caracterizaciÓn, evaluaciÓn y producciÓn de … · producciÓn de material ... el mango, la mora...

84
CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE MATERIAL LIMPIO DE MORA CON ALTO VALOR AGREGADO COMPILACIÓN DE ARTÍCULOS TÉCNICOS COMPILADORA Y EDITORA TÉCNICA LUZ STELLA BARRERO MENESES * * Investigadora Ph.D. Asociada. Laboratorio de Genética Molecular Vegetal. Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB). Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (CORPOICA), Km. 14 vía Mosquera - Cundinamarca. E-mail: [email protected]

Upload: doandang

Post on 28-Oct-2018

217 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE MATERIAL LIMPIO DE

MORA CON ALTO VALOR AGREGADO

COMPILACIÓN DE ARTÍCULOS TÉCNICOS

COMPILADORA Y EDITORA TÉCNICALuz SteLLa Barrero MeneSeS*

* Investigadora Ph.D. Asociada. Laboratorio de Genética Molecular Vegetal. Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB). Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (CORPOICA), Km. 14 vía Mosquera - Cundinamarca. E-mail: [email protected]

Page 2: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

AGRADECIMIENTOS

© Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria, Corpoica C.I. Tibaitatá

ISBN: 978-958-740-003-8CA: PN20100046CUI: 276Primera edición: Junio de 2009 Tiraje: 245 ejemplares

Línea de atención al cliente: [email protected]

Producción editorial: Diagramación, impresión y encuadernación

www.produmedios.org

Diseño gráfico:

Impreso en ColombiaPrinted in Colombia

Barrero Meneses, Luz Stella. / Caracterización, evaluación y producción de material limpio de mora con alto valor agregado. Cundinamarca - Colombia. Corpoica. 2009. 84 p.

Palabras clave: RUBUS, MANEJO DEL CULTIVO, EVALUACIÓN NUTRICIONAL, ALIMENTOS, BIOFERTILIZANTES, TRICHODERMA, PROPAGACIÓN VEGETA-TIVA, COLOMBIA - CUNDINAMARCA - SILVANIA.

A los productores del sector Monterrico, municipio de Silvania (Cundinamarca), al equipo de auxiliares, a los estudiantes e investigadores del Proyecto 1144, a la Comercializadora

CI La Cosecha y al Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural, MADR.

Page 3: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

3CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

CONTENIDO

Caracterización, evaluación y producción de material limpio de mora con alto valor agregado

INTRODUCCIÓN ........................................................................................................................................ 5

CAPACITACIÓN SOBRE EL MANEJO DE UN LOTE EXPERIMENTAL PARA EL CULTIVO DE LA MORA EN SILVANIA (CUNDINAMARCA) ........................................................................................................ 9

IDENTIFICACION TAXONÓMICA DE LAS ESPECIES DEL GENERO Rubus PRESENTES EN LA COLECCIÓN COLOMBIANA DE MORA ......................................................................................................................25

EVALUACIÓN AGRONÓMICA, NUTRICIONAL Y SELECCIÓN PARTICIPATIVA DE MATERIALES DE MORA EN SILVANIA (CUNDINAMARCA) .........................................................................................34

BIOFERTILIZACIÓN EN EL CULTIVO DE LA MORA (Rubus glaucus Benth) .................................................................................................................................43

PROMOCIÓN DE CRECIMIENTO EN ENDURECIMIENTO DE PLÁNTULAS DE MORA PRODUCIDAS IN VITRO (EFECTO DE LA APLICACIÓN DE richoderma koningiopsis Th003)............................................57

VALIDACIÓN Y ESCALAMIENTO DE PLÁNTULAS DE MORA IN VITRO Y MANEJO EX VITRO PARA ENTREGA A AGRICULTORES DE SILVANIA .......................................................................................64

NOTA TÉCNICA Evaluación social y económica ex ante y ex post .................................................................................76

Page 4: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados
Page 5: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

5CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

INTRODUCCIÓN

Luz Stella Barrero Meneses

Los resultados del estudio elaborado por la Asociación Hortofrutícola de Colombia, Aso-hofrucol, indican que el sector frutícola viene registrando la tasa de crecimiento anual más

alta dentro del ámbito agrícola del país. Dicho crecimiento general corresponde al 14.3% y se refleja en la ampliación de la frontera cultivable de productos como cítricos y piña, además de aquellos que poseen un alto potencial agroindustrial, especialmente los utilizados en la elabo-ración de jugos, entre los cuales se mencionan el lulo, el mango, la mora y la guayaba con un 12% (Asohofrucol, 2002).

Lobo (2006) plantea que el potencial aumento de productividad de la mora (Rubus glau-cus Benth) y otros frutales andinos en Colombia está determinado por varios factores como la existencia de una gran variabilidad en los Andes, área de diversidad primaria de estos frutales; la presencia de nichos ecológicos apropiados para su cultivo y su aceptación por parte de consumidores locales y de otras regiones del mundo. Existen, además, posibilidades agroindus-triales y para generar desarrollo económico a nivel de pequeños productores pues se ha visto la necesidad de aumentar el consumo de frutas en Latinoamérica, debido a su valor nutritivo y antioxidante. En este sentido, se ha descrito que las especies del género Rubus, se caracterizan por presentar un importante potencial nutracéutico, término utilizado para definir sustancias capaces no sólo de aportar nutrientes sino también de mejorar algunos aspectos medicinales (Cotes et al., 2006, Clark et al., 2007).

Diferentes exploraciones acerca del cultivo de la mora en Colombia muestran que esta actividad es realizada por pequeños y medianos agricultores. En muchas regiones constituye una de las principales fuentes de ingresos; generación de empleo rural; oferta de alimento y de agroin-dustria. El área de siembra nacional se estima en 10,297 hectáreas, con una producción de 89,251 t/año y un rendimiento de 8,7 t/ha (Arias et al., 2006). Está localizada en los departamentos de Cundinamarca, Santander, Valle, Caldas, Antioquia, Huila, Tolima, Boyacá, Nariño y Norte de Santander, en su mayoría. Para el año 2020, se espera un aumento de 10,000 hectáreas nuevas y 104,265 toneladas de mora cosechada (Tafur et al., 2006).

De acuerdo con el Primer Censo Nacional de 10 Frutas Agroindustriales y Promisorias (Asohofrucol et al., 2004), Cundinamarca representa el principal departamento productor con el 41.3% del área nacional. Adicionalmente, la mora representa el primer frutal de importancia en este departamento en términos de área sembrada, cantidad de lotes (3488), cantidad de productores (2939) y cantidad de fincas productoras (3032). En el período 1992-2003, el área cultivada en Cundinamarca creció a una tasa anual promedio de 10,64%, mientras que la pro-ducción creció a una tasa del 14% anual. Por lo tanto, este departamento se ha convertido en una zona de alto potencial para la oferta de productos tecnológicos desarrollados en núcleos pilotos por la capacidad de producción y por los requerimientos de semillas limpias con alto valor agregado, lo que implicaría replicar el modelo tecnológico en otras zonas del país.

A pesar de la riqueza y del gran potencial de la mora, esta especie no ha adquirido el grado de importancia esperado, lo cual puede atribuirse a varias limitaciones dentro de las que se destaca, por un lado, la dependencia de un número reducido de variedades y la baja calidad genética del material de siembra. En Colombia se cultiva, en mayor medida, la Mora

Page 6: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

6 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

de Castilla, ampliamente adaptada que, sin embargo, presenta limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo contenido de grados Brix (Botero et al., 2002; Franco et al., 2000; Franco y Giraldo, 2002). La siembra de la especie en el país se hace, de preferencia, a partir de ma-teriales no identificados como élite; productores y viveros propagan los materiales regionales sin normas de calidad fisiológica y sanitaria; tampoco brindan seguridad de la identidad gené-tica del material (Santana, 2003).

Por otro lado, la multiplicación tradicional de semilla (acodos principalmente), consti-tuye la forma más considerable de transmisión de plagas y enfermedades. Los sistemas actuales de producción de mora tienen limitaciones fitosanitarias que afectan las diferentes partes de las plantas (Botero et al., 2002). Dentro de éstas se encuentra el moho gris producido por el hongo Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados reproductivos de la planta y, en algunos casos, permanece latente hasta cuando el fruto se encuentra maduro, momento en el cual se desarrolla la enfermedad en forma agresiva, produciendo la pérdida completa del fruto en corto tiempo (Dashwood y Fox, 1988). El control de esta enfermedad se efectúa mediante el uso de fungicidas como el Captan, Vinclozolin, Benomyl y Clorotalonil, los cuales, debido a su modo de acción (inhibición de la síntesis de ergosterol e inhibición del crecimiento micelial y de la germinación), ocasionan el desarrollo de resistencia por parte del hongo, lo cual hace ineficientes sus aplicaciones.

Estas limitaciones, aunadas a la necesidad, cada vez más creciente de producir materiales con calidades nutricionales y nutracéuticas, hacen necesario tomar acciones que conlleven a la evaluación y selección de materiales con alto valor agregado en esquemas de producción limpia.

En el contexto anterior, el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR) financió el proyecto denominado: “Certificación y escalamiento de material de mora con potencial nutri-tivo y nutracéutico para entrega a pequeños agricultores”, que hace parte del convenio 028 del 2005, código 1144, realizado con el fin de contribuir al fortalecimiento de la cadena de la mora por medio del desarrollo tecnológico integrado involucrando expertos de diferentes disciplinas del conocimiento y comunidades de agricultores que derivan su sustento del cultivo.

Se trabajó en la caracterización y evaluación de materiales cultivados (poblaciones de la colección nacional manejada por la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (CORPOICA) y materiales de productores de diferentes regiones del país), desde el ámbito morfológico, agronómico, molecular, nutricional y potencial nutracéutico. Se identificaron ma-teriales promisorios de manera participativa con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) en un lote experimental establecido en la zona. El material seleccionado se utilizó para el desarrollo de esquemas de producción limpia de semilla que involucró el uso de biocontroladores y biofertilizantes con el fin de mejorar su establecimiento y reducir los problemas fitosanitarios originados durante la propagación. El material fue escalado mediante multiplicación masiva in vitro y fueron entregadas a los agricultores para la siembra en sus te-rrenos ∼23,000 plántulas ex vitro. De esta forma, los agricultores han tenido la oportunidad de vincularse a sistemas de innovación tecnológica.

Adicionalmente, el mismo proyecto ha generado la publicación de un artículo científico relacionado con el componente de biofertilizantes (Roveda et al., 2007) y se está preparando, por lo menos, una publicación científica relacionada con el componente molecular y nutracéutico.

Como resultado del Proyecto 1144, considerado como una primera fase y para efectos de ejecutar la segunda fase, el MADR ha aprobado la financiación de los componentes de pro-ducción de semilla limpia mediante proyectos como el “Desarrollo de una estrategia de control biológico de Botrytis cinerea en mora en campo” y la “Producción in vitro de mora de Castilla en biorreactores de inmersión temporal como alternativa para la producción de semilla de calidad

Page 7: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

7CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

fitosanitaria y de bajo costo”, con el mismo grupo de agricultores y utilizando como punto de partida los seis materiales de mora y los biocontroladores seleccionados en el proyecto 1144.

Otra propuesta, aprobada con financiación pendiente de la última convocatoria del MADR 2008, considera el componente de evaluación molecular, agronómica, nutracéutica y agroindustrial de los seis materiales promisorios con testigos comerciales a través del tiempo en Monterrico y en nue-vos nichos productivos. Con lo anterior se busca responder a una demanda por parte de los agriculto-res, quienes, como resultado del conocimiento adquirido en cumplimiento del proyecto 1144, esperan producir material certificado de buena calidad en sus fincas. De esta forma, se pretende contribuir a la diversificación del cultivo y al incremento de hectáreas sembradas con materiales élite certificados para atender de manera adecuada las nuevas áreas proyectadas, de acuerdo a la apuesta exportadora agropecuaria MADR 2006 – 2020 (Arias et al., 2006).

En esta edición se compilan seis artículos técnicos y una nota ídem, que reúnen resulta-dos de diferentes componentes del Proyecto 1144, relacionados con las prácticas de manejo de los materiales introducidos en un lote seleccionado en el sector Monterrico y el programa de capacitación impartido a los agricultores de la zona; la identificación taxonómica de las especies del genero Rubus de la colección manejada por CORPOICA, con futuros propósitos de mejora-miento de la mora; la evaluación agronómica, nutricional y selección participativa de materiales sobresalientes en el lote; los efectos de la aplicación de biofertilizantes y biocontroladores en plántulas seleccionadas en endurecimiento; el establecimiento y producción masiva in vitro del material seleccionado entregado a los agricultores; y, además, la evaluación social y económica realizada al inicio y al final del proyecto.

En la compilación se evidencia el trabajo multidisciplinario del equipo que conformó el proyecto, el cual reunió expertos de diferentes disciplinas y productores de la región para trabajar en forma mancomunada, a fin de contribuir al desarrollo y a la competitividad del cultivo en la zona y en otras regiones del país, en el futuro. El propósito es que esta com-pilación alcance un público amplio no sólo de técnicos, estudiantes e investigadores, sino también diferentes actores de la cadena (productores, comercializadores, agroindustriales y consumidores).

Finalmente, es necesario agradecer al equipo multidisciplinario que conformó el proyec-to, el cual incluyó estudiantes, técnicos e investigadores de CORPOICA y también producto-res de Monterrico, sin quienes no hubiese sido posible realizar un proyecto participativo de tal magnitud. A CORPOICA y al MADR, entidades financiadora y co-financiadora, respectivamente. A la comercializadora C.I. Cosecha por suministrar el primer contacto con los agricultores de Monterrico y a todas aquellas personas dentro y fuera de CORPOICA que de una u otra forma contribuyeron a la realización del proyecto.

BIBLIOGRAFÍA

Asohofrucol. 2002. Frutas mejoran su productividad. En: Actualidad hortícola. Boletín infor-mativo de la Asociación Hortofrutícola de Colombia y del Fondo Nacional de Fomento Hortofrutícola. 2: 9.

Asohofrucol, Fondo Nacional de Fomento Hortofrutícola, Departamento Administrativo Nacional de Estadística, SISAC, Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. 2004. I Censo Nacional de 10 frutas agroindustriales y promisorias. 63 p.

Arias, C.L., Támara, L.V., Arbeláez, F. 2006. Apuesta exportadora agropecuaria 2006-2020. República de Colombia. Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. 119 p.

Page 8: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

8 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Botero, M.J., Ríos G., Franco G., Romero, M., Pérez J.C., Morales J.E., Gallego J.L., Echeverri, D.I. 2002. Identificación y espacialización de enfermedades asociadas a los cultivos de mora (Rubus glaucus Benth) en el eje cafetero. En: Memorias IV Seminario Frutales de Clima Frío Moderado. Medellín.

Clark J.R., Stafne E.T., Hall H.K., Finn C.E. 2007. Blackberry Breeding and Genetics. En: Plant Breeding Reviews. J. Janick (Ed.), John Wiley & Sons, Inc. 29: 19-144.

Cotes, A.M., Cristancho, E., García, M.X. 2006. ANTIOXIDANTES Oportunidades para la producción agropecuaria y agroindustrial. Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural, CORPOICA. Produmedios, Bogotá, Colombia. 43p.

Dashwood, E.P., Fox, R.A. 1988. Infection of flowers and fruits of red raspberry by Botrytis cinerea. Plant Pathology. 37: 423-430.

Franco, G., Gallego, J., Tamayo, A., Heredia, L., Medina, G. 2000. Fertilización de la mora de Castilla (Rubus glaucus Benth) en zonas frías del departamento de Caldas. En: Memorias del tercer seminario frutales de clima frío moderado. Centro de Desarrollo Tecnológico de Frutales C.D.T.F. Manizales. p. 81-87.

Franco, G., Giraldo, M. 2002. El Cultivo de la mora. Quinta edición corregida. Manual de asistencia técnica. CORPOICA, Federación Nacional de Cafeteros de Colombia, SENA, Comité Técnico Agropecuario de Risaralda, UMATA. Risaralda. 81p.

Lobo, M. 2006. Recursos genéticos y mejoramiento de frutales andinos: una visión concep-tual. Revista Corpoica – Ciencia y Tecnología Agropecuaria. 7: 40-54.

Roveda, G., Cabra, L., Ramírez, M., Peñaranda A. 2007. Efecto de las micorrizas arbusculares sobre la aclimatación y endurecimiento de microplántulas de mora (Rubus glaucus). Re-vista Corpoica – Ciencia y Tecnología Agropecuaria. 8: 41-49.

Santana, G. 2003. Establecimiento de parcelas experimentales de mora de castilla (Rubus glau-cus Benth) para evaluar la calidad y el rendimiento en Antioquia. Informe final convenio Corpoica, regional cuatro y municipios de La Ceja y Envigado. 60 p.

Tafur, R., Toro, J., Perfetti, J., Ruiz, D., Morales, J. 2006. Plan Frutícola Nacional (PFN). Min-isterio de Agricultura y Desarrollo Rural, Fondo Nacional de Fomento Hortofrutícola, Asohofrucol, SAG. 43 p.

Page 9: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

9CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

CAPACITACIÓN SOBRE EL MANEJO DE UN LOTE EXPERIMENTAL PARA EL CULTIVO DE LA MORA EN SILVANIA (CUNDINAMARCA)

Álvarez Zambrano Roberto1, Barrero Meneses Luz Stella2, Beltrán Acosta Camilo Rubén3, Cotes Prado Alba Marina3

RESUMEN

El presente trabajo describe el manejo del cultivo de la mora en un lote experimental vin-culado a un proceso de capacitación de agricultores en el sector Monterrico en Silvania

(Cundinamarca) con el fin de contribuir a su empoderamiento y a la vinculación de tecnolo-gías de innovación en sus cultivos. Inicialmente, se procedió a identificar participativamente áreas con potencial productivo orientadas por asociaciones dispuestas a interactuar con los investigadores. En el lote experimental se desarrollaron prácticas integrales de manejo de 35 accesiones de mora, dos de las cuales eran cultivadas en la región. Se relacionan los aspectos de la siembra, el manejo de estos materiales y el plan de capacitación, el cual hace parte del pro-yecto “Certificación y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracéutico para entrega a pequeños agricultores”. En el proceso participaron los socios productores de tres asociaciones, investigadores y técnicos de CORPOICA y otros técnicos especializados en temas de interés para la zona.

PaLaBraS cLave: Agricultores, accesiones, manejo del cultivo, capacitación, lote experimental.

INTRODUCCIÓN

El cultivo de la mora requiere para su óptimo desarrollo un clima entre 1.800 y 2.400 metros sobre el nivel del mar; una humedad relativa entre el 70 y el 80 %; temperaturas entre 11 y 18 grados centígrados y una precipitación entre 1.500 y 2.500 milímetros anuales (Erazo, 1983). Acepta suelos ácidos, pero profundos y exige nitrógeno, fósforo, potasio, calcio y magnesio para su buen desarrollo y producción. Los mejores suelos son los francos y ricos en materia orgánica (Escoto, 1994).

La densidad de siembra se determina de acuerdo al material, pendiente del terreno, fertilidad del suelo, sistemas de poda y tutorado. Así, para el material Sin Espinas se requieren distancias y tutorados más amplios. Otros materiales introducidos tienen comportamientos di-

1 Centro de Investigación (C.I.) Tibaitatá, CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.2 Laboratorio Genética Molecular Vegetal, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.3 Laboratorio de Control Biológico, CBB, CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.

Autor de correspondencia: Roberto Álvarez Zambrano, Ingeniero Agrónomo, pensionado de CORPOICA, e-mail: [email protected]

Page 10: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

10 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

ferentes por el clima, suelo, idiosincrasia y manejo de los productores, lo cual implica la amplia-ción o acortamiento de distancias y el manejo de infraestructura, según el caso. Generalmente, se utilizan distancias entre calles de 2 hasta 2.8 metros y entre plantas de 1.5 hasta 2.2 metros. Es necesario dejar lotes con calles amplias para manejo del cultivo (transporte de material, in-sumos, entre otros). Adicionalmente, las plantas a sembrar deben ser de origen conocido; una buena planta permite aprovechar sus mejores características de producción, sanidad, tamaño y calidad del fruto (Franco y Giraldo, 2000).

El hábito rastrero de la mora y el comportamiento estructural de las diferentes acce-siones exige el manejo de buenos tutorados. Algunos materiales aceptan el sistema de espaldera sencilla, pero otros exigen el sistema de chiquero con una mayor amplitud o el de espaldera en doble T. Lo anterior debe ir acompañado de podas constantes de formación, producción y fito-sanitarias. Si las podas no se efectúan constantemente y a tiempo, el incremento en jornales es mayor y se disparan las plagas y enfermedades, lo cual ocasiona altas pérdidas en la producción (Franco y Giraldo, 2000).

Otras labores importantes son la fertilización de acuerdo al análisis de suelo, la selección de arvenses o controles de las mismas en la época adecuada y los aporques para darle mayor anclaje a la planta (Franco et al., 2000). Las plagas y enfermedades están asociadas a las prácticas del cultivo y al clima reinante en la zona. La aplicación de productos químicos es complemento extremo a lo anterior (De La Rotta y Muñoz, 1993).

Pese a requerimientos ya establecidos, la mora se maneja en forma tradicional y con tan mínima adopción de los mismos que inciden en la ampliación de la brecha tecnológica. Estos as-pectos son: los altos costos de los insumos, incidencia de plagas y enfermedades, altas demandas de mano de obra, mala calidad de los materiales de propagación, dependencia de uno o pocos materiales, deficiente manejo del cultivo, desconocimiento de avances técnicos, escasa asistencia técnica, nula o escasa integración entre productores, desorganización de las comunidades y vías en mal estado, entre otros.

En Colombia, la extensión rural ha evolucionado del método de asistencia y capacitación individual finca a finca, hacia la transferencia a través de eventos relevantes. Así se erige la par-cela demostrativa y en otros casos, las fincas demostrativas como escenarios claves para realizar transferencia de tecnología y capacitación más integrales, con la ventaja adicional de cumplir un papel importante en materia de desarrollo experimental (Aranzazu, 2000).

En el presente trabajo se seleccionó un lote en el sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) con el fin de realizar investigación participativa y demostración de mane-jo del cultivo con comunidades de productores de la zona, quienes fueron capacitados y sensibilizados en el uso de tecnologías para la producción limpia de semilla con alto valor agregado como parte del proyecto “Certificación y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracéutico para entrega a pequeños agricultores”, relacionado en la introducción de esta compilación. Su participación en el proyecto fue decisiva, desde el mismo inicio, en la selección del lote y del material comercial para evaluación; en el establecimiento y mantenimiento de materiales; en la evaluación e identificación de los mejores (ver artículo de Espinosa et al. de esta compilación); y, además, en su manejo ex vitro (ver artículo de Valderrama et al. de esta compilación). A continuación se describe el montaje y manejo de materiales en el lote experimental, lo cual fue acompañado de un plan de capacitación para llevar a cabo procesos participativos de evaluación, selección y producción limpia.

Page 11: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

11CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

MATERIALES Y MÉTODOS

Material vegetal

Se seleccionaron 21 poblaciones cultivadas del banco de germoplasma manejado por el Centro de Investigaciones (C.I.) La Selva de CORPOICA y 14 materiales de agricultores de diferentes regiones del país (Cundinamarca, Antioquia, Valle del Cauca y Huila) (Tabla 1).

Siembra y manejo de materiales

Los materiales fueron dispuestos en un lote seleccionado en Monterrico. Una réplica de los mis-mos es mantenida en el centro de investigaciones C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia. El manejo de cultivo se llevó a cabo de acuerdo con Franco y Giraldo (2000; 2002) con modificaciones que se describen en los resultados.

Determinación de problemas fitopatológicos

A partir de plantas y material de propagación de cultivos de mora provenientes de Monterrico, se tomaron muestras de tallos y frutos, sanos y con síntomas de antracnosis y moho gris.

El material seleccionado se desinfectó mediante un lavado en alcohol al 70% durante 3 minutos. Posteriormente se realizó un lavado en Hipoclorito de Sodio al 0.2% durante 3 minutos y dos enjuagues consecutivos con agua destilada estéril durante 4 minutos cada uno. Este material se secó en cabina de flujo laminar y se dejó en cámara húmeda, de una a dos semanas, para de-terminar la incidencia de agentes patógenos. Posteriormente, se tomó micelio que se desarrolló sobre los frutos y tallos, el cual se sembró en Agar Papa Dextrosa (PDA) para aislar e identificar dichos agentes de forma macro y microscópica. Se describieron algunas características del daño causado por los elementos patógenos mencionados y se hicieron recomendaciones generales para el control de estas enfermedades en campo.

Sensibilización y capacitación de agricultores

Se realizaron eventos a modo de talleres, días de campo, visitas a los laboratorios y demostracio-nes de método y resultado a productores de la zona, quienes actualmente conforman tres aso-ciaciones: Moricultores Monterrico SAT (7 familias), Asociación de Productores Agropecuarios Campesinos Forjadores de Paz (18 familias), y Asociación Agropecuaria de Mujeres de Monterri-co, ASOAGROM (17 familias). Los miembros de las asociaciones fueron capacitados desde la se-lección del lote (año 2006), la preparación del mismo, la siembra y mantenimiento de materiales, la evaluación e identificación de los mejores, hasta el manejo ex vitro de plántulas de los materiales seleccionados.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

A continuación se describen las actividades que se llevaron a cabo con los agricultores de Mon-terrico para la siembra y manejo de materiales y el programa de capacitación impartido. La eva-luación, selección y entrega de materiales se describen en Espinosa et al. y Valderrama et al. de esta compilación.

Page 12: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

12 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Selección del lote

Con la participación de los productores, se seleccionó un lote ubicado en el municipio de Silvania, vereda Agua Bonita, sector Monterrico, finca El Arenal, coordenadas 4°27´24” N 74°19´26” O, de propiedad del agricultor Gerardo Solórzano, con una altura sobre el nivel del mar de 2,485, precipitación mayor a 2,000 milímetros y luminosidad menor de cuatro horas diarias.

Como criterios de selección se tuvieron en cuenta los antecedentes del terreno (con-taminación por químicos, aplicaciones de estiércoles no compostados, erosión, posibilidades de inundación, focos de plagas, compactación); topografía ligeramente ondulada y profundidad del suelo entre 0.70 a 0.90 centímetros (óptima para el desarrollo de las raíces). Así mismo, la es-tructura de vías se encontraba en regular estado lo cual disminuía la posibilidad para transportar el producto e insumos y se carecía de agua para riego, lo cual hizo necesaria la instalación de un sistema de almacenamiento de agua en el lote seleccionado.

Preparación del terreno

Las labores manuales de preparación estuvieron sujetas a las condiciones del terreno y equipos o maqui-naria disponibles en la zona. La presencia de pasto kikuyo en el terreno exigió la aplicación de matamale-zas. Posteriormente, se realizó el arado y rastrillado. Los productores participaron en la toma de muestra de suelo para su respectivo análisis en el Laboratorio de Suelos de CORPOICA, C.I. Tibaitatá.

