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042-828-6525
www.takara.co.kr
Clontech 판매 주년 기념
3
F L U O R E S C E N T P R O T E I N S & R E P O R T E R S
tdTomato GFP
Applications of Living Colors Fluorescent ProteinsClontech’s fluorescent proteins are available in plasmid, lentiviral, and retroviral vector formats for a range of key applications. Visit www.clontech.com for a complete list of our vectors.
Fusions
FRET
Cellular & subcellular labeling
Gene expression
Kinetic studies
Cell capture
Cell cycle reporters
Proteasome activity analysis
Promoter reporters
Timed gene expression
In vivo imaging
Stem cell applications
Figure 1. Subcellular labeling. AcGFP1 and DsRed2 protein fusions were transiently trans-fected and visualized by fluorescence microscopy. Panel A. pAcGFP1-Mito (mitochondria) and pDsRed2-Nuc (nucleus) in HEK 293 cells. Panel B. pAcGFP1-Golgi (Golgi apparatus) and pDsRed2-Nuc (nucleus) in HEK 293 cells.
Figure 2. In vivo Imaging. False-color overlay images (regions of interest encircled) highlight tdTomato fluorescence, but not GFP fluorescence, in the cadaver model. Panel A. Implanted tube with 100 x 106 MDA-MB-231-tdTomato-expressing cells, imaged with the DsRed filter set. Panel B. Implanted tube with 100 x 106 MDA-MB-231-GFP-expressing cells, imaged with the GFP filter set. Exposure times: 1 sec.
A B A B
Selected Applications of Living Colors Fluorescent Proteins
Application Recommended Products Comments
Protein localization Fusion fluorescent proteins from far red to cyan are available in a variety of vector formats for both N- and C-terminal fusions.
AcGFP1, DsRed-Monomer, and mCherry proteins are ideal for fusions, since they are monomeric and least disruptive to the function of the protein of interest.
Bacterial expression We offer a variety of basic fluorescent protein vectors for bacterial expression.
The bacterial expression of fluorescent proteins is driven by the lac promoter.
Subcellular labeling AcGFP1DsRed-MonomerDsRed2mCherryHcRed1
Available vectors formats allow targeting of fluorescent proteins to the golgi complexes, actin filaments, plasma membranes, nuclei, microtubules, endoplasmic reticuli, mitochon-dria, peroxisomes, and endosomes (Figure 1).
In vivo imaging mPlumE2-CrimsonHcRedtdTomato
Red and far red fluorescent proteins are ideal for in vivo imaging due to their reduced autofluorescence (Figure 2).
Fluorescence resonance energy transfer (FRET)
AcGFP1 & DsRed-MonomerAcGFP1 & mCherrymOrange & mStrawberrymOrange & mCherry
FRET can be used to monitor the proximity and interaction of two proteins. Success of FRET relies on the correct pairing of donor and acceptor fluorescent proteins.
Protein dynamics & half-life PAmCherry—fluoresces when activated by 350–400 nm light.
Dendra2—converts from green to red when exposed to UV or blue light.
Photoactivatable and photoconvertible fluorescent proteins are powerful tools for studying protein half-life and trafficking, because they only mark molecules that were present at the time of activation.
고 객고 객 (학술/제품문의) 02-2081-2510 지원지원센터센터 [email protected]
Tel. 042-828-6525 대 전 지 사대 전 지 사 (대전•충청지역 제품주문)
C L O N T E C H C A M P A I G N E
• Full color spectrum-cyan부터 far red까지 총 26 종 보유
• 최적화된 형광 & photostability
• 다양한 application 가능
• EGFP보다 뛰어난 성능의 AcGFP 보유
• Multicolor imaging에 적합
• Live cell에서 쉽게 검출 가능
• Specific한 fluorescent protein antibody 보유
Application에 따른 선택 가이드
Application 추천 제품 비고
Protein localization • N- 또는 C- 말단에 fusion AcGFP1, DsRed-Monomer, mCherry 단백질은 monomeric 형태로
• 다양한 형광 단백질 (cyan to far red) 타겟 단백질의 기능을 방해를 줄일 수 있어서 fusion 단백질 실험에 이상적
Bacterial expression • 다양한 bacterial expression vector 보유 Lac promoter 이용
Subcellular labeling
• AcGFP1 세포 소기관을 표식할 수 있는 다양한 형태의 vector 보유 • DsRed-Monomer (golgi complexes,actin filaments, plasma membranes, nuclei,
• DsRed2 microtubules, endoplasmic reticuli, mitochondria, Peroxisomes,
• mCherry endosomes) (Figure 1). • HcRed1
In vivo imaging
• mPlum
• E2-Crimson In vivo imaging에는 백그라운드를 줄여줄 수 있는 red나 far red
• HcRed 형광 단백질 추천 (Figure 2).
• tdTomato
Fluorescence • AcGFP1 & DsRed-Monomer
resonance energy • AcGFP1 & mCherry FRET은 두 단백질의 상호작용을 모니터 가능
transfer • mOrange & mStrawberry 성공적인 FRET실험을 위해서는 올바른 pair 선택이 중요
(FRET) • mOrange & mCherry
Protein dynamics &
• PAmCherry - 350-400nm의 빛을
Photoactivatable과 photoconvertible 형광 단백질은 half-life와
half & life
조사하면 형광을 띰
trafficking을 연구할 수 있는 강력한 방법 • Dendra2 - UV 또는 푸른 빛을 조사하면
녹색에서 붉은색으로 변화
파격 소비자 할인가 165,000원
* 제품 리스트 참조 (VAT 별도)
Vector 한정
수량
Living Colors Fluorescent Proteins다수의 citation을 보유하고 있는
Clontech vector(FP)에는 Clontech 항체가 최적
Clontech에서는 다양한 fluorescent vector와 함께 specific한 antibody를 보유하고 있습니다. Clontech의 항체는 western blot, immunoprecipitation, immu-
nocytochemistry를 포함하여 다양한 실험에 적용 가능합니다.
