cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida...
TRANSCRIPT
![Page 1: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/1.jpg)
Cromatografia e os jogos
olímpicos de 2016:
uma corrida contra o doping
Prof. Helvécio Costa Menezes
![Page 2: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/2.jpg)
Conteúdo
Doping no esporte
Substâncias proibidas e seus efeitos
Agências de controle antidoping
Métodos de análise
Cromatografia a gás
Princípios
Componentes
Acoplamento com espectrometria de massas
GCxGC.
Preparo de amostras para GC/MS
Aplicações da GC/MS no controle antidoping.
2
![Page 3: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/3.jpg)
Doping
3
Presença de qualquer substância ou método que
tenha o potencial para aumentar o desempenho
desportivo, que ofereça risco desnecessário a
atletas, ou atue de forma contrária ao espírito
desportivo.
WADA, 2016
![Page 4: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/4.jpg)
Ideal Olímpico
4 Barão de Coubertin, 1896
A coisa mais importante não é vencer, mas participar,
assim como a coisa mais importante da vida não é a
vitória, mas a luta. O essencial não é conquistar e sim lutar
bem”
![Page 5: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/5.jpg)
Motivação
Movere (latim): mover para realizar determinada ação.
Energia que nos impulsiona em direção a um determinado objetivo a fim de satisfazer uma necessidade pessoal.
5
![Page 6: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/6.jpg)
Tipos de indivíduos
Tarefa
Prazer em realizar tarefas
corretamente
(reconhecimento próprio)
Referencial interno
Dificuldades e obstáculos são
desafios
Os fins não justificam os
meios
Realizar uma tarefa de forma
correta encerra a recompensa
Ego
Prazer em conquistar algo ou
vencer alguém
(reconhecimento social)
Referencial externo
Dificuldades e obstáculos não
são desafios
Os fins justificam os meios
Só a vitória é a recompensa
6
![Page 7: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/7.jpg)
Fatores que favorecem o doping
Motivação pessoal
Excesso de cobrança (social, empresarial, e familiar)
Necessidade financeira
Força da mídia
Impunidade
7
![Page 8: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/8.jpg)
Fatores que favorecem o doping
8
O medo da detecção e consequente desgraça e perda de
rendimentos é o maior desincentivo a dopagem para os atletas.
Mais do que o dano pessoal. Em estudo patrocinado pela Sports
Illustrated, 195 de 198 atletas disseram que “TOMARIAM”
drogas promotoras de desempenho se eles tivessem a garantia
de vencer e não serem flagrados.
50% declararam que fariam isso mesmo se MORRESSEM de
efeitos colaterais da droga após 5 ANOS de uma vitória em
competição.
![Page 9: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/9.jpg)
Histórico do uso de substâncias proibidas
9
China (2737 aC)
Efedra, mandragora
Arábia (1000 aC)
Cannabis, Haxixe
Grécia (300 aC)
Cogumelos, ópio
América precolombiana
Coca, mescalina
Europa (1810 dC)
Cafeína, morfina
Japão (1919 dC)
Anfetaminas
![Page 10: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/10.jpg)
Histórico do uso de substâncias proibidas
10
Áustria (1910)
Primeiro teste anti doping
Jogos Olímpicos
de Roma (1960)
heroína
1940
Primeiros métodos por GC
e TLC
Tóquio (1964)
Primeiras Leis e punições
Décadas 60 e 70
Anfetaminas
Década de 80
Anabolizantes
![Page 11: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/11.jpg)
Altetas flagrados no exame antidoping
11
ATLETISMO 2003
Maurren Maggi
(Clostebol -pomada
dermatológica)
VOLEI 2003
Giba
(Maconha)
NATAÇÃO 2007
Rebeca Gusmão,
(Testosterona)
FUTEBOL 2008
Romário
(Finasterida)
MMA 2015
Anderson Silva
(Esteróides)
![Page 12: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/12.jpg)
Altetas flagrados no exame antidoping
12
ATLETISMO 1988
Bem Johnson
(Estanozolol)
VELOCISTA 2007
Marion Jones
(Esteróides)
CICLISMO 1999
Lance Amostrong
(EPO)
FUTEBOL 1994
Maradona
(Efedrina)
CICLISMO, 2006
Floyd Landis
(Testosterona)
![Page 13: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/13.jpg)
13
![Page 14: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/14.jpg)
14
![Page 15: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/15.jpg)
Anabolizantes (S1)
15
Esteróides Anabólicos Androgênicos (EAA)
A testosterona é o principal esteróide anabolizante, é produzida nos testículos,
assim como pelo córtex supra renal em homens e mulheres. Ao atingir o núcleo
celular estimula o DNA a sintetizar proteínas. Quanto mais intenso for o esforço
maior será a produção de testosterona.
Promove o aumento da massa muscular, aumento da hemoglobina, aumento
da deposição de cálcio nos ossos.
Efeitos colaterais
Impotência sexual, e esterilidade
testosterona
![Page 16: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/16.jpg)
Anabolizantes (S1)
16
Esteróides Precursores da testosterona
Desidroepiandrosterona (DHEA)
Androstenediona
Oximetolona,
Oxandrolona,
Metandostrenolona
Estanozolol.