Trazado y ahoyado

Para el trazado se utilizó el sistema de tres bolillos a distancias de 2.20 x 2.5 metros y en el sitio se hicieron hoyos de 0.40 x 0.40 metros. De acuerdo con el análisis de suelos, se aplicó un kilo de materia orgánica y 300 gramos de cal dolomita (Figura 1A).

Densidad de siembra

De acuerdo con las recomendaciones (Franco y Giraldo, 2000), las distancias de siembra utili-zadas en el lote fueron de 2.5 metros entre calles y 2.20 entre plantas con una calle amplia para manejo del cultivo. Se sembraron 35 accesiones en 35 surcos, cada surco con 5-10 plantas por accesión (dependiendo de la disponibilidad de la fuente, Tabla 1), para un total de 240 plantas en un lote de 3,500 metros cuadrados.

Material de siembra

Previamente a la siembra en el lote seleccionado, los materiales a introducir habían sido multipli-cados desde la fuente (C.I. La Selva de CORPOICA en Rionegro, Cundinamarca, Caldas, Huila y Antioquia) por los sistemas de acodo, yema, o semilla (Tabla 1). Las plantas fueron colocadas en bolsas grandes (12 x 22 centímetros) y sometidas a control de fitopatógenos como Colletotrichum y Botrytis con el uso de Control 500 rotado con Benlate. Las plantas se nutrieron con aplicaciones constantes de fertilizantes foliares como Tottal y edáficos como 15-15-15.

Siembra

Pasado un mes del ahoyado, se procedió a sembrar las plantas embolsadas que presentaban buen desarrollo en los sitios previamente enmarcados. Las plantas se retiraron de las bol-

Page 13: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

13CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

sas; se sembraron en un sustrato enriquecido con anterioridad permitiendo que el cuello sobresaliera unos 4 centímetros; se ajustó el suelo alrededor y se regó con suficiente agua cada planta.

La mayoría de materiales fueron sembrados en mayo de 2006 (33 accesiones). En junio de 2006, se sembraron Morón y Mora Dulce. La accesión Ranchona no se adaptó.

Manejo de arvenses

El lote seleccionado para la siembra se trató previamente con el herbicida Roundup ya que la planta en su estado inicial de crecimiento sufre los efectos de competencia de malezas por agua, luz y nutrientes (Figura 1 B). Se mantuvo limpio el plato de la planta para que ésta emitiera brotes, especialmente en los primeros nueve meses. Las calles se trabajaron con guadaña, evitando cortar las malezas a ras de suelo, con el objeto de mantener una cobertu-ra para controlar la erosión y mantener arvenses que no compiten con el cultivo y aportan nutrientes, comúnmente conocidos como la siempreviva o suelda, añiles, pega pega, maní forrajero, tréboles, entre otras.

Fertilización

La fertilización se hizo de acuerdo con las recomendaciones del análisis de suelos y se ajustó de acuerdo a diferentes pruebas realizadas por Franco et al. (2000) en varias regiones del país, lo cual indica que la mora da respuesta positiva a la aplicación de altas dosis de nitrógeno (cinco bultos de úrea por hectárea), potasio (cuatro bultos de cloruro de potasio por hectárea), fósforo (cuatro bultos de fosforita Huila por hectárea) y a la aplicación semestral de 40 gramos de elementos me-nores por planta. Se recomendó que dos meses después de la siembra, con una buena humedad del suelo, se aplicara 10-30-10 o 15-15-15 y Agrimins, en dosis de 80 y 40 gramos, respectivamen-te, e incrementar las dosis cada tres meses (Figura 1 C).

En caso de aplicar componentes orgánicos, se recomendaron los de tipo biológico (bio-fertilizantes como el súper 4) y compost orgánicos (como el Bokashi). En Roveda et al. (2007) y Roveda et al. de esta compilación, se relaciona la aplicación de biofertilizantes promisorios en mora con alto potencial para su futuro uso en el cultivo.

Poda

La poda es la principal labor cultural que se debe hacer a la mora. Una poda constante implica un ahorro de productos para el control de enfermedades, facilidad en la recolección, mayor duración del cultivo y alta producción (Franco et al., 1997). De acuerdo con lo recomendado, se llevaron a cabo tres tipos de poda:

Poda de formación: A los 45 ó 60 días de sembrados los materiales de mora se selec-cionaron seis tallos que venían debajo del suelo (Figura 1D). Se escogieron dos ramas tipo macho (el terminal o punta que tiene las hojas cerradas y crece verticalmente) con el fin de regular la producción (ya que las ramas secundarias de los machos son las que producen todo el año, mientras que las ramas hembras dan los picos de cosecha), lo cual permite que siempre haya fruta para cosechar (Franco et al., 1997). Inmediata-mente, se cortó el tallo que tenía la planta al momento de la siembra. De esta forma quedaron seis tallos que venían de la cepa ya conformada; se eliminaron las ramas látigo

Page 14: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

14 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

(rastreras, delgadas con hojas pequeñas) y se entresacaron hojas de los primeros 30 centímetros de los tallos.

Poda de producción: Las ramas hembra (el terminal que tiene las hojas abiertas) se dejaron crecer libremente. Sin embargo, en el caso de ramas hembra y macho que sobrepasaban la segunda cuerda del tutor, se cortaron a 15 centímetros por encima del segundo alambre del sistema de tutorado empleado (espaldera compuesta en doble T). Las ramas secunda-rias se podaron en forma escalonada, de arriba hacia abajo (la rama de arriba, dejando dos yemas y la rama que le sigue hacia abajo dejando tres yemas y así sucesivamente, para bus-car una buena entrada del sol y una mayor aireación). Esta poda permite la programación de cosechas (Franco et al., 1997).

Poda sanitaria: Se cortaron constantemente desde la cepa, los tallos y ramas que ya habían producido, se eliminaron látigos y ramas secas, al igual que ramas secundarias con frutos afectados por enfermedades. El material producto de la poda se retiró del lote.

Tutorado

Debido a que el hábito de crecimiento de las 35 accesiones podía variar en la nueva zona de adaptación, fue necesario orientar su crecimiento con la utilización de tutores que favorecieran la aireación y permitieran ejecutar las labores de mantenimiento del cultivo (fumigaciones, manejo de arvenses, cosecha, entre otros) (Figura 1E).

Chiquero

Este método es muy común en pequeños cultivos y demanda mucha madera. Aunque no fue utilizado en Monterrico, se recomienda para el manejo de la mora en zonas de alta precipita-ción. Normalmente se utiliza la forma cuadrada y se colocan cuatro postes equidistantes a un metro de la planta, dependiendo del material y a una altura de 1.4 metros. Posteriormente, se ubican travesaños, de tal forma que la planta quede en el centro desde donde, posteriormente, se dirigen los tallos hacia las varas para apoyarlos. Los tallos se distribuyen de manera equidis-tante (Franco et al., 1997).

Espaldera compuesta en doble T

Se colocaron postes de 2 metros sobre el surco, cada 3-4 plantas. En cada poste se ubicó un pri-mer travesaño de longitud de 60 centímetros a los 60-80 centímetros del suelo. A este travesaño se le colocó en sus extremos alambre de bajo calibre o terlenka. A 1.5 metros del suelo se ubicó un segundo travesaño de 0.80 metros de largo, el cual llevaba alambre más grueso, calibre 14. Las ramas se distribuyeron de tal forma que existiera buen espacio entre ellas.

Riego

Las plantas se ubicaron en suelos bien drenados, a fin de evitar el daño que sufren cuando el suelo se encharca. Aunque los métodos de riego más convenientes para el cultivo de la mora son el goteo, micro aspersión y riego corrido (Franco y Giraldo, 2000); para el caso del lote en Monte-rrico, no hubo necesidad de riego por las constantes precipitaciones.

Page 15: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

15CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Aporque

El aporque implica un mejoramiento en el anclaje de las plantas. Este se hizo con azadón una vez transcurrió la poda de formación y no fue muy alto (5 centímetros), con el fin de facilitar la salida de ramas nuevas (Figura 1F). Posteriormente, se realizaron aporques más altos, de 20 centíme-tros, y se recomendó hacerlos repetidamente cada seis meses.

Cultivos intercalados

En las calles, o antes de instalar la mora, se recomendó sembrar maíz, posteriormente fríjol arbus-tivo u otras especies de pancoger, cuyo desarrollo no afectara el cultivo de la mora. El fríjol, por ejemplo, le proporciona nitrógeno al suelo, lo cual beneficia el cultivo de mora.

Plagas

A continuación se describen las plagas de mayor presencia en el lote del sector Monterrico, las cuales no son de alta importancia para la economía:

Áfidos o pulgones (Aphis spp.). Esta plaga chupa savia de retoños y hojas nuevas, las cuales se deforman; también transmite enfermedades causadas por virus (Castaño, 1997; Figura 2 A).

Trips (Frankliniella spp.). Como los áfidos, los trips atacan en verano; se localizan en las partes más jóvenes de la planta donde chupan la savia de los retoños, de los brotes terminales y de las hojas jóvenes. Los tallos y frutos se pueden ver afectados cuando se presenta un ataque severo, el cual frena el crecimiento y provoca momificación en los frutos (Castaño, 1997; Botero, 2007; Figura 2B).

Cucarrón del follaje (Diabrotica spp.). Perforan las hojas de diferentes tamaños y ocasionan su caída. Su manejo consiste en hacer una buena fertilización, controlar selectivamente la malezas y regar por aspersión (Castaño, 1997).

Enfermedades

Se encontró que el material de propagación que usan los agricultores (estacas y acodos) es to-mado de plantas de los mismos cultivos, sin tener en cuenta sus condiciones sanitarias ya que, con frecuencia, este material está infectado con Colletotrichum spp. Igualmente, los agricultores compran el material de propagación (estacas, acodos y plántulas a partir de semillas) en viveros no certificados. Con frecuencia, este material no cumple criterios fitosanitarios y tiene un pobre establecimiento en el cultivo lo cual provoca pérdidas económicas importantes.

Al analizar el material de mora colectado en Monterrico, se determinó que las principales enfermedades causadas por hongos que limitan y afectan la fase de producción y poscosecha, y además, reducen la cantidad y calidad del fruto cosechado son el moho gris producido por B. cine-rea (Figura 2 C-D) y la antracnosis producida por Colletotrichum spp. (Figura 2 E-F). Estos agentes patógenos se encontraron en el material de propagación (estacas, acodos, semilla), tanto el colec-tado en campo, como el adquirido en vivero. Igualmente, se observó la presencia recurrente de mildeo velloso (Peronospora spp.) (Figura 2G), visto en tallos (recolectados) y hojas (en campo), los cuales afectan el desarrollo de los frutos en diferentes grados. A continuación se describen las enfermedades producidas por estos agentes.

Page 16: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

16 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Pudrición del fruto o moho gris (Botrytis cinerea). Esta enfermedad, producida por el hon-go B. cinerea, se constituye en una de las más limitantes en el cultivo de la mora de Castilla (De La Rotta y Muñoz, 1993). Es favorecida por la alta humedad, por lo tanto, se presenta especialmente en épocas de lluvia (Franco y Giraldo, 2000). Ataca en forma agresiva, flores y frutos en formación y en desarrollo, lo cual ocasiona pérdidas en campo. Afecta los frutos maduros ya recolectados, es decir, la poscosecha (Botero, 2007). El hongo produce quema-zón en las flores en campo o permanece latente dentro de sus estructuras y se desarrolla posteriormente en los frutos. Los frutos inmaduros se vuelven negros y los frutos en proceso de maduración, se pudren.

Los efectos de esta enfermedad pueden ser disminuidos con la realización de las siguien-tes prácticas:

Siembra con distancias que permitan aireación de las plantas y fácil realización de las • podas de formación, podas sanitarias y cosecha de los frutos.Eficiente control de malezas.• Podas sanitarias y de mantenimiento que permitan que el cultivo tenga una buena airea-• ción y entrada de luz.Adecuada y oportuna fertilización.• Buen drenaje del suelo.• Retiro del material infectado.• Aislamiento de los frutos afectados, de otros frutos o del suelo.• Recolección de frutos en su punto óptimo de madurez y comercialización.• Control químico recomendado por un asesor técnico.• Control biológico con • Trichoderma spp. en etapas tempranas del cultivo.

Antracnosis o palo negro (Colletotrichum spp.). También conocida como palo azul (estado inicial de la enfermedad) o palo negro (estado maduro y final de la enfermedad). Es causada por el hongo Colletotrichum gloeosporioides ó C. acutatum, el cual fue aislado de tallos sinto-máticos. Es una enfermedad persistente en los cultivos de mora que afecta las plántulas en vivero, en el establecimiento en cultivo y durante todo su ciclo de producción. La humedad relativa alta y las lluvias frecuentes estimulan su desarrollo. Puede atacar los brotes tiernos y los botones florales, momifica los frutos, ocasiona manchas violeta oscuras y negras en ramas y tallos; produce el secamiento y la muerte de la rama. En las hojas se presentan manchas pardas rodeadas de un aro púrpura (Franco y Giraldo, 2000; Forero de La Rotta, 2001). Esta enfermedad ocasiona la muerte progresiva de ramas y brotes y en un estado avanzado, la muerte de la planta.

Para el control de esta enfermedad se recomienda la realización de las siguientes prácticas:

Siembra con distancias que permitan aireación de las plantas y fácil realización de las • labores de podas de formación, podas sanitarias y cosecha de los frutos.Podas que eliminen los tallos afectados y faciliten la entrada de aire.• Retiro de residuos de las podas del cultivo para quemarlos o enterrarlos.• Mantenimiento del cultivo y el plateo libres de malezas.• Fertilización oportuna.•

Page 17: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

17CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Buen drenaje del cultivo.• Control químico con fungicidas cúpricos recomendados por un asesor técnico. Para su • utilización es necesario confirmar la especie que ataca el cultivo, ya que el comporta-miento y susceptibilidad de cada especie es diferente, ante los fungicidas usados.

Mildeo velloso (Peronospora spp.). Esta enfermedad se ve favorecida por condiciones de alta humedad, temperaturas frías y lluvias constantes. Puede atacar hojas, tallos, pedúnculos y fru-tos. Las plantas afectadas presentan el hongo en el envés de las hojas y en los tallos en forma de pequeñas áreas grisáceas. En los tallos produce coloraciones blancas y cuarteamiento; los pedúnculos presentan lesiones irregulares de color blanco que se secan; las hojas y pecíolos adquieren un color violeta. Las flores presentan un amarillamiento que causa la pérdida pre-matura de los pétalos y los frutos desarrollados se deforman, pierden color y maduran en forma desigual; los no maduros se pasman y detienen su crecimiento (Franco y Giraldo, 2000; Forero de La Rotta, 2001).

Para su manejo se recomiendan las siguientes labores:

Control de malezas • Fertilización oportuna• Prácticas de poda para mejorar la aireación y la entrada de luz al cultivo• Retiro del cultivo los residuos de las podas, para luego ser quemados.• Buen drenaje del cultivo•

Debido a las altas precipitaciones, el sector de Monterrico es muy susceptible a estas enfer-medades. Fue necesario llevar a cabo un plan de control, manejo y recomendaciones con los agricul-tores. Para el manejo de plagas, se recomendó realizar a tiempo las labores agronómicas: mantener controladas las malezas, fertilizar, regar y, en caso extremo, aplicar insecticida. Para el control de enfermedades, se instruyó y entregó un paquete de recomendaciones con productos como Benlate, Bravo 720, Control 500, Derosal, Brestanid 500, Antracol, Kocide, Ridomil, Rovral y Mertec, en diferentes combinaciones y proporciones, según el caso. Adicionalmente, se instruyó sobre la nece-sidad de llevar a cabo un manejo integrado del cultivo con el objeto de reducir el impacto sobre el ambiente e incrementar la producción y la rentabilidad del mismo mediante la siembra de material de alta calidad genética y fitosanitaria, manejo de distancias de siembra, fertilización, desyerbas, po-das, cosechas oportunas, destrucción de residuos y control biológico, entre otros.

Eventos de capacitación con agricultores

En Febrero de 2006, se inició la socialización del proyecto con 21 productores, un miembro (el gerente en su momento) de la comercializadora C.I. La Cosecha y ocho ejecutores. En esta re-unión se identificaron las responsabilidades de cada miembro en el proyecto y sus compromisos, dentro de cada componente del mismo.

Después de esto, se llevaron a cabo eventos de seguimiento y capacitación que incluían aspectos como el manejo del cultivo en el lote experimental; la evaluación y selección parti-cipativa de materiales en el lote (ver también artículo de Espinosa et al., en esta compilación); la producción limpia de la mora mediante el uso de biofertilizantes y biocontroladores (ver artículos de Roveda et al., Beltrán y Cotes, en esta compilación); la producción limpia (in vitro) de materiales promisorios y su entrega y manejo ex vitro (ver artículo de Valderrama et al., en esta compilación).

Page 18: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

18 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Estos eventos se llevaron a cabo a manera de talleres, días de campo, visitas a los labora-torios, y, además, demostraciones de método y resultado, los cuales contaron con la participación de agricultores, personal científico y técnico y en algunos casos comercializadores e interventoría del Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR) (Tabla 2, Figura 3). Adicionalmente, se realizaron visitas continuas al sector Monterrico, en promedio, una vez cada 15 días durante los tres años del proyecto, con visitas más frecuentes en épocas de siembra, cosecha y entrega de materiales ex vitro.

CONCLUSIONES

Se seleccionó participativamente con agricultores del sector Monterrico, Silvania, un lote • experimental en el cual se sembraron 35 materiales de mora (dos cultivados por los agricul-tores de la región). En el proceso participaron los socios productores de tres asociaciones, investigadores y técnicos de CORPOICA y otros técnicos especializados en temas de interés para la zona. Los agricultores fueron capacitados en el manejo del cultivo en el lote desde la preparación • del terreno para la siembra, el trazado y ahoyado, la densidad y el material de siembra, la siembra, el manejo de arvenses, la fertilización, la poda, el tutorado, el riego y el manejo de plagas y enfermedades. Se realizaron eventos y visitas frecuentes para impartir el plan de capacitación de manejo del • cultivo en el lote y para llevar a cabo investigación participativa relacionada con la evaluación y selección de los mejores materiales en las condiciones de experimentación y con la produc-ción y entrega de semilla limpia.

AGRADECIMIENTOS

A las asociaciones de productores del sector Monterrico y especialmente a Alberto Vanegas, Nubia Garzón, Miguel Babativa, Genoveva Forero y Octaviano Villalobos, quienes con su apoyo permitieron el desarrollo del proyecto. A Carlos Parrado, por su continuo apoyo en labores de campo y seguimiento con los agricultores. A Yaneth Camargo, por su excelente apoyo en el se-guimiento logístico y administrativo.

BIBLIOGRAFÍA

Aranzazu, H. F. 2000. Parcelas en coautoría. En: Tercer seminario frutales. Manizales. 2p.Botero, J. D. 2007. Asesoría técnica para el mantenimiento y certificación de cultivos de

mora de Castilla en el municipio de La Unión (Antioquia), haciendo énfasis en el uso de buenas prácticas agrícolas. Trabajo de grado (Ingeniería Agropecuaria). Politécnico Co-lombiano Jaime Isaza Cadavid. Facultad de Ciencias Agrarias. Medellín. 98 p.

Castaño, P. O. 1997. Módulo sobre Las plagas del cultivo de mora y su manejo. En: Memorias tercer seminario de frutales de clima frío moderado. Centro de Desarrollo Tecnológico de Frutales C.D.T.F. Manizales. p. 112-118.

De La Rotta, M. C., Muñoz, V. 1993. Enfermedades y manejo en frutales de clima frío mode-rado. Agrodesarrollo. Tunja. 4: 220-230.

Erazo, S. B. 1983. El cultivo de la mora en Colombia. En: Memorias curso nacional de frutales Raúl Salazar. Instituto Colombiano Agropecuario ICA. p. 31-38.

Escoto, M. A. 1994. El cultivo de la mora. Editorial Tecnológica de Costa Rica. Costa Rica. 80 p.

Page 19: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

19CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Forero de La Rotta, M.C. 2001. Enfermedades de la mora de Castilla. Instituto Colombiano Agropecuario ICA. Produmedios. Bogotá. p. 6-23.

Franco, G., Giraldo, C. M. J., Gallego, D. J. L., Rodríguez, O. J., Guevara, N. N. 1997. Módulo sobre la poda en el cultivo de la mora. Pronatta, CORPOICA. Manizales. 4 p.

Franco, G., Giraldo, M. J. 2000. El cultivo de la mora. Corporación Colombiana de Investiga-ción agropecuaria CORPOICA. Tercera edición. Manizales. 75 p.

Franco, G., Gallego, J., Tamayo, A., Heredia, L., Medina, G. 2000. Fertilización de la mora de Castilla (Rubus glaucus Benth) en zonas frías del departamento de Caldas. En: Memorias del tercer seminario frutales de clima frío moderado. Centro de Desarrollo Tecnológico de Frutales C.D.T.F. Manizales. p. 81-87.

Franco, G., Giraldo, M. 2002. El cultivo de la mora. Quinta edición corregida. Manual de asistencia técnica. CORPOICA, Federación Nacional de Cafeteros de Colombia, SENA, Comité Técnico Agropecuario de Risaralda, UMATA. Risaralda. 81p.

Roveda, G., Cabra, L., Ramírez, M., Peñaranda A. 2007. Efecto de las micorrizas arbusculares sobre la aclimatación y endurecimiento de microplántulas de mora (Rubus glaucus). Re-vista Corpoica – Ciencia y Tecnología Agropecuaria. 8: 41-49.

Page 20: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

20 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

TABLAS Y FIGURAS

Tabla 1. Materiales de mora introducidos en un lote del sector Monterrico.

Nombre del material Fuente (código ILSa) Región de origen

Tipo de multipli-cación

No. de plantas

sembradas

Sara 3 C.I. La Selva (ILS 2286) Salamina, Caldas Acodo 5Cerezos C.I. La Selva (ILS 2268) Manizales, Caldas Acodo 5Pacho 1 C.I. La Selva (ILS 2280) Manizales, Caldas Acodo 5Guática C.I. La Selva (ILS 2273) Guática , Caldas Acodo 5Sara 4 C.I. La Selva (ILS 2287) Salamina, Caldas Acodo 5Sara 2 C.I. La Selva (ILS 2285) Salamina, Caldas Acodo 5ILS 1863 C.I. La Selva (ILS 1863) La Cocha, Nariño Acodo 5Manzanares C.I. La Selva (ILS 2276) Manzanares, Caldas Acodo 5Guarne L.S. C.I. La Selva (ILS 2272) Guarne, Antioquia Acodo 5Sara 1 C.I. La Selva (ILS 2284) Salamina, Caldas Acodo 5Don Matías C.I. La Selva (ILS 2270) Don Matías, Antioquia Acodo 5El Retiro C.I. La Selva (ILS 2271) El Retiro, Antioquia Acodo 5Pantanillo C.I. La Selva (ILS 2281) Envigado, Antioquia Acodo 5La Ceja C.I. La Selva (ILS 2274) La Ceja, Antioquia Acodo 5Córdoba C.I. La Selva (ILS 2269) Córdoba, Quindío Acodo 5Villa María C.I. La Selva (ILS 2288) Villamaría, Caldas Acodo 5Pácora C.I. La Selva (ILS 2279) Pácora, Caldas Acodo 5Río Sucio C.I. La Selva (ILS 2282) Riosucio, Caldas Acodo 5Salamina C.I. La Selva (ILS 2283) Salamina, Caldas Acodo 5La Finca C.I. La Selva (ILS 2275) SD b Acodo 5Monteloro C.I. La Selva (ILS 2277) Tulúa, Valle Acodo 5Guarne Universidad de Antioquia Antioquia Semilla 10Francesa Universidad de Antioquia SD Acodo 10San Bernardo Vivero Los Arcángeles, Fusa San Bernardo, Cundinamarca Acodo 10

Sin Espinas Vivero Los Arcángeles, Fusa (ILS 3400) San Bernardo, Cundinamarca Acodo 10

Pasca Agricultor (ILS 2375) Pasca, Cundinamarca Acodo 10Hartona Agricultor Manizales, Caldas Acodo 10Castilla Maniz Agricultor (ILS 2365) Manizales, Caldas Acodo 10Ranchona Agricultor (ILS 2376) Manizales, Caldas Acodo 10Huila Agricultor (ILS 2370) Huila Acodo 7Castilla Monterrico Yema Agricultor Monterrico Monterrico, Silvania,

CundinamarcaYema 10

Castilla Monterrico Semilla Agricultor Monterrico (ILS2367) Monterrico, Silvania,

CundinamarcaSemilla 10

Castilla Fusa Agricultor Monterrico Fusa, Cundinamarca Semilla 10

Mora Dulce Agricultor Monterrico (ILS2372) Monterrico, Silvania, Cundinamarca

Semilla 6

Morón Agricultor Monterrico (ILS2378) Monterrico, Silvania, Cundinamarca

Yema 6

a ILS = Código de introducción de la colección C.I. La Selva. b SD = Sin dato.

Page 21: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

21CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Tabla 2. Eventos de capacitación y socialización del proyecto con agricultores de Monterrico, técnicos e investigadores.

Tema Fecha Asis- tentes

Socialización del proyecto y taller ex ante Febrero 7 y 22, 2006 30Manejo del cultivo de la mora Abril 25, 2006 19Buenas prácticas agrícolas para el cultivo de la mora Agosto 2, 2006 25Manejo adecuado de la poda y fisiología Septiembre 12, 2006 28Taller anual y gira a CORPOICA C.I. Tibaitatá Noviembre 30, Diciembre 1, 2006 43Riegos para el cultivo de la mora Abril 10, 2007 12Evaluación de materiales con productores Junio 8, 2007 31Manejo de suelos Agosto 17, 2007 10Evaluación de materiales con productores Agosto 28, 2007 6Manejo Integrado de plagas y enfermedades de mora Septiembre 18, 2007 22Manejo de plantas in vitro, biofertilizantes, evaluación y producción Diciembre 11, 2007 26Evaluación de materiales con productores Enero 22, 2008 15Manejo de vitroplántulas en invernadero Enero 31, 2008 8Montaje de vitroplántulas en pre-ensayo con productores Febrero 5, 2008 7Manejo de poda, control de enfermedades y fertilización de la mora Febrero 26, 2008 14Taller de socialización de resultados para selección de materiales de mora con productores Abril 1, 2008 20

Visita a lote con interventor del MADR, taller de mercado y pos-cosecha de la mora Mayo 20, 2008 25

Taller de manejo de la mora ex vitro con productores Julio 21 de 2008 12Jornada de trabajo para el embolsado de material de mora propagada in vitro Agosto 12 de 2008 8

Taller de capacitación sobre embolsado de material de mora propagado in vitro Agosto 21, 2008 6

Día de campo para entrega de 9,723 plántulas ex vitro Septiembre 3, 2008 12Manejo agronómico y vivero. Capacitación de manejo de la mora ex vitro con productores Octubre 7, 2008 12

Taller ex post de mora con productores Noviembre 11, 2008 21Día de campo para entrega de 3,300 plántulas ex vitro Noviembre 20, 2008 5Visita a fincas para seguimiento de material entregado Diciembre 4, 2008 8Visita a fincas para seguimiento de material entregado Diciembre 12, 2008 11Seguimiento y capacitación para manejo y siembra de plántulas de mora Enero 21, 2009 6

Día de campo para coordinación de entrega de plántulas de mora Febrero 13, 2009 5Día de campo para evaluación en condiciones de invernadero y seguimiento del cultivo Febrero 16, 2009 4

Día de campo para entrega de 5,000 plántulas de mora Febrero 18, 2009 3Día de campo para entrega de 5,000 plántulas de mora Febrero 25, 2009 3

Page 22: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

22 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Figura 1. Establecimiento y manejo del cultivo en lote de Monterrico. A. Trazado y ahoyado. B. Manejo de arvenses. C. Fertilización. D. Podas. E. Tutorado. F. Aporque.