4
F L U O R E S C E N T P R O T E I N S & R E P O R T E R S
AntibodiesClontech offers highly specific antibodies for the detection of our Living Colors fluorescent proteins. Our antibodies are compatible with many applications, including Western blotting, immunoprecipitation, and immunocytochemistry.
EGFP Monoclonal
Antibody
Full-Length ZsGreen
Polyclonal Antibody
A.v. Monoclonal
Antibody (JL-8)
Full-Length GFP
Polyclonal Antibody
A.v. Peptide Antibody
GFP Monoclonal
Antibody
Proven Usesa WB, IP, IC WB WB, IP, IC WB WB, IP, IC WB, IP, IC
AcGFP1
ZsGreen1
GFP
GFPuv
EGFPb
EYFPb
ECFPb
a WB = Western Blot, IP = immunoprecipitation, IC = immunocytochemistry
b Not sold by Clontech
Antibody Selection Guide for Living Colors Fluorescent Proteins
DsRed Monoclonal Antibody
DsRed Polyclonal Antibody
mCherry Monoclonal Antibody
Anti-RCFP Polyclonal Pan Antibody
Proven Usesa WB WB, IP, IC WB WB
mPlum
E2-Crimson
mRaspberry
HcRed1
mCherry
mStrawberry
PAmCherry
AsRed2
DsRed-Monomer
DsRed2
tdTomato
DsRed-Express
DsRed-Express2
mOrange
mOrange2
mBanana
ZsYellow1
Timer
ZsGreen1
AmCyan1
고 객고 객 (학술/제품문의) 02-2081-2510 지원지원센터센터 [email protected]
Tel. 042-828-6525 대 전 지 사대 전 지 사 (대전•충청지역 제품주문)
관련 제품 리스트
Code 제품명 용량
632393/632392 Living Colors DsRed Monoclonal Antibody 20 μl/200 μl
632496 Living Colors DsRed Polyclonal Antibody 100 μl
632543 Living Colors mCherry Monoclonal Antibody 100 μl
632475 Living Colors Anti-RCFP Polyclonal Pan Antibody 100 μl
632377/632376 Living Colors A.v. Peptide Antibody 200 μl/1 ml
632569 Living Colors EGFP Monoclonal Antibody 100 μl
632375 Living Colors GFP Monoclonal Antibody 100 μl
632474 Living Colors Full-Length ZsGreen Polyclonal Antibody 100 μl
632380/632381 Living Colors A.v. Monoclonal Antibody (JL-8) 20 μl/200 μl
632593/632592 Living Colors Full-Length GFP Polyclonal Antibody 20 μl/100 μl
O p t i m i z e d L e n t i v i r a l V e c t o r s
렌티바이러스 발현 시스템의 특징
관련 제품 리스트
제품코드 제품명 용량 특징
Lentiviral Packaging systems
631247 Lenti-X HTX Packaging System 20 회 광범위한 세포에 적용 가능한 pantropic VSV-G viral
envelope protein의 렌티바이러스 생산
631251 Lenti-X Ecotropic Packaging System 20 회
Mouse, rat 세포에 효과적으로 적용 가능한 MLV
ecotropic envelope glycoprotien: gp70 을 가진 렌티
바이러스 생산
631258 Lenti-X HTX Packaging System Genomic으로 삽입되지 않는 pantropic VSV-G viral
(Integrase Deficient) 20 회
envelope protein의 렌티바이러스 생산
632180 Lenti-X 293T Cell Line 1 ml 렌티바이러스 패키징용 세포주
631317/631318 Xfect 100 회/300 회 Transfection reagent
Lentiviral Transduction Tools
631243/631244 Lenti-X GoStix 20 회/ 50 회 최적의 virus harvest time 결정
631235 Lenti-X qRT-PCR Titration Kit 200 회 qPCR 방법으로 HIV-1 기반 렌티바이러스의 역가 측정
632200 Lenti-X p24 Rapid Titer Kit 96 회 Viral supernatant 내 P24 protein을 ELISA방법으로
역가측정
631231/631232 Lenti-X Concentrator 100 ml/200 ml 렌티바이러스 농축 시약
631233/631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 회/5회 렌티바이러스 정제를 통해 오염물질 제거
631254 Lenti-X Accelerator Starter Kit each Polybrene없이 신속하고 효과적인 transduction
631256/631257 Lenti-X Accelerator 400 ul/1,000 ul
T110A RetroNectine Precoated Dish 10 dishes 렌티바이러스나 레트로바이러스를 이용한
transduction 효과 향상T100A/T100B RetroNectin (Recombinant Human Fibronectin Fragment) 0.5 mg/2.5 mg - Jurkat cell이나 조혈모세포에 유전자 도입시 유용
631471 Ecotropic Receptor Booster 20 회 타겟 세포 도입시 사용
631239 Lenti-X Provirus Quantitation Kit 200 회 Integrated lentivirus(provirus) copy수 측정
631263 Lenti-X Integration Site Analysis Kit each 타겟 세포의 gDNA에서 provirus 위치 추적
재조합 렌티바이러스는 primary cell, 줄기세포, 신경세포와 같이 유전자 도입이 어려운 세포와 비분열세포등 대부분의 포유류세포에 유전자를 도
입할 수 있는 강력한 바이러스 시스템이다. pLVX lentiviral vector와 Lenti-X HTX Packaging System Mix를 Xfect Transfection Reagent로 Lenti
-X 293T 세포주에 cotransfection하면 48시간 후에 높은 역가의 재조합 렌티바이러스를 얻을 수 있다. 기본적인 lentiviral vector부터 shRNA에 적
용가능한 vector, inducible gene expression이 가능한 lenti-tet vector 형광을 리포터로 활용 가능한 형태의 vector, luciferase reporter vector까지
Clontech에서는 다양한 종류의 lentiviral vector를 보유하고 있다. (자세한 제품 리스트는 뒷장 참조)
최적화된 Lenti-X Vector
RRE(rev response element)과 cPPT/CTS (central polypurine tract/central
termination sequence)와 WPRE (woodchuck hepatitis virus post transcriptional
regulatory element)를 포함하여 고역가의 렌티바이러스 조제 가능하며, 타겟 세포
로의 transduction과 유전자 발현을 증가시킨다.
