conlap alt 2

8/18/2019 Conlap ALT 2

1/12

MIKROBIOLOGI

UJI KUALITAS MIKROBIOLOGI MAKANAN BERDASARKAN ANGKA LEMPENG

TOTAL KOLONI BAKTERI

LAPORAN PRAKTIKUMDisusun untuk memenuhi tugas matakuliah Mikr!ilgi Lan"ut #i!im!ing leh Pr$% Dr%

Dra% Utami Sri &astuti' M(#% Dan Dr% En#ang Suarsini' M%Ke#

Oleh)

Kelm(k * + O$$ering B

Al$iana K% P% ,-./.*-0-123/4

D5iriani P% ,-./.*-0-12.-4

Eni Su6antri ,-./.*-0-01784

Imam Bukhri M ,-./.*-0-01214

N9i A6u L% N% ,-./.*-0-07//4

The Learning University

PROGRAM PAS:A SARJANA

JURUSAN PENDIDIKAN BIOLOGI

UNI;ERSITAS NEGERI MALANG

Okt!er 8/-.

A% TOPIK ) Uji Kualitas Mikrobiologi Makanan Berdasarkan Angka Lempeng Total Koloni

Bakteri

B% &ARI+TANGGAL PRAKTIKUM )

1. Inokulasi sampel bakteri yang terdapat pada makanan padat dilakukan pada hari Rabu !

"ktober !#1$!. %engamatan dan perhitungan Angka Lempeng Total bakteri dilaksanakan pada hari

Kamis $ "ktober !#1$


2/12

:% TUJUAN )

Untuk menentukan kualitas mikrobiologi sampel makanan padat berdasarkan Angka

Lempeng Total koloni bakteri.

D% DASAR TEORI )

Teknik enumerisasi merupakan suatu &ara untuk menghitung jumlah spesies atau

kelompok mikroorganisme per gram atau per mili bahan yang digunakan sebagai media biakan

'(aluyo !##)*.

Untuk menentukan jumlah bakteri dapat digunakan beberapa &ara+

1. ,umlah bakteri se&ara keseluruhan 'total cell count *. %ada &ara ini dihitung semua bakteri

baik yang hidup maupun yang mati. -isebut juga Angka Lempeng Total 'ALT*.

!. ,umlah bakteri yang hidup 'viable count *. ara ini menggambarkan jumlah sel yang hidup

sehingga lebih tepat bila dibandingkan teknik pada butir 1 '(aluyo !##)*.

Koloni yang tumbuh tidak selalu berasal dari 1 'satu* sel mikroorganisme karena

beberapa mikroorganisme tertentu &enderung untuk berkelompok atau berantai. Bila

ditumbuhkan pada media dan lingkungan yang sesuai kelompok bakteri ini hanya akan

menghasilkan 1 'satu* koloni. Berdasarkan hal tersebut seringkali digunakan istilah

colonyforming units '/U0ml* untuk perhitungan jumlah mikroorganisme hidup. ebaiknya

hanya lempengan agar yang mengandung $#2$## koloni saja yang digunakan dalam perhitungan.

Lempengan agar dengan jumlah koloni tinggi '3$## koloni* sulit untuk dihitung sehingga

kemungkinan kesalahan perhitungan sangat besar 'Lay 144)*.

Uji Angka Lempeng Total 'ALT* dan lebih tepatnya ALT aerob meso5il atau anaerob meso5il

menggunakan media padat dengan hasil akhir berupa koloni yang dapat diamati se&ara 6isual

berupa angka dalam koloni'&5u* per ml0g atau koloni01##ml. %rinsip pengujian Angka Lempeng

Total menurut Metode Analisis Mikrobiologi yaitu pertumbuhan koloni bakteri aerob meso5il

setelah &uplikan diinokulasikan pada media lempeng agar dengan &ara tuang dan diinkubasi padasuhu yang sesuai.

