IDENTIFIKASI SENYAWA AKTIF EKSTRAK BUNGA KENIKIR

( Tagetes erecta L ) dan UJI POTENSI ANTIOKSIDANSKRIPSI

Disusun Sebagai Salah Satu Syarat

Untuk Memperoleh Gelar

Sarjana Farmasi

Oleh :

TIARA SILVIANomor Pokok : 10330044

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

INSTITUT SAINS DAN TEKNOLOGI NASIONAL

JAKARTA

2015IDENTIFIKASI SENYAWA AKTIF EKSTRAK BUNGA KENIKIR

( Tagetes erecta L ) dan UJI POTENSI ANTIOKSIDANOleh :

TIARA SILVIANomor Pokok : 10330044Disetujui Oleh :

Prof. DR. Amlius Thalib

Dra. Kusmiati, M.Si.Pembimbing ISTN

Pembimbing LIPIAgar Nama Pengarang

dan Program Studi Farmasi,

Fakultas Matematika dan Pengetahuan Alam,

Institut Sains dan Teknologi Nasional,

Jakarta, disebut bila dibuat kutipan atau saduran.ABSTRAK

Bunga kenikir (Tagetes erecta L.) merupakan tanaman yang mengandung senyawa antioksidan diantaranya yaitu senyawa golongan karotenoid dan flavonoid. Telah dilakukan penelitian identifikasi senyawa aktif ekstrak bunga kenikir (Tagetes erecta L.) dan uji potensi antioksidan. Bunga kenikir (Tagetes erecta L.) diekstraksi secara maserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96%, etil asetat, dan n-heksan. Hasil ekstrak kemudian diuji daya aktivitas antioksidannya menggunakan metode ABTS (Asam 2,2-Azinobis (3-etilbenzatiazolin)-6 sulfonat). Hasil pengujian aktivitas antioksidan diperoleh hasil IC50 untuk ekstrak etanol 96% sebesar 92,5567, etil asetat sebesar 200,7183 g/ml, dan n-heksan sebesar 85,5079 g/ml. Dari hasil pengujian antioksidan terhadap ketiga ekstrak maka diperoleh ekstrak n-heksan memiliki aktivitas antioksidan paling aktif dengan nilai IC50 85,5079 g/ml. Ketiga ekstrak kemudian diidentifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis, difraksinasi dengan kromatografi kolom untuk mendapatkan fraksi-fraksi yang memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi. Berdasarkan nilai IC50, fraksi-fraksi yang menunjukkan aktivitas antioksidan tertinggi untuk ekstrak etanol 96% fraksi IX (fraksi 7-8) sebesar 21,0785 g/ml, ekstrak etil asetat fraksi I (fraksi gabungan 1-7, 9-12), dan ekstrak n-heksan fraksi V (fraksi gabungan 9-12) sebesar 17,2012 g/ml, masing-masing fraksi dianalisis dengan LC-MS untuk mengetahui senyawa yang terkandung di dalamnya. Hasil analisis LC-MS pada ekstrak etanol 96% fraksi IX (fraksi 7-8) diperoleh 15 senyawa, etil asetat fraksi I (fraksi gabungan 1-7, 9-12) diperoleh 18 senyawa, dan n-heksan fraksi V (fraksi gabungan 9-12) diperoleh 20 senyawa.KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunia-Nya, sehingga penelitian dan penyusunan skripsi dengan judul IDENTIFIKASI SENYAWA AKTIF EKSTRAK BUNGA KENIKIR (Tagetes erecta L) dan UJI POTENSI ANTIOKSIDAN dapat diselesaikan. Skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Sains dan Teknologi Nasional, Jakarta.Pada kesempatan ini atas segala keterbatasan yang ada dengan segala kerendahan hati penulis haturkan ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada bapak Prof. DR. Amlius Thalib, selaku pembimbing dari ISTN dan ibu Dra. Kusmiati, M.Si, selaku pembimbing dari LIPI yang telah meluangkan waktu, tenaga, dan pikiran untuk membimbing dan mengarahkan penulis dalam pembuatan proposal, pelaksanaan penelitian hingga penyusunan skripsi ini diselesaikan.Selanjutnya, ucapan terimakasih disampaikan pula kepada :

1. Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam ISTN Jakarta, Prof. Dr. Teti Indrawati, M.S.,Apt.