* 다양한 형태의 lentiviral vector 보유, 뒷장 제품 리스트 참조
최적화된 Lenti-X™ Vector와 발현 시스템
03 / 04
5' LTR WPRE
RREcPPT/CTS
Core lentiviral vector backbone
Vector-specific elements
3' LTR
Lentiviral vector의 핵심 부분
O P T I M I Z E D L E N T I - X V E C T O R S Y S T E M S F O R A N Y A P P L I C A T I O N
34
PurorPEF1
PEF1 FP
FP = fluorescent protein (mCherry or ZsGreen1)
MC
S
pLVX-EF1 -IRES-Puro*
pLVX-EF1 -IRES-FP**
PEF1 FP
PEF1 FP
FP = fluorescent protein (AcGFP1, DsRed-Monomer, or mCherry)
MC
S
MC
S
pLVX-EF1 -FP-N1**
pLVX-EF1 -FP-C1**
IRES
MC
S
IRES
PPGKPPGK
PPGK Puror
Puror
Neo/HygPCMV IE IRES Puror
FP = fluorescent protein (mCherry, tdTomato, or ZsGreen1)
PCMV IE IRES FP
MC
SM
CS
pLVX-IRES-Puro/Neo/Hyg*
pLVX-IRES-FP*
Constitutive cDNA Expression
PCMV IE PurorPPGKMC
S
pLVX-Puro*
shRNA Expression
PurorPU6 PPGK
PU6 PCMV IE ZsGreen1
MC
SM
CS
pLVX-shRNA1*
pLVX-shRNA2**
Tetracycline-Inducible Expression
ProteoTuner™ Protein Control
Bicistronic Expression
Fluorescent Protein Expression
EF-1 Alpha Promoter
Promoter Reporters
PCMV IE DD IRES Puror
PCMV IE IRES ZsGreen1DD
MC
SM
CS
pLVX-PTuner**
pLVX-PTuner Green**
DD
FP = fluorescent protein (AmCyan1, ZsGreen1, or tdTomato)
MetLuc
FP
MC
SM
CS
pLVX-MetLuc*
pLVX-DD-FP*
PCMV IE PurorPPGKFP
PCMV IE PurorPPGKFP
FP = fluorescent protein (AcGFP1, AmCyan1, DsRed-Express2,DsRed-Monomer, mCherry, tdTomato, or ZsGreen1)
MC
S
MC
S
pLVX-FP-N1**
pLVX-FP-C1**
pLVX-Tet3G
pLVX-TRE3G
PCMV IE Tet-On 3G IRES Neor
PurorPTRE3GV PPGKMC
S
DD FP
MC
S
pLVX-DD-FP*
형광단백질이나 분비형 luciferase를 발현시키는 리포터시스템을 사용하여 promoter의 활성을 모니터 할 수 있다.
ProteoTuner destabilization domain(DD) 뒤쪽에 목적 유전자를 클로닝하면 리간드ligand인 Shield1을 이용하여 목적유전자의 안정화를 조절할 수 있다. Shield1은 소분자 리간드로 DD와 융합된 단백질이 proteosomal degradation되는 것을 방지하여 “protein on”으로 세포에 축적되도록 한다.
U6 promoter 뒤쪽으로 목적 shRNA 서열을 클로닝하면 트랜스펙션 시키기 어려운 세포에서도 유전자 발현을 knockdown시킬 수 있다.
Tet-On 3G나 Tet-Express vector system을 사용하면 정밀하고 높은 유전자 유도발현을 가능하게 한다.CMV promoter를 이용해 목적유전자를 발현시키고 항생제 마커를 활용해 렌티바이러스가 integration된 세포를 선별한다.
IRES가 포함된 렌티바이러스 vector를 이용하면 하나의 전사산물에서 목적유전자와 또 하나의 유전자(항생제 내성 유전자 또는 형광발현 유전자)를 공발현시킬 수 있다.
다양한 형광단백질(FP) 중 하나가 MCS의 N-말단 또는 C-말단에 클로닝 되어있어 목적 유전자가 단백질로 발현되고 세포내 위치하는 것을 모니터 할 수 있게 한다.
* Vector는 system 구성품으로만 판매된다.** Vector는 별도 구매 가능하다.
EF-1 α promoter를 이용하면 조혈모세포나 줄기세포와 같은 세포에서 CMV promoter 사용시 나타나는 silencing을 극복하고 목적유전자를 발현시킬 수 있다.
FP = fluorescent protein (AmCyan1, ZsGreen1, or tdTomato)
Promoter 특징
•CMV : 도입한 유전자를 항상 안정하게 발현한다
•EF-1α : 다른 promoter(CMV 등)로 발현이 낮거나, 줄기세포와 같이 promoter가 silencing이 되는 경우 유용하다.
※ PGK promoter의 하류에 항생제 내성 유전자(neo, hyg, puro 내성)가 포함되어 있어 stable cell line 선별에 이용할 수 있다.
형광단백질의 특징
•AcGFP1(monomer) : 목적단백질과의 융합 발현에 적합하다.