Decanoato de nandrolona (Deca)
Fenilpropinato de nandrolona
Cipionato de testosterona
Undecilenato de boldenona
Meia vida: 10 a 20 minutos
Metabolizados: fígado
Eliminação: urina
Deca
Estanozolol.
![Page 17: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/17.jpg)
Hormônios Peptídicos (S2)
17
São substâncias reguladoras de diversas funções do organismo. Sua origem se
dá pelo estímulo inicial do SNC, que gera reações químicas para a sua
secreção.
Hormônio de Crescimento (GH)
Secretado pelas glândulas pituitárias, possui função anabólica de diversos
tecidos e sua secreção é ampliada em circunstâncias anaeróbias. A meia vida
sérica do GH é de 20 minutos após secretado ou injetado, o pico de
concentração dá-se de 1 a 3 horas após injetado, tornando-se indetectável
após 24 horas.
Efeitos Colaterais: pode causar o surgimento da síndrome do túnel do carpo,
acromegalia, cardiomegalia, diabetes II e hipertensão arterial
GH acromegalia
![Page 18: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/18.jpg)
Hormônios Peptídicos (S2)
18
Fator de Crescimento tipo Insulina 1 (IGF-1)
possui função estimulante do DNA para a síntese protéica, causando também o
anabolismo muscular, tendo efeitos colaterais similares ao GH .
Eritropoetina (EPO)
Este hormônio é naturalmente secretado pelas glândulas supra-renais (90%) e
pelo fígado (10%). É responsável pelo aumento da proliferação de células
tronco, precursoras da produção de glóbulos vermelhos do sangue, através da
ligação a sítios específicos na medula óssea. Sua meia vida é de 6 a 8 horas.
Efeitos colaterais:
Eleva a densidade sanguínea, pode causar hipertensão, infarto, lesões renais e
doenças cardiovasculares.
![Page 19: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/19.jpg)
Hormônios Peptídicos (S2)
19
Gonadotrofina (hCG)
Glicoproteina hormonal produzida durante a gravidez nos líquidos maternos.
Garante a manutenção da gestação, inibindo a menstruação e a ausência de
uma nova ovulação.
Efeitos colaterais:
Tumores hepáticos, retenção de líquidos e de sódio, sobrecarga cardíaca,
diabetes e maior incidência leucemias.
![Page 20: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/20.jpg)
Beta-2 Antagonistas (S3)
20
Atuam nos receptores beta-2 de diversos tecidos, inclusive da
musculatura esquelética. Possuem efeitos broncodilatadores, atuam na
oxidação dos tecidos adiposos.
Diminuem a frequência cardíaca e a pressão arterial, normalmente
usados em esportes que requerem precisão e concentração como tiro e
arco e flecha.
Efeitos Colaterais
Taquicardias,nervosismo, dores de cabeça, tremores, insônia,
hipertensão, patologias morfológicas e funcionais no coração.
Clenbuterol Salbutamol
![Page 21: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/21.jpg)
Moduladores hormonais e metabólicos (S4)
21
Inibidores de aromatase: impedem a formação de hormona estrogénica
Moduladores seletivos de receptores de estrogênios (SERMs): inibição
ou ativação do estrogênio em vários tecidos.
Insulinas: aumento da queima de glicose
Efeitos Colaterais
Dor nos músculos e nas junções
Osteoporose, ossos frágeis e fracturas
Confusão da memória
Hipoglicemia
Aminoglutetimida
Exemestano
![Page 22: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/22.jpg)
Diuréticos (S5)
22
Agem na redução da secreção de renina pelas células dos rins. A renina
tem função precursora na conversão de enzimas que aumentam o volume
de água do organismo.
Redução de peso antes das competições
Camuflagem de outras substâncias na urina
Efeitos colaterais
Redução dos sais minerais e outros nutrientes estocados no tecido muscular,
e redução da capacidade física do atleta.
Furosemida Hidroclorotiazida
![Page 23: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/23.jpg)
Estimulantes (S6)
23
Agem no sistema nervoso central, aumentam o estado de
alerta e capacidade física.
Efeitos
Dilatação das pupilas
Inibição da secreção das glândulas salivares
Aumento da frequência respiratória
Inibição dos movimentos peristálticos
Aumento da glicogenólise
Contração do esfíncter da uretra
![Page 24: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/24.jpg)
Estimulantes (S6)
24
Mecanismo de ação
![Page 25: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/25.jpg)
Estimulantes (S6)
25
Aumenta a secreção de catecolaminas, o que aparentemente
potencializa a capacidade neural muscular.
Provas de longa duração
Ajuda a reduzir ou retardar a fadiga
Aprimora e amplia o desempenho
![Page 26: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/26.jpg)
Estimulantes (S6)
26
Catecolaminas endógenas
![Page 27: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/27.jpg)
Estimulantes (S6)
Efeitos Colaterais
Palpitações
Perda de apetite
Hipertensão
Sobrecarga do coração e fígado
Problemas renais
27
![Page 28: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/28.jpg)
Narcóticos-Analgésicos (S7)
28
Agem no SNC, ligando-se a receptores específicos, o que impede a
liberação de neurotransmissores responsáveis pela mensagem da dor.