2. Kepala Program Studi Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam ISTN Jakarta, Dr. Melova Amir, M.Sc.,Apt.3. Pembimbing Akademik, Drs. Tahoma Siregar, M.Si.,Apt4. Seluruh dosen pengajar atas bekal ilmu pengetahuan dan bimbingan selama masa perkuliahan, serta seluruh karyawan tata usaha dan laboratorium atas bantuannya dalam hal administrasi di Program Studi Farmasi, FMIPA, ISTN, Jakarta.5. Kepala Laboratorium Mikroalga Air Tawar, Prof. I Nyoman Kabinawa, yang telah memberikan kesempatan untuk dapat melakukan penelitian di Laboratorium Akuakultur LIPI - Cibinong.

6. Kedua orang tuaku tercinta, papi Nasrul Wahab dan mami Nyiayu Erna Maziah yang telah mendidik, memberikan perhatian, kasih sayang, doa dan nasihat, serta memberi dukungan baik moril maupun materil dan juga kakak-kakakku tersayang Helmy Arnaldy, Diah, Hefny Rifqi, Reni Setyowati serta seluruh keluarga besarku terimakasih atas doa dan dukungan kalian.7. Teman seperjuanganku selama penelitian di LIPI Cibinong : Ari Manda, Herdelina, Nurul Afrianti Zein, Muthmainah, Saras Octarini, Theresia Novani, dan sahabat-sahabat ceriaku Witry, Nina, Kinanthi, Septiana, Risa, Yunita, Nindy, Nova, Anik, Fahmi, Miftahurrobihin, Sayuti, Hida, Fajri, Tanti, dan Nyoman terimakasih atas persahabatan, kebersamaan, doa, serta dukungan yang selama ini telah diberikan, seluruh teman-teman Farmasi ISTN angkatan 2010, dan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu yang telah memberikan bantuan dan motivasi selama masa perkuliahan sampai penyusunan skripsi ini.Semoga keikhlasan dan ketulusan bantuan yang diberikan menjadi berkah yang melimpah dari Allah SWT kepada kita semua. Akhir kata semoga skripsi ini dapat diterima dan berguna dalam pengembangan ilmu pengetahuan terutama dalam bidang farmasiJakarta, Januari 2015 PenulisDAFTAR ISI

Halaman

PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI

iii

ABSTRAK

ivKATA PENGANTAR

vDAFTAR ISI

viiiDAFTAR TABEL

xiiDAFTAR GAMBAR

xiiiDAFTAR LAMPIRAN

xvBAB I PENDAHULUANI.A Latar Belakang

1I.B Perumusan Masalah

4I.C Tujuan Penelitian

4I.D Manfaat Penelitian

4BAB II TINJAUAN PUSTAKA II.A Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

5II.A.1 Klasifikasi Tanaman

5II.A.2 Morfologi

6II.A.3 Khasiat

6II.A.4 Kandungan Kimia

7II.A.5 Bagian yang digunakan

7II.A.6 Sifat Tanaman

7II.B Karotenoid

7II.C Ekstraksi

9II.D Radikal Bebas

11II.E Antioksidan

13II.F Vitamin E

15II.G ABTS (Asam 2,2-Azinobis (3-etilbenzatiazolin)-6 sulfonat)

17II.H Spektrofotometer UV-VIS

19II.I Kromatografi Lapis Tipis

19II.J Kromatografi Kolom

22II.K Fraksinasi

23II.L LC-MS (Liquid Chromatograph-Mass Spectrometry)

24BAB III METODOLOGI PENELITIAN III.A Waktu dan Tempat Penelitian

26III.B Bahan Uji

26III.C Prinsip Penelitian

26III.D Tahapan Penelitian

27III.E Analisis Data

28III.F Alat

29III.G Bahan Kimia

30III.H Prosedur Percobaan

30

III.H.1. Determinasi Tanaman

30III.H.2. Pengambilan Sampel

31

III.H.3. Penapisan Fitokimia Serbuk Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

31III.H.4. Susut Pengeringan Serbuk Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

34III.H.5. Pembuatan Ekstrak Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

34III.H.6. Identifikasi Senyawa Ekstrak Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.) Menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis

35III.H.7. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak

Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.) Menggunakan

Metode ABTS (Asam 2,2-azino-bis-3

-ethylbenzatiazolin-6-sulfonat)

36III.H.8. Fraksinasi Ekstrak Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