•ZsGreen1(Tetramer) : 유전자 도입효율을 모니터하는 리포터 발현에 적합하다. (IRES서열에 의해 목적유전자와 별도로 각각 번역된다)
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최고의 Lentivirus delivery를 위한, 최적화된 Lentiviral Vector 한정
수량
T e t r a c y c l i n e I n d u c i b l e E x p r e s s i o n
관련 제품 리스트
Code 제품명 용량
Tet Gene expression system에 적합하도록 functional test가 완료된 고품질 FBS
631107/631106 Tet System Approved FBS, USDA-Approved 50 ml/500 ml
631105/631101 Tet System Approved FBS, US-Sourced 50 ml/500 ml
Tet Gene expression system의 유도물질
631311 Doxycycline 5 g
Selection 효율을 높이기 위해서
631625 Linear Hygromycin Marker 2 μg
631626 Linear Puromycin Marker 2 μg
항생제
631305/631306 Puromycin 25 mg/100 mg
631307/631308 G418 1 g/5 g
631309 Hygromycin B 1 g
Tet-On 3G, Tet-On/Off Advanced, TetR, Tet-Off protein를 검출할 수 있는 항체
631131/631132 TetR Monoclonal Antibody (Clone 9G9) 40 μg/200 μg
Tet-One vs Tet-On 3G 비교
Tet-One Tet-On 3G
기작 Tetracycline transactivation Tetracycline transactivation
포맷 1 vector 2 vector
유도물질 Doxycycline Doxycycline
Virus delivery available Lentiviral, Retroviral Lentiviral, Retroviral, Adenoviral
• 강력하게 유전자의 발현을 조절할 수 있는 Tet-On 3G vector를 기반으로 한 All-in-One Vector format
• 10 ng/ml의 doxycycline에도 반응하는 높은 민감도
• 낮은 백그라운드, 높은 유도발현 효율
최고의 Inducibe Expression, Clontech Tet-On System
Tet-One System강력한 Tet-On 3G에 편리함까지 더해진
Tet-On 3G transactivator protein는 human PGK promoter에 의해서 발현되며, doxycycline이 첨가되었을 경우에 TRE3G promoter에 결합하여
목적 유전자를 고발현 시킨다.
Tet-One system 기작
한정
수량
NEW
NEW
L u c i f e r a s e R e p o r t e r
• 빠른 검출 시간_ Cell lysis 과정이 필요없이 5-10분 만에 실험 완료
• 비용• 시간 절감_ 동일 cell 반복 실험이 가능하기 때문에 추가적인 cell culture/lysis 등의 과정이 불필요
• 동일 cell로 정확한 복수 데이터_ 배양 상층액을 이용하여, 복수 데이터 획득시 세포간 차이 제거
• Time-course 실험 적합_ Cell이 유지되기 때문에 transfection이 어렵거나 잘 성장하지 않는 cell도 간편하게
Ready-To-Glow Secreted LuciferaseCell lysis없이 신속하고 정확한 assay
Code 제품명 용량
631726/631727/631728 Ready-To-Glow Secreted Luciferase Reporter Assay 100 회/ 500 회/ 1,000 회
631739/631740 Ready-To-Glow Automation Kit 1,000 회/ 5,000 회
관련 제품 리스트
Ready-To-Glow Assay는
Cell Lysis 과정이 없다!
Ready-To-Glow 시스템은 배지로 분비된 Metridia Lu-
ciferase (MetLuc)의 활성을 측정한다. 따라서 cell lysis 과
정 없이, 배양 상층액을 샘플링할 수 있으며, substrate/
reaction buffer를 첨가하면 검출 가능하다 (우측).
기존의 non-Secreted luciferase 방법은 배지 제거, cell
의 washing 및 lysis 등의 복잡한 과정이 필요하기 때문
에 데이터 편차의 원인이 될 수 있다. 또한, 세포내 비특
이적인 반응의 영향 가능성도 있다. 이와 달리 Ready-
To-Glow Secreted Luciferase는 배양 상층액으로 검출
하므로, 이러한 영향을 배제할 수 있어 더 안정적인 데이
터를 얻을 수 있다.
•Ready-To-Glow™ Assay는 Cell Lysis 과정이 필요하지 않다!Secreted Luciferase Non-Secreted Luciferase
제품명 Cat.No. Size 구성품Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase Reporter Assay 631726 100 회 Luciferase Substrate 외Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase pMetLuc Vector Kit 631729 2 x 20 μg pMetLuc-Reporter Vector 외
631730 100 회Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase Reporter System 631731 500 회 pMetLuc Vector Kit & Luciferase Reporter Assay Kit
631732 1000 회Ready-To-GlowTM NFkB Secreted Luciferase Reporter System 631743 Each pNFκB-MetLuc2 Vector 외Ready-To-GlowTM CRE Secreted Luciferase Reporter System 631745 Each pCRE-MetLuc2-Reporter Vector 외Ready-To-GlowTM Dual Secreted Reporter Assay 631734 500 회 Luciferase substrate & SEAP substrate 외Ready-To-GlowTM Dual Secreted Reporter Vector Kit 631735 4 x 20 μg pMetLuc-Reporter Vector & pSEAP2- Vector 외
Ready-To-GlowTM 시스템은 배지로 분비된
Metridia Luciferase (MetLuc)의 활성을 측정
한다. 따라서 cell lysis 과정이 필요하지 않고, 배
양상층액을 샘플링하여, substrate/reaction
buffer를 첨가하면 검출이 가능하다 (우측).
기존의 비분비형 luciferase 이용한 방법은 배지
제거, cell의 washing 및 lysis 등의 복잡한 과
정이 필요하며 이는 데이터 편차의 원인이 되기도
한다. 또, 세포상의 검출법은 세포내 비특이적인
반응의 영향 가능성도 있다. 그러나 Ready-To-
GlowTM Secreted Luciferase를 이용하면 배
양 상층액을 샘플링하여 검출하므로, 이러한 영향
을 배제할 수 있어 더 안정적인 데이터를 얻을 수
있다.