Não melhoram o desempenho físico, mas aliviam e retraem a
sensação de dor como a fadiga. Atletas de maratona e triatlo.
Efeitos Colaterais
Causam entorpecência e perda de sensibilidade, lesões músculo
esqueléticas, náuseas, vômitos, insônia, depressão e dependência.
química.
Papaver somniferum
![Page 29: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/29.jpg)
Canabinóides (S8)
29
São substâncias derivadas da Canabis sativa e atuam como depressores do
SNC. A Canabis sativa possui cerca de 420 substâncias, dentre estas destaca-
se o Δ9THC (Delta 9 Tetra Hidrocanabinol).
Reduz a ansiedade antes e durante a competição.
Efeitos Colaterais: pode causar dependência química, aparente destruição
irreparável de receptores neurais, redução da memória, e da capacidade
intelectual
Δ9THC
![Page 30: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/30.jpg)
Glicocorticóides (S9)
30
São hormônios esteróides que se ligam com o receptor do cortisol.
Afetam o metabolismo dos carboidratos, são usados como anti-inflamatórios,
reduzem a dor, imunosupressores, e provocam euforia.
Efeitos Colaterais: hemorragias, úlceras, glaucoma, e diabetes.
Cortisol
![Page 31: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/31.jpg)
Manipulação do Sangue e seus componentes
(M1)
31
Promove o aumento da concentração de hemoglobina para o melhor
transporte de oxigênio.
Transfusões de sangue
Aplicações intravenosas de perfluorcarbonos
Hemoglobina bovina
Efeitos Colaterais
Reações alérgicas, transmissões virais, choques metabólicos e
sobrecarga de circulação
![Page 32: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/32.jpg)
Manipulação Química e Física (M2)
32
Manipular visando alterar a integridade e validade das amostras
coletadas no Controle de Dopagem.
Infusões intravenosas e/ou injeções maiores que 50 mL por um período
de 6 horas exceto aquelas administradas de forma legítima durante
ocasiões de admissões hospitalares, procedimentos cirúrgicos ou
investigações clínicas.
![Page 33: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/33.jpg)
Manipulação da urina
33
Uso de Probenecida bloqueador da secreção de testosterona e
camuflador de agentes dopantes.
![Page 34: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/34.jpg)
Doping genético (M3)
34
Alteração dos genes responsáveis pela síntese de proteínas.
Dentre os genes capazes de alterar a força e a resistência física destacam-se:
Enzima Conversora de Angiotensina (ECA): agente vasoconstritor
Eritropoetina (EPO): estímulo para a produção de hemácias
Miostatina: proteína bloqueadora da síntese protéica muscular , e
desenvolvimento da musculatura esquelética
![Page 35: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/35.jpg)
Álcool (P1)
35
O etanol atua no SNC e em pequenas doses reduz o nervosismo, tremor,
sensibilidade às lesões, aumenta a sensação de relaxamento e confiança.
Limite: 0,1 g L-1
Efeitos Colaterais
Diminui a capacidade visual, a concentração, e os reflexos motores.
Alterações cardíacas, cirrose, pancreatites, dependência, e teratogênese.
Proibido para as modalidade
Aeronáutica, tiro com arco, automobilismo, karatê, pentatlo, motociclismo,
e motonáutica
![Page 36: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/36.jpg)
Beta bloqueadores (P2)
36
Melhora as arritimias cardiácas.
Reduzem os batimentos cardíacos,
Estabilizam mãos e braços
Precisão nos movimentos
Efeitos Colaterais
Insuficiência cardíaca descompensada
Doença pulmonar obstrutiva crónica (DPOC)
Asma brônquica
Proibido para as modalidade
Arco e flecha, automobilismo, bilhar, dardos, desportos subaquáticos,
golfe, e tiro.
![Page 37: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/37.jpg)
Agências de controle antidoping
37
World Anti-Doping Agency – WADA
(Agência Mundial Antidoping - AMA)
Fundada em 1999 na Suiça
![Page 38: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/38.jpg)
Agentes de controle
38
Fonte: ABCD, 2016
![Page 39: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/39.jpg)
Como é feito o controle antidoping
39
Seleção dos atletas
Fonte: ABCD, 2016
![Page 40: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/40.jpg)
Como é feito o controle antidoping
40
Coleta das amostras
Na Estação de Controle de Dopagem Oficial de Controle de Dopagem (DCO)
informa os direitos e deveres, e registra as informações do atleta.
Urina
O atleta escolhe um copo de coleta, e com a supervisão do DCO faz a coleta
de 90 mL.
O atleta recebe 3 frascos selados, e escolhe 2 para transferir a amostra
(frasco A 60 mL, e frasco B 30 mL)
Após o DCO checar a densidade da urina, o atleta acondiciona as amostras
para o transporte e confere o formulário de controle..