A B

C D

E F

Page 23: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

23CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Figura 2. Plagas y enfermedades presentes en el lote de Monterrico. A. Áfidos. B. Trips. C y D. Fruto maduro con moho gris. E y F. Plantas a partir de semilla y estacas afectadas por antracnosis. G. Mildeo velloso en hoja.

A B

C D

E

F

G

Page 24: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

24 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Figura 3. Algunas fotografías de eventos de capacitación con los agricultores de Monterrico en las instalaciones de CORPOICA C.I. Tibaitatá (A y B) y en la escuelita de Monterrico en Silvania (C y D).

A B

C D

Page 25: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

25CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

IDENTIFICACIÓN TAXONÓMICA DE LAS ESPECIES DEL GÉNERO RUBUS PRESENTES

EN LA COLECCIÓN COLOMBIANA DE MORA

Espinosa Bayer Natalia1; Medina Cano Clara Inés2; Lobo Arias Mario2

RESUMEN

La mora es un frutal andino, del género Rubus, con importancia actual creciente en Colombia. El desarrollo sostenible de la especie requiere del soporte de una colección amplia de materiales del taxón cultivado y la existencia de una colección de recursos genéticos de la entidad biológica y taxa relacionados. Tiene un conjunto de poblaciones locales, silvestres y cultivadas y algunas introducciones foráneas de diversas especies de Rubus, las cuales son conservadas por parte de la Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria, CORPOICA, entidad que tiene a cargo el Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nación Colombiana para la Alimentación y la Agri-cultura. Este conjunto germoplásmico debe apoyar los sistemas productivos, mediante procesos de conocimiento de la diversidad inter e intraespecífica disponible. El primer paso es determinar y categorizar las especies presentes en el conjunto mencionado, para lo cual se seleccionaron accesiones morfológicamente contrastantes, con toma de material para su identificación en el Herbario de la Facultad de Agronomía de la Universidad Nacional (Sede Bogotá). Se logró deter-minar la presencia de cinco taxa diferentes en la metapoblación objeto del estudio: R. macrocarpus (sin. R. nubigenus), R. niveus, R. urticifolius, R. glaucus y R. floribundus, mediante el empleo de claves taxonómicas, ejemplares de referencia para tal fin y el apoyo de expertos en el área. Esto permitirá diseñar una búsqueda de entidades biológicas del género reportadas en el país, no presentes en el sistema de mantenimiento, para procesos de colecta, conservación y utilización.

PaLaBraS cLave: Recursos genéticos, sistemática, herbarios, morfología.

INTRODUCCIÓN

Focke (1910, 1914, citado por Romoleroux, 1996), trabajó en la taxonomía del género Rubus. El autor estableció 12 subgéneros con 429 especies, de los cuales, los tres subgéneros más importantes, por el número y relevancia de las especies agrupadas, fueron: Rubus, Idaeobatus y Malachobatus con 132, 117 y 115 taxa, respectivamente. Diversos trabajos taxonómicos posteriores señalan a Rubus como uno de los géneros de plantas más complejos, debido a la ocurrencia de hibridación entre especies relacionadas y aun entre subgéneros, a la poliploidía y a la presencia de pseudogamia (Alice y Campbell, 1999; Antonius-Klemola, 1999; Nybom y Kraft, 1995; Weber, 1996).

1 Laboratorio de Genética Molecular Vegetal, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.

2 Centro de Investigación (C.I.) La Selva, CORPOICA, Rionegro, Antioquia.

Autor de correspondencia: Mario Lobo Arias, Ph.D. Genética, e-mail: [email protected]

Page 26: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

26 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

La permanencia o separación del receptáculo de las drupeolas, al cosechar el fruto, se ha utilizado para diferenciar los subgéneros Rubus e Idaeobatus, que corresponden a nivel hortícola, a las zarzamoras o moras y a las frambuesas, respectivamente (Clark et al., 2007). Sin embargo, Clark et al (2007), señalan que, aun cuando esta diferenciación es de gran utilidad en Europa y Norteamérica, las especies de Rubus presentes en Centro y Suramérica exhiben atributos de los dos tipos hortícolas, por lo cual la mencionada diferenciación carece de aplicabilidad en las espe-cies latinoamericanas.

El apoyo de las técnicas moleculares, en particular ITSs (“Internal transcribed spacer region sequences”), a los estudios morfológicos y citológicos, empleados en taxonomía y filogenia, han evidenciado que el género Rubus en conjunto y 10 de los 12 subgéneros establecidos por Focke, no soportan tratamiento monofilético (Alice, 2002; Alice y Campbell, 1999). En el contexto ante-rior, el subgénero Orobatus, exclusivo de América Latina, admitió monofilia, tal cual fue establecido por Focke y el subgénero Rubus es monofilético al incluir R. glaucus Benth. (subg. Idaeobatus) y R. alpinus Macfad. (subg. Lampobatus) y excluir a R. ursinus Cham. et. Schltdl. Este resultado indica la necesidad de revisar la taxonomía del género Rubus (Alice, 2002; Alice and Campbell, 1999; Ballington et al., 1993).

En los Andes ecuatorianos se han encontrado, en mayor proporción, especies de los subgéneros Orobatus y Rubus, entre las cuales se destaca en el subgénero Orobatus, la entidad bio-lógica R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K., conocida en Colombia como Morón (Popenoe, 1920; Rivera et al., 1997). Esta se distribuye en zonas ecológicas entre los 2600 y los 3400 msnm. El taxón se distingue por el color rojo a vino del fruto, un sabor ligeramente ácido al madurar y el gran tamaño de sus bayas (2.5 x 5 cm), característica, esta última, que dio origen a su nombre (Ballington et al., 1993; Popenoe et al., 1989; Popenoe, 1920; Thompson, 1997).

Otra especie del subgénero Rubus es R. urticifolius Poir., conocida como Mora de Piedra, la cual se reconoce porque la planta está cubierta completamente por tricomas glandulares rojizos (Ballington et al., 1993; Rivera et al., 1997; Romoleroux, 1996).

Por su parte, R. glaucus Benth es un taxón que generó controversia sobre el subgénero al cual pertenecía (Rubus o Idaeobatus), por su morfología, debido a que combina atributos de crecimiento y follaje (tallos y hojas) de frambuesa y características del fruto, como la permanencia del receptáculo en el fruto maduro, asociadas a la zarzamora; elementos que en forma conjunta con una probable reproducción apomíctica, han hecho que se considere como un posible híbrido intersubgenérico (Rubus x Idaeobatus) o un anfidiploide fértil (Ballington et al., 1993; Popenoe et al., 1989; Popenoe, 1921; Thompson, 1997). Los resultados obtenidos con marcadores ITS, indican que R. glaucus pertenece al subgénero Rubus (Alice, 2002; Alice y Campbell, 1999; Ballington et al., 1993; Popenoe et al., 1989; Popenoe, 1921; Thompson, 1997).

Del subgénero Idaeobatus se encuentra R. niveus Wall., conocida como frambuesa, la cual es una especie introducida, proveniente de Asia continental e Indonesia que crece asilvestrada y se ca-racteriza por su hojas imparipinnadas (Ballington et al., 1993; Rivera et al., 1997; Romoleroux, 1996).

En Colombia, Rivera et al. (1997), adelantaron un estudio sobre la distribución y ecología de especies Rubus silvestres en la cuenca del río El Palmar en Ubaque, Cundinamarca, en un área de estudio comprendida entre los 1500 y 3600 msnm, donde se reportó la presencia de 10 taxa silvestres del género, las cuales representan aproximadamente el 50% de las reportadas en el país. Los autores reportaron la presencia de R. acanthophyllus, R. compactus, R. floribundus y R. macrocarpus restringidas a la zona de páramo entre los 2800 y los 3600 msnm, en tanto que registraron una amplia distribución, entre los 1500 a los 3000 msnm, de los taxa R. bogotensis, R. glaucus, R. megalococ-cus y R. urticaefolius, en el Bosque Andino y Subandino (1500 a 3000 msnm). Por su parte, el taxón R. porphyromallus, exhibió una población reducida a 2700 msnm y los investigadores hallaron, creciendo

Page 27: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

27CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

en forma espontánea, la especie introducida R. idaeus (Rivera et al., 1997). Las especies en estudio se relacionan con hábitats intervenidos por el hombre, ya que se encuentran en bosques y matorrales secundarios, cercas de piedra o linderos, bordes de carreteras y lotes abandonados.

Aguilar (2006), informó que en Colombia se cultivan diversas especies del género Rubus, aparte de R. glaucus Benth, el taxa más importante, se encuentran R. bogotensis HBK, sembrada en altitudes entre los 1700 y los 3700 msnm; R giganteus o macrocarpus Benth, entre los 2600 y los 3400 msnm; R. megalococcus Focke, entre los 2300 y los 2700 msnm y R. nubigeus (sin. R. macrocar-pus, Romoleroux, 1996), entre los 2600 y los 3100 msnm.

El Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nación Colombiana, a cargo de CORPOICA, posee una colección de Rubus, la cual incluye actualmente poblaciones cultivadas y espontáneas, colectadas en diversas zonas del país y algunas introducciones de otras áreas del mundo. Esta se ha conformado para conservar la variabilidad del género y promover su utilización, en sistemas produc-tivos, mediante la realización de procesos de valor agregado de diversa índole, los cuales parten de la identificación de las especies presentes. Por ello, se realizó el estudio actual, tendiente a categorizar sistemáticamente los demes presentes en la metapoblación en mantenimiento. Las poblaciones cul-tivadas de esta metapoblación fueron evaluadas participativamente con agricultores en Silvania

MATERIALES Y MÉTODOS

En forma previa al trabajo de categorización de las especies, presentes en la Colección de Mora de la Nación Colombiana, se realizó una visita al Herbario Nacional Colombiano del Instituto de Ciencias de la Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá, con el fin de conocer los atributos presentes en las especies del género Rubus, con las características particulares de cada una y con las muestras utilizadas en la determinación taxonómica de especies.

De la colección de campo, ex situ de poblaciones de Rubus conservada en el C.I. “La Sel-va”, por CORPOICA en Rionegro (Antioquia), se seleccionó al azar la accesión Sara 4 de aquellas que mostraron características típicas de la especie R. glaucus. Además, se incluyeron los demes que exhibieron particularidades morfológicas distintas a R. glaucus: ILS 2187, ILS 1817, ILS 1865, “Sin Espinas”, “Frutilla”, “La Macha” y “Morón”, para un total de ocho entradas. De las anteriores, se tomaron muestras de órganos vegetativos (tallos y hojas) y reproductivos (flores y frutos) de un individuo por accesión, con prensado y secado de las muestras, para su transporte e identifi-cación en el precitado Herbario.

Para el proceso de identificación taxonómica de las muestras, se contó con la asesoría del MSc Juan Carlos Granados, curador del Herbario de la Facultad de Agronomía de la Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá. Esta se realizó con la utilización de la clave de especies de Rubus, compendiada en la serie Flora del Ecuador (Romoleroux, 1996), mediante examen de las muestras con estereoscopio, con el fin de apreciar las características diferenciales de taxa, como son el indumento en hojas, tallos y flores, entre otras.

Adicionalmente, las muestras fueron revisadas por el profesor Edgar Linares, del Instituto de Ciencias Naturales de la Universidad Nacional de Colombia sede Bogotá, experto en el género Rubus.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En las ocho accesiones analizadas, se encontraron cinco especies diferentes, las cuales se relacio-nan en la Tabla 1. La accesión “La Macha”, exhibió características del taxón cultivado R. glaucus, tales como flores de pétalos blancos lanceolados y cerosidad en el tallo, así como caracteres de

Page 28: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

28 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

especies silvestres, correspondientes a hojas trifoliadas y pentafoliadas y presencia de aguijones pronunciados. Además de estos elementos, observados en laboratorio, en campo fue evidente la ausencia de formación de frutos o el aborto temprano de estos, en todas las plantas de dicha población. Lo anterior, condujo a concluir, en principio, que este material puede ser producto de un evento de hibridación entre R. glaucus y una especie silvestre no determinada. Al respecto, en el género Rubus, los cruzamientos naturales interespecíficos e intersubgenéricos son frecuente-mente reportados (Alice and Campbell, 1999; Nybom, 1995). Con la asesoría del profesor Edgar Linares se clasificó la accesión mencionada, en principio, como R. glaucus, Tabla 1, lo cual amerita, un estudio posterior para elucidar si la desviación morfológica de los atributos de ésta es produc-to de hibridación interespecífica o de variabilidad genética dentro del taxón.

Igualmente, el material llamado: ‘Sin Espinas’ fue categorizado como R. glaucus, ya que todas sus estructuras vegetativas y reproductivas coinciden con la descripción de esta especie, exceptuando la presencia de aguijones, los cuales han sido reemplazados por rudimentos de aguijón. Ésta modificación constituye una ventaja a nivel de manejo agronómico, pues se facilita la realización de las diferentes labores en campo.

Las otras especies, ubicadas en los materiales objeto de identificación, exhiben los siguien-tes atributos:

R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K.

Estípulas ovadas, hojas trifoliadas, inflorescencias laxas con más de 4 flores, envés tomentoso o viloso. De acuerdo con Romoleroux (1996), el taxón exhibe tallos tipo terete, tomentosos a gla-brescentes, usualmente glandulares estipitatos, con aguijones curvos, que se estrechan de la base hacia la punta, con 1 a 3 mm de longitud; las estípulas son ovatas a auriculadas y subcoriáceas; las hojuelas son acartonadas a coráceas con 7 a 11 pares de venas secundarias, una base redondeada a cuneada y ápice redondeado a agudo, con márgenes serrulados a dentados. Las inflorescencias son cimas compuestas de 8 a 16 cm de longitud con 8 a 20 flores que tienen 20 a 30 mm de diá-metro, con sépalos que exhiben ápice agudo o acuminado; los pétalos son magenta o púrpura y los carpelos tomentosos; los frutos tienen forma ovoide-globosa, con sépalos reflexos, exhibiendo 40 a 60 drupeolas por receptáculo y color vino tinto a negro (Figura 1).

R. niveus Thumb, De Rubo.

Estípulas filiformes, hojas imparipinadas 5-7 foliolos; drupeolas que se separan del receptáculo y fru-tos rojos. Al respecto, Romoleroux (1996), señala que éste es un arbusto suberecto de 2 m de alto, con tallos terete, glabros, pruinosos, con aguijones que se estrechan a partir de una base amplia, de 7 a 10 mm de anchos, derechos o ligeramente curvos. Las estípulas son lanceaoladas, glabrescentes; los pecíolos son espinosos; las hojas imparipinadas, con 5 a 7 folíolos; las hojuelas son ovatas a ligéra-mente rómbicas, subcoriáceas, con 9 a 11 pares de venas secundarias; las ramas florales son pilosas con pequeñas espinas, las inflorescencias exhiben entre 20 y 50 flores, con pedicelos de 5 a 10 mm de longitud y acículas; los frutos son ovoide-globosos, con presencia de pétalos reflexos y 50 a 80 drupeolas por receptáculo, de color rosa a profundamente rosadas (Figura 2).

R. urticifolius Poir.

Glándulas sésiles esparcidas en el tallo; más de 30 flores por inflorescencia, hojas pentafolio-ladas, sin glándulas, carpelos pilosos en el ápice. Sobre la especie Romoleroux (1996), informa

Page 29: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

29CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

que es un arbusto rastrero de 2 a 3 m de alto; cubierto de pelos de color rojizo; tallos angu-losos, que exhiben una alta densidad de aguijones curvos, que se estrechan de la base al ápice; estípulas subulatas o filiformes, tomentosas a glabrescentes, pecíolos armados, pilosos; hojas con 5 foliolos, cuyas hojuelas son ovatas o elípticas, acartonadas, con base redondeada, ápice agudo-acuminado, margen serrado, envés tomentoso en las venas, haz ligeramente piloso, to-mentoso en las venas. Las inflorescencias son panículas piramidales con 50 a 150 flores y gran ramificación. Las flores presentan sépalos ovatos o lanceolados, ápice apiculado o acuminado, con pétalos ampliamente obovatos, de color rosado o rosado claro. Los frutos son ovoides a globosos, con sépalos ascendentes y 30 a 50 drupeolas por receptáculo, glabros y de color rojo a negro (Figura 3).

R. glaucus Benth.

Estípulas filiformes, hojas trifolioladas, drupeólas permanecen adheridas al receptáculo, menos de 30 flores por inflorescencia, tallos glabros, frutos con más de 50 drupeolas por receptáculo. Ro-moleroux (1996). Reporta que R. glaucus presenta tallos trepadores teretes, glabros, con aguijones que se estrechan de la base al ápice; la planta exhibe estípulas lineares acartonadas, glabras. Las hojas son trifoliadas, con hojuelas ovato-lanceoladas, subcoriáceas, con 10 a 13 pares de venas se-cundarias, base redondeada o ligeramente truncada, ápice acuminado y margen biserrado. El envés es lanoso de color blanquecino y el haz glabro; las inflorescencias son cimas compuestas con 15 a 22 flores que exhiben sépalos deltados, ápice acuminado a filiforme, pétalos obovatos blancos y carpelos pilosos. Los frutos son ovoides a globosos, con sépalos reflexos y 70 a 100 drupeolas por receptáculo, de color rojo a negro (Figura 4).

R. floribundus H.B.K.

Estípulas filiformes, drupeolas adheridas al receptáculo, más de 40 flores por inflorescencia, hojas pentafolioladas, tallos con glándulas dispersas estipitadas, pecíolo no pulvinulado, base de los folío-los redondeado. Tallos y ramas sin glándulas, envés pubescente, tallos tomentosos, foliolos con 10 a 12 pares de venas secundarias, margen serrado. Romoleroux (1996), señala que el taxón exhibe tallos trepadores, angulosos-tomentosos a glabrescentes, a menudo con glándulas dispersas sé-siles o subsésiles; exhibiendo aguijones curvos que se estrechan de la base al ápice. Las estípulas son lanceoladas, acartonadas, tomentosas o glabrescentes. Los pecíolos tienen aguijones y son tomentosos a glabrescentes; las hojas tienen 5 folíolos, con hojuelas ovato-elípticas, acartonadas, ápice agudo, margen aserrado, envés velloso o piloso, tomentoso en las venas y haz piloso; inflo-rescencias con 30 a 80 flores, en algunas oportunidades con una rama terminal simosa, pedicelos tomentoso-vellosos, a menudo con glándulas sésiles o subsésiles; flores con sépalos ovatos, ápice subapiculado o acuminado, pétalos blancos o rosado-claros, carpelos glabros o ligeramente pilosos en el ápice; frutos ovoide-globosos, con sépalos ascendentes, con presencia de 40 a 50 drupeolas por receptáculo, glabras o glabrescentes, de color negro (Figura 5).

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

El estudio realizado permitió determinar la presencia de materiales de cinco especies del género Rubus en el Sistema de Bancos de la Nación Colombiana a cargo de CORPOICA, de las aproxi-madamente veinte especies, presentes en el país.

Page 30: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

30 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

En la colección hay ejemplares de los taxa: R. macrocarpus (sin: R. nubigenus), R. niveus, R. urticifolius, R. glaucus y R. floribundus.

Esto indica la posibilidad de emplear, no sólo el material de la especie más sembrada: R. glaucus, sino también de taxa relacionados, lo cual se favorece por la posibilidad de hibridación interespecífica, la cual ha sido reportada en forma espontánea en el género, posibilidad que hay que determinar en cada cruzamiento entre el taxón cultivado y los relacionados.

El conocimiento de los taxa, presentes en la colección, permite desarrollar una estrategia de colecta de aquellos reportados en Colombia, no presentes en el sistema de conservación.

AGRADECIMIENTOS

Al Curador del Herbario de la Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá, M. Sc. Juan Car-los Granados y al Profesor Edgar Linares, del Instituto de Ciencias Naturales del mismo centro docente, por su apoyo, constante y decisivo, en el proceso de clasificación taxonómica de los materiales de Rubus.

BIBLIOGRAFÍA

Aguilar, S.B. 2006. Caracterización molecular de Rubus spp., en el eje cafetero-Colombia. Tesis Magister en Ciencias, Biología Vegetal. Universidad del Quindío, Universidad Tecnológica de Pereira, Universidad de Caldas. 132p.

Alice, L.A. 2002. Evolutionary relationships in Rubus (Rosaceae) based on molecular data. Acta Horticulturae (ISHS). 585: 79-83.

Alice, L.A., Campbell, C.S., 1999. Phylogeny of Rubus (Rosaceae) based on nuclear ribosomal DNA internal transcribed spacer region sequences. American Journal of Botany. 86: 81-97.

Antonius-Klemola, K., 1999. Molecular markers in Rubus (Rosaceae) research and breeding. Journal of horticultural science and biotechnology. 74: 149-160.

Ballington, J.R., J.L. Luteyn, M.M. Thompson, K. Romoleroux, R. Castillo. 1993. Rubus and vaccin-iaceous germplasm resources in the Andes of Ecuador. Plant Genetic Resources Newslet-ter. 93: 9-15.

Nybom, H., 1995. Evaluation of interspecific crossing experiments in facultatively apomictic blackberries (Rubus subgen. Rubus) using DNA fingerprinting. Hereditas. 122: 57-65.

Clark J.R., Stafne E.T., Hall H.K., Finn C.E. 2007. Blackberry Breeding and Genetics. In: Plant Breeding Reviews. J. Janick (Ed.), John Wiley & Sons, Inc. 29: 19-144.

Nybom, H., T. Kraft, 1995. Application of DNA fingerprinting to the taxonomy of European blackberry species. Electrophoresis. 16: 1731-1735.

Popenoe, H., S., King, J., León, L., Kalinowski, N., Vietmeyer, M., Dafforn. 1989. Lost Crops of the Incas: Little-Known Plants of the Andes with Promise for Worldwide Cultivation. En: N. R. C. Staff (ed.). National Academies Press, Washington. 409 p.

Popenoe, W. 1921. The Andes berry. Journal of Heredity. 12: 387-393.Popenoe, W., 1920. The colombian berry or giant blackberry of Colombia. Journal of Heredity.

11: 195-202.Rivera, D., E. Linares, M.S. Carrizosa, C. Ramírez. 1997. Conservación de germoplasma de moras

silvestres (Rubus spp.) de la cuenca del río El Palmar, municipio de Ubaque (Cundinamarca, Colombia). I: Distribución y ecología. Plant Genetic Resources Newsletter. 111: 40-52.

Romoleroux, K. 1996. Rosaceae. In: G. Harling and L. Annderson (eds.) Flora del Ecuador, vol. 56. University of Goteborg, Lund. pp. 169p.

Thompson, M. 1997. Survey of chromosome numbers in Rubus (Rosacea: Rosoideae). Annals of the Missouri Botanical Garden. 84: 128-164.

Weber, H.E. 1996. Former and modern taxonomy treatment of the apomictic Rubus complex. Folia Geobotanica 31: 373-380.

Page 31: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

31CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

TABLAS Y FIGURAS

Tabla 1. Especies identificadas en la Colección de Rubus de la Nación Colombiana, a cargo de CORPOICA

Especie Accesión

R. macrocarpus, sin R. Nubigenus Morón

R. niveus Frutilla

R. urticifolius ILS 1865

R. glaucus Sara 4, Sin Espinas, La Macha

R. floribundus ILS 2187, ILS 1817

Figura 1. R. macrocarpus Benth o R. nubigenus H.B.K. Hoja, flor y fruto.

Page 32: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

32 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Figura 2. R. niveus Thumb, De Rubo. Hoja, flor y fruto.

Figura 3. R. urticifolius Poir. Hoja, flor y fruto.

Page 33: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

33CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Figura 4. R. glaucus Benth. Hoja y fruto.

Figura 5. R. floribundus HBK. Hoja y fruto.

Page 34: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

34 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

EVALUACIÓN AGRONÓMICA, NUTRICIONAL Y SELECCIÓN PARTICIPATIVA

DE MATERIALES DE MORA EN SILVANIA, CUNDINAMARCA

Espinosa Bayer Natalia1, Sánchez León Dora2, García Ramírez Andrea2, Ariza Nieto Magnolia2, Ariza Nieto Claudia2, Barrero Meneses Luz Stella1

RESUMEN

La mora es un frutal andino cultivado por pequeños y medianos agricultores y su cultivo consti-tuye, en algunas regiones de Colombia, una de las principales fuentes de ingresos, empleo ru-

ral, oferta de alimento y utilización en la agroindustria. La Mora de Castilla (Rubus glaucus Benth), ampliamente adaptada se cultiva, aunque con limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo índice de madurez (bajos grados Brix y alta acidez). La escasa oferta de materiales puede conducir a la vulnerabilidad en la producción. Estos aspectos aunados a la necesidad cada vez más creciente de producir materiales con alto valor agregado, hacen necesario tomar acciones que conlleven a la evaluación de nuevos materiales en nichos específicos.

En el presente trabajo se evalúan materiales de mora provenientes del banco de ger-moplasma manejado por CORPOICA y material de agricultor por atributos relevantes de tipo morfológico, agronómico, nutricional y antioxidante en procesos participativos con agricultores de el sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca). A partir de 34 materiales evaluados, se se-leccionaron seis que presentan características agronómicas sobresalientes, alta calidad nutricional y una buena variabilidad para los atributos estudiados. Estos materiales fueron multiplicados in vitro y entregados a los agricultores del sector Monterrico (Ver artículo de Valderrama et al., en esta compilación).

PaLaBraS cLave: Investigación participativa, material promisorio, valor nutricional, base genética.