•단, 10분내 검출 _ 배지로분비된 luciferase를이용하기때문에 cell lysis 과정이필요없어기존30분~40분소요되던실험을5-10분으로단축.
•동일세포로복수의데이터획득 _ 복수의데이터획득을위해다수의cell culture나 cell lysis 과정불필요
•귀중한 세포를 살아있는 상태로 실험에 이용 _ Transfection이 어렵거나 잘 성장하지 않는 세포도 살아있는 상태로 배양하면서 시간의 흐름에 따른 데이터 획득이 가능
•비용 절감 _ 동일세포로반복실험이가능하기때문에추가적인세포배양/세포용해등의과정이불필요
•Ready-To-Glow™ Assay는 Cell Lysis 과정이 필요하지 않다!Secreted Luciferase Non-Secreted Luciferase
제품명 Cat.No. Size 구성품Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase Reporter Assay 631726 100 회 Luciferase Substrate 외Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase pMetLuc Vector Kit 631729 2 x 20 μg pMetLuc-Reporter Vector 외
631730 100 회Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase Reporter System 631731 500 회 pMetLuc Vector Kit & Luciferase Reporter Assay Kit
631732 1000 회Ready-To-GlowTM NFkB Secreted Luciferase Reporter System 631743 Each pNFκB-MetLuc2 Vector 외Ready-To-GlowTM CRE Secreted Luciferase Reporter System 631745 Each pCRE-MetLuc2-Reporter Vector 외Ready-To-GlowTM Dual Secreted Reporter Assay 631734 500 회 Luciferase substrate & SEAP substrate 외Ready-To-GlowTM Dual Secreted Reporter Vector Kit 631735 4 x 20 μg pMetLuc-Reporter Vector & pSEAP2- Vector 외
Ready-To-GlowTM 시스템은 배지로 분비된
Metridia Luciferase (MetLuc)의 활성을 측정
한다. 따라서 cell lysis 과정이 필요하지 않고, 배
양상층액을 샘플링하여, substrate/reaction
buffer를 첨가하면 검출이 가능하다 (우측).
기존의 비분비형 luciferase 이용한 방법은 배지
제거, cell의 washing 및 lysis 등의 복잡한 과
정이 필요하며 이는 데이터 편차의 원인이 되기도
한다. 또, 세포상의 검출법은 세포내 비특이적인
반응의 영향 가능성도 있다. 그러나 Ready-To-
GlowTM Secreted Luciferase를 이용하면 배
양 상층액을 샘플링하여 검출하므로, 이러한 영향
을 배제할 수 있어 더 안정적인 데이터를 얻을 수
있다.
•단, 10분내 검출 _ 배지로분비된 luciferase를이용하기때문에 cell lysis 과정이필요없어기존30분~40분소요되던실험을5-10분으로단축.
•동일세포로복수의데이터획득 _ 복수의데이터획득을위해다수의cell culture나 cell lysis 과정불필요
•귀중한 세포를 살아있는 상태로 실험에 이용 _ Transfection이 어렵거나 잘 성장하지 않는 세포도 살아있는 상태로 배양하면서 시간의 흐름에 따른 데이터 획득이 가능
•비용 절감 _ 동일세포로반복실험이가능하기때문에추가적인세포배양/세포용해등의과정이불필요
•Ready-To-Glow™ Assay는 Cell Lysis 과정이 필요하지 않다!Secreted Luciferase Non-Secreted Luciferase
제품명 Cat.No. Size 구성품Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase Reporter Assay 631726 100 회 Luciferase Substrate 외Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase pMetLuc Vector Kit 631729 2 x 20 μg pMetLuc-Reporter Vector 외
631730 100 회Ready-To-GlowTM Secreted Luciferase Reporter System 631731 500 회 pMetLuc Vector Kit & Luciferase Reporter Assay Kit
631732 1000 회Ready-To-GlowTM NFkB Secreted Luciferase Reporter System 631743 Each pNFκB-MetLuc2 Vector 외Ready-To-GlowTM CRE Secreted Luciferase Reporter System 631745 Each pCRE-MetLuc2-Reporter Vector 외Ready-To-GlowTM Dual Secreted Reporter Assay 631734 500 회 Luciferase substrate & SEAP substrate 외Ready-To-GlowTM Dual Secreted Reporter Vector Kit 631735 4 x 20 μg pMetLuc-Reporter Vector & pSEAP2- Vector 외
Ready-To-GlowTM 시스템은 배지로 분비된
Metridia Luciferase (MetLuc)의 활성을 측정
한다. 따라서 cell lysis 과정이 필요하지 않고, 배
양상층액을 샘플링하여, substrate/reaction
buffer를 첨가하면 검출이 가능하다 (우측).
기존의 비분비형 luciferase 이용한 방법은 배지
제거, cell의 washing 및 lysis 등의 복잡한 과
정이 필요하며 이는 데이터 편차의 원인이 되기도
한다. 또, 세포상의 검출법은 세포내 비특이적인
반응의 영향 가능성도 있다. 그러나 Ready-To-
GlowTM Secreted Luciferase를 이용하면 배
양 상층액을 샘플링하여 검출하므로, 이러한 영향
을 배제할 수 있어 더 안정적인 데이터를 얻을 수
있다.
•단, 10분내 검출 _ 배지로분비된 luciferase를이용하기때문에 cell lysis 과정이필요없어기존30분~40분소요되던실험을5-10분으로단축.
•동일세포로복수의데이터획득 _ 복수의데이터획득을위해다수의cell culture나 cell lysis 과정불필요
•귀중한 세포를 살아있는 상태로 실험에 이용 _ Transfection이 어렵거나 잘 성장하지 않는 세포도 살아있는 상태로 배양하면서 시간의 흐름에 따른 데이터 획득이 가능
•비용 절감 _ 동일세포로반복실험이가능하기때문에추가적인세포배양/세포용해등의과정이불필요
Cell lysis 과정
없이 정확하고
안정적인 실험!
