicos. El gnero Streptococcus rene apenas dos especies: S. bovis y S.equinu, que son ms abundantes en heces animales. Presentan tasas se supervivencia semejantes a la de los patgenos entricos (CAMPOS, 1999). Los Estreptococos fecales no se multiplican en el medio ambiente, o si esto ocurre es solamente en raras ocasiones. Son ms persistentes en ambientes acuticos y en suelos contaminados que E. coli. Son importantes en situaciones donde se sabe que hay contaminacin fecal y no se detectan coliformes, como ocurre cuando las descargas son intermitentes o ms antiguas, de modo que mueren los coliformes fecales y E. coli, y permanecen los estreptococos (CAMPOS, 1999).

SALMONELLA Y VIBRIO CHOLERAEEl gnero Salmonella son bacilos gram-negativos, crecen ptimamente a 37C y pueden catabolizar la glucosa y otros carbohidratos con produccin de cido y gas, estn ampliamente distribuidos en la naturaleza, siendo responsables de las siguientes enfermedades: fiebre tifoidea, paratifoidea y salmonelosis, constituyendo un importante problema en la salud pblica (WAFAA y AMANI, 2011).El medio ambiente se contamina por excretores humanos y animales. Por lo general, los animales son slo portadores que eliminan Salmonellas de forma regular, aunque en pequeas cantidades, estas se transmiten a travs de las aguas superficiales.

Los miembros del genero Vibrio son bacilos gramnegativos curvos o rectos, anaerobios facultativos, habitantes naturales de aguas dulces y saladas.La familia Vibrionaceae incluye muchas especies, que en su mayor parte son habitantes normales del ambiente acutico. De ms de 30 especies Vibrio solo 12 se han reconocido como patogenos para el ser humano y solo V cholerae se asocia con el clera epidmico (WAFAA y AMANI, 2011).

MATERIALES Y METODOSMateriales Envase de vidrio (1L) Pipetas de 10mL y 1mL estriles con tapn de algodn Asa bacteriolgica o inoculador Mechero Placas Tubos de ensayo Gradillas Tubo Durham

Equipos Incubadora 37C, 44.5C y 20C Horno para esterilizar material de vidrio a 160C. 180C AutoClave Bao Mara Balanza digitalMedios de cultivo Caldos: peptona, lactosado, Brilla, E. Coli, Tetrationato, Selenito Cistina Agar: Plate Count, Sabouraud, Nutritivo, Manitol salado, Sangre, TCBS, SSPreparacin de materialesSe prepar los frascos de muestreo, esterilizados y rotulados con el nombre del punto de muestreo. Estos no fueron abiertos hasta el momento de la toma de muestra.

Mtodos MuestraEl muestreo se realiz durante dos das, entre las 8:00 y 10:00 de la maana, una muestra diaria. Cada muestra de agua fue colectada manualmente al inicio de la captacin, muestreo puntual, en 1 frasco de vidrio de 1L de volumen (APHA, 1999), sumergindolos en el agua de manera que la boca apunte hacia la corriente. Inmediatamente se llev la muestra al laboratorio de microbiologa de la Universidad Nacional Agraria de la Selva. La captacin del sector Quezada, quebrada Quinceaera se encuentra ubicado en las coordenadas UTM 391563E, 8964491N a 1040 msnm y la captacin del AA HH Brisas del Huallaga en las coordenadas 389308 E y 8968230 N a 913 msnm, estas zonas fueron geoposicionados con un GPS de la marca GARMIN.La frecuencia de muestreo y anlisis se realiz 1 vez al mes, durante Enero y Febrero.

Anlisis microbiolgicoPara los anlisis se tomaron muestras de agua en recipientes 1 L de vidrio, previamente esterilizadas en autoclave (120C/ 15-.20 min) las cuales permanecieron perfectamente cerradas hasta la toma de la muestra.Los mtodos utilizados para analizar las muestras fueron mediante medios selectivos para cada grupo bacteriano.Se utiliz medios lquidos para coliformes fecales y totales, y agar para el aislamiento de los Staphylococcus y Streptococcus fecales, mohos, microorganismos aerobios viables, Vibrio cholerae y Salmonella.Para la determinacin de los grupos bacterianos se realizaron diluciones (10-1, 10-2 y10-3). Para el grupo de las coliformes totales se utiliz el caldo Brilla incubndo por 24 horas a 37C y para coliformes fecales el caldo E. Coli incubndose por 24 a 48 horas a 44.50.5C.El grupo de microorganismos mesfilos aerobios viables se incubo en agar plate count por 24 horas a 37CEl grupo de los mohos se incub en un medio sabouraud por 72 horas a temperatura ambiente (20C).El grupo de los Staphylococcus se incub en manitol por 24 a 48 horas a 37C.El grupo Streptococcus se incub en agar sangre por 24 a 48 horas a 37CEl grupo Vibrio se incub en agar TCBS a 37C previo enriquecimiento con caldo peptona y cloruro de sodio (NaCl).El grupo Salmonella se incub en agar SS a 37C previo pre enriquecimiento con caldo lactosado y enriquecimiento selectivo con caldo Tetrathionate y Selenite cistine.Los resultados se reportaron en unidades formadoras de colonias por 100 mL (UFC/100 mL) en mohos y microorganismos mesfilos viables. Se cuantifico los coliformes por el mtodo indirecto del nmero ms probable. Para Staphylococcus, Streptococcus, Vibrio cholerae y Salmonella los resultados se presentaron en presencia/ausencia.