INTRODUCCIÓN

Dentro de la cadena frutícola, la mora (Rubus glaucus Benth) es un frutal andino con propie-dades agronómicas, nutritivas y antioxidantes con alto potencial en el mercado nacional e internacional (Tafur et al., 2006). En Colombia se cultiva principalmente la Mora de Castilla, material o conjunto de materiales similares ampliamente adaptados que, sin embargo, presen-

1 Laboratorio de Genética Molecular Vegetal, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.

2 Laboratorio de Nutrición, CBB, CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.

Autor de correspondencia: Luz Stella Barrero Meneses, Ph.D. Genética y Mejoramiento Vegetal, e-mail: [email protected]

Page 35: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

35CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

tan limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo índice de madurez (bajos grados Brix y alta acidez) (Barnett y Murant, 1970; Botero et al., 2002; Franco et al., 2000; Franco y Giraldo, 2002). Adicionalmente, la escasa oferta de materiales puede conducir a la vulnerabilidad en la producción, por tanto se hace necesario ampliar la base genética del cultivo. Esto, aunado a la necesidad cada vez más creciente de producir semilla con altas calidades nutricionales y an-tioxidantes, exige tomar acciones que conlleven a la evaluación de materiales para atributos de calidad morfológica, agronómica y nutricional que permitan seleccionar aquellos con alto valor agregado adaptables a ambientes específicos y que representen buena parte de la variabilidad genética del cultivo.

Los estándares internacionales en Rubus para atributos morfológicos, agronómicos y nu-tricionales indican que la evaluación primaria se debe realizar en el período de fructificación y normalmente se tiene en cuenta el índice de madurez, el cual se basa en el cambio del color del fruto (NTC-4106), acompañado de cambios en los sólidos solubles totales o grados Brix; la acidez expresada como ácido málico y el pH. Adicional a la evaluación primaria, los frutos se cosechan y se determina el índice de calidad en el cual se incluye la apariencia (tamaño, forma y ausencia de defectos), firmeza, sabor (sólidos solubles totales o grados Brix, acidez titulable y presencia de volátiles) y valor nutricional (Vitaminas, minerales y fenoles) (Clark et al., 2007). Estas evaluacio-nes son imperativas para la selección de genotipos élite y la promoción de la siembra de material genético con propiedades diferenciales.

En Colombia, los estudios han mostrado que para algunos parámetros morfológicos y agronómicos existe variabilidad en Rubus. Seis materiales provenientes de Antioquia y foráneos presentaron un comportamiento agronómico diferencial entre materiales Rubus y R. glaucus Ben-th. Entre estos el material originario de San Antonio fue el de mayor producción, lo cual fue atribuible a su precocidad, mayor cantidad de ramas productivas, inflorescencias y frutos, y baja o nula emisión de tallos vegetativos (Córdoba y Londoño, 1996). De otro lado, en materiales Rubus (R. glaucus, R. urticifolius y R. robustus) colectados en el Valle del Cauca, Cauca y Nariño, se identificaron algunos sobresalientes por su mayor peso de fruto, grados Brix y menor número de espinas (Zamorano et al., 2007).

En cuanto a atributos nutricionales y potencial nutracéutico, también se ha encontrado variabilidad. En frambuesa, R. idaeus, se han identificado once compuestos fenólicos, incluidas algu-nas antocianinas. En diferentes cultivares los contenidos individuales de compuestos de este tipo varían significativamente tanto por factores de desarrollo como por factores genéticos (Patel et al., 2004; Anttonena y Karjalainen, 2005; Beekwilder et al., 2005), lo cual concuerda con estudios recientes del potencial nutracéutico por medio de ORAC o FRAP (métodos para detección de antioxidantes), antocianinas, flavonoles y fenoles, de materiales de Rubus, donde se evidencian algunos cultivares con una variación muy amplia y una muy alta capacidad antioxidante. Estos resultados han conducido a proponer que el valor nutricional de Rubus puede ser optimizado por medio de programas de ampliación del germoplasma y que el mejoramiento genético puede incrementar estos niveles (Clark et al., 2007).

El Sistema de Bancos de Germoplasma de la Nación Colombiana, a cargo de CORPOI-CA, posee una colección del género Rubus, la cual incluye poblaciones cultivadas y espontáneas, colectadas en diversas zonas del país y algunas introducciones de otras áreas del mundo. Con el fin de promover la utilización de estos materiales en sistemas productivos del país, se propuso evaluar, en material cultivado, variables relevantes de tipo morfológico, agronómico, nutricio-nal y antioxidante en procesos participativos con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca), junto con material de agricultor de la región y seleccionar aquellos con mejores atributos y adaptación en la zona de estudio.

Page 36: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

36 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

MATERIALES Y MÉTODOS

Material vegetal

Se evaluaron 34 accesiones pertenecientes a la Colección de Rubus mantenida por CORPOICA, sembradas en un lote de la zona productora de mora en el sector Monterrico del Municipio de Silvania, Cundinamarca. De estas, 32 correspondían a Mora de Castilla (R. glaucus) y las otras dos a Morón (R. macrocarpus) y Mora Dulce (Rubus spp). Dos de ellas (Castilla Monterrico Yema y Castilla Monterrico Semilla) eran tradicionalmente cultivadas por los agricultores de la región. Una réplica de las accesiones es mantenida en el Centro de Investigación, C.I. La Selva, Rionegro, Antioquia. Para las evaluaciones, se sembró un surco por accesión con un contenido entre cinco y diez plantas (para detalles de la siembra y el manejo del cultivo en el lote, ver artículo de Álvarez et al. de esta compilación).

Selección participativa

Se realizaron dos encuestas a los agricultores de Monterrico. En la primera se buscó identi-ficar las preferencias de cultivar de los agricultores, respecto a su sistema productivo y a las características de la zona. Para tal fin, se seleccionaron variables reproductivas de carácter cualitativo, las cuales se ponderaron asignándoles un valor mayor, de acuerdo con los criterios que los agricultores consideraron favorables. Por ejemplo: en el caso de la variable forma del fruto, los estados posibles son alargado o redondo. Los agricultores prefirieron que el fruto fuera alargado, entonces se le asignó tres al tipo alargado y uno al tipo redondo. De esta ma-nera se le otorgó mayor importancia en la calificación final a las características apreciadas por el productor (Tabla 1).

En la segunda encuesta, el objetivo consistió en calificar los materiales de mora estableci-dos en el lote con base en los criterios del productor y en criterios comerciales. Se concentró la atención en evaluar las mismas variables de la primera encuesta con los agricultores que tuvieron mayor participación en el desarrollo del ensayo; se organizaron cuatro parejas de productores que observaron y calificaron todas las accesiones. Para el análisis de las encuestas, se procedió a ponderar las calificaciones de los estados de las variables evaluadas y sumarlos. De esta manera se obtuvo una calificación total de cada material con un máximo de 20 para el mejor. La segunda encuesta se llevó a cabo en enero de 2008, cuando las accesiones mostraron estabilidad en su producción después de año y medio de sembradas.

Evaluación agronómica y nutricional

Una vez terminadas las encuestas, se procedió a tomar datos en campo de la variable cuantitativa de rendimiento por planta (expresado en gramos). Las moras se cosecharon en el estado de ma-durez organoléptica (estado en el cual el fruto se desea comercializar, debido a su característica no climatérica); condición fisiológica del fruto que limita cambios en el índice de madurez después de la cosecha (Wills, 1998).

En laboratorio, se midieron las variables: longitud de fruto y ancho de fruto (en centí-metros) utilizando un calibrador digital en las zonas más ancha y más larga del fruto y, además, peso de fruto (en gramos) utilizando una balanza digital (Córdoba y Londoño, 1996). El índice de madurez se midió a través de los grados Brix y acidez. El valor nutracéutico se determinó a través de la capacidad antioxidante por el método FRAP (Benzie & Strain, 1996, Huang, et al., 2005). De

Page 37: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

37CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

cada accesión se tomaron cinco plantas para evaluar rendimiento y de cada planta cinco frutos para el resto de variables.morfológicas del fruto.

El valor nutricional se determinó teniendo en cuenta los estados de madurez 3, 4 y 5, siendo este último, el estado de madurez fisiológica para este fruto no climatérico (Wills, 1998). Los datos de campo y laboratorio se evaluaron estadísticamente mediante análisis de componen-tes principales y análisis de conglomerados (Díaz, 2007; Hidalgo, 2003).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Los resultados de las encuestas de selección participativa indicaron que el tipo de fruto alargado y dulce es el preferido por los agricultores (Tabla 1). Las mejores accesiones que tuvieron califi-cación de agricultores de 18-20 fueron Sin espinas, ILS1863, Monteloro, Castilla Fusa y Riosucio. Sin embargo, Castilla Fusa presentó un bajo contenido de antioxidantes (Tabla 2).

Para la selección de los seis materiales que representaron los mejores atributos, se consi-deraron como parámetros de mayor importancia el contenido de antioxidantes, la calificación de los agricultores y el rendimiento, seguido por otros parámetros. De esta manera se seleccionaron los materiales Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin espinas y Monterrico Yema e ILS 1863 en este ambiente. Cabe señalar la importancia de realizar evaluaciones a través del tiempo, en la misma localidad y en nuevas localidades.

También se consideró en una segunda fase que los materiales seleccionados representa-ran variabilidad de la especie R. glaucus. En este sentido se llevaron a cabo análisis de componentes principales y de conglomerados con los datos obtenidos.

El análisis de componentes principales mostró que los primeros cuatro componentes presentaron valores propios superiores a uno y fueron los de mayor relevancia en la medida que agruparon alrededor de un 86% de la variación total de los datos originales (Tabla 3).

Se encontró que las variables que mostraron mayor relación con los cuatro primeros componentes principales descritos en la Tabla 3 fueron en su orden longitud de fruto, peso de fruto, ancho de fruto, madurez, grados Brix y acidez. Lo cual indica que éstas fueron las variables que más aportaron en la discriminación de los materiales de Rubus. En la figura 1 se observan las agrupaciones que se obtuvieron a partir del análisis de conglomerados con la utilización de todas las variables en estudio, donde se conformaron tres grupos de cultivares, de los cuales, el segundo se subdividió en otros dos.

Los materiales con mejores características agronómicas y fisicoquímicas se ubicaron en el grupo 2B, el cual incluyó tanto materiales de la especie R. glaucus como Mora Dulce (Rubus spp.). Éste grupo mostró tamaño de fruto mayor, en cuanto a longitud (alrededor de 3 cm), ancho y peso (~6 g) (Tabla 4).

En el grupo 1 se encontraron materiales de fruto pequeño con algunas características im-portantes en cuanto a calidad nutricional como madurez (2.58) y grados Brix (7.45). Mientras que en el grupo 2A, se encontraron materiales intermedios, de mayor tamaño de fruto y características nutricionales inferiores al grupo 1. Por su parte R. macrocarpus o Morón que se diferenció con clari-dad formó un nuevo grupo (el 3) con caracteres interesantes en cuanto a su tamaño de fruto (~ 10 g) y calidad nutricional (madurez de 2.65 y grados Brix de 7.7), muy superiores a los de R. glaucus, por tanto es un material a tener en cuenta en un programa de mejoramiento de mora (Tabla 4).

Los materiales seleccionados por sus características agronómicas sobresalientes, alta ca-lidad nutricional y por participación de los agricultores, se ubicaron en los grupos 1, 2A y 2B, lo cual indica que se escogieron materiales con diferentes ventajas nutricionales o agronómicas.

Page 38: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

38 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

A cinco de las accesiones se les determinaron los parámetros fisicoquímicos (grados Brix, pH, acidez) de tres estados de madurez (3, 4 y 5). No se presentaron diferencias significa-tivas en los análisis fisicoquímicos de las accesiones evaluadas (Tabla 5). Sin embargo, se mostró que, en la medida en que aumenta el estado de madurez del fruto, los grados Brix y el índice de madurez también aumentan, lo cual indica que el fruto acumula la mayor cantidad de sólidos solubles totales en la madurez fisiológica (estado 5).

CONCLUSIONES

Después de evaluar 34 materiales de mora provenientes del banco de germoplasma manejado por CORPOICA y material de agricultor por atributos relevantes de tipo morfológico, agronómico, nutricional y antioxidante en procesos participativos con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca), se seleccionaron como promisorios: Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin espinas, Monterrico Yema e ILS 1.863, de acuerdo con su contenido de antioxidantes, calificación de los agricultores y rendimiento, seguido por otros parámetros de importancia en el cultivo para el ambiente en estudio.

Los seis genotipos seleccionados se ubicaron en diferentes grupos (1, 2A y 2B), lo cual indica que se escogieron materiales con diferentes ventajas nutricionales o agronómicas.

Para cinco accesiones evaluadas por grados Brix, pH y acidez en tres estados de madurez (3, 4 y 5) se encontró que el fruto acumula la mayor cantidad de sólidos solubles totales en la madurez fisiológica (estado 5).

AGRADECIMIENTOS

A las Asociaciones de productores de Monterrico. A Roberto Álvarez por su continuo apoyo con los agricultores del sector. A Yaneth Camargo por su excelente apoyo logístico y administrativo.

BIBLIOGRAFÍA

Anttonena, M.J., Karjalainen, R.O. 2005. Environmental and genetic variation of phenolic compounds in red raspberry. Journal of Food Composition and Analysis. 18: 759-769.

Barnett, O.W., Murant, A.F. 1970. Host range, properties and purification of raspberry bushy dwarf virus. Annals of applied Biology. 65: 435-449.

Benzie, I.F.F, Strain, J.J. 1996. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of “antioxidant power”: the FRAP assay. Anals of Biochemistry. 239: 70-76.

Beekwilder, J., Jonker, H., Meesters, P., Hall, R.D., Van Der Meer, I.M., Ric de Vos, C.H. 2005. Antioxidants in raspberry: On-line analysis links antioxidant activity to a diversity of individual metabolites. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53: 3313-3320.

Botero, M.J., Ríos G., Franco G., Romero, M., Pérez J.C., Morales J.E., Gallego J.L., Echeverri, D.I. 2002. Identificación y espacialización de enfermedades asociadas a los cultivos de mora (Rubus glaucus Benth) en el eje cafetero. En: Memorias IV Seminario Frutales de Clima Frío Moderado. Medellín.

Clark J.R., Stafne E.T., Hall H.K., Finn C.E. 2007. Blackberry Breeding and Genetics. En: Plant Breeding Reviews. J. Janick (Ed.), John Wiley & Sons, Inc. 29: 19-144.

Córdoba, O., J. Londoño, 1996. Evaluación de seis materiales de mora (Rubus spp.) bajo condiciones de clima frío moderado. Tesis para optar al título de Ingeniero Agrónomo. Universidad Nacional de Colombia, Medellín.

Díaz, L.G. 2007. Estadística multivariada: Inferencia y métodos, Segunda edición. Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Ciencias, Bogotá, 570p.

Page 39: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

39CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Franco, G., Gallego, J., Tamayo, A., Heredia, L., Medina, G. 2000. Fertilización de la mora de Vastilla (Rubus glaucus Benth) en zonas frías del departamento de Caldas. En: Memorias del tercer seminario frutales de clima frío moderado. Centro de Desarrollo Tecnológico de Frutales C.D.T.F. Manizales. p. 81-87.

Franco, G., Giraldo, M. 2002. El cultivo de la mora. Quinta edición corregida. Manual de asistencia técnica. CORPOICA, Federación Nacional de Cafeteros de Colombia, SENA, Comité Técnico Agropecuario de Risaralda, UMATA. Risaralda. 81p.

Hidalgo, R. 2003. Variabilidad genética y caracterización de especies vegetales. En: T. Franco e R. Hidalgo (editores). Análisis estadístico de datos de caracterización morfológica de recursos fitogenéticos. Boletín técnico Nº 8. Instituto Internacional de Recursos Fitoge-néticos. Cali. 26p.

Huang, D., Ou, B., Prior, R.L. 2005. The chemistry behind dietary antioxidant capacity assays. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 3:1841-1856.

Patel, A.V., Rojas-Vera, J., Dacke, C.G. 2004. Therapeutic constituents and actions of Rubus species. Current Medicinal Chemistry. 11: 1501-1512.

Tafur, R., Toro, J., Perfetti, J., Ruiz, D., Morales, J. 2006. Plan Frutícola Nacional (PFN). Mi-nisterio de Agricultura y Desarrollo Rural, Fondo Nacional de Fomento Hortofrutícola, Asohofrucol, SAG. 43 p.

Wills, R. 1998. Introducción a la fisiología y manipulación poscosecha de frutas y hortalizas y plantas ornamentales. Segunda edición. Editorial Acribia. Zaragoza, España. 260 p.

Zamorano, A., Morillo, A.C., Morillo, Y., Vásquez, H., Muñoz, J. 2007. Caracterización mor-fológica de mora en los departamentos de Valle del Cauca, Cauca y Nariño, de Colom-bia. Acta Agronómica. 56: 51-60.

TABLAS Y FIGURAS

Tabla 1. Variables cualitativas evaluadas por productores de mora en Silvania (Cundinamarca).

Variable Estado Valor asignado por preferencia

Forma del frutoRedonda 1

Alargada 3

Sabor

Dulce 5

Acido 3

Insípido 1

Cantidad de fruto

Mucha 5

Regular 3

Poca 1

Calificación general

Buena 5

Regular 3

Mala 1

Page 40: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

40 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Tabla 2. Calificación de agricultores y parámetros agronómicos y fisicoquímicos de las accesiones establecidas en Silvania*.

Accesión**

Califi- cación agri-

cultores

Rendi- miento

(g/planta)

Anti- oxidantes

(FRAP) Brix Ph AcidezLargo de

frutoRelación

largo/ancho

Monteloro 18 150 3446 7,6 2,45 3,03 2,66 1,26Manzanares 8 78 3165 8,4 2,33 2,78 2,32 1,21Pantanillo 12 80 2627 6,7 2,21 3,26 2,69 1,3Riosucio 18 84 2536 6,6 2,71 2,92 2,26 1,11La Finca 8 86,67 2482 8,5 2,35 3,08 2,29 1,18Pacho 1 10 16,67 2145 8,3 2,27 2,78 2,1 1,17Cerezos 15 310 2118 7 2,47 3,57 2,39 1,17Don Matias 5 65 1991 6,9 2,58 3,16 2,27 1,15Sara 4 14 72,5 1963 7,7 2,43 3,09 2,57 1,27Sin Espinas 20 208 1937 8,2 2,28 3,19 2,48 1,19Castilla M. yema 11 90 1870 7 2,37 3,14 2,43 1,26ILS 1863 18 203,33 1850 8,1 2,33 3,42 2,54 1,24Sara 1 10 62,5 1776 8,1 2,17 4,2 2,47 1,22Pácora 16 125 1693 7,5 2,28 3,04 2,63 1,29Guática 12 96,67 1597 7,2 2,23 3,24 2,31 1,23El Retiro 12 86 1533 6,5 2,65 3,32 2,71 1,33Villa Maria 14 135 1490 7,6 2,36 3,29 2,42 1,16San Bernardo 12 67,5 1326 7,5 2,33 3,51 2.377 1,18Castilla Maniz. 12 84 1290 7,1 2,44 3,46 2,38 1,23Salamina 10 56 1275 6,8 2,57 2,66 2,28 1,22Castilla M. semilla 14 97,5 1239 6,8 2,5 3,23 2,53 1,18Sara 3 14 41,67 1211 7,3 2,54 2,98 2,35 1,25Guarne 12 37 1196 7 2,73 2,92 2,55 1,29Francesa 14 51 1143 6,9 2,66 3 2,23 1,1Pasca 12 125 850 6,6 2,33 3,3 2,6 1,23Guarne L.S. 14 94 777 7,1 2,48 3,11 2,11 1,11Castilla Fusa 18 140 745 7,3 2,46 3,34 2,71 1,26La Ceja 12 18,75 727 8,8 2,4 3,45 2,46 1,24Hartona 16 87 428 7,3 2,25 3,29 2,29 1,18Morón 16 128 382 7,7 2,27 2,93 3,3 1,05Córdoba 8 80 327 7 2,5 3,35 2,3 1,16

* Los datos fueron ordenados por contenido de antioxidantes. Los materiales seleccionados para multi-plicación in vitro se señalan en rojo.

** M. = Monterrico, Maniz. = Manizales

Page 41: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

41CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Tabla 3. Valores propios y porcentaje de varianza de nueve componentes en accesiones de Rubus.

Número Valor PropioPorcentaje de la varianza

total explicadaAbsoluto Acumulado

1 2.9692 32.99 32.992 2.1073 23.41 56.413 1.6286 18.10 74.504 1.0252 11.39 85.895 0.7312 8.12 94.026 0.4451 4.95 98.967 0.0838 0.93 99.898 0.0061 0.07 99.969 0.0035 0.04 100.00

Tabla 4. Valores promedio de las características de las agrupaciones obtenidas por análisis de conglomerados.

Variable Grupo 1Grupo 2: Grupo 3:

Morón2A 2BLongitud fruto (cm) 2.15 2.41 2.57 3Peso fruto (g) 4 4.47 5.9 10.97Ancho fruto (cm) 1.88 1.85 2.05 3.04Madurez 2.58 2.15 2.30 2.65Brix 7.4 7.3 7.0 7.7Acidez 2.91 3.29 3.33 2.93

Tabla 5. Efecto de la accesión y el estado de madurez sobre características fisicoquímicas de la mora.

Factor Grados Brix pH Acidez Índice de madurez

AccesiónCastilla M. Yema 6.80 ± 2.83 2.98 ± 0.09 3.62 ± 0.45 1.92 ± 0.93ILS 1863 6.90 ± 1.49 2.70 ± 0.21 3.93 ± 0.61 1.84 ± 0.77Sin Espinas 5.34 ± 0.72 2.80 ± 0.12 3.15 ± 0.27 1.69 ± 0.21Pácora 7.46 ± 1.74 2.82 ± 0.11 3.61 ± 0.63 2.17 ± 0.94Villa María 6.37 ± 2.34 2.92 ± 0.09 3.12 ± 0.58 2.13 ± 1.09

Estado3 5.12 ± 0.63b 2.77 ± 0.16 3.62 ± 0.53 1.42 ± 0.09b

4 5.94 ± 0.67b 2.79 ± 0.12 3.81 ± 0.43 1.57 ± 0.07b

5 7.98 ± 1.97a 2.89 ± 0.18 3.11 ± 0.53 2.61 ± 0.75ªEfectos

Accesión NS NS NS NSEstado * NS NS *Accesión x Estado NS NS NS NS

a,b Promedios con letras distintas son significativamente diferentes (P<0.05); NS, no significativo. * P <0.05.

Page 42: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

42 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

* Accesiones seleccionadas por características agronómicas, nutricionales, nutracéuticas y calificación de agricultores.

Figura 1. Dendograma obtenido por análisis de conglomerados.

Clasificación jerárquica ACP

RG01

RG14

RG18

RG05

RG07

RG24

RG09

RG04

RG27

RG16

RG20

RG13

RS30

RG08

RG22

RG15

RG06

RG11

RG12

RG21

RG17

RG28

RG26

RG39

RG25

RG02

RG31

RG19

RG23

RG10

RG32

RG03

RG33

RNU29 MorónSin espinas*PácoraMonteloro*

Sara 4Sara 3La CejaILS 1863*Villa MaríaSara 2C. FusaC. ManizalesEl RetiroMonterrico S.Sara 1HuilaGuáticaSan BernardoHartonaPantanilloPascaMora dulceCórdobaDon MatíasMonterrico Y.*Cerezos*Manzanares

3

2

2A

2B

1La FincaPacho 1FrancesaGuarne L.S.GuarneSalaminaRiosucio*

Castilla M. Yema*

Page 43: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

43CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

BIOFERTILIZACIÓN EN EL CULTIVO DE LA MORA (RUBUS GLAUCUS BENTH)

Roveda Gabriel 1, Ramírez Margarita 2, Peñaranda Andrea 1, Cabra Lucrecia 1

RESUMEN

Durante la última década se ha incrementando en Colombia el uso de la micropropagación in vitro a partir del cultivo de meristemos. Esta tecnología permite la propagación masiva

de clones específicos de frutales, y garantiza alta calidad y mayor uniformidad en programas de obtención de semilla limpia con materiales libres de agentes patógenos. Sin embargo, el uso de esta tecnología ha sido restringida, debido al alto grado de mortalidad de plántulas (> 50%), oca-sionado por una cutícula poco desarrollada, estomas no funcionales y un sistema radical débil que facilita la deshidratación. El principal propósito de esta investigación se relaciona con la obtención de semilla limpia de mora, endurecida, procedente de cultivo de tejidos e inoculada con Hongos de Micorrizas Arbusculares (HMA) para mejorar la supervivencia de plántulas, reducir el uso de fertilizantes, mejorar la calidad del fruto y ampliar el acceso a los mercados. Mediante la investi-gación, realizada en las instalaciones de CORPOICA, en condiciones controladas, se evaluaron varias cepas nativas aisladas de las zonas productoras de mora de los departamentos de Cundi-namarca y Boyacá. Los mayores beneficios se lograron con la inoculación de la cepa MA4, aislada en Silvania (Cundinamarca), con esporas nativas de Glomus y Acaulospora, expresados en plantas con mayor biomasa (foliar y radical), porte, área foliar, estado nutricional y alta capacidad de ab-sorción de nutrientes esenciales (P, N, Ca y Mg). Se concluyó, además que el uso de la cepa MA4 permite sustituir el 50% de la fertilización comercial, con valores similares al testigo comercial (T100) en absorciones de P y Ca, y superiores a T100 en N y Mg.

INTRODUCCIÓN

Colombia posee una enorme riqueza en especies frutales con potencial como alimentos funciona-les (Echeverry, 2003). Existen algunas evidencias sobre las propiedades antioxidantes del género Rubus, dentro de las cuales se encuentra la mora. Este género presenta una gran diversidad que actualmente comprende cerca de unas 300 especies distribuidas por todo el mundo.

La mora (Rubus glaucus Benth) es una especie originaria de los Andes Tropicales de Amé-rica; pertenece a la familia Rosáceae y fue descubierta por Hartw y descrita por Benth. La Mora de Castilla es la más conocida y cultivada en Colombia. Aunque existen diversas especies de Rubus en el país, tales como: R. bogotensis (Antioquia, Valle, Santander y Cundinamarca); R. nubigenus (Caldas, Cundinamarca, Cauca); R. megalococus (Cundinamarca); R. floribundus y R. giganteus, entre otras (Franco y Giraldo, 1998).

1 LaboratoriodeEcofisiologíaVegetal,CentrodeinvestigacionesC.I.Tibaitatá,CORPOICA.2 Laboratorio de Microbiología de Suelos, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA.

