Caracterização molecular e capacidade de colonização de plantas por estirpes do gênero Herbaspirillum

Conclusões

Referência

Valéria Mendes Soares, bolsista PIBIC/CNPqOrientador: Leonardo Cruz Magalhães

O gênero Herbaspirillum é composto por 14 espécies descritas e é conhecido por conter bactérias diazotróficas capazes de assimilar o nitrogênio atmosférico. A interação destas bactérias com gramíneas evidencia um grande potencial biotecnológico para o aumento da produtividade das culturas. O objetivo deste trabalho consiste na caracterização molecular e avaliação da capacidade de colonização de plantas por estirpes do gênero Herbaspirillum marcadas.

Introdução e Objetivos

Métodos▪ Caracterização Molecular – as estirpes foram submetidas à análise por espectrometria de massa MALDI-TOF e identificadas por sequenciamento do gene 16S rRNA. ▪ Transformação bacteriana – as estirpes foram transformadas pelos métodos de conjugação e eletroporação para marcação com gene repórter gfp.▪ Colonização de plantas – testes de colonização epifítica e endofítica em milho foram realizados com a espécie Herbaspirillum huttiense.

Resultados e Discussão

FIGURA: Espectros de massa de diferentes espécies de Herbaspirillum analisadas por MALDI-TOF

▪ Técnica de espectrometria de massa por MALDI-TOF mostrou-se útil na identificação e diferenciação das espécies do gênero Herbaspirillum (Figura)

▪ Todas as estirpes transformadas mostraram-se resistentes ao antibiótico Tetraciclina, mas não apresentaram fluorescência.

▪ Ensaios de colonização mostraram que a espécie H. huttiense é capaz de colonizar raízes de milho em níveis iguais aos encontrados para a espécie controle H. seropedicae.

▪ A espectrometria de massa MALDI-TOF é uma técnica rápida, barata e confiável para a identificação de espécies do gênero Herbaspirillum.▪ A marcação de estirpes é útil para se confirmar a colonização, principalmente endofítica.▪ Pela primeira vez foi demonstrada a capacidade da espécie H. huttiense de colonizar plantas de milho em níveis iguais à espécie controle.

▪ BALDANI, J.I.; BALDANI, V.L.D.; SELDIN, L.; DÖBEREINER, J. Characterization of Herbaspirillum seropedicae gen. nov., sp. nov., a root-associated nitrogen-fixing bacterium, 1986.