The FB14 represents a unique portable high performance luminometer.
ConceptThe FB14 is a very small, portable single tube luminometer that combines excellent performance with ease of use and versatility. Its built-in software is ideal for field measurements. When used in the lab, a powerful PC software can be added for numerous data analysis functions.
Detection SystemThe sample compartment is situated inside a sliding door, which initiates the measurement sequence upon closing. The proximity of the sample to the light detector and the use of a light reflector surrounding the major part of the vial produce optimal photon collection.The resulting efficiency, combined with the high-speed photon counter, provide a measurement performance which is unique in its class.
User Interface OptionsThe FB14 can be run from its embedded software, but can also be interfaced with a powerful PC-software package:The Single Tube Luminometer PC Software is designed for stationary use in the laboratory. In addition to the Quick Measurement function, it offers five additional protocol types: Single Assay, Dual Assay, Single Kinetics, Multiple Kinetics and Cut-off Assay. The operator can define new protocols of all five types. Highly flexible graphical presentation of kinetic data is supported.
Advanced Tools for The Life Sciences www.titertek-berthold.com
FB14 Portable Tube Luminometer
The FB14 can be used for any luminescent glow-type
application performed in single tube format, for example: · Water Testing
· ATP Assays
· Immunoassays
· DNA / RNA Probe Assays
· Toxicity Assays
· Biothreat Assays
ConceptThe FB12 system is ideal for measurement of glow type luminescence fromsingle samples. Due to the unique design, a variety of sample formats can be accommodated. FB12 Luminometer combines a very small footprintwith excellent sensitivity and outstanding ease of use.In stand-alone mode, FB12 is ready for standard measurements. Samplesare readily loaded into the retractable drawer. Closing the sample drawerautomatically initiates the measurement. An external printer may be connectedoptionally.The modular Windows® Luminometer PC-Software or the Pocket PC-Lumino-meter Software can further enhance performance by organizing the measure-ment dialog and data evaluation.
ApplicationsFB12 is the instrument of choice for all luminescent glow type applicationsperformed in single sample format, for example:· Reporter gene assays, including dual-reporter assays· ATP assays · Cell proliferation, cytotoxicity and biomass assays, apoptosis assays· Detection of mycoplasma contamination in cell culture· Cellular luminescence/reactive oxygen species· Environmental toxicity and mutagenicity assays
DetectorThe FB12 Luminometer features advanced photoncounting electronics coupledwith a highly sensitive detector, providing the lowest signal backgroundand highest linearity spanning 6 decades. No cumbersome internal calibrationis required and no gain switch is needed.Light collection is maximized through both the proximity of the sample to thedetector and the use of optimized light reflectors surrounding the samplevial. As a result, reporter gene assays using firefly luciferase can now detectless than 1000 molecules of the enzyme with the FB12 Luminometer.
Stand-alone Operation FB12 offers basic raw data, extended raw data and Cut-off measurementprotocols. The interface supports the addition of an external serial printer.Three softkeys allow easy and intuitive operation. Both delay and measure-ment time can be set in steps of 0.1s.
Windows PC Software PlatformThe capabilities of the FB12 Luminometer are enhanced by its PC-Software.Even complex tasks can be performed conveniently using the PC program whichruns on a Microsoft® Windows® platform. It provides a direct link to the Micro-soft® Excel spreadsheet program. All suitable Windows® features are supported.The software relies on open system architecture:The basic module for standard measurements meets most basic needs.For more demanding tasks, Single Assay, Dual Assay, Single Kinetics, MultipleKinetics and Cut-off Assay protocol types are available.
FB12 Performance and Ease of Use
Versatile sample formats
The Sirius L is a compact high performance tube luminometer with unique features:
The sample versatility is unmatched.
The Quickstart capabilities provide results on the fly.
The intuitive and powerful PC software sets the standard:
Windows®7 compatible, self-detecting USB-port.
Sirius L in Flash configuration (left) and Glow configuration (right)
Wide Range of ApplicationsThe Sirius L is the perfect choice for all luminescent flash and glow applications performed in single sample format, for example:
· Reporter gene assays, including dual-reporter assays· Rapid detection of mycoplasma contamination in cell cultures: Lonza MycoAlert®
· ATP assays· Cell proliferation, cytotoxicity and biomass assays· Apoptosis assays· Cellular luminescence/reactive oxygen species· Environmental toxicity and mutagenicity assays
Supersensitive DetectorThe Sirius L detects less than 0.5 zmol of firefly luciferase. Light collection is maximized through both the proximity of the sample to the detector and the use of optimized light reflectors surrounding the sample vial.
Quickstart CapabilitiesClosing of the sample drawer automatically initiates the measurement with no need to press any key. The automatic light shutter protects the detector from ambient light, making the instrument ready to measure from the moment the door is closed.
Sample FormatsThe sample chamber is designed for performance and flexibility. Accomodation of a variety of vial types: From 35 mm petri dishes to micro-fuge format to 20 ml vials, there is virtually no limit.
Various Injector OptionsThe instrument is available with up to two syringe-type automatic reagent injectors. The injection volume ranges from 20–500 µl. Ready-to go sample holders for precise injection are available for 1.5 ml and 2.5 ml microfuge tubes, as well as for 55 mm and 75 mm, 12 mm diameter tubes (standard format for most luminescence assays).