Autor de correspondencia: Gabriel Roveda, M.Phil. Fisiología de plantas, e-mail: [email protected]

Page 44: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

44 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

La Mora de Castilla se distribuye ampliamente en el país. Se encuentra en forma silves-tre, desde el departamento del Putumayo hasta el Valle del Magdalena, y es posible cultivarla en altitudes entre los 2.000 y 3.200 metros (Asohofrucol et al., 2004). Su fruto morado brillante se caracteriza por altos contenidos de azúcar; forma alargada, cónica, tamaño grande y tallos con espinas (Franco y Giraldo, 1998).

Los cultivos de mora presentan grandes altibajos en productividad ocasionados por di-versos limitantes agronómicos como problemas fitosanitarios que inciden en la baja calidad de la semilla. Otras causas tienen que ver con el sistema de propagación y la carencia de semilla cer-tificada. La mayoría de los cultivos establecidos en Colombia parten de material de propagación asexual, mediante acodos o estacas que, frecuentemente, transmiten enfermedades fungosas, bacterianas y virales que dejan grandes pérdidas al agricultor (Ávilan et al., 1989; Angulo, 2003).

En Colombia se ha incrementado, en la última década, el uso de la micropropagación de me-ristemos en frutales, mediante la técnica de cultivo de tejidos (Angulo, 2003). Este sistema, además de permitir la propagación masiva de clones específicos, garantiza alta calidad, mayor uniformidad y semilla limpia, con materiales libres de agentes patógenos (Jaizme-Vega y Barea, 1992; Jaizme-Vega, 1999). Este sistema de propagación in vitro es una valiosa alternativa para la multiplicación de clones seleccionados (Broome y Zimmerman, 1978; Castro y Gaviria, 1995). Los resultados de investiga-ciones donde se comparan plantas propagadas por acodo tradicional y plantas micropropagadas permiten establecer que las plantas propagadas in vitro presentan una mejor calidad en la producción, y frutos de mayor tamaño, peso y homogeneidad (Castro y Gaviria, 1995).

A pesar de los múltiples beneficios que genera la micropropagación, existen limitantes para un uso más extendido de esta técnica. La transferencia de plántulas en condiciones in vitro (Laboratorio) a condiciones ex vitro (vivero o campo), constituye uno de los pasos más críticos de la micropropagación, debido al alto grado de mortalidad de plántulas (entre 50 y 90%) (Sutter, 1985; Ziv et al., 1987). Estas pérdidas se producen por problemas de aclimatación, como con-secuencia de una cutícula poco desarrollada, estomas no funcionales con un inadecuado control del estado hídrico de la planta y un sistema radical débil, que facilita la deshidratación (Vestberg y Estaún, 1994; Elmeskaoui et al., 1995; Alarcón y Ferrera-Cerrato, 2000; Schultz, 2001).

Por otra parte, se ha observado que algunas plantas micropropagadas como la uva, la manzana, la piña, el aguacate, el plátano y el anón presentan, por lo general, alta dependencia en las relaciones micorrícicas (Nemec, 1986), ya que, al inocular las plantas micropropagadas con hongos formadores de micorrizas arbusculares (HFMA) se logra alcanzar un crecimiento óptimo (Gianinazzi et al., 1990). En la actualidad, este conocimiento ha permitido integrar ambas biotec-nologías, la micropropagación in vitro y el uso de la inoculación micorrícica en diversas plantas de interés (Lovato et al., 1996).

Las ventajas de la inoculación con HFMA ex vitro en plantas micropropagadas in vitro se han probado en muchas especies de frutales como uvas, manzana, ciruelo, piña, aguacate, fresa, frambuesa, cereza (Varma y Schüepp, 1995; Fortuna et al., 1996; Lovato et al., 1996; Azcón-Aguilar et al.,1997), plátano (Jaizme-Vega y Azcón, 1995; Jaizme-Vega, 1999), patrones clonales de peral y melocotonero (Rapparini et al., 1994), pistacho (Schubert y Mazzitelli, 1988), kiwi (Schubert et al., 1992) anón y cereza silvestre, las cuales mostraron una mejor adaptación, toma de nutrientes y crecimiento vegetal (Azcón-Aguilar et al., 1997; Lovato et al., 1994).

La fase de aclimatación es un paso crítico en el ciclo de la micropropagación. Algunas in-vestigaciones recientes en plantas de yuca (Azcón-Aguilar et al., 1997) y micropropagación de los rizomas de árboles frutales. Monticelli et al., 2000, citado en Schultz, 2001, han demostrado que la inoculación con micorrizas, al inicio de esta etapa, reduce el choque del transplante, aumenta la supervivencia y produce la consiguiente estabilización de la planta (Schultz, 2001). Es importante

Page 45: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

45CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

realizar experimentos para la selección de las mejores cepas del hongo formador de micorriza arbuscular en búsqueda de un eficiente desarrollo micorrícico en plantas micropropagadas (Gui-llemin et al., 1992).

Si bien se conocen las bondades de una etapa de endurecimiento del material in vitro, muchos de los laboratorios comerciales que emplean estas técnicas de propagación, no realizan el endureci-miento de los materiales antes del transplante definitivo a campo, por considerar este proceso difícil y costoso pues representa entre el 35 y el 75% del costo total de la semilla (Encina, 1996).

La tecnología de biofertilización, a partir de hongos formadores de micorrizas arbuscula-res, es una estrategia importante para aumentar la supervivencia de plántulas multiplicadas in vitro, por la técnica de cultivo de tejidos. Esta inoculación mejora, a la vez, la aclimatación durante la fase de transplante a condiciones de vivero y campo. Adicionalmente, optimiza la nutrición vegetal y ejerce una protección del cultivo contra enfermedades y el ataque de elementos patógenos, con implicaciones en reducción de costos de producción y aumentos en productividad. El principal propósito de esta investigación es la obtención de semilla limpia de mora, endurecida, procedente de cultivo de tejidos e inoculada con Hongos Formadores de Micorrizas Arbusculares (HFMA) que mejore la supervivencia de plántulas, la calidad del fruto y el acceso a los mercados e incida en la reducción del uso de fertilizantes químicos.

MATERIALES Y MÉTODOS

Diseño experimental

La investigación se realizó en los invernaderos y laboratorios de micropropagación y ecofisiología vegetal del Centro de Investigaciones Tibaitatá (CORPOICA). El diseño experimental selecciona-do se realizó con bloques completos al azar: ocho tratamientos y tres repeticiones, cada bloque con cuatro unidades experimentales. Se realizaron dos tipos de muestreos: uno de seguimiento o monitoreo, con una frecuencia quincenal, y tres muestreos destructivos a los 30, 80 y 120 días, después del transplante. Los tratamientos evaluados fueron los siguientes: Tres tratamien-tos testigo sin inoculación: uno sin fertilizar (T0), uno con 50% de fertilización (T50), y un testigo comercial con 100% de fertilización (T100), y cinco tratamientos inoculados con HFMA+50% de la fertilización comercial (MA1, MA2, MA3, MA4 y Mycobiol).

Preparación del sustrato e inoculantes

Después de la fase de enraizamiento in vitro, al inicio de la etapa de aclimatación, se utilizaron tinas de plástico con turba canadiense (sustrato estéril), previamente humedecida. A los 30 días después de la siembra (dds), se pasaron a materas desinfectadas de 1.8 Kg con un sustrato com-puesto por una mezcla de suelo y cascarilla de arroz en proporción 3:1 (V:V). De acuerdo con el análisis de suelo, las características químicas fueron: pH ligeramente ácido (5,0), alto contenido de materia orgánica (11,4%), niveles bajos de fósforo (9 mg.kg-1), situación ideal para la evaluación de HFMA. De igual manera, se evaluaron nutrientes como azufre (23 mg.kg-1), calcio (3 cmol+.kg-1), magnesio (1,9 cmol+.kg-1), potasio (1,7 cmol+.kg-1), cobre (1,8 cmol+.kg-1), manganeso (16 cmol+.

kg-1), sodio (0,3 cmol+.kg-1), zinc (6,9 mg.kg-1), boro (0,3 mg.kg-1) y hierro (360 mg.kg-1). Los inóculos de micorriza arbuscular se obtuvieron a partir de muestras de suelo rizos-

férico de cultivos establecidos de mora de los departamentos de Antioquia y Cundinamarca. Con estas muestras se inició la multiplicación de las cepas nativas de hongos formadores de micorriza arbuscular, para luego proceder a inocular las plántulas de mora.

Page 46: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

46 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Inoculación y Condiciones experimentales

Se utilizaron propágulos de mora de tres semanas en enraizamiento in vitro, propagadas en el Laboratorio de Micropropagación de Plantas del Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB) de CORPOICA. La inoculación se realizó en el momento de la siembra, en el Laboratorio de Ecofisiología Vegetal, utilizando una concentración de 200 esporas por planta. El endurecimiento de plántulas de mora requiere una humedad relativa alta durante los primeros días. En trabajos realizados en CORPOICA se sembraron las plántulas en recipientes plásticos, con una mezcla de sustratos sólidos e inoculados con micorrizas arbusculares y se cubrieron con papel Vinipel, para garantizar una mayor supervivencia de plántulas, en las cuales se obtuvo cerca del 100% de super-vivencia de plántulas endurecidas (Roveda et al, 2007). Cada tres días se aplicó solución nutritiva de Hoagland a todos los tratamientos y cuatro semanas más tarde se pasaron a materas; luego se trasladaron al invernadero.

Sistema de muestreo y variables analizadas

Se realizaron tres muestreos destructivos de la siguiente manera: En la fase de aclimatación (ex vitro), 30 días después de la siembra (dds), y durante la fase de endurecimiento de los materiales, 80 y 120 días después del transplante (ddt). En este momento se cuantificaron los efectos de la inoculación sobre la acumulación de biomasa en plantas, crecimiento vegetal y absorción de nu-trientes. Adicionalmente, se analizó la asociación simbiótica mora-HFMA a través del porcentaje de colonización en raíz de micorrizas arbusculares, empleando la metodología de tinción con Azul de Tripán, propuesta por Phillips & Hayman (1970), para lo cual se tomaron muestras de raíces a los 80 y 120 ddt. El monitoreo de tamaño de planta se realizó a partir de los 83 ddt hasta los 160 ddt, con una frecuencia quincenal.

Se cuantificó la concentración de nutrientes (N, P, K, Ca, Mg y S) en tejido vegetal, teniendo en cuenta la metodología del Laboratorio de Suelos y Tejidos del Programa Nacional de Recursos Biofísicos (CORPOICA). Para la cuantificación del fósforo y el azufre se utilizó el método colorimé-trico mediante Molibdato-Vanadato y Cloruro de Bario, respectivamente. La concentración de K, Mg y Ca en tejido vegetal se determinó mediante espectrometría de absorción atómica y la concen-tración de nitrógeno se determinó por el método de Kjeldahl (AOAC. 16° edición, 1996).

Finalmente, los resultados experimentales obtenidos se compararon estadísticamente, mediante análisis de varianza (P<0,05 y P<0,01) y la prueba de comparación de Tukey, con un nivel de confianza de (P<0,05).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN Aislamiento y recolección de hongos formadores de micorrizas arbusculares con potencial como biofertilizantes.

En la tabla 1 se pueden observar los resultados de análisis del número de esporas/g de suelo, y % de colonización, subdividido en Frecuencia de micorrización (%F), Intensidad de micorrización (%M) e Intensidad de micorrización de los fragmentos infectados (%m), para cada una de las muestras recolectadas.

Inicialmente, se aislaron del suelo esporas de hongos formadores de micorrizas arbuscu-lares (HFMA) en plantaciones de mora, para diferentes localidades de los municipios de Cundina-

Page 47: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

47CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

marca y Antioquia, con el propósito de obtener cepas nativas adaptadas a condiciones de suelo y clima de las zonas productoras de mora.

Los resultados presentan una amplia variación en las poblaciones de HFMA, expresadas en número de esporas por gramo de suelo. Estas diferencias en las poblaciones se registraron entre municipios y dentro de la misma finca, así como para el municipio de Silvania, 70 esporas por gramo de suelo; mientras que para Chocontá, se aislaron 18,8 y 7,9 esporas/g de suelo en dos lotes de una misma finca del departamento de Cundinamarca (Tabla 1). De igual forma, en el departamento de Antioquia, se observaron diferencias importantes entre los municipios de Santa Cruz, La Manuela y Montenevado, con valores promedio de 82, 40 y 54 esporas/g de suelo.

Estos cambios en las poblaciones residentes del hongo, frecuentemente están asocia-dos a las características del suelo: contenido de materia orgánica, tal como se observa en la Figura 1. La reducción en las poblaciones de HFMA puede estar asociada a procesos erosivos, es decir que, durante la pérdida de suelo se presenta un arrastre de esporas y propágulos de hongos formadores de micorrizas arbusculares. Otras posibles explicaciones se relacionan con la incidencia de las prácticas culturales inadecuadas para el manejo de los cultivos, tales como la labranza y el uso excesivo de pesticidas, entre otros. Es importante destacar que en el caso de la Finca Santa Cruz en Antioquia, se presentan los mejores niveles de colonización, acompaña-dos por un alto número de esporas.

El porcentaje de colonización indica el grado de asociación entre la raíz de la planta hos-pedera y los HFMA, esto es, el nivel de simbiosis entre estos dos organismos (Figura 2). Para una mejor interpretación de nivel de asociación, se utilizaron dos variables: La frecuencia de micorri-zación (%F) y la intensidad de micorrización (%m). La primera, representa el porcentaje de raíces colonizadas con relación al número total de raíces observadas, mientras que la segunda repre-senta la intensidad de micorrización de los fragmentos infectados para cada una de las muestras recolectadas, con base en una escala.

Los resultados experimentales muestran diferencias importantes entre localidades res-pecto a la frecuencia de micorrización (Figura 3). Las altas frecuencias observadas en Santa Cruz muestran que los hongos formadores de micorrizas arbusculares pueden asociarse con facilidad a las raíces de plantas de mora, es decir que se trata de una especie vegetal con tendencias mi-cotróficas. Estos resultados sugieren un buen potencial de asociación de mora-HFMA, lo que significa que es posible utilizar tecnologías de biofertilización con éxito en plantaciones de mora. Sin embargo, este éxito de la simbiosis requiere una adecuada selección de cepas y su interacción con los cultivares de mora, debido a que no todos los HFMA son igualmente eficaces al colonizar raíces de plantas de mora.

Respecto a la segunda variable analizada: intensidad de la micorrización (%m), en general, presentó valores muy bajos, inferiores a 25% m, excepto en una de las fincas de Santa Cruz, con 72% m (Figura 4). Estos resultados sugieren que existe algún factor que inhibe el avance de la co-lonización del hongo en la raíz de la planta. Dentro de las posibles explicaciones que se reportan en la literatura está el efecto de las prácticas inadecuadas de manejo en las plantaciones lo cual puede restringir el avance de la asociación simbiótica. Entre tales prácticas se cuentan una exce-siva fertilización, labranza inadecuada y alto uso de pesticidas, entre otros.

Los resultados obtenidos sugieren que, a pesar de existir un alto potencial en la utiliza-ción de hongos formadores de micorrizas en programas de biofertilización, es necesario realizar un proceso de selección de las mejores combinaciones materiales de mora con cepas de HFMA, y además es de gran importancia revisar las prácticas inadecuadas de manejo del cultivo, las cuales pueden estar inhibiendo el grado de asociación simbiótica, aunque se observa una tendencia mi-cotrófica de los materiales de mora cultivados en Cundinamarca y Antioquia.

Page 48: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

48 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Efecto de los HFMA en la acumulación de biomasa de plantas de mora durante la etapa de endurecimiento

La inoculación con HFMA, en este ensayo, se realizó con aislamientos de cepas nativas, los cuales provenían de plantaciones establecidas de mora, a los cuales se hizo identificación taxonómica, para determinar los géneros que se encontraban en cada muestra. La tabla 2 muestra los resulta-dos obtenidos en la identificación de géneros de HMFA.

La acumulación de biomasa en las plantas de mora se determinó a nivel de la parte aérea de la planta (tejido foliar) y en la raíz. Durante la fase inicial de aclimatación (30 dds) no se encontraron diferencias significativas entre tratamientos para materia seca foliar y fresca radical, de acuerdo con el análisis de varianza (GLM). No obstante, a partir de los 80 ddt, durante la etapa de endurecimiento, se presentaron diferencias altamente significativas (Figura 5).

Durante la fase de aclimatación se inicia el proceso de establecimiento de la colonización del hongo a las raíces de plántulas de mora, por lo tanto, en esta etapa no se observan beneficios en la planta. Por el contrario, el hongo demanda fotosintatos de carbono provenientes de la planta para su crecimiento, durante la colonización.

Los beneficios de la asociación simbiótica se presentaron en la etapa de endurecimiento, una vez establecida la simbiosis en el sistema radical de las plántulas, posiblemente con la forma-ción de arbúsculos o hifas tipo coil, tal como se explica a continuación: Las diferencias debidas a la fertilización se pueden observar al comparar los tratamientos testigo, donde el testigo T100 mostró los valores más altos en acumulación de materia seca, superiores a testigo absoluto (sin fertilización), similares al testigo T50 a los 80 ddt, pero ligeramente más altos, en las variables peso seco foliar y peso fresco radical.

En los tratamientos micorrizados se destacó la cepa MA4 con 50% de fertilización en la acumulación de materia seca foliar y fresca radical a los 80 ddt, con relación a las demás cepas. Es importante resaltar que estas diferencias de la cepa MA4 (50%) superaron al testigo absoluto y T50, pero presentaron valores similares al testigo comercial (T100), en materia seca (foliar y radical). Las otras cepas como MA1, MA2, MA3, Mycobiol presentaron valores similares al trata-miento testigo T50, con un 50% de fertilización.

Los resultados permiten ver el efecto benéfico de la cepa MA4 sobre la acumulación de biomasa y muestran la capacidad de esta cepa para sustituir el 50% de la fertilización en plantas de mora al presentar resultados superiores a T50, y similares al testigo comercial con el 100% de la fertilización (T100).

Efecto de las Micorrizas Arbusculares sobre la absorción de nutrientes en plantas de mora

A partir de la determinación de la concentración de nutrientes en tejido vegetal y los valores de materia seca vegetal, cuantificados en los laboratorios de ecofisiología vegetal y química de suelos, se calculó la absorción de nutrientes esenciales en plantas de mora a los 120 ddt. Los nutrientes analizados fueron nitrógeno (N), fósforo (P), potasio (K), calcio (Ca), magnesio (Mg) y azufre (S).

Respecto a la absorción de N, las plantas inoculadas con la cepa MA4 (236.91 mg/planta) fueron significativamente superiores al testigo absoluto (24.81 mg/planta) y a la cepa MA2 (86.63 mg/planta), pero similares a los demás tratamientos, T100 con 173.11 mg/planta, T50 con 132.76 mg/planta y las cepas MA1 (142.57 mg/planta), MA3 (115.22 mg/planta) y Mycobiol (129.16 mg/planta), según Tukey (Figura 6).

Page 49: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

49CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

En muchos de los procesos vitales, las plantas requieren del nitrógeno en grandes cantida-des, pues éste forma parte de compuestos esenciales para las células, tales como los aminoácidos y los ácidos nucleicos. Por tanto, la deficiencia del nitrógeno inhibe rápidamente el crecimiento de la planta. Esta deficiencia se puede ver en las plantas inoculadas con la cepa MA2 que tuvieron un comportamiento similar al del testigo absoluto, con un menor crecimiento y desarrollo y pre-sentan plantas de menor porte, respecto a los otros tratamientos. Estos resultados muestran la importancia de los HFMA, particularmente la cepa MA4. No sólo se limita a mejorar la absorción de fósforo, sino que participa en la toma de nutrientes esenciales como el nitrógeno.

Con relación a la absorción de fósforo, se destacan las plantas inoculadas con la cepa MA4 seguida del tratamiento T100, con valores de 14.44 y 12.83 mg/planta, los cuales fueron similares entre sí y significativamente superiores (P<0.05) al testigo absoluto con 2.612 mg/ planta, según Tukey. Los demás tratamientos T50, MA1, MA2, MA3 y Mycobiol presentaron valores intermedios entre 6.37 y 9.47 mg/planta, similares tanto al tratamiento MA4 y T100, como al testigo absoluto.

Es importante recordar que la fertilización fosfatada de los tratamientos con HFMA fue sólo del 50% respecto al testigo comercial, con 100% de fertilización y, sin embargo, según el análisis estadístico, las inoculaciones con cepa MA4 fueron similares al testigo comercial T100, en cuanto a la absorción de fósforo. Los resultados obtenidos concuerdan con lo citado por algunos autores, entre ellos Sanders y Tinker (1973) y Jakobsen (1995), quienes dicen que la absorción de fósforo por los tejidos radicales puede ser influenciada positivamente por la presencia de los HFMA. Sin embargo, este aumento en la eficiencia de la absorción de fósforo está determinado por la cepa utilizada. Así, la cepa MA4, fue la más eficiente, mientras que la cepa MA2 fue la menos eficiente, aunque no se detectaron diferencias significativas entre los dos tratamientos.

Con relación a los fertilizantes fosfatados se ha establecido que, en presencia de los HFMA, inducen en sus hospederos una mayor eficiencia, cuando estos se aplican en cantidades moderadas que no inhiben la actividad micorrícica (Sieverding, 1991). El fósforo es un elemento importante para las plantas porque participa en la respiración, en la fotosíntesis, actúa en el metabolismo de las plantas en forma de ATP y hace parte de los ácidos nucléicos como el ADN y ARN.

Con relación a la absorción de calcio, se destacan el testigo T100 y las plantas inoculadas con la cepa MA4, con valores de 16.88 y 18.46 mg/ planta, los cuales fueron similares entre sí y significativamente superiores (P<0.05) al testigo absoluto con 3.68 mg/ planta. Los demás trata-mientos presentaron valores intermedios entre T100, MA4 y T absoluto, con los siguientes valores: 12.43 mg/ planta para T50 y niveles de absorción entre 8.04 y 10.14 mg/planta para plantas inocu-ladas con las cepas MA1, MA2, MA3 y Mycobiol.

El calcio es un nutriente de vital importancia en procesos como la división celular (mitosis) y es un constituyente fundamental para el normal funcionamiento de las membranas celulares. Además, se considera un segundo mensajero para las diversas respuestas de la planta al medio ambiente y está relacionado con la acción de varias fitohormonas. Su deficiencia se manifiesta como una necrosis en las zonas meristemáticas, tales como yemas apicales y nuevas raíces (Taiz y Zeiger., 2006).

En cuanto a la absorción de magnesio, nuevamente la cepa MA4 de los hongos de micorri-zas mostró los mayores niveles de absorción de este nutriente: 11.9 mg/planta. Estos valores fueron significativamente superiores al testigo absoluto con 2.18 mg/planta y similares a los otros trata-mientos, T100 con 9.65 mg/planta, T50 con 7.37 mg/planta, y los micorrizados, MA1 (6.58 mg/planta), MA2 (5.23 mg/planta), MA3 (6.38 mg/planta) y Mycobiol (6.65 mg/planta), de acuerdo con Tukey.

El magnesio participa en la activación de las enzimas involucradas en los procesos de respiración, fotosíntesis y en la síntesis de ADN y ARN y hace parte de la molécula de clorofila. La deficiencia de este nutriente se ve reflejada en una pérdida prematura de las hojas, por tanto es de vital importancia para las plantas (Taiz y Zeiger., 2006).

Page 50: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

50 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Como síntesis de los principales resultados obtenidos, se observa un provechoso efecto de la inoculación con HFMA con relación a la absorción de nutrientes esenciales (N, P, Ca y Mg) en tejido vegetal. Sin embargo, es importante anotar que no todas las cepas contribuyen en igual forma a mejorar la absorción de nutrientes en plantas de mora. Las plantas inoculadas con la cepa MA4 muestran mayor nivel de absorción de nutrientes, seguida por el tratamiento T100, mientras que el testigo absoluto y MA2 son los tratamientos con menores niveles nutricionales en plantas de mora a los 125 días después del transplante, como se ilustra en las Figuras 6 y 7.

CONCLUSIONES

Los resultados sugieren que existe un alto potencial en la utilización de hongos formadores de micorrizas en programas de biofertilización, por la condición micotrófica de la planta de mora. Sin embargo, se hace necesario realizar un proceso de selección de las mejores combinaciones ma-teriales de mora con cepas de HFMA. De igual forma, es de gran importancia revisar las prácticas de manejo del cultivo, las cuales pueden estar inhibiendo el grado de asociación simbiótica.

Los mayores beneficios de la micorrización se lograron con la inoculación de plántulas con la cepa MA4, procedente de la finca El Arenal en Silvania, Cundinamarca, con esporas nativas de los géneros Glomus sp y Acaulospora sp. Las plantas de mora mostraron mejor adaptación al medio, expresada en acumulación de biomasa foliar y radical y en mejor estado nutricional, con mayor absorción de nutrientes esenciales (P, N, Ca y Mg).

La inoculación de la cepa MA4 hace posible sustituir el 50% de la fertilización comercial, tal como lo corroboran los resultados obtenidos. Es así como plantas inoculadas con esta cepa presentaron absorciones similares de fósforo y calcio al testigo comercial, T100, y superiores a éste en absorciones de nitrógeno y magnesio.

Las anteriores conclusiones permiten considerar la cepa MA4 como promisoria en pro-gramas de biofertilización en plantaciones de mora y componente importante de la Buenas Prác-ticas Agrícolas (BPA), en cultivos convencionales o de producción limpia.

BIBLIOGRAFÍA

Alarcón, A., Ferrera-Cerrato, R. 2000. Ecología, fisiología y biotecnología de la micorriza arbuscular. IRENAT-Colegio de Postgraduados. Montecillo. Mundi Prensa, México. p. 141-148.

Angulo, R. 2003. Frutales exóticos de clima frío moderado. Bayer Crop Science S.A. p. 99-118.Asohofrucol, Fondo Nacional de Fomento Hortofrutícola, Departamento Administrativo

Nacional de Estadística, SISAC, Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. 2004. I Censo nacional de 10 frutas agroindustriales y promisorias. 63 p.

Ávilan, L., Bautista, D., Leal, F., 1989. Manual de fruticultura. Maracay: América, p. 1111 - 1132.Azcón-Aguilar, C., M. Cantos., A. Troncoso., y J.M. Barea. 1997. Beneficial effect of ar-

buscular mycorrhizas on acclimatization of micropropagated cassava plantlets. Scientia Horticulturae. 72: 63-71.

Broome, O.C., Zimmerman, R.H. 1978. In vitro propagation of blackberry and tayberry. Hort Res. 18: 141-143.

Castro R., D., Gaviria G. B.M. 1995. Propagación in vitro de especies del género Rubus. Rione-gro, Universidad Católica de Oriente, Fundación de Fomento Agropecuario Buen Pastor. Serie Investigaciones 10. 10 p.

Echeverry L, 2003. Bioprospección en productos naturales. Instituto Alexander Von Hum-boldt y Programa de Política y legislación Proyecto de Accesos a Recursos Genéticos. Informe de Trabajo. Medellín Colombia. 44p.