%engen&eran sampel membantu untuk memperoleh penghitungan jumlah yang benar

namun pengen&eran yang terlalu tinggi akan menghasilkan lempengan agar dengan jumlah


3/12

koloni yang rendah '7$# koloni*. Lempengan demikian tidak absah se&ara statistik untuk

digunakan dalam penghitungan '(aluyo !##)*.

-alam penghitungan mikroorganisme seringkali digunakan pengen&eran. -i laboratorium

pengen&eran dilakukan dengan botol pengen&er namun dapat pula menggunakan tabung.

Lempengan yang dapat digunakan dalam penghitungan bakteri ialah lempengan yang

mengandung $#2$## koloni. ,umlah bakteri permiliter ialah jumlah koloni dikalikan 5aktor

pengen&er 'Lay 144)*.

Keuntungan dari metode pertumbuhan agar atau metode uji Angka Lempeng Total adalah

dapat mengetahui jumlah mikroba yang dominan. Keuntungan lainnya dapat diketahui adanya

mikroba jenis lain yang terdapat dalam &ontoh. Adapun kelemahan dari metode ini adalah +

1. Kemungkinan terjadinya koloni yang berasal lebih dari satu sel mikroba seperti pada

mikroba yang berpasangan rantai atau kelompok sel. Kemungkinan ini akan

memperke&il jumlah sel mikroba yang sebenarnya.

!. Kemungkinan adanya jenis mikroba yang tidak dapat tumbuh karena penggunaan jenis

media agar suhu p8 atau kandungan oksigen selama masa inkubasi.

$. Kemungkinan ada jenis mikroba tertentu yang tumbuh menyebar di seluruh permukaan

media agar sehingga menghalangi mikroba lain. 8al ini akan mengakibatkan mikroba

lain tersebut tidak terhitung.

). %enghitungan dilakukan pada media agar yang jumlah populasi mikrobanya antara $# 9

$## koloni. Bila jumlah populasi kurang dari $# koloni akan menghasilkan penghitungan

yang kurang teliti se&ara statistik namun bila lebih dari $## koloni akan menghasilkan

hal yang sama karena terjadi persaingan diantara koloni.

%enghitungan populasi mikroba dapat dilakukan setelah masa inkubasi yang umumnya

membutuhkan :aktu !) jam atau lebih 'Bu&kle 14;


4/12

&. %ipet steril

d. =nt Kas0 Laminar Air /lo:

e. Labu =rlenmeyer 1## ml

5. Tabung reaksi

g. Mortar dan pistle

h. Blender

Bahan yang dibutuhkan adalah+

a. ampel bahan makanan Prol Tape padat 1# gram

b. Medium lempeng >apek Agar 'A* ? buah

&. Larutan air pepton #1 @ sebanyak 4# ml

d. tabung reaksi berisi larutan air pepton #1 @ 4 ml

e. Al&ohol


5/12

8% :ara Ker"a

Menyiapkan 1 labu =rlenmeyer berisi 4# ml air pepton #1@ dan tabung

reaksi berisi air pepton #1@ 4 ml lalu diberikan kode A B - dan =.

Menyiapkan ? buah medium lempeng yang diberikan kode A B - = dan /.

Menimbang 1# gram bahan makan padat kemudian se&ara aseptis memasukkan ke

dalam 4# ml air pepton #1@ dalam labu =rlenmeyer tersebut kemudian mengambil

1 ml suspense dalam tabung reaksi A lalu ko&oklah dengan memutar diantara kedua

tangan atau dengan shaker.

Mengambil 1 ml suspense dalam tabung reaksi B. Melakukan pengen&eran

bertahap tersebut sampai dengan tabung reaksi = maka diperoleh suspense

dengan tingkat pengen&eran 1#21 1#2! 1#2$ 1#2) 1#2 1#2?.