Fonte: ABCD, 2016
![Page 41: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/41.jpg)
Como é feito o controle antidoping
41
Amostra A: análise imediata
Amostra B: armazenada
Se A for um Resultado Analítico
Adverso (positivo para dopagem) o
atleta decide se pede a análise da
amostra B para contestar o resultado.
Suspensão mínima de 4 anos, Banimento dos Reincidentes
Fonte: ABCD, 2016
![Page 42: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/42.jpg)
Resultados analíticos adversos
42 WADA, 2013
![Page 43: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/43.jpg)
Processo Analítico
Amostragem
(sa)
Armazenamento e transporte
Tratamento da amostra (sp)
Análise (sm)
Resultados
Fonte: Bartley, 1990
sg2
= sm
2 + sa2 + sp
2
sg2
= variância global
sm2 = variância do método
sa2 = variância da amostragem
sp2 = variância do preparo da amostra
![Page 44: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/44.jpg)
Erro em função da concentração do analito
44
Fonte: Horowitz, Anal. Chem., 1982.
![Page 45: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/45.jpg)
Espectro de Massas
Isotopológos
27 28 29 30
CO
13 CO
Int.
+
+
27 28 29 30
CO
13 CO
Int.
+
+
Mesma espécie, com os mesmos elementos mas diferentes isótopos.
![Page 46: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/46.jpg)
Espectros de Massas Isótopos
Elemento Isótopo Abund. Relativa Isótopo Abund. Relativa Isótopo Abund. Relativa
Carbono 12 C 100 13 C 1.1
Hidrogênio 1 H 100
2 H 0.016
Nitrogênio 14
N 100 15
N 0.38
Oxigênio 16
O 100 17
O 0.04 18
O 0.2
Enxofre 32
S 100 33
S 0.78 34
S 4.4
Cloro 35 Cl 100 Â 37 Cl 32.5
Bromo 79
Br 100 81
Br 98
Geralmente o isótopo mais leve é o mais abundante
![Page 47: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/47.jpg)
Espectro de Massas
abundância isotópica
Pico do Carbono 13
Pico monoisotópico
![Page 48: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/48.jpg)
Para se estimar o número de
carbonos em uma molécula:
dividir a intensidade de A+1
por 1.1 (abundância do
Carbono 13 na natureza).
25 / 1.1 = 23,7
~ 24 átomos de
carbono na molécula
Espectro de Massas
Abundância isotópica
![Page 49: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/49.jpg)
Br - CH3 15 u
79Br-CH3 = 94 81Br-CH3 = 96
Informações:
• Relação m/z
• Presença dos isótopos
• Diferença de massa entre os sinais
Espectro de Massas
Abundância isotópica
![Page 50: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/50.jpg)
Espectro de Massas
Abundância isotópica
Cloro
MM = 35,453 u
Isótopos: 75,77 % de 35Cl e 24,23 % de 37Cl
Ciantoxina 7
40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61mass0
100
%
Dani_07 (0.046) Is (1.00,1.00) CH3Cl 1: TOF MS ES+ 7.49e1250.0
52.0
35Cl
37Cl
![Page 51: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/51.jpg)
Espectro de Massas
Regra do Nitrogênio
válida apenas para o modo EI
Número ímpar de átomos de N
Íon molecular [M]+• terá massa ímpar!!
Número par de átomos de N ou não contém átomos de N
Íon molecular [M]+• terá massa par!!
![Page 52: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/52.jpg)
Espectro de Massas
Medida da Massa Molecular
• m/z 249
» C20H9+
» C19H7N+
» C13H19N3O2+
• m/z 249 » C20H9
+ 249.0700
» C19H7N+ 249.0580
» C13H19N3O2+ 249.1479
Sistemas de
Baixa resolução
Sistemas de
Alta resolução
![Page 53: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/53.jpg)
Massa nominal Massa de um íon de uma determinada fórmula empírica calculada através do isótopo mais abundante. Ex : M = 249 C20H9
+ ou C19H7N+ ou C13H19N3O2
+
Massa exata Massa de um íon de uma determinada fórmula empírica calculada através da massa exata do isótopo mais abundante da cada elemento. Ex : M = 249 C20H9
+ 249.070 C19H7N
+ 249.0580 C13H19N3O2
+ 249.1479 Faixa de massas Limite superior e inferior de m/z observáveis por um dado analisador de massas.
Espectro de Massas
Medida da Massa Molecular
![Page 54: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/54.jpg)
Espectro de Massas
Resolução
249 249.0700 249.0580 249.1479
3 compostos diferentes
Mesma massa nominal
Baixa Resolução
3 compostos diferentes
3 massas exatas diferentes
alta resolução
C20H9+
C19H7N+
C13H19N3O2+ C20H9
+ C19H7N+ C13H19N3O2
+
Medida da capacidade de um analisador de massas de separar íons adjacentes.