Page 51: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

51CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Elmeskaoui, A., Damont, J.P., Poulin, M. J., Piche, Y., Desjardins, J. 1995. A Triparttite cul-ture systems for endomycorrizhal inoculation of micropropagated strawberry plantlets in vitro. Mycorrhizal. 5: 313-319.

Encina, L.C. 1996. Enraizamiento y aclimatación de plantas obtenidas in vitro. Encuentros en la biología. Nº. 31.

Fortuna, P., Citernesi, A.S., Morini, S., Vitagliano, C., Giovannetti, M. 1996. Influence of ar-buscular mycorrhizae and phosphate fertilization on shoot apical growth of micropropa-gated apple and plum rootstocks. Tree Physiology. 16: 757-763.

Franco, G., Giraldo, J.M. 1998. El cultivo de la mora. Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria, CORPOICA. Regional 9. Programa Nacional de Transferencia de Tecnología Agropecuaria, PRONATTA. Manual de asistencia Técnica. LITOAS, Manizales. p. 9-14.

Gianinazzi, S., Gianinazzi-Pearson, V., Trouvelot, A. 1990. Role and use of mycorrhizas in horticul-tural crop production. 23rd I.H.C. Plenary Lectures. Intern. Soc. for Hort. Sci. p. 25-30.

Guillemin, J. P., Gianinazzi, S., Trouvelot, A. 1992. Screening of VA endomycorrhizal fungi for establishment of micropropagated pineapple plants. Agronomie. 12: 831-836.

Jaizme-Vega, M.C., Barea, J.M. 1992. VAM inoculation of micropropagated banana plantlets (Musa acuminata Colla AAA) in the Canary Islands. Meeting Cost 8.10. 20-23 Mayo. Dijon. Francia.

Jaizme-Vega, M.C. 1999. Aplicaciones de las micorrizas arbusculares (MA) sobre plataneras micropropagadas. En: Rosales, F.E., S.C. Tripon y J. Cerna, editores. 1999. Producción de banano orgánico y/o, ambientalmente amigable. Memorias del taller internacional realiza-do en la EARTH, Guácimo, Costa Rica, 27-29 de Julio de 1998. Red internacional para el mejoramiento del banano y el plátano, Montpellier, Francia.

Jaizme-Vega M.C., Azcón, R. 1995. Response of some tropical and subtropical cultures to endomycorrhizal fungi. Mycorrhiza. 5: 213-217.

Jakobsen I., 1995. Transport of phosphorus and carbon in VA mycorrhizas. In A Varma, B Hock, eds, Mycorrhiza. Springer-Verlag, Berlin. p. 297–324.

Lovato, P.E., Hammat, N. H, Gianinazzi-Pearson, V., Gianinazzi, S. 1994. Mycorrhization of micropropagated mature wild cherry (Prunus avium L.) and common ash (Fraxinus excel-sior L.). Agriculture Science in Finland. 3: 297-303.

Lovato, P.E., Gianinazzi-Pearson, V., Trouvelot, A., Gianinazzi, S. 1996. The state of art of mycorrhizas and micropropagation. Advanced Horticulture Science. 10: 46-52.

Nemec, S. 1986. Mycorrhizae in horticulture system. In Ecophysiology of VA Mycorrhzal plants. (Ed G.R. Safir), CRC, Boca Ratón. Fl. p. 193-211.

Phillips, J.M., y Hayman, D.S., 1970. Improved procedure for clearing roots and staining para-sitic and vesicular-arbuscular fungi for rapid assessment of infection. Trans. British Mycol. Soc. 55: 158-161.

Rapparini F., Baraldi, R., Bertazza, C., Branzanti, B., Predieri, S. 1994. Vesicular-arbuscular mycorrhizal inoculation of micropropagated fruit trees. J. Hortic. Sci. 69: 1101-1109.

Roveda, G., Cabra, L., Ramírez, M., Peñaranda A. 2007. Efecto de las micorrizas arbusculares sobre la aclimatación y endurecimiento de microplántulas de mora (Rubus glaucus). Re-vista Corpoica – Ciencia y Tecnología Agropecuaria. 8: 41-49.

Sanders F.E., Tinker P.B., 1973. Phosphate flow into mycorrhizal roots. Pestic. Sci. 1973; 4: 385-395. Schubert A., Mazzitelli, A. 1988. Effect of vesicular-arbuscular mycorrhizae on growth of in vitro propagated Pistascia integerrima. Acta Hortic. p. 441-443.

Schubert A., Bodrino, C., Gribaudo, L. 1992. Vesicular-arbuscular mycorrhizal inoculation of kiwifruit (Actinidia deliciosa) micropropagated plants. Agronomie. 12: 847-850.

Schultz, C. 2001. Effect of (vesicular-) arbuscular mycorrhiza on survival and post vitro de-velopment of micropropagated oil palms (Elaeis guineensis Jacq.). p. 5-14. Elektronische Dissertatioonen der Georg-Aug-Universität Göttingen. http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/2002/schultz/index.html

Sieverding, E. 1991. Vesicular-arbuscular mycorrhiza management in tropical agrosystem. Germany: GTZ. 370 p.

Sutter, E.G. 1985. Morphological, physical and chemical characteristics of epicuticular wax on ornamental plants regenerated in vitro. Ann Botanic. 55: 321-329.

Taiz, L. and Zeiger, E. 2006. Plant Phisilogy. Fourth edition. Sinauer Associates, Inc. p. 75-82.

Page 52: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

52 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Varma, A., Schüepp, H. 1995. Mycorrhization of the commercially important micropropa-gated plants. Critical Reviews in Biotechnology. 15: 313-328.

Vestberg M., Estaún, V. 1994. Micropropagated plants, an opportunity to positively manage mycorrhizal activities. En: Impact of arbuscular mycorrhizas on sustainable agriculture and natural ecosystems. Birkhäuser, Basel. p. 217-226.

Ziv, M., Schwartz, A., Fleminger, A. 1987. Malfunctioning stomata in vitreous leaves of carna-tion (Dianthus caryophyllus) plants propagated in vitro, implication of ardening. Plant Sci. 52: 127-134.

TABLAS Y FIGURAS

Tabla 1. Resultado de análisis de micorrizas en el cultivo de mora, en fincas de Cundinamarca y Antioquia

Departamento Municipio Finca %F %M %m N° sporas/g

Cundinamarca Silvania El Arenal 53.33 3.00 5.63 70.0Cundinamarca Chocontá Saucido 18.8Cundinamarca Chocontá Saucido 7.9Cundinamarca Fusagasugá Santa Lucía 33.0Antioquia Envigado Santa Cruz 86.66 9.26 10.69 76.0Antioquia Envigado Santa Cruz 100.00 72.50 72.50 74.0Antioquia Envigado Santa Cruz 80.00 23.30 29.13 96.0Antioquia Envigado La Manuela 37.50 10.00 26.60 36.0Antioquia Envigado La Manuela 12.50 0.13 1.00 22.0Antioquia Envigado La Manuela 40.00 0.40 1.00 63.0Antioquia Envigado Montenevado 53.85 8.69 16.14 78.0Antioquia Envigado Montenevado 61.53 0.92 1.50 42.0Antioquia Enviqado Montenevado 15.38 0.15 1.00 42.0

Tabla 2. Géneros identificados en los aislamientos de cepas nativas de HFMA procedentes de cultivos establecidos de mora.

Cepa HMA Géneros de HMA

MA 1Gigaspora spAcaulospora spGlomus sp

MA 2 Acaulospora spGlomus sp

MA 3

Gigaspora spAcaulospora spGlomus spScutellospora sp

MA 4 Acaulospora spGlomus sp

Page 53: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

53CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Figura 1. Relación entre el número de esporas/gramo de suelo y el porcentaje de materia orgánica en fincas de Cundinamarca y Antioquia

ANTIOQUIA CUNDINAMARCA

Figura 2. Raíces de plantas de mora colonizadas por hongos formadores de micorrizas arbusculares de Cundinamarca y Antioquia (Fuente, Roveda et al., 2007)

% M

ater

ia o

rgán

ica

Page 54: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

54 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Figura 3. Frecuencia de micorrización en cultivos de mora en fincas de Antioquia.

Figura 4. Intensidad de micorrización en cultivos de mora en fincas de Antioquia.

Page 55: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

55CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Figura 5. Efecto de micorrizas arbusculares sobre el peso seco de plántulas de mora 80 días después del transplante.

Figura 6. Efecto de micorrizas arbusculares en la absorción de nitrógeno en plántulas de mora, 120 días después del transplante.

Letras diferentes indican: Diferencias altamente significativas (P<0.05), de acuerdo con la Prueba de Tukey.

Page 56: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

56 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Figura 7. Efecto de micorrizas arbusculares en la absorción de nutrientes (P, Ca, Mg) en plántulas de mora, 120 días después del transplante.

Page 57: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

57CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

PROMOCIÓN DE CRECIMIENTO EN ENDURECIMIENTO DE PLÁNTULAS

DE MORA PRODUCIDAS IN VITRO (EFECTO DE LA APLICACIÓN DE TRICHODERMA

KONINGIOPSIS TH003)

Beltrán Acosta Camilo Rubén1, Cotes Prado Alba Marina1

RESUMEN

Con el propósito de mejorar las condiciones en el establecimiento de plántulas de mora pro-ducidas in vitro, se evaluó un bioplaguicida a base de Trichoderma koningiopsis (Th003) a una

concentración de 1x106 conidios.mL-1 en dos frecuencias de aplicación, una cada siete días y otra cada 14 días desde el momento de la siembra, como parte del proceso de endurecimiento utili-zando turba como sustrato. Las variables evaluadas fueron peso fresco y peso seco. De acuerdo con los resultados obtenidos se seleccionó la aplicación del bioplaguicida cada 14 días, con el cual se obtuvieron los mayores valores de peso seco promedio (0.22 g.) con más del 46.6% y 33.3% en producción de biomasa respectivamente con relación al testigo (0.15 g.) y con la aplicación del bioplaguicida cada 7 días (0.17 g.), este último tratamiento sólo presentó un 13.3% de aumento en biomasa con relación al testigo. Así mismo se observó mejor establecimiento, desarrollo y vigor de las plántulas reflejado en el crecimiento del sistema radicular, tallos y hojas.

El resultado obtenido evidenció que la aplicación del bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) en plántulas de mora producidas in vitro presentó efectos benéficos en su crecimiento y adaptabilidad al sustrato.

PaLaBraS cLave: Rubus glaucus, Trichoderma koningiopsis, bioplaguicida, promoción de crecimiento, producción limpia.

INTRODUCCIÓN

Una estrategia para el manejo de los problemas fitosanitarios en un programa de agricultura sos-tenible, es el control biológico, utilizado de manera integral con las diversas prácticas culturales usadas en el manejo del cultivo. El uso de buenas prácticas para la producción de la mora es un requisito indispensable para su comercialización y para la apertura de nuevos mercados. Dentro de ese contexto, la implementación de sistemas de producción de semilla de alta calidad que

1 Laboratorio de Control Biológico, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.

Autor de correspondencia: Alba Marina Cotes, Ph.D. Fitopatología, e-mail: [email protected]

Page 58: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

58 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

asegure la sanidad del cultivo, es un paso esencial para la producción limpia, siendo el control biológico uno de los elementos principales.

El control biológico de los agentes patógenos de las plantas se define como la reducción del inóculo de un agente patógeno o de su actividad patogénica mediante la utilización de uno o más organismos diferentes al hombre (Baker, 1987). Los microorganismos biocontroladores han demostrado ventajas frente al uso de moléculas químicas ya que no generan riesgos para el medio ambiente; no son tóxicos; no presentan problemas de residualidad y, en muchos casos, la eficacia demostrada ha sido comparable a la de otros productos químicos recomendados (Van Lenteren, 2000, Shtienberg y Elad, 2002).

Ciertos agentes biocontroladores como Trichoderma spp. utilizan varios mecanismos de acción para controlar un agente patógeno.

Diferentes autores han atribuido el fenómeno de control del micoparasitismo y a la capacidad de este antagonista para producir toxinas. Dicho fenómeno ha explicado el control ejercido por diferentes cepas contra Rhizoctonia solani y Sclerotinia americana (Weinding, 1934), Phytophtora spp. (Howel y Stipanovic, 1980), Pythium ultimum (Lumsden et al., 1992), entre otros. Otros autores han atribuido el fenómeno de control a la competencia del hongo por espacio y nutrientes y particularmente por la habilidad de algunas cepas para colonizar la rizósfera (Howel et al., 2000; Harman, 2001). Recientemente, se ha evidenciado que el fenómeno de control de diversos agentes patógenos depende de la producción de enzimas líticas de Trichoderma spp. del tipo quitinasas y glucanasas. Estas enzimas demuestran capacidad para romper los polisacáridos quitina y B-glucanos, constituyentes de la pared de los agentes patógenos que le confieren rigidez a su pared celular (Howell, 2003). Esta acción enzimática ha sido descrita en la interacción ce-bolla- Sclerotium cepivorum - T. koningii (Metcalf y Wilson, 2001). Igualmente, Lorito et al. (1998), transfirieron el gen que codifica una endoquitinasa de T. harzianum en tabaco y papa y obtuvieron en estas plantas una resistencia de amplio espectro contra diferentes agentes patógenos. Otro concepto interesante con relación a la acción de la enzimas de Trichoderma spp. es descrito por Elad y Kapat (1999), quienes demostraron que la protección conferida por T. harzianum contra B. cinerea en fríjol se debe, principalmente, a la producción de proteasas que inactivan las exo y endopoligalacturonasa, pectin-metilesterasa, pectato liasa poligalacturonasa, celulasa y cutinasa del agente patógeno. El principal rol fue atribuido a una cistein proteasa (Elad, 2000).

Del mismo modo, la inducción de resistencia en la planta hospedera es otro mecanismo que ha sido demostrado en plántulas de cohombro en las que, después de la inoculación con T. har-zianum se observó aumento de las actividades de peroxidasa y quitinasa, así como acumulación de calosa (Yedidia et al., 1999). Posteriormente, en la misma interacción se demostró que la inoculación con T. harzianum inducía diferentes proteínas relacionadas con la patogénesis dentro de las que se destacan hidrolasas (Yedidia et al., 2000). Un estudio similar demostró que, al inocular semillas de algodón con T. virens o con sus filtrados de cultivo, se estimula en las raíces de las plántulas, la sínte-sis de altas concentraciones de terpenoides altamente inhibitorios de R. solani (Howell et al., 2000). También se demostró que, al aplicar T. harzianum en sitios espacialmente separados de aquel en el que se inoculaba B. cinerea se logra entre un 25 y un 100% de reducción de la enfermedad en tomate, lechuga, pimentón, fríjol y tabaco. Este efecto se relacionó con la inducción de resistencia sistémica lo cual ha sido igualmente demostrado cuando se usa una cepa de T. hamatum en rábanos (Krause et al., 2003), y en pepino (Khan et al., 2004) y una cepa de T. harzianum contra Phytophtora capsici en pimiento. En este último se observó acumulación de capsidiol (Sid Ahmed et al., 2000).

Un efecto de Trichoderma que también podría tener un rol en el control ejercido contra diferentes elementos patógenos es la estimulación del crecimiento vegetal, ya que este microor-ganismo tiene la habilidad de incrementar la tasa de crecimiento y desarrollo de las plántulas, en

Page 59: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

59CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

especial del sistema radical. Este efecto estimulante de crecimiento causado por Trichoderma ha sido demostrado al aplicae T. harzianum en plántulas de pepino, lo cual se atribuye a la penetración del biocontrolador dentro de las raíces y el control de agentes patógenos en la rizósfera. Esta respuesta ha sido descrita por Ahmad y Baker (1987) en cultivos de pepino, arveja, tomate y rá-bano, y, además, Windham et al. (1986) en tabaco y tomate, entre otros autores. Se han sugerido algunas explicaciones a este fenómeno que involucran desde la inhibición y alteración de la micro-flora normal de las raíces, la producción de sustancias estimuladoras del crecimiento (factores de crecimiento y fitohormonas) y la liberación de nutrientes en el suelo (Yedidia et al., 1999).

En el Laboratorio de Control Biológico del Centro de Biotecnología y Bioindustria de CORPOICA (CBB), se realizan diferentes investigaciones que han permitido aislar, seleccionar, producir, formular y evaluar microorganismos nativos altamente eficaces en el control de agentes fitopatógenos. Es el caso del hongo nativo T. koningiopsis (aislamiento Th003) con el cual se ha obtenido entre 70% y 100% de control en los siguientes patosistemas: R. solani en fríjol (Cotes, 1993); P. splendens en fríjol y pepino (Cotes et al., 1996); R. solani y Fusarium oxysporum f.sp. lyco-persici en tomate (Cotes et al., 2001); B. cinerea y Oidium sp. en tomate (Moreno, 2003); Sclerotinia sclerotiorum en lechuga y Alternaria dauci en cilantro (Villamizar et al., 2004). Dichos modelos han involucrado actividades a nivel de laboratorio, pruebas experimentales bajo condiciones contro-ladas en invernadero y a nivel de cultivos comerciales, en campo abierto e invernadero.

A este aislamiento no solamente se le ha atribuido una acción directa en el control de fitopatógenos en la interacción tomate - F. oxysporum (Cotes, 2001), sino un efecto de inducción del crecimiento vegetal (Cotes et al., 2001) y un efecto en inducción de respuestas de defensa en las plantas (Cotes et al., 1996; Cotes et al., 2001).

A partir de este aislamiento se ha desarrollado en CORPOICA un bioplaguicida micro-biano el cual consiste en un granulado dispersable que puede ser aplicado directamente al suelo o dispersado en agua y se utiliza para el tratamiento de semillas y sustratos de siembra, ya que pue-de ser empleado con equipos comunes de aspersión. El presente artículo muestra los resultados obtenidos con el bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) en material de mora seleccionado participativamente con agricultores de Silvania (ver artículo Espinosa et al., de esta compilación).

MATERIALES Y METODOS

Se evalúo el efecto de la aplicación de un bioplaguicida granulado a base de T. koningiopsis Th003 (Figura 1) sobre la promoción de crecimiento vegetal en plántulas de mora de las accesiones Monteloro, Monterrico y Sin Espinas seleccionadas de acuerdo a criterios participativos con agri-cultores de Silvania y propagadas in vitro en el Laboratorio de Micropropagación de Plantas del CBB (ver artículos Espinosa et al. y Valderrama et al. de esta compilación, Figura 2).

Ocho días previos al transplante de las plántulas de mora, se humedeció según la capacidad del campo, el sustrato de siembra (turba) con una suspensión del producto granulado Th003 a una concentración de 1x106 conidios.mL-1, con el fin de establecer el antagonista en el sustrato. Previo al transplante, las plántulas de 28 días in vitro, de las tres accesiones mencionadas se sumergieron en una suspensión de Th003 a igual concentración (Figura 3). Se realizaron tres tratamientos: un primer tratamiento (testigo) consistió en plántulas sembradas en sustrato humedecido a capacidad de campo con agua de la llave y dos tratamientos con sustrato humedecido con una suspensión del bioplaguicida Th003 a una concentración de 1x106 conidios.mL-1. Estos últimos se diferenciaron en las aplicaciones de refuerzo del bioplaguicida, realizadas cada siete días durante un mes y aplicacio-nes de refuerzo cada catorce días durante un mes en el proceso de endurecimiento.

Page 60: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

60 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Al evaluar el peso seco promedio de las plantas, se encontraron diferencias significativas entre el peso seco de las plantas tratadas con el bioplaguicida granulado de Th003, aplicado en el momen-to del transplante, con una frecuencia de 14 días, respecto a los demás tratamientos. Presentaron un peso seco promedio de 0.22 gramos con más del 46.6% en la producción de biomasa respecto al testigo 33.3% (0.15 g.) y con la aplicación del bioplaguicida granulado cada 7 días (0.17 gramos) (Figuras 4 y 5).

El peso seco entre plántulas con aplicación del bioplaguicida granulado aplicado al mo-mento del transplante cada 7 días durante un período de 28 días (0.17 g.) y el testigo absoluto (0.15 g.), no presentó diferencias significativas (Figura 5). Sin embargo, cuando las plántulas fueron tratadas con el bioplaguicida cada 14 días, durante la fase de endurecimiento, se adaptaron mejor y presentaron los mayores valores de peso seco promedio con relación a los demás tratamientos (Figuras 4 y 5). En las plantas correspondientes al testigo se observó menor crecimiento y de-sarrollo del sistema radicular, tallos y hojas, además de hojas secas y cloróticas debido al estrés ocasionado al retirarlos del contenedor y del medio de crecimiento.

Con la aplicación de T. koningiopsis, las plantas presentaron una mejor tolerancia y adapta-bilidad al sustrato y se observaron efectos benéficos en el crecimiento y desarrollo de las plantas respecto al control (Figuras 4 y 5).

CONCLUSIÓN

La aplicación del bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) en plántulas de mora producidas in vitro produjo efectos benéficos en su crecimiento y adaptabilidad al sustrato.

AGRADECIMIENTOS

Al Laboratorio de Micropropagación de Plantas del Centro de Biotecnología y Bioindustria de CORPOICA por proveer el material multiplicado in vitro.

BIBLIOGRAFÍA

Ahmad, J.S., Baker, R. 1987. Rhizosphere competence of Trichoderma harzianum. Phytopa-thology. 77:182-189.

Baker, K.F. 1987. Evolving concepts of biological control of plants pathogens. Annual Review of Phytopathology. 25: 67-85.

Cotes, A.M. 1993. Study of common bean protection against damping-off by treatment of seeds with Trichoderma koningii Oudemans. Tesis de Doctorado. Gembloux, Facultad de Ciencias Agronómicas. Bélgica. 120 p.

Cotes, A. M., Lepoivre, P., Semal, J. 1996. Correlation between hydrolytic enzyme activi-ties measured in bean seedlings after Trichoderma koningii treatment combined with pregermination and the protective effect against Pythium splendens. European Journal of Plant Pathology. 102: 497-506.

Cotes, A.M. 2001. Biocontrol of fungal plant pathogens - from the discovery of potential bio-control agents to the implementation of formulated products. IOBC Bulletin. 24: 43-47.

Cotes, A. M., Cárdenas, A., Pinzón, H. 2001. Effect of seed priming in the presence of Tri-choderma koningii on seed and seedling disease induced in tomato by Rhizoctonia solani and Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. IOBC Bulletin. 24: 259-263.

Page 61: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

61CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Elad, Y., Kapat, A. 1999. The role of Trichoderma harzianum protease in the biocontrol of Botrytis cinerea. European Journal of Plant Pathology. 105:177-189.

Elad, Y. 2000. Trichoderma harzianum T 39 preparations of biocontrol of plant disease- con-trol of Botrytis cinerea, Sclerotinia sclertiorum and Cladisoporium fulvum. Biocontrol science and technology. 10: 499-507.

Harman, G.E. 2001. Myths and dogmas of biocontrol: Changes in perceptions derived from research on Trichoderma harzianum T22. Plant Disease. 84: 377-393.

Howell, C.R., Stipanovic, R.D. 1980. Suppresion of Phytium ultimatum induced damping-off cotton seedlings by Pseudomonas fluorescents and its antibiotic pyoluteorin. Phytopatho-logy. 70: 712-715.

Howell, C.R., Hanson, L.E., Hanson, L.E., Stipanovic, R.D., Puckhaber, L.S. 2000. Induction of terpenoid synthesis in cotton roots and control of Rhizoctonia solani by seed treatment with Trichodema virens. Phytopathology. 90: 248-252.

Howell, C.R. 2003. Mechanisms employed by Trichoderma species in the biological control of plant diseases: The history and evolution of current concepts. Plant Disease. 87: 4-10.

Khan, J., Ooka, J.J., Miller, S.A., Madden, L.V., Hoitink, H.A.J. 2004. Systemic resistance in-duced by Trichoderma hamatum 382 in cucumber against phytophthora crown rot and leaf blight. Plant Disease. 88: 280-286.

Krause, M.S., De Ceuster, T.J., Tiquia S.M., Michel Jr., F.C., Madden L.V., Hoitink, H.A. 2003. Isolation and characterization of rhizobacteria from composts that suppress the severity of bacterial leaf spot of radish. Phytopathology. 93: 1292-1300.

Lorito M., Woo S.L., Garcia-Fernandez I., Colucci G., Harman G.E., Pintor-Toro J.A., Filip-pone E., Muccifora S.,Lawrence C., Zoina A., Tuzun S., Scala F. 1998. Genes from myco-parasitic fungi as a source for improving plant resistance to fungal pathogens. Proceedings of National Academy of Sciences USA. 95: 7860-7865.

Lumsden, R.D., Locke, J.C., Adkins, S.T. Walter, J.F., and Ridout, C.J. 1992. Isolation and localization of the antibiotic gliotoxin produced by Gliocladium virens from alginate prill in soil and soilless media. Phytopathology. 82: 230-235

Metcalf D.A., Wilson C.R. 2001. The process of antagonism of Sclerotium cepivorum in white rot affected onion roots by Trichoderma koningii. Plant Pathology. 50: 249-257.

Moreno, C.A. 2003. Control biológico de enfermedades foliares del cultivo del tomate (Lyco-persicon esculentum Mill.) con énfasis en mildeo polvoso (Oidium sp.). Trabajo de grado. Ingeniero Agrónomo. Universidad Nacional de Colombia. 106p.

Shtienberg, D., Elad, Y. 2002. Is it possible to cope with variability of biological control? (abstract). En: Y. Elad, J. Köhl y N. Delen (eds.). Influence of abiotic and biotic factors on biocontrol agents. Seventh meeting of the working group IOBC. May. Turkia. Pune Bay, Kusadasi. p.19.

Sid Ahmed, A., Pérez, C., Candela M.E. 2000. Evaluation of induction of systemic resistance in pepper plants (Capsicum annuum) to Phytophthora capsici using Trichoderma harzianum and its relation with capsidiol accumulation. European Journal of Plant Pathology. 106: 817-824.

Van Lenteren, J.C. 2000. A greenhouse without pesticides: fact or fantasy?. Crop Protection. 19: 375-384.

Villamizar, L., Moreno, C., Paris, A., Cotes, A., Garzón, C. 2004. Development of biopesticide prototypes for controlling pathogens in vegetables. En: Diseases Biocontrol. International Workshop: Development of biocontrol agents of diseases for commercial applications in food productions systems. Book of abstracts. Sevilla, España. Ediciones de la UdL. p. 136.

Weinding R. 1934. Studies on a lethal principle effective in the parasitic action of Trichoderma lignorum on Rhizoctonia solani and other soil fungi. Phytopathology. 24: 1153-1179.

Windham, M., Elad, Y., Baker., R. 1986. Mechanism for increased plant growth induced by Trichoderma spp. Phytopathology. 76: 518-521.