Mengambil se&ara aseptis 1 ml masing2masing suspense tersebut lalu diper&ikan di

atas permukaan medium lempeng dengan kode yang sesuai. Menutup &a:an petri

berisi medium lempeng tersebut lalu memutar2mutar &a:an petri tersebut sehingga per&ikan inokulum tadi tersebar se&ara merata pada permukaan medium lempeng.

Menginkubasikan biakan pada medium lempeng tersebut pada suhu $


6/12


7/12

. 1# 2 $;

?. 1# 2? 1

G% ANALISIS DATA

N Tingkat Pengen=eran Jumlah Klni Bakteri

1. 1# 21 !)#

!. 1# 2! !$;

$. 1# 2$ 4;

). 1# 2) )!

. 1# 2 $;

?. 1# 2? 1 ' TU-*

%ada praktikum kali ini kelompok kami mengunakan makanan Prol tape yang diperoleh

dari kantin MI%A UM. -igunakan beberapa tingkat pengen&eran mulai dari 1# 21 1# 2! 1# 2$

1# 2) 1# 2 dan 1# 2?. Berdasarkan ketentuan perhitungan jumlah total koloni bakteri dalam tiap

mL atau gram sampel makanan apabila data yang dihasilkan terdapat dua atau lebih tingkat

pengen&eran yang menghasilkan antara $#2$## koloni maka yang digunakan adalah data

dengan tingkat pengen&eran tertinggi yakni tingkat pengen&eran 1#2) dan 1#2 pada praktikum

ini. Untuk men&ari nilai angka lempeng total maka dilkukan perbandingan antara hasil

tertinggi dan terendah dari kedua tingkat pengen&eran perhitungannya sebagai berikut +


8/12

ALT Koloni pada T.%engen&eran 1#2) E D D 1#

E )! D 101#2) D 1#

E )! D 1#?

ALT Koloni pada T.%engen&eran 1#2 E D D 1#

E $; D 101#2 D 1#

E $; D 1#<

%erbandingan E $; D 1#?

)! D 1#?

E 4#

8asil perbadingan antara nilai tertinggi dan terendah adalah 4# '3 !* maka yang

dilaporkan hasil dari kedua pengen&eran ini adalah yang terke&il yakni )! D 1#? &5u0g.

Berdasarkan Badan %enga:asan "bat dan makanan Fo. $ bah:a kue berbasis sayur umbi2

umbian dan ka&ang2ka&angan 'gadung singkong talas kentang ubi jalar jamur dan

sebagainya* batas kontaminasi ALT adalah sebesar 1 D 1#) &5u0g maka &ake tape yang dijual

di kantin MI%A dengan nilai ALT sebesar )! D 1#?

&5u0g melebihi ambang batas dan tidak layak dikonsumsi.

&% PEMBA&ASAN

%raktikum yang bertujuan untuk menentukan kualitas mikrobiologi sampel makanan

padat berdasarkan Angka Lempeng Total 'ALT* koloni bakteri ini dia:ali dengan membiakan

bakteri yang terdapat pada makanan padat pada medium lempeng. Terlebih dahulu makanan

padat yaitu Prol Tape tersebut dilarutkan ke dalam larutan air pepton #1@. Makanan padat

ditimbang sebanyak 1# gram dilarutkan ke dalam 4# ml larutan pepton #1@. ampuran

tersebut kemudian diko&ok hingga terbentuk suspensi. elanjutnya dilakukan pengen&eran

pada suspensi tersebut hingga tingkat pengen&eran 1#2?. %engen&eran ini bertujuan untuk

mendapatkan jumlah biakan yang representati5 untuk dilakukan perhitungan.