![Page 55: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/55.jpg)
Espectro de Massas
Resolução
FWHM = Full Width at Half Maximum
![Page 56: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/56.jpg)
Espectro de Massas
Resolução
319.8 319.9 320.0 320.1 Mass
%
0
20
40
60
80
100
Resolução = 1.000
319.8 319.9 320.0 320.1 Mass
%
0
20
40
60
80
100 319.8965 319.9329
Resolução = 10.000
![Page 57: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/57.jpg)
Espectros de Massas
Alta Resolução
57
![Page 58: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/58.jpg)
C11H12Cl2N2O5: C11 H12 Cl2 N2 O5 pa Chrg 0
322 323 324 325 326 327 328 329 330 331 332
m/z
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
Rela
tive A
bundance
322,0123
324,0094
323,0157 326,0064325,0127
327,0098 328,0107 329,0140 330,0174 331,0183 332,0216
C11H12Cl2N2O5
Cloranfenicol
Massa Nominal = 322
Massa Exata Monoisotópica = 322,0123
Espectros de massas
Alta Resolução
58
![Page 59: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/59.jpg)
Espectro de Massas
Exatidão de massas
Exatidão da informação de massa fornecida pelo espectrômetro de massas
mexatidão = mreal - mmedida
ppm = 106 * mexatidão/ mmedida
Auxilia na eterminação da fórmula molecular de compostos
desconhecidos
Pode indicar a presença de um íon particular em um
composto conhecido
mexatidão
![Page 60: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/60.jpg)
Espectro de Massas
Exatidão e Resolução
![Page 61: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/61.jpg)
Espectro de Massas
Sensibilidade e Resolução
Diminuição da resolução implica em aumento de sensibilidade!
![Page 62: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/62.jpg)
Análise qualitativa Identificação de Eluatos
TEMPO
CO
NTA
GE
NS
MASSA / CARGA
CO
NT
AG
EN
S
1 Seleção manual ou automática do espectro de massa correspondente a um eluato.
2 Interpretação manual do espectro e / ou comparação automática com biblioteca de espectros padrão do equipamento.
![Page 63: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/63.jpg)
Busca automática em bibliotecas de espectros: comparação
estatística ( Probability Based Matching )
BIBLIOTECA DE ESPECTROS
ESPECTRO DESCONHECIDO
PBM
Lista com possíveis
candidatos + porcentagem de confiabilidade
# NOME FÓRM. %
1 1-dodeceno C12H24 99
2 1-dodecanol C12H26O 91
3 ciclododecano C12H24 91
4 2-dodeceno C12H24 66
5 1-undeceno C11H22 35
6 8-metil-3-undeceno C12H24 32
PBM de um eluato
“desconhecido” (1-dodeceno)
LIMITAÇÕES:
Identificação pouco confiável de espectros muito simples
Limitada pelo tamanho da base de dados (NIST = 66.000
espectros)
Diferenças entre espectros gerados por diversos EM
![Page 64: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/64.jpg)
Espectrometria de Massas no Controle Antidoping
Critérios de identificação
WADA , 2016
Diferença máxima de ± 0,5 Da entre as massas do íon
alvo e a massa do mesmo íon adquirido a partir de
uma amostra enriquecida.
A razão sinal/ruído (S/N) dos íons de identificação
deve ser maior do que 3
Em MS1 usar pelo menos três íons de identificação.
Em MSn usar pelo menos dois íons precursores.
![Page 65: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/65.jpg)
Espectrometria de Massas no Controle Antidoping
Critérios de identificação
WADA , 2016
Abundância Relativa (%)
no MR*
Tolerância máxima para a Abundância Relativa na
amostra
Exemplos
Abundância Relativa (%)
No MR
Tolerância Máxima
50 – 100 ±10 (absoluto) 60 50 - 70
25 – 50 ±20 (relativo)
40 32 - 48
1- 25 ±5 (absoluto)
10 5 - 15
* MR = material de referência analisado nas mesmas condições
![Page 66: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/66.jpg)
Espectrometria de Massas no Controle Antidoping
Critérios de identificação
=
MR = material de referência
Am = amostra
(MR)
MDMA= metiletilenodioximetanfetamina
(Ecstasy)
(Am)
![Page 67: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/67.jpg)
Espectrometria de Massas no Controle Antidoping
Critérios de identificação
MR = material de referência
Am = amostra
(MR)
MDMA= metiletilenodioximetanfetamina
(Ecstasy)
(Am)
![Page 68: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/68.jpg)
Técnicas de separação no controle antidoping
68
Separação
SPE LLE SPME
![Page 69: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/69.jpg)
Extração em Fase Sólida (Solid Phase Extraction - SPE)
Woolfenden E. J. Chrom. A. 1217(16): 2674-2684, 2010. 69
Princípio: passagem da amostra por sorventes adequados, onde ocorre partição entre duas fases (solido-liquido).
Mecanismos de retenção: Força de van der Waals, ligações dipolo-dipolo, ligações de hidrogênio, e interações iônicas.
Modos:
ATIVO: bombeamento;
PASSIVO: difusão.
