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Clasificación de Proteínas
• Según la COMPOSICIÓN:– PROTEÍNAS SIMPLES U
HOLOPROTEÍNAS: son aquellas que al hidrolizarse producen únicamente aminoácidos.
– PROTEÍNAS CONJUGADAS O HETEROPROTEÍNAS: son proteínas que al hidrolizarse producen además de los aminoácidos, otros componentes orgánicos o inorgánicos.
• La porción no protéica de una proteína conjugada se denomina "grupo prostético". Las proteínas cojugadas se subclasifican de acuerdo con la naturaleza de sus grupos prostéticos.
• Según su CONFORMACIÓN:– Conformación = orientación
tridimensional que adquieren los grupos característicos de una molécula en el espacio.
– PROTEÍNAS FIBROSAS: se constituyen por cadenas polipeptídicas alineadas en forma paralela; esto puede producir fibras que se trenzan sobre si mismas formando una "macrofibra", como en el caso del colágeno de los tendones o la a-queratina del cabello; o produce la formación de láminas como en el caso de las b-queratinas de las sedas naturales.
– PROTEÍNAS GLOBULARES: cadenas polipeptídicas que se enrollan sobre si mismas en formas intrincadas como un "nudillo de hilo enredado”, como una macro-estructura de tipo esférico.
Recordar!• Las proteínas fibrosas poseen alta resistencia al
corte por lo que son los principales soportes estructurales de los tejidos; son insolubles en agua y en soluciones salinas diliudas y en general más resistentes a los factores que las desnaturalizan.
• La mayoría las proteínas globulares son solubles en agua y por lo general desempeñan funciones de transporte en el organismo. Las enzimas, cuyo papel es la catálisis de las reacciones bioquímicas, son proteínas globulares.
Proteínas Fibrosas: cabello
Proteínas Globulares: enzimas
Hemoglobina Hexoquinasa
Funciones de las Proteínas– Estructurales: algunas proteínas pueden contribuir a la conformación de
órganos debido a su estructura fibrosa (ejemplo, la queratina en pelo, uñas, cutículas, cuernos, cascos).
– Movimiento: como el caso de las proteínas Actina y Miosina en los músculos, permiten movimiento de contracción y relajación.
– Transporte: se pueden unir a moléculas de menor tamaño y llevarlas por medio de la sangre, como por ejemplo la Hemoglobina o el oxígeno.
– Defensa: por ejemplo los anticuerpos en el torrente sanguíneo.– Almacenamiento de sustancias nutritivas, como el caso de la albúmina de la
clara de huevo, que se guarda en el hígado.– Señales químicas: ejemplo, la hormona del crecimiento en el torrente
sanguíneo o la transmisión del impulso nervioso.– Catálisis: como por ejemplo las enzimas que catalizan casi todas las
reacciones químicas en las células: amilasa, ATP sintetasa.– Reguladores: regulan la expresión del ADN; tienen un papel importante en el
crecimiento y diferenciación de las células.
Propiedades de las Proteínas• DESNATURALIZACIÓN• Consiste en la pérdida de la estructura terciaria,
por romperse los puentes que forman o estabilizan dicha estructura.
• Se produce por cambios de factores como temperatura (el ejemplo del huevo cocido o frito ), variaciones del pH. En algunos casos, si las condiciones se restablecen, una proteína desnaturalizada puede volver a su anterior plegamiento o conformación, proceso que se denomina renaturalización.
ENZIMAS
IntroducciónIntroducción
• En los diversos compartimientos celulares transcurre un gran número de reacciones químicas que proporcionan a la célula energía y los componentes necesarios para su mantenimiento.
• La vida depende de la existencia de catalizadores poderosos y específicos
ConceptoConcepto
Son catalizadores biológicos, la mayor parte de las veces de naturaleza proteica.
Su actividad fue reconocida durante los estudios acerca de la digestión en el estómago entre 1780 y 1825Luis Pasteur reconoció que la fermentación del azúcar a alcohol, se hallaba catalizada por enzimas, que él denominó “fermentos” En 1897, E. Buchner, contrariamente a lo postulado por Pasteur, demostró que las enzimas podían actuar independientemente de la estructura de las células de levadura.