Requires minimal bench space15 cm
FB14휴대 가능한 luminometer
PC 없이 측정 가능
FB12다양한 tube 사용 가능한 luminometer
PC 없이 측정 가능
Sirius LInjector가 있어 편리한 luminometer
사용자를 위한 편리한 software
Luciferase Reporter System
최고 명성의 독일 Berthold Luminometer
한정
수량
대 전 지 사 042-828-6525 고 객 (제품문의) 02-2081-2510
지원센터 [email protected] (대전•충청지역 제품주문)
지역별 전문 대리점
그린비바이오 (주) (서울,인천,경기) 02-2633-7114
(주) 에스앤씨 (서울,인천,경기) 1644-5778
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(주) 진성에스엠알 (광주, 전남) 062-672-7631
(주) 프라임텍 (강원) 033-244-6969
브니엘바이오 (대구, 경북) 053-381-3611
(주) 대한과학 (부산, 울산, 경남) 051-247-2875
이엔바이오 (진주) 055-761-1036
(주) 셀피스 (제주) 064-722-6707
할인 제품 리스트Code 제품명
Tetracycline-Inducible Expression Systems
634303 pTetOne Vector Set
631846 pLVX-TetOne Vector Set
631849 pLVX-TetOne-Puro Vector Set
634306 pRetroX-TetOne Vector Set
634309 pRetroX-TetOne-Puro Vector Set
631173 pTRE3G Vector Set
631174 pTRE3G-IRES Vector Set
631332 pTRE3G-BI Vector Set
631333 pTRE3G-BI-mCherry Vector Set
631175 pTRE3G-mCherry Vector Set
631176 pTRE3G-ZsGreen1 Vector Set
631193 pLVX-TRE3G Vector Set
631358 pLVX-Tet3G Vector
631359 pLVX-EF1alpha-Tet3G Vector
631360 pLVX-TRE3G-mCherry Vector Set
631361 pLVX-TRE3G-ZsGreen1 Vector Set
631362 pLVX-TRE3G-IRES Vector Set
631194 pRetroX-TRE3G Vector Set
631335 pCMV-Tet3G Vector
631336 pEF1alpha-Tet3G Vector
Ready-To-Glow Secreted Luciferase Assay
631729 Ready-To-Glow Secreted Luciferase pMetLuc
Vector
631735 Ready-To-Glow Dual Secreted Reporter Vector kit
631742 Ready-To-Glow Secreted Luciferase pNFγB-Met
Luc Vector
631744 Ready-To-Glow pCRE MetLuc Vector kit
632547 pBI-CMV5 Vector
631747 Lenti-X MetLuc Vector Set
Fluorescent Proteins for Organelle and Subcellular Labeling
632453 pAcGFP1-Actin Vector
632479 pDsRed-Monomer-Actin Vector
631078 pLVX-mCherry-Actin Vector
632419 pDsRed2-Bid Vector
632490 pAcGFP1-Endo Vector
632464 pAcGFP1-Golgi Vector
632480 pDsRed-Monomer-Golgi Vector
632432 pAcGFP1-Mito Vector
632421 pDsRed2-Mito Vector
632434 pHcRed1-Mito Vector
632515 pIRES2-AcGFP1-Nuc Vector
632431 pAcGFP1-Nuc Vector
632408 pDsRed2-Nuc Vector
632433 pHcRed1-Nuc Vector
632409 pDsRed2-ER Vector
632488 pAcGFP1-Tubulin Vector
632418 pDsRed2-Peroxi Vector
632491 pAcGFP1-Mem Vector
632512 pDsRed-Monomer-Mem Vector
632509 pAcGFP1-Mem Hyg Vector
632513 pDsRed-Monomer-Mem Hyg Vector
632511 pAcGFP1-F Vector
632510 pAcGFP1-F Hyg Vector
632493 pDsRed-Monomer-F Vector
632514 pDsRed-Monomer-F Hyg Vector
632589 pPAmCherry-Actin Vector
632591 pPAmCherry-Mito Vector
632590 pPAmCherry Tubulin Vector
632588 pPAmCherry-Mem Vector
632583 pAutophagSENSE Vector
Fluorescent Labeling & Transfection Control
632416 pCMV-DsRed-Express Vector
632539 pCMV DsRed-Express2 Vector
632534 pCMV-tdTomato Vector
632556 pCMV-E2-Crimson Vector
631979 pEF1alpha-DsRed-Express2 Vector
631981 pEF1alpha-E2-Crimson Vector
631975 pEF1alpha-tdTomato Vector
Fluorescent Protein Vectors for Cloning & Bacterial Expression
632468 pAcGFP1 Vector
632446 pZsGreen Vector
632404 pDsRed2 Vector
Code 제품명
632412 pDsRed-Express Vector
632535 pDsRed-Express2 Vector
632467 pDsRed-Monomer Vector
632451 pAsRed2 Vector
632410 pHcRed1 Vector
632440 pAmCyan Vector
632443 pZsYellow Vector
632553 pE2-Crimson Vector
632522 pmCherry Vector
632526 pmRaspberry Vector
632527 pmPlum Vector
632528 pmBanana Vector
632548 pmOrange2 Vector
632530 pmStrawberry Vector
632531 ptdTomato Vector
632529 pmOrange Vector
632370 pGFP Vector
632312 pGFPuv Vector
Fluorescent Protein Vectors for fusions
632470 pAcGFP1-C1 Vector
632481 pAcGFP1-C2 Vector
632482 pAcGFP1-C3 Vector
632492 pAcGFP1-Hyg-C1 Vector
632489 pAcGFP1-Hyg-N1 Vector
632469 pAcGFP1-N1 Vector
632483 pAcGFP1-N2 Vector
632484 pAcGFP1-N3 Vector
632441 pAmCyan1-C1 Vector
632442 pAmCyan1-N1 Vector
632450 pAsRed2-C1 Vector
632449 pAsRed2-N1 Vector
632407 pDsRed2-C1 Vector
632406 pDsRed2-N1 Vector
632538 pDsRed-Express2-C1 Vector
632537 pDsRed-Express2-N1 Vector