![Page 70: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/70.jpg)
Extração em Fase Sólida
70
Amostra bruta
Amostra após
extração com SPE
![Page 71: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/71.jpg)
Extração em Fase Sólida
71
![Page 72: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/72.jpg)
Sorventes comerciais para extração em fase sólida
SORBENTE COMPOSIÇÃO APLICAÇÕES
Tenax TA
Poli (oxido de 2,6-difenil-p-fenileno)
Aromáticos exceto Benzeno, apolares PE < 100°C e polares PE < 150°C
Chromosorb 106 Estireno-divinilbenzeno Compostos oxigenados.
C5 a C12
Porapak N Polivinilpirrolidona Nitrilas, piridina e álcoois. C5 a C8
Carbotrap C Carbono grafitizado Hidrocarbonetos até C20 , alquil benzenos
Carbotrap X Carbono grafitizado BTEX
Spherocarb
Pirólise de PVC
Óxido de etileno, CS2 , CH2Cl2 , metanol, etanol, acetona
Carboxen 1000 Pirólise de PVC Hidrocarbonetos ultra-voláteis, C2 a C3
Ras, M.R. et al. Trends in Analytical Chemistry, Vol. 28, No. 3, 2009. 72
![Page 73: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/73.jpg)
Sorventes suportados em sílica para SPE
73 Rodriguez et al. Intech, 2013
![Page 74: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/74.jpg)
Carbono grafítico para SPE
Ferenc et al. Polish J. of Environ. Stud, 2006
Area superficial específica: 100 m2 g-1
Funcionalização: grupos oxigenados
Nomes comerciais: Carbopack, Carbograph
Aplicações: espécies neutras, ácidas e básicas.
![Page 75: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/75.jpg)
Carbono grafítico Poroso para SPE
Ferenc et al. Polish J. of Environ. Stud, 2006
Area superficial específica: 120 m2 g-1
Diâmetro médio dos poros: 250 Å
Porosidade: 75%
Funcionalização: grupos oxigenados
Nome comerciaL Carb GR
Aplicações: espécies polares e apolares
![Page 76: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/76.jpg)
Grafenos para SPE
Wang et al. J. Chromatogr. A, 2014
![Page 77: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/77.jpg)
Nanocompósitos de Grafeno
Wang et al. J. Chromatogr. A, 2014
![Page 78: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/78.jpg)
Nanocompósitos de Grafeno com sílica
Zhang et al. J. Chromatogr. A, 2013
1-(3-dimetilaminopropil)-
3-etilcarbodiimida hidrocloreto (EDC)
N-hidroxisuccinamida (NHS)
![Page 79: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/79.jpg)
Nanotubos de carbono para SPE
Multi-walled carbon nanotubes (MWCNT)
Elevada área superficial específica (200 a 400 m2 g-1)
Elevados fatores de enriquecimento (2000 a 4000 vezes)
Estabilidade química
Estabilidade térmica
Hidrofobicidade
Funcionalização
![Page 80: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/80.jpg)
Funcionalização não covalente dos CNT
Forças envolvidas:
Interações pi
Van der Walls
Eletrostáticas
Grupos:
Polímeros
Surfactantes
Carboidratos
Proteínas
Enzimas
DNA
Estratégias
Mistura física em solução
Polimerização na superfície dos CNT
![Page 81: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/81.jpg)
Funcionalização covalente dos CNT
Forças envolvidas
Ligações covalentes
Grupos
Halogênios
Radicais(alquila, arila)
Ciclicos
Hidroxila
Carboxila
Estratégias
Tratamento dos CNT com agentes oxidantes fortes a temperaturas elevadas
Oxidação em fase gasosa (hidroxila e carbonila)
Oxidação em fase líquida(carboxila)
![Page 82: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/82.jpg)
Funcionalização covalente dos CNT
MWCNT não oxidado MWCNT após tratamento com NaClO 7% m/v
Socas et al. J, Chrom. A, 2014
![Page 83: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/83.jpg)
Extração dispersiva em fase sólida (Dispersive solid-phase extraction - DSPE)
Rastkart, et al. J, Chrom. A, 2013 Análise
![Page 84: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/84.jpg)
Mecanismos em SPE
Fase Normal
Fase Reversa
Analito
Polar Apolar
Sorvente
Polar Apolar
Solvente (matriz) Apolar Moderadamente Polar
Solvente (Eluição)
Polar Apolar
Interações (Analito/sorvente)
Dipolo-dipolo
Van der Walls
84
![Page 85: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/85.jpg)
Extração com cartuchos SPE
Cartuchos de 1 a 50 mL.
Diâmetro médio das partículas 40 a 60 μm
Volume médio da amostra 500 mL
![Page 86: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/86.jpg)
Eluição sequencial em SPE
86
![Page 87: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/87.jpg)
Extração SPE automatizada
Gerstel, 2015
![Page 88: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/88.jpg)
Extração com discos SPE
88
Sorvente impregnado em fibra de vidro ou PTFE
com espessura média de 0,5 mm.
Diâmetro médio das partículas 8 a 40 μm
Diâmetro médio dos discos 5 a 93 mm.