Yedidia, I., Benhamou, N., Chet, I. 1999. Induction of defense in cucumber plants (Cucumis sativus L.) by the biocontrol agent Trichoderma harzianum. Applied Environmental Micro-biology. 65:1061-1070.

Yedidia, I., Benhamou, N., Kapulnik, Y., Chet, I. 2000. Induction and accumulation of pathoge-nesis related protein activity during the early stages of root colonization by Trichoderma harzianum. Plant Physiology and Biochemistry. 38: 863-873.

Page 62: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

62 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

FIGURAS

Figura 1. A. Observación microscópica de T. koningiopsis (40x). B. Producto granulado a base de T. koningiopsis (Th003).

Figura 2. Plántulas de mora producidas in vitro.

Figura 3. Plántulas de mora in vitro sumergidas en una suspensión de un bioplaguicida a base de T. koningiopsis (Th003) a una concentración de 1x106 conidios.mL-1.

A B

Page 63: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

63CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Figura 4. Comparación de plántulas de mora del genotipo Monteloro producidas in vitro e inoculadas con T. koningiopsis Th003. La aplicación se hizo al momento del transplante y cada siete días (Th003 7 días) y al momento de transplante y cada catorce días (Th003 14 días). Evaluación después de 35 días post-transplante.

TestigoTh003 7 días

Th003 14 días

Figura 5. Peso seco promedio de plántulas de mora producidas in vitro inoculadas con T. koningiopsis Th003 (evaluación a los 35 días). La aplicación se hizo al momento del transplante y cada siete días (Th003 7D), o al momento de transplante y cada catorce días (Th003 14D). Valores con letras distintas difieren significativamente entre sí, conforme a Kruskal Wallis, LSD. (α=0.05).

Page 64: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

64 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

VALIDACIÓN Y ESCALAMIENTO DE PLÁNTULAS DE MORA IN VITRO Y MANEJO

EX VITRO PARA ENTREGA A AGRICULTORES DE SILVANIA

Valderrama Ana Milena 1, Álvarez Roberto 2, Barrero Luz Stella 3, Robayo Mónica 3, Núñez Víctor 3

RESUMEN

Después de la selección participativa de seis genotipos promisorios con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca) se llevó a cabo el ajuste, validación y escalamiento in

vitro de estos materiales para la entrega a los productores de la zona. En la fase de establecimiento in vitro con tratamiento de desinfección ajustado para material de campo, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre 27.9% y 57.3% dependiendo del genotipo. El genotipo Cerezos fue el más bajo por la presencia de una bacteria endógena. En la fase de multiplicación, se lograron coeficientes entre el 2.2 y 4.7, lo que permitió obtener, por cada yema introducida, entre 100 y 9.000 brotes respectivamente, después de cinco subcultivos. Para la fase de enraizamiento in vitro se lograron condiciones apropiadas para cada genotipo. Los genotipos Cerezos y Riosucio fueron los de más tardío desarrollo. Adicionalmente, de cuatro medios evaluados se seleccionó el Basal de Lepoivre modificado, por permitir el mejor desarrollo de brotes con la presencia de un buen sistema radicular para futuros trabajos. Durante la fase de endurecimiento, con el método empleado, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 90 y el 95% para los seis genotipos evaluados. Los materiales fueron trasplantados en condiciones de vivero y permanecieron un mes hasta cuando alcanzaron un tamaño aproximado de 10 cm de longitud; presentaron color verde intenso y un sistema radicular bien formado. Un total de 23.000 vitroplantas de mora fueron transportadas a Monterrico y entre-gadas a los productores, para su siembra en campo.

PaLaBraS cLave: Mora, micropropagación in vitro, endurecimiento, entrega, agricultores.

INTRODUCCIÓN

La mora pertenece a la familia de las Rosáceas, género Rubus. Es un arbusto que forma parte de los “berries” o frutos menores (Antía y Torres, 1998). El cultivo de mora tiene características

1 Laboratorio de Micropropagación de Plantas, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.

2 Centro de Investigación (C.I.) Tibaitatá, CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.3 Laboratorio de Genética Molecular Vegetal, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera,

Cundinamarca.

Autor de correspondencia: Ana Milena Valderrama, M.Sc. Biotecnología, e-mail: [email protected]

Page 65: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

65CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

agroindustriales promisorias exportables como fruta fresca y como materia prima en la industria alimenticia (Agronet, 2006). Recientemente, se han identificado propiedades medicinales por sus características antioxidantes, lo cual ha influido en su demanda nacional e internacional (Clark et al., 2007). Sin embargo, la Mora de Castilla, presenta limitaciones de susceptibilidad fitosanitaria y bajo contenido de grados Brix. Adicionalmente, existe una baja calidad del material de siembra, desde el punto de vista genético y fitosanitario, lo cual está afectando el posicionamiento de la mora en el mercado internacional (Franco et al., 2000; Franco y Giraldo, 2002).

Tradicionalmente, el cultivo de mora se propaga de manera vegetativa, ya sea por acodo o estaca, lo que ha generado que los productores y los viveros propaguen los materiales regio-nales sin ninguna norma de calidad fisiológica ni sanitaria. Por cuanto este medio de propagación es la principal fuente de introducción de plagas y enfermedades (Castro y Díaz, 2001), se hace necesario el desarrollo de técnicas alternativas de propagación, mediante el cultivo de tejidos para garantizar una semilla de alta calidad fisiológica, fitosanitaria y genética.

El cultivo de tejidos vegetales in vitro o micropropagación, constituye dentro de la bio-tecnología, la técnica que mayor aporte práctico ha brindado (Cetz, 2005). La micropropagación es un método alternativo para la propagación clonal de plantas. La mayor diferencia entre la propagación convencional y la propagación in vitro consiste en que las plantas son producidas bajo condiciones estériles en un medio artificial. En estas condiciones, las plantas no son afectadas por circunstancias adversas del clima y, como consecuencia, el crecimiento se da mucho más rápido que cuando se utilizan los métodos tradicionales (Hannweg, 1997).

Las aplicaciones de la micropropagación son varias: Regeneración de plantas, obtención de plantas libres de agentes patógenos, conservación de germoplasma, producción de metabolitos secundarios y mejoramiento genético (Pérez et al., 1998). La mayor desventaja de la micropro-pagación in vitro es que requiere un ambiente estéril de crecimiento para evitar contaminación con bacterias u hongos (Hannweg, 1997). Sin embargo, las condiciones de asepsia se manejan con éxito en los laboratorios especializados.

La micropropagación de Rubus involucra típicamente cultivo in vitro de ápices (del inglés “shoot tip culture”), el cual es considerado el método más eficiente para una rápida proliferación y eliminación de la variación somaclonal (Pelto y Clark, 2000). A nivel mundial se tienen varios reportes del cultivo in vitro de diferentes especies de Rubus, tales como: R. parvifolius y R. caesius (Chang y Reed, 1999), R. arcticus (Kokko et al., 1996), R. idaeus (Palonen y Buszard, 1998); Taylor y Harrier, 2000), R. fruticosus (mora), e híbridos entre mora y frambuesa (McNicol y Graham, 1990; Swartz et al., 1990) y R. chamaemorus (Martinussen et al., 2004). En Colombia, Marulanda y Márquez (2002), obtuvieron plantas procedentes de Caldas y Quindío mediante organogénesis a través de callo, las cuales, junto con las plantas en los subcultivos F4 y F15 del proceso de multi-plicación in vitro, presentaron alta estabilidad genética (evaluada por marcadores RAPD), lo que llevó a recomendar hasta 10 subcultivos para la multiplicación masiva de Rubus in vitro. Castro y Díaz (2001) también han desarrollado propagación de Mora de Castilla in vitro, utilizando plantas madre seleccionadas para la obtención de yemas en la etapa de establecimiento.

Desde al año 2005 se ha venido trabajando con la implementación del sistema de micro-propagación de mora en el Laboratorio de Micropropagación de Plantas de CORPOICA. Durante este tiempo se han desarrollado y ajustado los protocolos de introducción, multiplicación y en-raizamiento de mora in vitro. De esta forma, se ha mejorado el sistema de endurecimiento de las vitroplantas para su entrega a los agricultores.

Con este trabajo se implementó el sistema de micropropagación y endurecimiento de plantas de mora desarrollado en CORPOICA, para seis genotipos de importancia agronómica y nutricional, seleccionados con base en resultados de encuestas a agricultores y características

Page 66: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

66 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

agronómicas y nutricionales (ver artículo Espinosa et al., de esta compilación). Este sistema de propagación permitió la entrega de 23.000 vitroplantas de mora a agricultores del sector Mon-terrico, vereda Aguabonita del municipio de Silvania (Cundinamarca) listas para la siembra en campo. Lo equivalente a 2.000 vitroplantas es mantenido por el Laboratorio de Micropropagación de Plantas del Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB) de CORPOICA, para su utilización en futuros proyectos.

Adicionalmente, se busca ajustar la metodología de micropropagación que permita el desarrollo de las etapas de multiplicación y enraizamiento en un solo medio de cultivo. Con este fin se probaron diferentes medios para reducir el tiempo y costos de la etapa de enraizamiento in vitro. Actualmente, se busca ir mejorando el sistema de micropropagación de mora con la imple-mentación de nuevas metodologías.

MATERIALES Y MÉTODOS

Ubicación

El trabajo se desarrolló en las instalaciones del Laboratorio de Micropropagación de Plantas del CBB y en los invernaderos de vidrio, situados en CORPOICA C.I. Tibaitatá, ubicado a una altura de 2542 m.s.n.m y con un promedio de temperatura de 13ºC.

Material vegetal

Las plantas madre de mora fueron recolectadas en la Finca El Arenal, sector Monterrico de la Vereda Aguabonita (Silvania, Cundinamarca). Con base en resultados de encuestas a agricultores y características agronómicas y nutricionales, se seleccionaron seis genotipos promisorios del cultivo de mora establecido en Monterrico. Los genotipos seleccionados fueron: Monteloro, Rio-sucio, Cerezos, Sin Espinas, Castilla Monterrico Yema e ILS 1863 (ver artículo Espinosa et al., de esta compilación).

Establecimiento in vitro

Del material establecido en Monterrico se seleccionaron estacas sanas, no florecidas, de aproxi-madamente 50 cm de longitud y se llevaron envueltas en papel periódico, al Laboratorio de Mi-cropropagación de Plantas. Las estacas fueron cortadas cerca del ápice hasta obtener miniestacas de 5 cm de longitud aproximadamente; las miniestacas fueron lavadas con cepillo y una solución jabonosa; posteriormente, fueron lavadas con una solución bactericida con agitación constante, durante 10 minutos y luego fueron transferidas a una solución fungicida durante 20 minutos. Para terminar la desinfección, las miniestacas fueron trasladadas a una solución de hipoclorito durante 10 minutos y alcohol al 70% por un minuto. Después de cada solución desinfectante, se lavaron tres veces con agua destilada estéril. Las miniestacas desinfectadas se cortaron nuevamente hasta obtener un explante de 2 centímetros de longitud aproximadamente y se sembraron en el me-dio de introducción que contiene sales MS (Murashine & Skoog, 1962), suplementadas con una mezcla de auxina/citoquinina que permite el desarrollo de los explantes. Después de 15 días de incubación a una temperatura promedio de 20ºC, fotoperíodo de 16 horas luz/8 horas oscuridad y una intensidad lumínica de 2.000 lux, se retiraron los explantes contaminados y se dejaron los que estaban sanos en crecimiento, durante 15 días más.

Page 67: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

67CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Multiplicación in vitro

Los explantes sanos y libres de contaminación se dividieron y se pasaron al medio de multi-plicación, que contiene sales MS (Murashine & Skoog, 1962), suplementadas con una mezcla de auxina/citoquinina que permite la formación de brotes axilares. Después de cuatro se-manas de crecimiento a una temperatura promedio de 20ºC, fotoperíodo de 16 horas luz/8 horas oscuridad y una intensidad lumínica de 2000 lux, se dividieron los explantes nuevos y se transfirieron a un medio fresco de multiplicación hasta obtener el número de explantes requeridos por genotipo.

Enraizamiento in vitro

Los explantes multiplicados se dividieron, se sembraron en el medio de enraizamiento, que contiene sales MS (Murashine & Skoog, 1962), suplementadas con una auxina que induce la formación de raíz. Los explantes se incubaron durante cuatro semanas a las mismas con-diciones de temperatura, fotoperíodo e intensidad lumínica usadas para la multiplicación in vitro.

Medio de cultivo de una sola fase

Con el objetivo de implementar un medio de cultivo doble propósito para las etapas de multi-plicación y enraizamiento de mora, se diseñó un experimento con cuatro medios de cultivo, con diferencia en las soluciones de macronutrientes y en la concentración hormonal. Se seleccionó el mejor medio, teniendo en cuenta la formación de raíz y brotes formados.

Endurecimiento de las vitroplantas

A las plantas con formación de raíz, se les retiró el gelificante con agua, se sumergió la raíz en una solución enraizadora y se sembraron en bandejas de germinación de 50 alvéolos que contenía una mezcla de turba y micorriza comercial (un kg/bulto de turba), que contiene esporas de Glomus sp., Acaulospora sp., Scutesllospora sp. y Entrophospora sp. en una concentración de 230 esporas viables/gramo de suelo. Se llevaron a una condición de cámara húmeda durante 15 días con una temperatura promedio de 22ºC. Después de este tiempo se abrió paulatinamente el plástico para ir preparando las plantas a su condición ex vitro y se fertilizó foliarmente cada semana con una solución de N/P/K/ (10/52/10) más elementos traza, hasta completar cinco semanas de adapta-ción ex vitro. Cada 15 días se aplicó foliarmente una solución que contenía Trichoderma konigiopsis Th003 (1 x 10 6 conidios/ml), producida por el Laboratorio de Control Biológico del CBB (ver artículo Beltrán y Cotes, de esta compilación.

Embolsado de las plantas endurecidas

Las plantas con un tamaño de aproximadamente siete centímetros, de color verde intenso y con buena formación de raíz fueron sembradas en bolsas negras de una libra de capacidad que contenían una mezcla de suelo y cascarilla de arroz. Las plantas fueron fertilizadas foliarmente cada semana con una solución de N/P/K (15/15/15). Después de 15 días de su siembra, las plantas fueron llevadas a Monterrico para su adaptación a la zona.

Page 68: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

68 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Entrega de plántulas endurecidas a agricultores

La entrega de plántulas endurecidas de los seis genotipos seleccionados se llevó a cabo en cuatro etapas. La primera en septiembre de 2008 (9.723 plántulas), la segunda en noviembre de 2008 (3.300 plántulas) y las dos últimas en febrero de 2009 (10.000 plántulas). Cada vez se realizó un acta de entrega, un acuerdo de transferencia y un documento de recomendaciones para manejo del material ex vitro en vivero y campo (ver también artículo de Álvarez et al., de esta compilación).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Establecimiento in vitro

La Figura 1 muestra el proceso de establecimiento in vitro desarrollado en el Laboratorio de Mi-cropropagación de Plantas del CBB. Con el tratamiento de desinfección ajustado para el material de campo, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 27.9% y el 57.3%, dependiendo del genotipo (Tabla 1). El porcentaje de supervivencia para el genotipo Cerezos fue bajo, respecto a los otros evaluados; se observó una alta pérdida para los genotipos Cerezos y Riosucio por la presencia de una bacteria que se reflejaba, semanas después del establecimiento, con la licuefac-ción del medio de cultivo. Para los otros genotipos evaluados, los porcentajes de supervivencia fueron superiores al 40%.

Las diferencias en el porcentaje de supervivencia, de acuerdo al genotipo pueden ser producidas por factores que influyen en la respuesta al establecimiento in vitro, como por ejemplo: la época del año, el estado fisiológico de la planta y las condiciones ambientales. Estos factores, posiblemente, influyeron en la respuesta al establecimiento in vitro, ya que los genoti-pos fueron recolectados en diferentes épocas del año. Los primeros materiales seleccionados fueron los genotipos Sin Espinas, Monterrico y Monteloro y se inició su establecimiento en el año 2007, mientras que los genotipos Cerezos, Riosucio e ILS 1863 fueron introducidos en el año 2008.

Lo más aconsejable para el establecimiento de plantas in vitro es realizar una desinfección semanal de las plantas en condiciones de invernadero, con fungicidas y bactericidas que permitan obtener explantes con menor carga microbiana en el momento de su establecimiento. En este sentido, en el estudio desarrollado por Jones y Flores (2007) para el establecimiento in vitro de plantas de R. idaeus, provenientes de invernadero, se lograron porcentajes de supervivencia entre el 25% y el 45%.

Sin embargo, para este trabajo no fue posible realizar una desinfección previa, ya que no se contaba con el material genético en condiciones de invernadero sino en campo abierto. Esta situación fue tomada en cuenta para el desarrollo del protocolo de desinfección, que permitió obtener plantas sanas y vigorosas de los seis genotipos seleccionados para el estudio.

Multiplicación in vitro

Los explantes establecidos fueron transferidos al medio de multiplicación con el objetivo de in-ducir brotes múltiples, los cuales se separaron cada 30 días (Figura 2). En la Tabla 2 se observa el promedio del coeficiente de multiplicación para cada uno de los genotipos evaluados. Se obtuvie-ron coeficientes de multiplicación entre el 2.2 y 4.7, lo que permite conseguir entre 100 y 9.000 brotes por cada yema introducida, después de cinco subcultivos.

Page 69: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

69CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Castro y Díaz (2001) reportan que para la etapa de proliferación se pueden obtener hasta 500 brotes por yema establecida in vitro de R. glaucus. La diferencia en el número de brotes obtenidos puede ser atribuida a la combinación de hormonas en el medio de proliferación o a di-ferencias en los genotipos evaluados. El medio de cultivo en el CBB de CORPOICA contenía una mezcla de las hormonas ácido indol acético (AIA) y 6-Bencilaminopurina (BAP), mientras que el medio de proliferación de Castro y Díaz utiliza la hormona 6-benciladenina. Después de obtener el número de plantas requerido, los brotes fueron individualizados y sembrados en el medio de enraizamiento.

Enraizamiento in vitro

Los brotes individualizados y sembrados en el medio de enraizamiento permanecieron cuatro semanas hasta la formación del sistema radicular (Figura 3). Sin embargo, para los genotipos Rio-sucio y Cerezos se necesitaron cinco semanas para la formación de la raíz. El medio de cultivo contenía la hormona Acido Indol Butírico (AIB), pero se requiere evaluar por cada genotipo con-centraciones diferenciales de la hormona AIB, que permitan el desarrollo de la raíz en un menor tiempo.

Medio de cultivo de una sola fase

Con el fin de mejorar el proceso de enraizamiento y acortar el tiempo de obtención de plantas completas, se diseñaron experimentos para obtener formación de brotes con un buen sistema radicular en el mismo medio. De cuatro medios evaluados, se seleccionó el medio Basal de Lepoi-vre, modificado con compuestos inorgánicos y orgánicos (Tabla 3). Este medio permitió el mejor desarrollo de brotes con la presencia de un buen sistema radicular para garantizar una buena adaptación de las plantas (Figura 4).

Endurecimiento de las vitroplantas

Las plantas enraizadas fueron endurecidas en bandejas de germinación con una mezcla de turba+micorriza (Figura 5). Después de cinco semanas de endurecimiento se obtuvieron plantas de un tamaño aproximado de 7 centímetros de longitud, con buena formación de raíz y de color verde intenso. Con el método empleado de endurecimiento, se obtuvieron porcentajes de super-vivencia entre el 90 y el 95% para los seis genotipos evaluados.

Marulanda (2000), reporta porcentajes de supervivencia del 50%, 40% y 35% con la utilización de Jiffy pellets, mezcla de arena con tierra en bandejas de polipropileno y en bolsas plásticas, respectivamente. Castro y Díaz (2001), emplean como sustrato, arena des-infectada con agua caliente e inóculo micorrízico y Pérez (2007), evalúa diferentes sustratos que permiten la obtención de porcentajes de supervivencia más altos cuando se utiliza arena estéril+Trichoderma+micorriza.

La fase de endurecimiento y adaptación ex vitro resulta ser la más problemática en el proceso de producción de vitroplantas de mora, debido al alto grado de mortalidad de plán-tulas (50-90%), como consecuencia de una cutícula poco desarrollada, estomas no funcionales y un sistema radical débil que facilita la deshidratación por estrés hídrico. Los factores más determinantes para la supervivencia de las plantas son humedad, frecuencia de riego y calidad del sustrato (Marulanda, 2000). Mediante el trabajo desarrollado en el CBB de CORPOICA

Page 70: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

70 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

en el proceso de endurecimiento de vitroplantas de mora, se obtuvieron plantas con un alto porcentaje de supervivencia y calidad física.

Embolsado de las plantas endurecidas

En el proceso de trasplante a bolsa plástica se utilizó una mezcla de suelo y cascarilla de arroz para el desarrollo de la parte radicular y aérea de la planta, antes de su siembra en campo (Figura 6). Después de un mes del trasplante se obtuvieron plantas de un tamaño aproximado de 10 cm de longitud, de color verde intenso y un sistema radicular bien formado.

Entrega de plántulas endurecidas a agricultores

Las vitroplantas embolsadas fueron transportadas a Monterrico y 23.000 de los seis genotipos seleccionados fueron entregados en muy buen estado a los agricultores de Monterrico, después de un tiempo de endurecimiento en vivero de CORPOICA (Figura 7 A). Sin embargo, para la primera y segunda entrega, una vez establecidas las plántulas en vivero de Monterrico, éstas em-pezaron a deteriorarse (Figura 7 B).

El clima ha sido el principal enemigo de las plántulas ex vitro. El sector de Monterrico se ubica a 2485 msnm con precipitaciones mayores a 2000 mm y luminosidad menor de cuatro horas diarias, lo cual facilita la aparición de enfermedades (Ver artículo de Álvarez et al., de esta com-pilación). Lo anterior, aunado al inadecuado manejo del material por parte de los productores, a pesar de las recomendaciones impartidas, contribuyó a la pérdida de gran parte del mismo.

Para recuperar parte de este material, se acordó que un solo productor lo manejaría, siguiendo las recomendaciones indicadas y lo entregaría a los agricultores de cada asociación para siembra en sus fincas (Figura 7C-D). Los productores más juiciosos han logrado mantener plántu-las en buen estado, después del trasplante a campo (Figura 7E). Ellos han observado que un buen manejo es fundamental para el éxito del proceso. De esta forma, ha sido posible salvar cerca del 25% de las dos primeras entregas.

Para las últimas entregas de materiales a los agricultores, las mesas receptoras ubicadas en el vi-vero de Monterrico, se desinfectaron con hipoclorito y creolina y se reubicó el plástico del invernadero y la polisombra (Figura 7F). Adicionalmente, CORPOICA entregó nuevas recomendaciones para el estric-to cuidado del material. En visitas posteriores a estas últimas entregas, se encontró que las plántulas en el vivero reformado y con buen manejo fitosanitario estaban en excelentes condiciones (Figura 7 G). Los agricultores aprendieron que un manejo adecuado es fundamental para el mantenimiento y adaptación bajo condiciones de vivero de las plántulas ex vitro. Es necesario un seguimiento continuo del material de campo y de vivero, para dar el acompañamiento a los productores de mora y lograr una mayor compe-titividad productiva del material de siembra obtenido a través de técnicas in vitro.

CONCLUSIONES

Se llevaron a cabo procedimientos de ajuste, validación y escalamiento in vitro para los genotipos Monteloro, Riosucio, Cerezos, Sin Espinas, Castilla Monterrico Yema e ILS 1863, seleccionados con agricultores del sector Monterrico en Silvania (Cundinamarca).

En la fase de establecimiento in vitro con tratamiento de desinfección ajustado para mate-rial de campo, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre 27.9% y 57.3% dependiendo del genotipo, siendo el genotipo Cerezos el más bajo por la presencia de una bacteria endógena.

Page 71: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

71CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

En la fase de multiplicación, se lograron coeficientes entre el 2.2 y 4.7, lo que permitió obtener entre 100 y 9.000 brotes respectivamente, por cada yema introducida, después de cinco subcultivos.

Para la fase de enraizamiento, se lograron obtener condiciones apropiadas para cada genotipo. Los genotipos Cerezos y Riosucio son los de más tardío desarrollo. Adicionalmente, de cuatro medios evaluados, se seleccionó el Basal de Lepoivre modificado por permitir el mejor desarrollo de brotes con la presencia de un buen sistema radicular.

Durante la fase de endurecimiento, se obtuvieron porcentajes de supervivencia entre el 90 y el 95% para los seis genotipos. Los materiales fueron trasplantados en vivero y se entregaron 23.000 vitroplantas a los productores de Monterrico, una vez su sistema radicular se encontraba bien formado.

AGRADECIMIENTOS

A Patricia Martínez, Vicky Lorena Arango, Rodrigo González, Yolanda Torres, Camilo Martínez y Luz Stella Rincón, auxiliares del Laboratorio de Micropropagación de Plantas por su compromiso y trabajo para la entrega del material in vitro. A las asociaciones de productores de Monterrico. A Yaneth Camargo por su excelente apoyo logístico y administrativo.

BIBLIOGRAFÍA Agronet. 2006. Red de Información y Comunicación Estratégica del Sector Agropecuario,

Colombia. Análisis-Estadísticas. En: http://www.agronet.gov.co (16/02/2008).Antía, G.A., Torres, J.F. 1998. El manejo post-cosecha de la mora (Rubus glaucus Benth). Serie

de paquetes de capacitación sobre manejo en post-cosecha de frutas y hortalizas; No. 12. Programa Nacional de Capacitación en Manejo Post-Cosecha y Comercialización de Frutas y Hortalizas, Convenio SENA - Reino Unido. Centro Agroindustrial del SENA, A.A. 695 Armenia, Quindío, COLOMBIA. Edición Magnitud Ltda. Pereira. Impresión OP Gráficas, Santafé de Bogotá, D. C. Colombia. 272p.

Castro, D., Díaz, J.J. 2001. Alternativas para el manejo integrado del cultivo de la mora de Castilla (Rubus glaucus Benth.). Universidad Católica de Oriente, Unidad de Biotecnología Vegetal. 74p.

Cetz, J. 2005. Micropropagación de chile dulce (Capsicum annuum L. var. Najera.) y chile habanero (Capsicum chinense Jacq.) con miras al mejoramiento genético del cultivo. Tesis de Maestría. CATIE, Costa Rica. 86 p.

Chang Y., Reed B.M. 1999. Extended cold acclimation and recovery medium alteration im-prove regrowth of Rubus shoot tips following cryopreservation. Cryo-Letters. 20: 371-376.

Clark J.R., Stafne E.T., Hall H.K., Finn C.E. 2007. Blackberry Breeding and Genetics. En: Plant Breeding Reviews. J. Janick (Ed.), John Wiley & Sons, Inc. 29: 19-144.

