células madre y regeneración de tejidos...estrategía para idenficar y purficar células madre...
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Célulasmadreyregeneracióndetejidos
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¿Quésonlascélulasmadre?
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Potencialidad
• Capacidaddedarorigenaotros1poscelulares
To1potentesPluripotentesMul1potentes
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Cigoto:To1potente
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BlastocistoMCI
Trofoblasto
Cavidad
Lascélulasdel“macizocelularinterno(MCI)”sonlasque
daránorigenalfeto
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Célulasmadreembrionariaspluripotentes
Puedengenerartodoslostejidosdelorganismo
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Célulasmadreadultas(célulascapacesderegeneraróreponeruntejido)
Mul1potentes
Puedendarorigenalascélulasdeunlinajecelular
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Célulasmadreadultas
Dosconceptosimportantes
Nicho Célulasamplificadorastransitorias
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Nicho
Una par1cular zona de tejido con unmicroambiente especializado en donde seintegran todas las señales que determinan siunacélulamadresedivide,damáscélulasdesímisma,daorigenaotracélulaconfuncionesmásespecializadasonosedivide.
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Célulasamplificadorastransitorias
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Célulasmadreembrionarias
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Lascélulasmadreembrionariaspuedencul1varseindefinidamente
MCI
Trofoblasto
Cavidad
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Condicionesadecuadas
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¿Porquéesimportantepodermanipularcélulasmadreencul1vo?
• Medicinaregenera1va
Célulasnerviosas(Parkinson,Alzheimer)Célulasmusculares(distrofiamuscular)
Célulaspancreá1cas(diabetes)Célulasinmunes(desórdenesinmunológicos)
• Testgené1cosdeembriones
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Célulasforáneassonreconocidasporelsistemainmuneyrechazadas
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Otrosmétodosparagenerarcélulasmadre
• Transferencianuclear
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Sesolucionaelproblemadelrechazo
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• Transferencianuclear
Clonación
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Nature.1997Feb27;385(6619):810-3.ViableoffspringderivedfromfetalandadultmammaliancellsWilmutI1,SchniekeAE,McWhirJ,KindAJ,CampbellKH.
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MuseonacionaldeEdimburgo,Escocia
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Clonacióndeprimatesnohumanosportransferencianuclear
Cell,Feb.2018
ADN-Dime1lasa+InhibidorHistona
deace1lasa
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Implicanciasé1cas
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Losexperimentosdetransferencianuclearindicabanqueelcitoplasmadeloocito
favorecelade-diferenciación.Así,éstedebecontenerfactoresdereprogramacióndela
croma1na
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OtrosmétodosparagenerarCM:
Célulasmadrepluripotentesinducidas(iPSC)
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AlgunosavancesimportantesenelcampodelasIPSCdesdeeltrabajofundacionaldeYamanaka
ü DispensabilidaddelfactorC-Myc(oncogénico)comouncomponenteesencialparala
reprogramaciónü Otrosmétodosde“delivery”delosfactores:Adenovirus(noesintegra1vo),ARN
codificandolosfactores,losfactoresdirectamente(proteínas),“smallmolecules”queac1vanepigené1camenteelprogramadeexpresióngené1cadecélulaspluripotentes.
ü SehalogradodiferenciarcélulasiPSChumanasadis1ntos1poscelulares,incluyendocélulasprovenientesdepacientesconpatologías.
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Célulasmadredelapiel
PNAS,100,September30,2003
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Folículopiloso
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Iden1ficaciónylocalizacióndecélulasmadre
Bromodesoxiuridina:AnálogodeTimidina
JournalofInves/ga/veDermatology(2001)117,943–948
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Tissue-specificpromoter
H2B-GFP H2B-GFP
Estrategíaparaiden1ficarypurficarcélulasmadredelapiel:marcarconGFP-histona2Baquellascélulasquesedividenesporádicamente
SinTc(odoxy)=expresióndeH2B-GFP
NatCellBiol.2011May;13(5):513–518.
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PULSE:SINTcCHASE:CONTc
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Célulasmadreadultasdelapiel
• Puedencul1varseenellaboratorio• Puedenpropagarseporlargo1empo• Puedendiferenciarseencul1voygenerarepidermis
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Terapiaenquemados
Muestradepielsanadelapersonaafectada
Cul1voyamplificacióndecélulasmadredela
piel
Diferenciaciónencul1vo
reimplante
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