![Page 89: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/89.jpg)
Extração em fase sólida com ponteira descartável (Disposable Pipette Extraction – DPX)
89
Eluição: 0,1 a 0,5 mL
Tempo: 1 a 2 min
![Page 90: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/90.jpg)
Extração DPX de drogas em urina equina e determinação por GC/MS
90
amostra eluato Lerch et al . Gerstel, 2012
![Page 91: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/91.jpg)
Extração em fase sólida com ponteira descartável (Disposable Pipette Extraction – DPX)
91
Vantagens
Mínimo uso de solventes
Baixos LD e LQ
Elevada precisão
Uso em diversas matrizes
Descartável
Baixo custo
Automação
![Page 92: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/92.jpg)
Vantagens e desvantagens SPE
Vantagens
Baixo custo
Simples operação
Grande variedade de sorventes
Elevada seletividade
Potencial para automação
Desvantagens
Restrições de vazão
Entupimentos
Uso de solventes
Exposição a solventes.
![Page 93: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/93.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
93 Sardela V.F.. et al. J. Chromatogr. B. 2009
![Page 94: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/94.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
5,0 mL de urina
1,0 mL de tampão pH=5,2
50,0 μL β-glucuronidase
55 °C por 2 h
KOH até pH=9,0
Centrifugação
Extração SPE
Lavagem com 2,0 mL MeOH
E 2,0 mL água e 1,0 mL tampão pH=4,0
Eluição com 2,0 mL
CHCl3/i-propanol 4:1
100,0 μL MSTFA, 60 °C por 5 min
Secagem com N2
20,0 μL MBTFA 60 °C por 10 min
GC/MS
MBTFA = N-metil-bis-(trifluoroacetamida)
MSTFA= N-metil-N-(trimetilsilil)-trifluoroacetamida
![Page 95: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/95.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
95 Sardela V.F.. et al. J. Chromatogr. B. 2009
![Page 96: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/96.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
96 Sardela V.F.. et al. J. Chromatogr. B. 2009
![Page 97: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/97.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
97 Sardela V.F.. et al. J. Chromatogr. B. 2009
![Page 98: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/98.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
98 Sardela V.F.. et al. J. Chromatogr. B. 2009
![Page 99: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/99.jpg)
Determinação de Sibutramina e metabólitos em urina por SPE-GC/MS
99 Sardela V.F.. et al. J. Chromatogr. B. 2009
![Page 100: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/100.jpg)
Matrizes biológicas e tempo de detecção
100 Bulcão et al, 2011
![Page 101: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/101.jpg)
Estrutura do cabelo
101 Pragst & Baliková, 2006
![Page 102: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/102.jpg)
Determinação de benzodiazepínicos em cabelo por SPE-GC/MS
102
50 mg cabelo
SPE
Condicionamento
SPE
Lavagem
SPE
Eluição
Derivatização
GC/MS
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 103: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/103.jpg)
Determinação de benzodiazepínicos em cabelo por SPE-GC/MS
103
A: Diazepan
B: Diazepan-d5
C: Nordiazepan
D: Oxazepan
E: Aminoclonazepan
F: Clordiazepóxido
G: Temazepan
Cromatograma dos benzodiazepínicos no cabelo após extração por SPE
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 104: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/104.jpg)
Determinação de benzodiazepínicos em cabelo por SPE-GC/MS
104
Limites de detecção e quantificação
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 105: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/105.jpg)
Determinação de benzodiazepínicos em cabelo por SPE-GC/MS
105
Pantaleão,L.N., 2012
Resultados para amostras de cabelo (6 a 9 cm) de usuários de benzodiazepínicos.
Amin: aminoclonazepan, Dzp: diazepan, Nzp: nordiazepan
![Page 106: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/106.jpg)
Microextração em Fase Sólida (Solid Phase Microextraction – SPME)
Princípio: equilíbrio do analito entre uma micro fase de coleta e a matriz.
19
![Page 107: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/107.jpg)
Microextração em Fase Sólida (Solid Phase Microextraction – SPME)
Modos
Fibra exposta
Fibra recolhida
19
![Page 108: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/108.jpg)
Fibras para SPME
Sorbente ESP.