RESULTADOS Cuadro 1. Resultados de los anlisis microbiolgicos, indicadores de contaminacin.pHColiformes TotalesColiformes FecalesNMLNMAVStaphylococcusStreptococcusVibrio choleraeSalmonella sp.

Captacin Sector Quezada1ra. Muestra6.814 NMP/100ml0 NMP/ml0 x 103 col/ml6 x 103 col/mlAusenciaAusenciaAusenciaAusencia

2da. Muestra6.840 NMP/ml0 NMP/100ml2 x 103 col/ml1 x 103 col/mlPresenciaPresenciaAusenciaAusencia

Captacin AA HH Brisas del Huallaga1ra. Muestra6.650 NMP/100ml0 NMP/100ml18 x 103 col/ml12 x 103 col/mlPresenciaAusenciaAusenciaAusencia

2da. Muestra6.720 NMP/100ml0 NMP/100ml216 x 103 col/ml1 x 103 col/mlPresenciaPresenciaAusenciaAusencia

Cuadro 2. Comparacin de resultados con los ECAs para Agua.Parmetros ECA Categora 1 A1ECA Categora 4 Ros SelvaCaptacin Sector QuezadaCaptacin AA HH Brisas del Huallaga

Coliformes totales50 NMP/100ml2000 NMP/100ml2 NMP/100ml0 NMP/100ml

E. coli0 NMP/100mlND--

SalmonellaAusenciaNDAusenciaAusencia

Vibrio choleraeAusenciaNDAusenciaAusencia

Mohos y levadurasNDND1 x 103 col/ml117 x 103 col/ml

Microorganismos aerobio viablesNDND3 x 103 col/ml6 x 103 col/ml

StaphylococcusNDND-Presencia

StreptococcusNDND--

Ausencia de coliformes

Presencia de mohos y levaduras

Presencia de Microorganismos mesofilos aerobios viables

Presencia de staphylococcus

Presencia de Streptococcus

Ausencia de Salmonella y Vibrio

DISCUSIONES

Los resultados de las muestras de agua indicaron la presencia de microorganismos propios del ambiente acutico y tambin agentes patgenos, Staphylococcus y Streptococcus provenientes de desechos orgnicos en su mayora de origen natural, si estas bacterias se encuentran en grandes cantidades en el agua pueden causar afecciones a la piel pero estos problemas pueden ser resueltos por desinfeccin convencional. Estos gneros de bacterias naturalmente se encuentran en la piel y mucosas de los animales por lo que se puede asegurar que solo la fauna local puede contaminar las aguas de estas quebradas ya que las zonas muestreadas se encuentran dentro de un Area Natural Protegida que limita el contacto de las aguas superficiales con los seres humanos.Se descarta la presencia de contaminacin fecal en estas quebradas ya que los indicadores mostraron un mnimo nmero de microorganismos coliformes totales y fecales o la ausencia total de estos. As mismo estas aguas no contienen microorganismos de los gneros Vibrio y Salmonella reafirmando la inexistencia de contaminacin fecal antropognica, por tanto estas aguas son aptas para el consumo humano previa desinfeccin simple para eliminar los microorganismos propios del ambiente.

CONCLUSIONESLas Quebradas Quinceaera y Brisas del Huallaga no se encuentran contaminadas por desechos orgnicos antropognicos, no presentan indicadores de contaminacin fecal, coliformes, vibrios y salmonellas. Por consiguiente estas aguas pueden ser aprovechadas para el consumo humano previa desinfeccin simple.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICASAPHA, 1999.Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, American Public Health Association, New York, EUACAMPOS C, 1999. Indicadores de contaminacin fecal en la reutilizacin de aguas residuales para riego agrcola. Tesis doctoral. Facultad de Biologa. Universidad de Barcelona.CONANP, 2011. Estudio para monitorear los parmetros de calidad de agua de las lagunas comunicadas con el sistema lagunar Tepancoapan. Chiapas, Mxico.

INSTITUTO ECUATORIANO DE NORMALIZACION, 2006. Determinacin de la Cantidad de Microorganismos Aerobios Mesfilos. Quito, Ecuador.GRANADOS y VILLAVERDE, 2003. Microbiologa: Tomo II. Madrid, Espaa.LECHEVALLIER y SEIDLER, 1980: Staphylococcus aguas de consumo rural. Microbiologa ambiental.MINAM, 2008. D.S-002- Estndares de Calidad Ambiental para Aguas.SERNANP, 2012. Plan Maestro Parque Nacional Tingo Mara.

WAFAA y AMANI, 2011. Journal of American Science. Detection of Salmonella and Vibrio species in some seafood in Alexandria.

Atentamente.

Yilssa Helen Tamani AguirreGUARDAPARQUE VOLUNTARIO DEL PNTM