Características de las EnzimasCaracterísticas de las Enzimas• Son inestables: Se desnaturalizan por
cambios fisicoquímicos como la temperatura.
• Alta eficacia como catalizadores• Alto grado de especificidad:
– Cada enzima solo reconoce un determinado sustrato sobre el que realiza un solo cambio.
– Las células producen un enzima para cada una de las reacciones químicas que se producen en su metabolismo.
Características de las EnzimasCaracterísticas de las Enzimas• No sufren modificación al final de la
reacción.• No cambian la constante de equilibrio de
una reacción química.• Actúan en condiciones moderadas de
presión y temperatura.• Las enzimas pueden tener naturaleza
exclusivamente proteica, o además necesitar de la presencia de alguna otra molécula o ión, que se denomina cofactor cofactor o coenzimao coenzima.
Características de las EnzimasCaracterísticas de las Enzimas• La coenzima es una molécula de naturaleza
orgánica o inorgánica, cuya presencia es necesaria para la activación de la enzima.
• La coenzima, puede ser un ión o una molécula orgánica de baja masa molecular.
• Cuando la coenzima no puede ser sintetizada por el organismo, debe ingerirse en pequeñas cantidades y se denomina Vitamina.
Ke
A BS P
S representa el (los) reactante(s) (llamado sustrato)
P representa el (los) producto(s)
Las Reacciones químicas son reversibles.
Las enzimas pueden catalizar una reacción de manera reversible o irreversible
S+E P+E
La Reacción EnzimáticaLa Reacción Enzimática
Las enzimas NO llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables, no modifican el sentido de los equilibrios químicos, sino que aceleran su consecución.
La Reacción EnzimáticaLa Reacción Enzimática
(a) Enzimas: el sitio activo
unión del sustrato a la enzima
Casi todas las reacciones en células vivas son catalizadas y controladas por enzimas.
Catalizadores biológicos, convirtiendo sustancias en otros productos sin sufrir cambio alguno.
La Reacción EnzimáticaLa Reacción Enzimática
Reacción con y sin enzimaReacción con y sin enzima
• Cuando se forma esta interacción baja la energía de activación necesaria para poder llevar a cabo la reacción.
Energía de activación
Curso de la reacción
Sin enzima Con enzima
Reacción con y sin enzimaReacción con y sin enzima
Clasificación de las enzimasClasificación de las enzimas
Factores que afectan la actividad Factores que afectan la actividad enzimática.enzimática.
• Concentración de enzima• Temperatura• pH• Concentración de sustrato• Inhibidores
Animales, plantas y microorganismos como fuentes de
enzimas
Descubrimiento de enzimas digestivas siglo XIX.Desarrollo de métodos para obtención de enzimas de matanza de animales.
Pepsina del estómago de cerdos y ganado, del cuajo del estómago de terneros.Cócteles de enzimas con tripsina, quimiotripsina, lipasas y amilasas del páncreas de cerdo.
Plantas fuentes potenciales de enzimas a escala industrial.Granos, remojar y germinar, se convierten en malta que contiene amilasas y proteasas usadas en la producción de cerveza y la destilación de bebidas alcohólicas.
Siglo XIX, métodos simples para obtención de grandes cantidades de proteasas de la savia de plantas tropicales.
Ablandadores de carne, digestión y limpieza de lentes de contacto.
Papaina y quimiopapaina del árbol de la papaya.
Ficina de higueras.
Bromelaina del tallo de la planta de la piña.
Fácil manejoAlto
rendimientoEstabilidad
X X
Producción de grandes cantidades a bajo costo.
No afectada por las estaciones del año.Uso de procesos de selección que aumentan la producción.
Producción de enzimas hechas a medida a través de ingeniería genética y diseño de proteínas.