Franco, G., Gallego, J., Tamayo, A., Heredia, L., Medina, G. 2000. Fertilización de la mora de castilla (Rubus glaucus Benth) en zonas frías del departamento de Caldas. En: Memorias del tercer seminario frutales de clima frío moderado. Centro de Desarrollo Tecnológico de Frutales C.D.T.F. Manizales. p. 81-87.

Franco, G., Giraldo, M. 2002. El Cultivo de la mora. Quinta edición corregida. Manual de asistencia técnica. CORPOICA, Federación Nacional de Cafeteros de Colombia, SENA, Comité Técnico Agropecuario de Risaralda, UMATA. Risaralda. 81p.

Hannweg K. 1997. Towards the Development of a Method for the Clonal Propagation of Avocado Rootstocks. South African Avocado Growers’ Association Yearbook. p. 20:35

Jones F., Flores D. 2007. Establecimiento in vitro y pruebas preliminares de micropropagación en medio semisólido y líquido de frambuesa (Rubus idaeus L). Tecnología en Marcha. 20: 3.

Page 72: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

72 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Kokko, H.I., Kivineva, M., Kärenlampi, S.O. 1996. Single-step immunocapture RT-PCR in detection of raspberry bushy dwarf virus. BioTechniques. 20: 842-846.

Martinussen, I., Nilsen, G., Svenson, L., Junttila, O., Rapp, K. 2004. In vitro propagation of cloudberry (Rubus chamaemorus). Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 78: 43-49.

Marulanda, A.M. 2000. Selección, propagación y caracterización genética de mora (Rubus glaucus Benth). Tesis Doctor en Ciencias Agrícolas. Colombia. Universidad Agraria de la Habana. p. 3-65.

Marulanda, M.L., Marquez, M.P. 2002. Evaluación de la estabilidad genética de vitroplantas de Rubus glaucus Benth mediante marcadores moleculares RAPD. Actualidades Biológicas. 24: 31-36.

McNicol R.J., Graham J., 1990. In vitro regeneration of Rubus from leaf and stem segments. Plant Cell Tiss. Org. Cult. 21: 45-50.

Murashige, T., Skoog, F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobac-co tissue cultures. Plant Physiology. 15: 473-479.

Palonen, P., Buszard, D. 1998. In vitro screening for cold hardiness of raspberry cultivars. Plant Cell Tissue and Organ Culture. 53: 213-216.

Pelto M.C., Clark, J.R. 2000. In vitro shoot tip culture of Rubus Part 1. Review. Small fruits Rev. 1: 69-82.

Pérez, J., Alvarado, Y., Gómez, R., Jiménez, E., Orellana, P. 1998. Propagación y mejoramien-to genético de las plantas por biotecnología. Instituto de biotecnología de las plantas. Santa clara, Cuba. CU. p 57-79.

Pérez, M.J. 2007. Efecto de cuatro sustratos en el endurecimiento de vitroplantas de mora (Rubus gluacus Benth) variedad Risaralda, en el municipio de Sabanas, Departamento de Madriz. Tesis de Grado. Managua.

Swartz H.J., Bors, R.H., Mohamed, F.A., Naess, S.K. 1990. The effect of in vitro pre-treatment on subsequent shoot organogenesis from excised Rubus and Malus leaves. Plant Cell Tiss. Org. Cult. 21: 179-184.

Taylor J., Harrier, L. 2000. A comparison of nine species of arbuscular mycorrhizal fungi on the development and nutrition of micropropagated Rubus idaeus L. cv. Glen Prosen (Red Raspberry). Plant Soil. 225: 53-61.

TABLAS Y FIGURAS

Tabla 1. Porcentaje de supervivencia en la etapa de establecimiento in vitro de mora

Genotipo % supervivencia

Cerezos 27.9

Riosucio 37.5

ILS 1863 42.5

Monteloro 57.3

Monterrico 49.3

Sin Espinas 47.4

Tabla 2. Promedio de coeficiente de multiplicación in vitro de mora

Genotipo Promedio coeficiente de multiplicación

Cerezos 3

Riosucio 2.2

ILS 1863 2.2

Monteloro 4.1

Monterrico 4.1

Sin Espinas 4.7

Page 73: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

73CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Tabla 3. Medio de cultivo seleccionado para el cultivo de una sola fase

Componentes Solución madre

Cantidad por litro

Macro Lepoivre 20X 50 mlMicro Lepoivre 100X 1 mlHierro MS 50X 10 mLTiamina 1000ppm 0.4 mLGA3 1000ppm 1.0 mLAIB 600ppm 0.17 mLInositol - 0.1 grAzúcar - 20 grGelRite - 3 gr pH - 5.8

Figura 1. Proceso de establecimiento in vitro de mora. A. Estacas de mora. B. Corte de miniestacas. C. Miniestacas en desinfección. D. Vitroplantas de mora establecidas

A B

C D

Page 74: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

74 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

Figura 2. Vitroplantas de mora multiplicadas in vitro listas para ser individualizadas.

Figura 4. Vitroplantas de mora completas formadas en el medio Basal de Lepoivre. A. Planta in vitro con buen estado de desarrollo foliar y formación de sistema radicular. B. Planta completa bien desarrollada lista para adaptación ex vitro.

Figura 3. Vitroplantas de mora en medio de enraizamiento.

A

B

Figura 5. Vitroplantas de mora endurecidas en bandejas de germinación y cámara húmeda en invernadero de Corpoica.

Figura 6. Vitroplanta de mora endu-recida lista para embolsar.

Page 75: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

75CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

Figura 7. Entrega de plántulas a agricultores en Monterrico (Silvania). A. Primera entrega. B. Mal estado de plántulas de la primera entrega en vivero. C. Manejo por un solo productor y entrega a cada asociación. D. Material manejado por un solo productor completamente recuperado, según las recomendaciones de CORPOICA. E. Material recuperado sembrado en campo. F. Preparación de vivero previo a últimas entregas. G. Buen estado de material de las últimas entregas en vivero, según las recomendaciones de CORPOICA.

A

C

E

B

D

F

G

Page 76: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

76 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

NOTA TÉCNICA

Evaluación social y económica ex ante y ex post

Paredes Zambrano Guillermo Alfredo1, Barrero Meneses Luz Stella2

RESUMEN

Con el fin de caracterizar la línea base de aspectos sociales y económicos del cultivo de la mora por parte de agricultores del sector Monterrico en Silvania, adscritos al proyecto

“Certificación y escalamiento de material de mora con potencial nutritivo y nutracéutico para entrega a pequeños agricultores” y de hacer seguimiento y evaluación a los cambios técnicos ligados al proyecto, relacionados con la capacitación impartida para el manejo del cultivo en un lote sembrado con materiales para evaluación, selección y producción limpia, se llevaron a cabo dos talleres participativos, uno al inicio y otro al final del proyecto. El taller inicial se realizó para identificar la tecnología de producción utilizada por los productores en el cultivo de la mora. Una vez finalizado el ciclo de capacitación, se hizo un taller final con el objeto de medir el nivel de conocimiento adquirido en las diferentes capacitaciones y el uso o implementación de las tecno-logías propuestas por el proyecto.

Como resultado de la comparación entre el sistema tradicional de producción, con la tecnología propuesta, los agricultores adquirieron nuevos conocimientos acerca del manejo del cultivo en el lote experimental para la ejecución del proyecto y la importancia de seleccionar materiales de buena calidad y producirlos de manera limpia. Sin embargo, los conocimientos no han sido aplicados totalmente en sus parcelas, debido principalmente a que aún no cuentan con cultivos nuevos, por lo que se hace necesario realizar seguimiento al montaje de nuevas parcelas. En una segunda fase del proyecto se esperaría evaluar el impacto socio-económico sobre los in-gresos y la producción de los cambios en productividad ligados a la adopción de nuevos genotipos y las tecnologías vinculadas con este proceso.

PaLaBraS cLave: evaluación, impacto, ex ante, ex post, tecnología

INTRODUCCIÓN

Un estudio de mapificación de las zonas óptimas actuales y potenciales de mora, lulo, pitaya, uchu-va y mango común presenta a la Región del Sumapaz como una de las zonas del Departamento de Cundinamarca que ofrece mejores condiciones comparativas (suelos, clima, agua, infraestructura, etc.) para la producción de mora. No obstante, las condiciones en que este proceso productivo se ha desarrollado, lo coloca en una difícil situación en términos de competitividad. En efecto,

1 Centro de Investigación (C.I.) Tibaitatá, CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera, Cundinamarca.2 Laboratorio de Genética Molecular Vegetal, Centro de Biotecnología y Bioindustria (CBB), CORPOICA, Km. 14 vía Mosquera,

Cundinamarca.

Autor de correspondencia: Guillermo Alfredo Paredes Zambrano, M.Sc. Economia, e-mail: [email protected]

Page 77: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

77CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

aspectos tales como la dispersión de las áreas sembradas, las limitaciones para el acceso a ma-terial genético certificado, la utilización excesiva y/o sin criterio técnico de productos químicos, las inadecuadas prácticas de manejo del cultivo y de los procesos de cosecha y poscosecha, la intermediación excesiva en el proceso de comercialización, entre otros, ponen de presente la necesidad de adelantar acciones coherentes y consistentes en materia de desarrollo tecnológico y transferencia de tecnología que redunden en el mejoramiento de la competitividad del producto (Pinzón et al., 2002 y 2004).

Según Estébanez (2002), “El impacto social de la ciencia y de la tecnología ha sido defini-do como los efectos positivos o negativos en la población, de la incorporación de conocimiento científico y tecnológico en prácticas sociales, hábitos e instituciones. Para ello, necesariamente, el análisis se dirige a la sociedad y los cambios que en ella operan y los diversos aspectos relaciona-dos a la ciencia y a la tecnología pasan a constituirse en factores explicativos de estos cambios.” Estébanez, añade que la dificultad básica que se plantea en un análisis de esta naturaleza es la factibilidad de identificar y ponderar la intervención de la ciencia y la tecnología en la sociedad, la cultura y la economía y, en particular, en la calidad de vida de la población, ante la existencia de muchos factores que operan en la producción de los cambios sociales.

Una de las vías más firmes para realizar un estudio de impacto efectivo son los estudios retrospectivos que limitan el análisis a la reconstrucción histórica de la secuencia o cadena de procesos de conocimiento y sus efectos sociales en un tema particular. Otra modalidad existente que también incorpora la dimensión temporal son los estudios de tipo prospectivo basados en la posibilidad de establecer a futuro los efectos del conocimiento producidos en determinado cam-po o las consecuencias de la difusión y uso de ciertas tecnologías (Estébanez, 2002).

La metodología utilizada en el presente trabajo busca combinar las dos modalidades, mediante el establecimiento de la línea base del cultivo de la mora, es decir, la tecnología tradi-cional utilizada por el productor y sus implicaciones económicas, para luego compararla, al final del proceso, con la nueva tecnología utilizada por el productor y los efectos sobre su producci-ón e ingresos. El método a seguir consiste en realizar, al inicio del proceso, una encuesta a los productores para ver su nivel de desarrollo tecnológico y luego realizar esta misma encuesta al final del proceso para identificar los cambios tecnológicos introducidos por los productores en su sistema de producción.

En el contexto anterior, el proyecto código 1144: “Certificación y escalamiento de mate-rial de mora con potencial nutritivo y nutracéutico para entrega a pequeños agricultores” finan-ciado por el Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural (MADR), referido en la introducción de esta compilación, contempló el establecimiento de la línea base del cultivo de la mora, al inicio del proceso, en una zona del Sumapaz, ubicada en el sector Monterrico, vereda Agua Bonita del municipio de Silvania (Cundinamarca).

Durante el proyecto se estableció un lote experimental para la siembra, evaluación y selección de materiales promisorios por sus características morfológicas, agronómicas, nutracéu-ticas y nutricionales (ver artículos de Álvarez, et al. y Espinosa et al., de esta compilación). El ma-terial seleccionado fue producido de manera limpia mediante multiplicación in vitro y adaptación ex vitro y fue entregado a los agricultores para la siembra en sus terrenos (ver artículo de Valderrama et al., de esta compilación). El material de propagación fue también evaluado con fertilizantes y controladores biológicos con el fin de mejorar su vigor y sanidad (Roveda et al., 2007, Roveda et al. y Beltrán y Cotes, de esta compilación). Durante el proceso se llevó a cabo un programa de capacitación integral a los agricultores (ver Álvarez et al., de esta compilación).

Al final del proyecto se realizó la misma encuesta de la línea base para identificar cambios tecnológicos que los agricultores hubiesen introducido en su sistema de producción como resul-

Page 78: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

78 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

tado de la capacitación impartida. Debido a que el final del proyecto 1144, no se considera el final del proceso, ya que es necesaria una segunda fase de seguimiento de nuevas áreas de siembra con el nuevo material producido in vitro, entregado a los agricultores, se esperaría en esta segunda fase hacer seguimiento a la nueva tecnología utilizada por el productor y a los efectos sobre la producción e ingresos.

METODOLOGÍA

Para la evaluación ex ante del proyecto 1144 se realizó un taller con los productores del sector Monterrico, vereda Agua Bonita del municipio de Silvania (Cundinamarca), el 22 de febrero de 2006 al inicio del proyecto con el objeto de identificar la línea base del cultivo de la mora, es decir, la situación inicial de los productores, desde el punto de vista tecnológico, así como la importan-cia económica y social del cultivo en la región. Para el análisis de la tecnología local de producción se aplicó una encuesta sobre las diferentes actividades que se realizan en el establecimiento y sostenimiento del cultivo.

Para la evaluación ex post se llevó a cabo un taller el 11 de noviembre de 2008, el cual tuvo como objeto realizar seguimiento y evaluación del impacto económico y tecnológico (grado de adopción de la tecnología) que ha tenido la capacitación en el manejo del cultivo, la evaluación y selección de materiales y la producción limpia de material de propagación, que se hizo llegar al grupo de productores por medio del proyecto. Para lograr el objetivo se realizó un taller en el cual los productores respondieron una encuesta similar a la realizada al inicio del proyecto.

Las encuestas se aplicaron a agricultores pertenecientes a tres asociaciones de la vereda (ver Álvarez et al., de esta compilación). Se relacionan principalmente los aspectos de tipo cualita-tivo aplicados en las encuestas; los de tipo cuantitativo, esperan utilizarse para análisis posteriores de impacto de la tecnología. Igualmente, los criterios de cosecha, pos-cosecha y mercadeo que se evaluaron en las encuestas, no se relacionan debido a que el corto tiempo del proyecto y el largo tiempo de producción del cultivo, no permitieron mejorar estos aspectos, por lo que se hace necesaria una segunda fase.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Evaluación ex ante

La evaluación ex ante permitió identificar la línea base del cultivo de la mora en el sector Monte-rrico, Silvania. A continuación se relacionan los resultados encontrados:

1. Selección del lote. Para identificar la forma en que los productores seleccionaban los lotes para la siembra, se tuvieron en cuenta ocho criterios y si éstos eran considerados para realizar dicha selección. Los agricultores consideraban criterios de facilidad de acceso, topografía y características del suelo. Sin embargo, no consideraban los criterios de dis-ponibilidad de agua para riego, sanidad, distancias a centros de acopio, cultivos anteriores (rotación) y luminosidad.

2. Preparación del lote. Inicialmente aplicaban matamalezas con bomba de espalda, lo que les demandaba dos jornales por hectárea. A continuación realizaban un plateo con azadón y12 jornales por hectárea.

3. Material de siembra. El material de siembra por tradición es la Mora de Castilla.

Page 79: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

79CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

4. Semillero. Los que hacían semillero, embolsaban las plántulas en tierra mezclada con casca-rilla de arroz en proporción 3:1; no utilizaban materia orgánica compostada y tampoco des-infectaban; no utilizaban productos para combatir los problemas de antracnosis; gran parte de los productores compraban las plántulas en viveros de Fusagasuga, las cuales provenían de semillas obtenidas artesanalmente de frutos recogidos en la región. En los viveros tampoco se desinfectaba la tierra y los productores no exigían registros sanitarios.

5. Siembra. Por la condición climática de la zona, la siembra se realizaba en cualquier época del año. La distancia de siembra utilizada era de 2 x 2 metros. En el ahoyado utilizaban 15 jornales y para la siembra tres jornales por hectárea.

6. Tutorado. En la región se utilizaban dos sistemas: Tutorado por hilera y Espaldera de una sola T. Cualquiera de los dos sistemas requería de 30 jornales para la instalación.

7. Podas. Poda de formación: La efectuaban a los tres meses de la siembra, dejando gene-ralmente dos ramas por planta y requería de dos jornales por hectárea. Poda sanitaria o de mantenimiento: Se realizaba, por lo general, cada mes y medio, pues entre más tiempo transcurría, requerían más mano de obra; utilizaban ocho jornales por hectárea. Realizaban dos aporques al año empleando ocho jornales por aporque. En ningún caso desinfectaban los equipos de poda, tijeras, o ramas cortadas.

8. Fertilización. No hacían análisis de suelo y realizaban las siguientes aplicaciones: 15-15-15 (N-P-K), tres meses después de la siembra, 80 kilos por hectárea; 10-30-10 (N-P-K) + nutrión + agrixin; a los seis meses de la siembra, 144 kilos por hectárea; 10-20-20 (N-P-K); a los nueve meses de haber sembrado, 144 kilos por hectárea. Mensualmente aplicaban abono foliar con boro y NPK. En el momento de la siembra, algunos combinaban gallinaza o porquinaza (de 20 días de compostaje) con cal en una relación de 20:4 y agregaban un kilo de esta mezcla al suelo de cada planta. Para una hectárea utilizaban 40 bultos de 40 kilos de abono.

9. Manejo del agua. Por tener disponibilidad de agua de manera permanente, no le daban un manejo apropiado. Se presentaron dos épocas de menor suministro durante los meses de febrero-marzo y de agosto-septiembre que, sin embargo, no fueron críticas.

10. Principales problemas sanitarios. Los principales problemas sanitarios que se presenta-ban en la zona, en orden de priorización de los productores fueron: Antracnosis y Botrytis, trips, nematodos, mildeo velloso, mildeo polvoso, araña roja, áfidos, Fusarium y chizas. El manejo que los productores daban a algunos de estos problemas se relaciona en la Tabla 1. Para ello, se utilizaban dos jornales por hectárea, y se efectuaba mensualmente.

11. Manejo de arvenses. El principal problema era el manejo del kikuyo. Su control era de tipo químico (Roundup, gramozone) aplicándose una mezcla de un litro de herbicida en 200 litros de agua. El control se realizaba anualmente y se invertían dos jornales por hectárea.

12. Manejo de los productos químicos. A pesar de conocer los grados de toxicidad de los productos y de leer las recomendaciones de sus etiquetas, los productores no utilizaban equipos de protección cuando realizaban aplicaciones. Los envases de los productos los acu-mulaban en el suelo para luego quemarlos.

13. Instalaciones para almacenamiento de productos químicos. Guardaban en un solo salón fertilizantes, plaguicidas y equipos. No utilizaban señalización.

Evaluación ex post

La evaluación ex post permitió identificar las condiciones utilizadas por los productores para el cultivo de la mora en sus predios, al finalizar el proyecto. A continuación se relacionan los resul-tados encontrados:

Page 80: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

80 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

1. Selección del lote. Como resultado del proyecto, en el cual se seleccionó participativa-mente un lote en predios de los productores para evaluación y seguimiento de materiales introducidos (ver Álvarez et al., de esta compilación), los productores consideran que una ubicación adecuada del cultivo favorece la organización del mismo y por ende la calidad del producto y los ingresos.

2. Preparación del lote. Como resultado del proyecto, en el cual se preparó el lote seleccio-nado (ver Álvarez et al., de esta compilación), los productores conocen las ventajas de utilizar el análisis de suelos antes de iniciar cualquier cultivo. Actualmente, realizan un plateo menos profundo en sus terrenos.

3. Material de siembra. Los productores recibieron diversas capacitaciones sobre la importancia de contar con semilla de alta calidad genética y fitosanitaria (ver articulo Álvarez et al., de esta compilación). Ellos encontraron que los materiales en el lote expe-rimental presentaban diferencias y que algunos sobresalían sobre los demás por atributos morfológicos, agronómicos y nutricionales (ver Espinosa et al., de esta compilación). Igualmente, participaron en la etapa de endurecimiento ex vitro de los seis materiales seleccionados participativamente (ver Valderrama et al., de esta compilación). Aunque al inicio del proceso de entrega de material ex vitro se presentaron pérdidas de plántulas, en el vivero de los productores, mayores al 50%, al final del proceso, las pérdidas dismi-nuyeron notablemente y se empezó a observar un mayor empoderamiento por parte de ellos. No obstante lo anterior, los productores requieren mejorar el manejo del material de siembra en sus fincas.

4. Siembra. En el lote que se sembró el material a evaluar, se utilizó una mayor distancia de siembra, de 2.5 metros entre calles y 2.2 entre plantas con una calle amplia para manejo del cultivo, frente a los 2 metros utilizados en la región. Los productores han podido observar que ese incremento en las distancias de siembra les ha traído como resultado una menor incidencia de plagas y enfermedades y una mayor facilidad para realizar actividades como las podas y la aplicación de controles fitosanitarios. Lo anterior ha tenido como consecuencia la reducción del número de jornales por hectárea. Actualmente, se utilizan cinco jornales por hectárea.

5. Podas. Como se comentó en el párrafo anterior, al incrementar las distancias de siembra se ha facilitado las labores de poda. Sin embargo, los agricultores continúan haciendo las podas con la tecnología local en sus terrenos.

6. Fertilización. Como resultado del proyecto, los agricultores aprendieron a conocer la im-portancia del análisis de suelos y a realizar los planes de fertilización. Igualmente, advierten la importancia de la aplicación de fertilizantes biológicos, los cuales, fueron identificados para mora (Roveda et al., 2007 y Roveda et al., de esta compilación). Sin embargo, se requiere una segunda fase para la producción y evaluación en campo.

7. Problemas sanitarios. Como producto del proyecto, los agricultores conocen las ventajas del manejo del cultivo y del control biológico (ver Álvarez et al. y Beltrán y Cotes, de esta compilación). Dadas las altas precipitaciones en la zona, se siguen presentando los mismos problemas en sus parcelas. Dado que el proyecto sólo llega hasta la identificación de bio-controladores, mas no su producción para evaluación en campo, el MADR recientemente financió otro proyecto relacionado con el desarrollo de una estrategia de control biológico de Botrytis cinerea en mora en campo, en el cual participan los mismos agricultores.

8. Manejo de arvenses. El plateo realizado para la evaluación participativa de materiales en el lote experimental (ver Álvarez et al., de esta compilación), ha sido ventajoso, según los productores, ya que disminuye problemas de malezas.

Page 81: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

81CaraCterizaCión, evaluaCión y produCCión de material limpio de mora Con alto valor agregado

9. Manejo de productos químicos. A pesar de haber recibido capacitación y adquirido con-ciencia de los perjuicios que el mal manejo de los productos trae para la salud del trabajador, los agricultores siguen realizando las labores sin utilizar los elementos de protección.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

El análisis de las respuestas dadas por los productores en el taller realizado al finalizar la capa-citación indica que gran parte de las enseñanzas impartidas en los diferentes talleres, fueron asimiladas. Sin embargo, no están aplicando algunas de éstas. Lo anterior podría ser ocasionado porque aún no existen cultivos en producción con los materiales promisorios seleccionados par-ticipativamente y producidos de manera limpia (in vitro), ya que hasta ahora se está sembrando material nuevo.

El cultivo de la mora es el de mayor importancia económica y social en el sector Monterrico. Por un lado, ha permitido la formación de varias asociaciones de productores y por otro, genera los principales ingresos y el mayor número de jornales. Sin embargo, un aspecto generalizado que se observa en productores de escasos recursos es que su tiempo de dedicación a las buenas prácticas agrícolas acompañadas de innovaciones tecnológicas es escaso, lo cual se refleja en la lentitud para adoptar nuevas tecnologías. Adicionalmente, el que existan varias asociaciones en un solo sector puede limitar la realización de iniciativas para la región por la rivalidad que se da entre ellas.

No obstante, el esfuerzo realizado por CORPOICA y la solicitud de apoyo que han mani-festado los productores, apuntan a la necesidad de hacer seguimiento a las áreas sembradas, con nuevo material entregado en Monterrico a fin de evaluar su comportamiento en el tiempo en éste y en nuevos ambientes. De esta forma, se podrá seleccionar el material élite con mayor acierto y mejorar las prácticas de su cultivo en nichos específicos. Un análisis social y económico ex post del proceso permitirá hacer seguimiento al grado de aplicación de la tecnología y su impacto.

AGRADECIMIENTOS

A las asociaciones de productores de Monterrico. A Yaneth Camargo por su excelente apoyo logístico y administrativo.

BIBLIOGRAFÍA

Estébanez, M.E. 2002. Impacto Social de la Ciencia y la Tecnología: estrategias para su análisis. En: Estado de la Ciencia. Principales indicadores de la ciencia y la tecnología Iberoameri-cana/Interamericana. Buenos Aires, RICYT. 15 p.

Pinzón, L.M., Carvajal, G.H., Romero, M. 2002. La competitividad de la mora en Cundinamar-ca y eje cafetero. Proyecto de Mapificación de Frutales. Convenio SENA-CORPOICA, Bogotá. Documento interno. 52 p.

Pinzón, L.M., Carvajal, G.H., Romero, M. 2004. Caracterización de las zonas productoras de lulo en Cundinamarca. En: Estudio de mapificación de las zonas óptimas actuales y potenciales de mora, lulo, pitaya, uchuva y mango común. Convenio SENA-CORPOICA, Bogotá. Documento interno. 38 p.

Roveda, G., Cabra, L., Ramírez, M., Peñaranda A. 2007. Efecto de las micorrizas arbusculares sobre la aclimatación y endurecimiento de microplántulas de mora (Rubus glaucus). Re-vista Corpoica – Ciencia y Tecnología Agropecuaria. 8: 41-49.

Page 82: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

82 CorporaCión Colombiana de investigaCión agropeCuaria - CorpoiCa

TABLAS

Tabla 1. Manejo a problemas fitosanitarios que utilizaban los productores al inicio del proyecto

Problema Manejo Producto utilizado

Antracnosis Fertilización y poda Según cuadro de fertilización

Botrytis Fumigación Fitorax, forum, rhodax, centauro, top sul y mezclas de antracol, forum y tilt

Trips Fumigación Neofat, efectrina, ají

Page 83: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados
Page 84: CARACTERIZACIÓN, EVALUACIÓN Y PRODUCCIÓN DE … · PRODUCCIÓN DE MATERIAL ... el mango, la mora y la guayaba ... Botrytis cinerea Pers. ex Fr. que infecta desde los primeros estados

Terminó de imprimirse en junio de 2009 en

Tel: 2885338 Bogotá, DC, Colombia www.produmedios.org