Menggunakan Kromatografi Kolom

38III.H.9. Identifikasi Senyawa Ekstrak Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.) Menggunakan LC-MS (Liquid Chromatography-Mass Spectrophotometry)

39BAB IV HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN

IV.A Hasil Determinasi Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

41IV.B Hasil Penapisan Fitokimia Serbuk Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

41IV.C Hasil Susut Pengeringan Serbuk Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

43IV.D Hasil Bobot Ekstrak Kental Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

43IV.E Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.) Menggunakan Metode ABTS

(Asam 2,2-azino-bis-3-ethylbenzatiazolin-6-sulfonat)

44IV.F Identifikasi Senyawa dalam Ekstrak Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.) Menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis

49IV.G Hasil Fraksinasi Ekstrak Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

Menggunakan Kromatografi Kolom

52IV.H Uji Aktivitas Antioksidan Terhadap Fraksi

55IV.I Identifikasi Senyawa Ekstrak Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

Menggunakan LC-MS (Liquid Chromatography-

Mass Spectrophotometry)

58BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

V.A Kesimpulan

64V.B Saran

65DAFTAR PUSTAKA

66LAMPIRAN

70DAFTAR TABEL

Tabel

1. Hasil Penapisan Fitokimia Serbuk Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

412. Hasil Susut Pengeringan Serbuk Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L.)

433. Hasil Bobot Ekstrak Kental Bunga Kenikir

(Tagetes erecta L)

434. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Vitamin E dan Ekstrak Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.) MenggunakanABTS

455. Nilai Rf Ekstrak Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

Pada Bercak dari masing-masing Penotolan

516. Nilai Rf penggabungan fraksi-fraksi dari ekstrak bunga kenikir (Tagetes erecta L.) pada bercak dari

masing-masing penotolan

547. Hasil Identifikasi LC-MS pada ekstrak bunga kenikir (Tagetes erecta L.)

60DAFTAR GAMBARGambar

1. Tanaman Bunga kenikir (Tagetes erecta L)

6

2. Struktur Molekul Vitamin E

17

3. Reaksi Antara ABTS dengan Antioksidan

18

4. Bagan Tahapan Penelitian

40

5. Grafik hubungan konsentrasi vitamin E

dengan % Inhibisi

466. Grafik hubungan konsentrasi ekstrak etanol96% bunga kenikir (Tagetes erecta L.) dengan

% inhibisi

467. Grafik hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat bunga kenikir (Tagetes erecta L.) dengan

% inhibisi

478. Grafik hubungan konsentrasi ekstrak n-heksan

bunga kenikir (Tagetes erecta L.) dengan

% inhibisi

489. Hasil identifikasi senyawa ekstrak etil asetat,

n-heksan, etanol 96% dari bunga kenikir

(Tagetes erecta L.) dilihat secara visual

5010. Hasil Fraksinasi ekstrak bunga kenikir(Tagetes erecta L.) menggunakan

kromatografi kolom

5211. Grafik hubungan konsentrasi fraksi 9ekstrak etanol 96% bunga kenikir

(Tagetes erecta L.) dengan % inhibisi

5612. Grafik hubungan konsentrasi fraksi 1ekstrak etil asetat bunga kenikir

(Tagetes erecta L.) dengan % inhibisi

5713. Grafik hubungan konsentrasi fraksi 5ekstrak n-heksan bunga kenikir

(Tagetes erecta L.) dengan % inhibisi

57DAFTAR LAMPIRAN

LAMPIRAN

1. Surat Permohonan Izin Penelitian ISTN

70

2. Surat Izin Penelitian LIPI

713. Surat Permohonan Izin Penelitian Laboratorium Fitokimia

ISTN

724. Surat Izin Penelitian Laboratorium Fitokimia ISTN

735. Surat Determinasi Tanaman

746. Gambar Hasil Skrining Fitokimia

757. Hasil Perhitungan Susut Pengeringan

768. Hasil Perhitungan Bobot Ekstrak Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

779. Hasil Ekstraksi Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

7810. Alat yang Digunakan Dalam Penelitian

7911. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Terhadap Ekstrak

Bunga Kenikir (Tagetes erecta L.)

8012.Perhitungan Hasil Identifikasi Senyawa Menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis

8813.Perhitungan Hasil Identifikasi Senyawa Menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis Terhadap Fraksi

9014.Hasil Kromatografi Lapis Tipis Terhadap Fraksi

98

15.Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Terhadap Fraksi

99

16.Hasil Identifikasi Senyawa Menggunakan LC-MS

117