Enzimas hidrolíticas simples como:proteasas, amilasas, pectinasasDegradan polímeros naturales como proteínas, almidones o pectinaEnzimas extracelulares
Fácil extracción
Poco específicas
Rhizopus sp
Jokichi Takamine1894
Enzima takadiastasaA partir de hongos
La primera enzima producida industrialmente fue la amilasa fúngica takadiastasa, empleada en USA como agente farmacéutico (para los desórdenes intestinales) en 1894
Enzimas Microbianas y sus aplicaciones
Enzima Fuente Aplicación industrial Industria
Amilasa Hongos Pan Panadera
Bacterias Revestimientos amiláceos Papelera
Hongos Fabricación de jarabe y glucosa Alimentaria
Bacterias Almidonado en frío de la ropa Almidón
Hongos Ayuda digestiva Farmacéutica
Bacterias Eliminación de revestimientos Textil
Bacterias Eliminación de manchas; detergentes Lavandería
Proteasa Hongos Pan Panadera
Bacterias Eliminación de manchas Limpieza en seco
Bacterias Ablandador de la carne Cárnica
Bacterias Limpieza de las heridas Medicina
Bacterias Eliminación de revestimientos Textil
Bacterias Detergente doméstico Lavandería
Invertasa Levadura Relleno de caramelos Confitería
Glucosa Oxidasa Hongos Eliminación de glucosa y oxígeno, papeles para pruebas de la diabetes
AlimentariaFarmacéutica
Glucosa Isomerasa Bacterias Jarabe de cereales rico en glucosa Bebidas refrescantes
Pectinasa Hongos Prensado, clarificación del vino Zumos de frutas
Renina Hongos Coagulación de la leche Quesera
Celulasa Bacterias Suavizante y abrillantador de tejidos; detergente Lavandería
Lipasa Hongos Degradar la grasa Lechería, lavandería
Lactasa Hongos Degradar la lactosa a glucosa y galactosa Lechería, alimentos
DNA polimerasa Bacterias; Archea Replicación del DNA por PCR Investigación biológica y forense
Aplicaciones en la Agroindustria
Aplicaciones de las Enzimas Microbianas
Enzima Fuente Aplicación industrial IndustriaAmilasa Hongos Pan Panadera
Bacterias
Revestimientos amiláceos
Papelera
Hongos Fabricación de jarabe y glucosa
Alimentaria
Bacterias
Almidonado en frío de la ropa
Almidón
Hongos Ayuda digestiva FarmacéuticaBacterias
Eliminación de revestimientos
Textil
Bacterias
Eliminación de manchas; detergentes
Lavandería
Amilasas
AlmidónCompuesto de almacenamiento de energía en plantas (maíz, arroz, patata, trigo).
Fuente de nutrición muy importante en animales y humanos (70-80%).
AmilasasDegradación del polisacárido almidón.
Últimos 20 años las amilasas han reemplazado la hidrólisis ácida.-amilasa de Bacillus y glucoamilasa de Aspergillus.
Sacarificación genera mucha dextrosa, degradación de almidón más corta, sin tratamiento ácido.
AmilasasProducción de Cerveza
Reemplazo de malta por granos sin germinar de maíz o arroz, prácticamente no contienen enzimas.
Se añaden enzimas, amilasas, glucanasas y proteasas, de hongos y bacterias.
Almidón a azúcares que sufren fermentación alcohólica por levaduras.
AmilasasHornear pan
El uso de enzimas en panadería se ha vuelto popular.
Las amilasas aceleran la degradación del almidón, y así aumenta el contenido de azúcar en la masa, acelerando el proceso de fermentación.El volumen del pan preparado con enzimas aumenta.
AmilasasDesengomado
Desengomado. Las amilasas eliminan la goma protectora basada en almidón, para hacer la mezclilla elástica.Antes se hacía con amilasas obtenidas de malta o de páncreas de animales, pero hoy en día se obtienen de bacterias.Enzimas resistentes a altas temperaturas para acelerar el proceso.
Enzima Fuente Aplicación industrial IndustriaProteasa Hongos Pan Panadera
Bacterias
Eliminación de manchas Limpieza en seco
Bacterias
Ablandador de la carne Cárnica
Bacterias
Limpieza de las heridas Medicina
Bacterias
Eliminación de revestimientos
Textil
Bacterias
Detergente doméstico Lavandería
Aplicaciones de las Enzimas Microbianas
ProteasasAblandan la carne
La papaya contiene altas concentraciones de las proteasas papaina y quimiopapaina.
Degradan el tejido conectivo de la carne, como el colágeno y la elastina, haciéndola más tierna.
ProteasasAblandan la carne
Se usan toneladas de papaina en polvo cada año para ablandar la carne en muchos países.