9/12

Gam!ar (engen=eran !ertingkat%

Masing2masing hasil tingkat pengen&eran yaitu 1#21 1#2! 1#2$ 1#2) 1#2 1#2? diambil

1 ml untuk diper&ikan diatas permukaan medium lempeng. etelah &a:an petri ditutup &a:an

petri diputar2putar sehingga per&ikan sampel merata pada permukaan medium lempeng.

etelah rata sampel biakan tersebut kemudian diinkubasikan pada suhu $


10/12

%erhitungan jumlah koloni bakteri didapatkan+ !)# koloni pada tingkat pengen&eran

1#21 !$; koloni pada tingkat pengen&eran 1#2! 4; koloni pada tingkat pengen&eran 1#2$ )!

koloni pada tingkat pengen&eran 1#2) $; koloni pada tingkat pengen&eran 1#2 dan 1 koloni

pada tingkat pengen&eran 1#2?. Berdasarkan hasil hitungan total koloni tersebut terdapat

pengen&eran yang menghasilkan jumlah koloni antara $# sampai $## sehingga untuk

menentukan nilai Angka Lepeng Total digunakan ketentuan nomor yaitu+ G Jika terdapat

dua atau lebih tingkat pengenceran yang menghasilkan jumlah antara 30 sampai 300 koloni

dan perbandingan antara hasil tertinggi dan terendah dari tingkat pengenceran terendah ! "

maka harus ditentukan rerata dari kedua nilai tersebut dengan memperhitungkan tingkat

pengencerannya. Jika perbandingan antara hasil tertinggi dan hasil terendah # " maka yang

dilaporkan hanya yang terkecil$.

Berdasarkan ketentuan tersebut maka yang dapat digunakan untuk perhitungan Angka

Lempeng Total adalah pada tingkat pengen&eran 1#2) ')! koloni* dan pada tingkat

pengen&eran 1#2 '$; koloni*. Angka Lempeng Total pada tingkat pengen&eran 1# 2) didapatkan

)! D 1#? &5u0g dan Angka Lempeng Total pada tingkat pengen&eran 1#2 didapatkan $; D 1#<

&5u0g. %erbandingan antara hasil tertinggi dan hasil terendah yang didapat adalah 4 atau lebih

dari ! sehingga nilai ALT yang digunakan adalah )! D 1#? &5u0g.

Untuk menentukan layak atau tidak layaknya suatu bahan makanan untuk dikonsumsi

maka harus di&o&okkan dengan ketentuan Badan %enga:as "bat dan Makanan atau Badan

%"M. %ada tabel ketentuan dari Badan %"M dapat dilihat batas minimal koloni yang

digunakan untuk menentukan kelayakan makanan dikonsumsi. Prol Tape yang digunakan

sebagai sampel penelitian termasuk dalam ketentuan bahan makanan nomor $ yaitu

G golongan kue berbasis sayur umbi%umbian dan kacang%kacangan &gadung singkong talas

kentang ubi jalar jamur'. Holongan ini memiliki batas maksimal jumlah koloni 1 D 1#) &5u0g.

Berdasarkan hasil hitungan ALT koloni di dapatkan angka )! D 1#

?

&5u0g

atau lebih dari batasmaksimal yang ditentukan oleh Badan %"M. -engan kata lain dapat dikatakan bah:a Prol

Tape yang dibeli dari kantin /MI%A UM tersebut tidak layak konsumsi.

Makanan yang tidak layak konsumsi merupakan makanan yang tidak memenuhi

standar mutu pangan yang telah ditentukan. -alam Undang2Undang %angan Tahun 144?

dijelaskan bah:a standar mutu pangan adalah spesi5ikasi atau persyaratan teknis yang

dilakukan tentang mutu pangan misalnya dari segi bentuk :arna atau komposisi yang

disusun berdasarkan kriteria tertentu yang sesuai dengan perkembangan ilmu pengetahuan

dan teknologi serta aspek lain yang terkait. tandar mutu pangan tersebut men&akup baik

pangan olahan maupun pangan yang tidak diolah. -alam pengertian yang lebih luas standar


11/12

yang berlaku bagi pangan men&akup berbagai persyaratan keamanan pangan gi>i mutu dan

persyaratan lain dalam rangka men&iptakan perdagangan pangan yang jujur misalnya

persyaratan tentang bahan olahan dan pemasaran

e&ara 5isik Prol Tape yang dijadikan objek pengamatan memiliki &iri antara lain

:arna+ &oklat kekuningan bau+ tape yang masih segar rasa+ manis asam dan kenyal.