632430 pDsRed-Express-C1 Vector
632429 pDsRed-Express-N1 Vector
632466 pDsRed-Monomer-C1 Vector
632495 pDsRed-Monomer-Hyg-C1 Vector
632494 pDsRed-Monomer-Hyg-N1 Vector
632465 pDsRed-Monomer-N1 Vector
632555 pE2-Crimson-C1 Vector
632554 pE2-Crimson-N1 Vector
632415 pHcRed1-C1 Vector
632424 pHcRed1-N1/1 Vector
632524 pmCherry-C1 Vector
632523 pmCherry-N1 Vector
632550 pmOrange2-C1 Vector
632549 pmOrange2-N1 Vector
632585 pPAmCherry-C1 Vector
632584 pPAmCherry-N1 Vector
632533 ptdTomato-C1 Vector
632532 ptdTomato-N1 Vector
632447 pZsGreen1-C1 Vector
632448 pZsGreen1-N1 Vector
632444 pZsYellow1-C1 Vector
632445 pZsYellow1-N1 Vector
631974 pEF1alpha-AcGFP1-C1 Vector
631973 pEF1alpha-AcGFP1-N1 Vector
631977 pEF1alpha-DsRed-Monomer-C1 Vector
631978 pEF1alpha-DsRed-Monomer-N1 Vector
631972 pEF1alpha-mCherry-C1 Vector
631969 pEF1alpha-mCherry-N1 Vector
632500 pAcGFP1-C In-Fusion Ready Vector
632501 pAcGFP1-N In-Fusion Ready Vector
632499 pDsRed-Monomer-C In-Fusion Ready Vector
632498 pDsRed-Monomer-N In-Fusion Ready Vector
Lentiviral Fluorescent Protein Vectors for fusions protein
632155 pLVX-AcGFP1-C1 Vector
632154 pLVX-AcGFP1-N1 Vector
632557 pLVX-AmCyan1-C1 Vector
632558 pLVX-AmCyan1-N1 Vector
632559 pLVX-DsRed-Express2-C1 Vector
Code 제품명
632560 pLVX-DsRed-Express2-N1 Vector
632153 pLVX-DsRed-Monomer-C1 Vector
632152 pLVX-DsRed-Monomer-N1 Vector
632561 pLVX-mCherry-C1 Vector
632562 pLVX-mCherry-N1 Vector
632587 pLVX-PAmCherry-C1 Vector
632586 pLVX-PAmCherry-N1 Vector
632564 pLVX-tdTomato-C1 Vector
632563 pLVX-tdTomato-N1 Vector
632566 pLVX-ZsGreen1-C1 Vector
632565 pLVX-ZsGreen1-N1 Vector
631984 pLVX-EF1alpha-AcGFP1-C1 Vector
631983 pLVX-EF1alpha-AcGFP1-N1 Vector
631989 pLVX-EF1alpha-DsRed-Monomer-C1 Vector
631990 pLVX-EF1alpha-DsRed-Monomer-N1 Vector
631985 pLVX-EF1alpha-mCherry-C1 Vector
631986 pLVX-EF1alpha-mCherry-N1 Vector
CherryPicker Cell Capture & Separation Systems
632579 CherryPicker Cell Capture (IRES) Vector Set
632578 CherryPicker Cell Capture Vector Set
632580 Lenti-X CherryPicker Cell Capture Vector Set
632581 Lenti-X CherryPicker Cell Capture (IRES) Vector Set
Fluorescent Protein express with microRNA
632542 pmR-mCherry Vector
632541 pmR-ZsGreen1 Vector
Fluorescent Protein Vectors for Promoter Studies
632497 pAcGFP1-1 Vector
632405 pDsRed2-1 Vector
632413 pDsRed-Express-1 Vector
632536 pDsRed-Express2-1 Vector
632411 pHcRed1-1 Vector
632525 pmCherry-1 Vector
632473 pZsGreen1-1 Vector
Fluorescent Protein Vectors for Kinetic Studies
632423 pDsRed-Express-DR Vector
632422 pHcRed1-DR Vector
632428 pZsGreen1-DR Vector
Fluorescent Timer Vectors
632403 pTimer-1 Vector
632402 pTimer Vector
Lentiviral Vector for Inducible Protein Stabilization
631077 pLVX-DD-AcGFP1-Actin Vector
632176 pLVX-PTuner Green Vector
632174 pLVX-PTuner Vector
631075 pLVX-PTunerC Vector
IRES Bicistronic Vectors
632435 pIRES2-AcGFP1 Vector
632540 pIRES2 DsRed-Express2 Vector
632420 pIRES2-DsRed2 Vector
632478 plRES2-ZsGreen1 Vector
631971 pEF1alpha-IRES-AcGFP1 Vector
631980 pEF1alpha-IRES-DsRed-Express2 Vector
631976 pEF1alpha-IRES-ZsGreen1 Vector
632185 pLVX-IRES-Hyg Vector
632184 pLVX-IRES-Neo Vector
632186 pLVX-IRES-Puro Vector
631237 pLVX-IRES-mCherry Vector
631238 pLVX-IRES-tdTomato Vector
632187 pLVX-IRES-ZsGreen1 Vector
631988 pLVX-EF1alpha-IRES-Puro Vector
631987 pLVX-EF1alpha-IRES-mCherry Vector
631982 pLVX-EF1alpha-IRES-ZsGreen1 Vector
Lentiviral Vector for shRNA Expression
632178 pLVX-shRNA1 Vector
632179 pLVX-shRNA2 Vector
Lentiviral Vector for Constitutive Gene Expression
632159 pLVX-Puro Vector
Proteasome sensor vector
632425 Proteasome Sensor Vector
Bidirectional Expression Vectors
631631 pBI-CMV2 Vector
631632 pBI-CMV3 Vector
631633 pBI-CMV4 Vector
※ 주문서를 작성하여 다카라코리아 대리점에 제출해주세요. 영리기관의 경우 Clontech과 별도 라이선스 계약이 필요합니다. 자세한 내용은 다카라코리아 고객지원센터로 문의 주세요.
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