Ficina del árbol de higos y bromelaina del ananá
Se frota la carne y se deja a temperatura ambiente varias horas.
ProteasasHornear pan
El gluten se degrada por proteasas obtenidas de hongos para hacer la masa más fácil de manejar y aumenta su capacidad para retener burbujas de aire.
El gluten se une parcialmente al agua y tiene consistencia de gel.
Las proteasas degradan las proteínas pegajosas (gluten) en la masa.
ProteasasSuavizan el cuero
Las proteasas de microorganismos son altamente efectivas en la producción de cuero.
Después de remover el pelo y antes de curtir, el cuero debe ser suavizado por un proceso conocido como rendido o purga.
Antiguamente se sumergía en agua y estiércol fermentado de perro o pájaro, que son un campo de cultivo para las bacterias que producen proteasas suavizantes de cuero.
Enzimas Microbianas y sus aplicacionesEnzima Fuente Aplicación industrial IndustriaInvertasa Levadur
aRelleno de caramelos Confitería
Glucosa Oxidasa Hongos Eliminación de glucosa y oxígeno, papeles para pruebas de la diabetes
AlimentariaFarmacéutica
Glucosa Isomerasa
Bacterias
Jarabe de cereales rico en glucosa
Bebidas refrescantes
Pectinasa Hongos Prensado, clarificación del vino
Zumos de frutas
Renina Hongos Coagulación de la leche QueseraCelulasa Bacteria
sSuavizante y abrillantador de tejidos; detergente
Lavandería
Lipasa Hongos Degradar la grasa Lechería, lavandería
Lactasa Hongos Degradar la lactosa a glucosa y galactosa
Lechería, alimentos
DNA polimerasa Bacterias; Archea
Replicación del DNA por PCR
Investigación biológica y forense.
PectinasasProducción de zumo de frutas
Al prensar fruta y vegetales para la obtención de jugo, las pectinas de alto peso molecular reducen la producción.
Se pica la fruta y se añaden pectinasas para degradar las pectinas de larga cadena.
Pectinasas procedentes de cultivos sumergidos de Aspergillus y Rhizopus.
Se reduce la viscosidad del zumo, facilitando la filtración y se obtiene más cantidad.Alimentación de bebés, las pectinasas maceran las fruta y los vegetales para hacerlos más suaves y fáciles de comer.
Detergentes biológicosLa aplicación más importante de las enzimas hidrolíticas
+ Las manchas que contienen proteínas son difíciles de remover. Proteínas no se disuelven fácilmente en agua.
+ A altas temperaturas, la proteína se cuaja en las fibras textiles y es más difícil de eliminar.
+ Polvo, hollín y materia orgánica como grasas, proteínas, carbohidratos y pigmentos. Las grasas y las proteínas actúan como pegamento.
+ Los detergentes sueltan la grasa de la tela, las proteínas permanecen en el material.
Detergentes biológicosLa aplicación más importante de las enzimas hidrolíticas
Descubrimiento de la subtilisina de Bacillus lincheniformis.
Producción a gran escala de detergentes biológicos 1960.
Enzimas pancreáticas poco estables y muy caras.
Activa bajo condiciones alcalinas.
Detergentes biológicosLa aplicación más importante de las enzimas hidrolíticas
Proteasas 1:50, actividad óptima durante el proceso de lavado.
Detergentes biológicos usados ampliamente, desde mediados 1960.
Degradan proteínas pegadas en aminoácidos y péptidos de cadena corta.Las proteínas son desprendidas de las fibras textiles y eliminadas.
Detergentes biológicosLa aplicación más importante de las enzimas hidrolíticas
Disuelven manchas vino tinto, pasto, fruta, café y te, y mezclas de manchas más comunes.
La eliminación enzimática de manchas: proteasas, lipasas y amilasas.
Actividad óptima 50-60ºC. No necesita hervir.
Helado de fruta, el yogurt o la salsa de tomate no sólo contiene pigmento, también proteínas y grasas.Salsa, ketchup y comidas preparadas contienen pigmento, proteínas, grasas y almidón.