Berdasarkan karakteristik tersebut se&ara 5isik Prol Tape yang diamati masih dalam kondisi

baik dan menarik untuk dikonsumsi. Famun setelah di hitung ALT terbukti makanan tersebut

tidak layak untuk dikonsumsi. Ada beberapa kemungkinan yang mengakibatkan Prol Tape

tersebut tidak layak untuk dikonsumsi antara lain kemungkinan bahan2bahan atau peralatan

yang digunakan dalam pembuatan Prol Tape tidak higienis atau dikarenakan dalam proses

penjualannya yang terpapar se&ara langsung dengan udara dan hiruk pikuk manusia. Prol

Tape di kantin /MI%A UM dijual se&ara terbuka tanpa ada penutupnya yang terpapar dengan

udara bebas dan akti6itas penjual dan pembeli. ehingga kondisi lingkungan sekitar tempat

penjualan tidak higienis.

I% DISKUSI

-% Bera(akah angka lem(eng ttal klni !akteri (a#a !e!era(a ma=am makanan 6ang

#i(eriksa>Makanan yang diteliti Angka Lempeng Total koloni bakteri adalah Prol Tape. Angka

Lempeng Total yang didapat adalah )! D 1#? &5u0gr.

8% Bagaimana kualitas mikr!ilgi makanan 6ang telah #i(eriksa !er#asarkan angka

lem(eng ttal klni !akteri >

Berdasarkan peraturan Kepala Badan %enga:as "bat dan Makanan Republik Indonesia

tentang penetapan batas maksimum &emaran mikroba dan kimia dalam makanan pada Kue

!er!asis sa6ur' um!i?um!ian #an ka=ang?ka=angan ,ga#ung' singkng ,ta(e4' talas'

kentang' u!i "alar' "amur4 adalah -@-/

*

=$u+g 'BFI B%"M !##4*. %ada makanan yangditeliti merupakan prol tape yang berbahan dasar tape 'hasil 5ermentasi dari singkong*

didapatkan hasil *'8 @ -/1 =$u+gr berdasarkan hasil tersebut dapat disimpulkan bah:a

makanan tersebut ti#ak la6ak #iknsumsi karena melebihi batas maksimum dalam hal ini

batas maksimum menurut BFI B%"M '!##4* adalah konsentrasi maksimum &emaran

yang dii>inkan terdapat dalam makanan.


12/12

.% Darimanakah asal !akteri kntaminan (a#a makanan terse!ut>

Bakteri kontaminan pada makanan Prol Tape kemungkinan berasal dari bahan2bahan

yang digunakan dalam pembuatan Prol Tape tidak higienis atau dikarenakan dalam proses penjualannya yang terpapar se&ara langsung dengan udara. Bakteri di udara akan menempel

tumbuh dan kembang biak di makanan tersebut dalam hal ini adalah Prol Tape. Makanan

merupakan sumber nutrisi 'substrat* yang baik bagi pertumbuhan bakteri.

J% KESIMPULAN

Berdasarkan hasil hitungan ALT koloni didapatkan angka )!D1#? &5u0g atau lebih dari

batas minimal yang ditentukan oleh badan %"M '1D1#) &5u0g*. berdasarkan perhitungan

tersebut dapat dikatakan bah:a Prol Tape yang dibeli dari kantin MI%A UM tersebut tidak

layak konsumsi. Ada beberapa kemungkinan yang mengakibatkan Prol Tape tersebut tidak

layak untuk dikonsumsi antara lain kemungkinan bahan2bahan atau peralatan yang digunakan

dalam pembuatan Prol Tape tidak higienis atau dikarenakan dalam proses penjualannya yang

terpapar se&ara langsung dengan udara dan hiruk pikuk manusia.

K% DA

conlap alt 2

Documents