Detergentes biológicosLa aplicación más importante de las enzimas hidrolíticas
Enzimas en la Agroindustria• Son muy antiguas sus aplicaciones• Se usaron enzimas de un modo inconsciente hasta
finales del siglo XIX en que se descubrieron los artífices de las reacciones
• Es un gran activo económico, y la investigación va encaminada a la purificación y la obtención de enzimas concretas para funciones concretas
Industrias LácteasFabricación del Queso
• Es una de las mas antiguas aplicaciones enzimáticas de la industria alimentaria.
• Para la producción de queso se usaban cuajos, estómagos enteros de vacas y otros rumiantes.
• En otras culturas, el queso se conseguía con vegetales como la papaya, que contienen otra clase de enzimas.
Industrias LácteasFabricación del Queso
• La operación más importante es la coagulación de la caseína.
• Para ello utilizamos una serie de enzimas que podemos encontrar en vegetales o animales.
• La pepsina y la quimosina son las enzimas más importantes en esto.
• Se encuentran en el cuajo de varios animales, entre ellos los rumiantes.
Industrias LácteasFabricación del Queso
• Otras enzimas como papaina o rennina.• Estos producen coágulos elásticos.• La utilización de unas u otras enzimas
repercute activamente en el sabor y en la naturaleza del queso.
Industrias Lácteas• La lactasa es el enzima que
consigue romper la lactosa, que es el azúcar que contiene la leche.
• Mucha gente es intolerante a la lactosa.
• Existen en el mercado leches que vienen con lactasa.
Industria Panadera• La más comúnmente utilizada es la lipoxidasa,
que conjuntamente con el blanqueante, le da a la masa un carácter más manejable.
• Esta contenida en la harina de soya y de otras leguminosas.
Industria Panadera• Para aumentar la acción de la levadura se
añade amilasa, en forma de harina de malta.• Se usan para ello también algunos mohos que
contienen la enzima.• La harina de malta, tiene un inconveniente, y
es que cambia el color del pan.
Industria Panadera• La proteasa rompe el gluten, una proteína
contenida en algunos cereales.• La rotura del gluten conlleva una mayor
plasticidad de la masa.• Es un aditivo importante en la fabricación de
bizcochos.
Industria Cervecera• La papaina se usa para romper algunas
proteínas de la cerveza para evitar que se enturbie cuando se almacena o se refrigera.
• Se pueden conseguir estas enzimas y otras parecidas, de similares funciones de algunas frutas tropicales como la piña.
Industria Cervecera• El proceso fundamental es la rotura del almidón.• Los azúcares simples formados son fermentados por
las levaduras.• Esto se lleva a cabo con las amilasas, provenientes de
la malta.• A veces se añaden otros almidones como de arroz o
papa para aprovechar al máximo la actividad de las enzimas.
Fabricación de Zumo• Las peptinas provocan que los zumos sean
demasiado viscosos y turbios.• Esto se elimina con enzimas amilasas,
contenidos en el propio zumo o que se pueden añadir.
• En el proceso, como subproducto tenemos metanol, que aparece en muy baja concentración.
Obtención de Glucosa y Fructosa a partir de Maíz
• Con la harina del maíz, ayudados por las enzimas alfa-amilasas y amiloglucosidasas conseguiremos jarabes de gran calidad.
• Antes se conseguía por la hidrólisis del almidón por parte de un ácido. Posteriormente, la glucosa se puede transformar a fructosa (más dulce) por la acción de la glucosa-somerasa.
Obtención de Glucosa y Fructosa a a partir de Maíz
• Estos jarabes se usan como edulcorantes en bebidas refrescantes.
• Se han conseguido producir a un precio muy competitivo.
• La UE ha pasado a proteger a la industria azucarera convencional (remolacha y caña) para evitar su hundimiento por esta nueva forma de conseguir azúcares.
Refinado de Azúcar• La rafinosa puede complicar la extracción de
la sacarosa.• El enzima raffinosutilizer, producido por el
hongo morteirella vinaceae se encarga de degradar la rafinosa, facilitando la cristalización y produciendo además sacarosa
Más Aplicaciones Agroindustriales
• En productos derivados del huevo, se añade glucosa-oxidasa y catalasa para evitar que se oscurezcan.
• Bromelaína y papaína se usan para ablandar la carne.
• La lactoperoxidasa ayuda a conservar productos lácteos.