(μm)
T(°C) USO
100 200-270 COV
PDMS 30 200-270 COSV ap
7 200-270 COSV semi-p
PDMS/DVB 65 200-270 V p
CX/PDMS 75 240-300 COV traço
CW/DVB 65 200-260 p
DVB/CX/PDMS 50/30 230-270 p
CW/TPR 50 - p
PA 85 220-310 COSV p
Parreira, F.V.; Cardeal, Z. L. Química Nova, 28, 646-654, 2005 108
Tabela 4. Características das principais fibras comerciais
![Page 109: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/109.jpg)
Escolha da Fibra para SPME
Parreira, F.V.; Cardeal, Z. L. Química Nova, 28, 646-654, 2005 109
Tabela 4. Características das principais fibras comerciais
![Page 110: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/110.jpg)
Reuso das fibras para SPME
Parreira, F.V.; Cardeal, Z. L. Química Nova, 28, 646-654, 2005 110
Tabela 4. Características das principais fibras comerciais
PDMS/DVB Após 20 ciclos de
extrações em suco de uva
PDMS Após 100 ciclos de
extrações em suco de uva
Bojko, et al. Anal. Chim. Acta, 2012
![Page 111: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/111.jpg)
Extração com SPME no modo Headspace (HS-SPME)
111
![Page 112: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/112.jpg)
Extração com SPME no modo de Imersão Direta (DI-SPME)
112
![Page 113: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/113.jpg)
Aplicações da SPME em química Forense
Furton, K. G. J. Chrom. Sci., 2000
![Page 114: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/114.jpg)
Extração de Drogas ilícitas por HS-SPME em diversas matrizes e determinação por GC/MS
Fujii.. H. J. Forensic. Toxicol., 2015
100 μm PDMS
Extração a 300°C de 30 s a 7 min
![Page 115: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/115.jpg)
Extração de Drogas ilícitas por HS-SPME em diversas matrizes e determinação por GC/MS
α-PVP: alfa-Pirrolidinapentiofenona
PV9: 1-Fenil-2-(pirrolidina-1-il)octan-1-one
MN18: N-1-Naftalenil-1-pentil-1H-indazol-3-carboxamida
Fujii.. H. J. Forensic. Toxicol., 2015
![Page 116: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/116.jpg)
Determinação de anfetaminas em urina por SPME-GC/MS
116
Souza, D.Z. et al., 2011
1,5 mL urina
75 mg Na2CO3 + 150 mg Na2SO4 + 5 μL PRCL
Vortex
SPME
PDMS 30μm, 1200 rpm por 20 min
GC/MS
PRCL= propilcloroformato
![Page 117: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/117.jpg)
Determinação de anfetaminas em urina por SPME-GC/MS
117 Souza, D.Z. et al., 2011
DIE: dietilpropion
AMP: anfetamina
MET: metanfetamina
FEN: fenproporex
MPH: metilfenidato
PROPYL: propilcarbamato (derivatizante)
![Page 118: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/118.jpg)
Determinação de anfetaminas em urina por SPME-GC/MS
118 Souza, D.Z. et al., 2011
![Page 119: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/119.jpg)
Extração Líquido-Líquido (Liquid-Liquid Extraction - LLE)
Equilíbrio de distribuição ou partição
KD = [A(org)] / [A(aq)]
Concentração do Analito que permanece na fase aquosa [A(aq)]i
Onde:
[A(aq)]o = conc. Inicial do A
Vaq = volume da fase aquosa
Vaq = volume da fase organica
i = número de extrações
119
![Page 120: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/120.jpg)
Extração Líquido-Líquido (Liquid-Liquid Extraction - LLE)
Vantagem
Baixo custo
Desvantagens
Elevado consumo de solvente
Risco de contaminações
Baixo fator de concentração
120
![Page 121: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/121.jpg)
Determinação de anabolizante em urina por LLE-GC/MS
121
Wójtowicz ,M. et al., 2015
2-etilamino-1-fenilbutane (EAPB)
![Page 122: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/122.jpg)
Determinação de anabolizante em urina por LLE-GC/MS
122
5,0 mL urina
20 μL Difenilamina 150 mg L-1 (P.I)
Ajuste pH = 9
1,3 mL
T-butil-metil éter
LLE
GC/MS
PI= padrão interno, Wójtowicz ,M. et al., 2015
![Page 123: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/123.jpg)
Determinação de anabolizante em urina por LLE-GC/MS
123
Cromatograma do EAPB após extração LLE
Padrão
Interno
EAPB
Wójtowicz ,M. et al., 2015
![Page 124: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/124.jpg)
Determinação de anabolizante em urina por LLE-GC/MS
124
Espectro de massas do EAPB
Wójtowicz ,M. et al., 2015
![Page 125: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/125.jpg)
Determinação de anabolizante em urina por LLE-GC/MS
125
Concentração de EAPB em urina de voluntário após a ingestão de 10,8 μg de EAPB em um suplemento alimentar
Wójtowicz ,M. et al., 2015
![Page 126: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/126.jpg)
Microextração com gota (Single Drop Microextraction - SDME)
126
Headspace (HS-SDME) Imersão direta (DI-SDME)
1 a 8 μL
![Page 127: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/127.jpg)
Microextração com gota (Single Drop Microextraction - SDME)
127
Fatores
Tipo e volume do solvente de extração
Temperatura e tempo de extração
Força iônica
pH
Agitação
Vantagens
Baixo custo
Simplicidade
Elevada recuperação
Elevado fator de enriquecimento
Desvantagens
Baixa seletividade
Baixa precisão
Cinética lenta
![Page 128: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/128.jpg)
Microextração em fase líquida (Liquid phase microextraction - LPME)
Diâmetro interno = 600 µm
Espessura das paredes = 200 µm
Poros = 0,2 µm
128 10:24
![Page 129: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/129.jpg)
Microextração em fase líquida (Liquid phase microextraction - LPME)
Psillakis, E., Kalogerakis, N. TrAC, 2003
Solução aceptora (organica)
Paredes da fibra Agulhas
Fibra imersa na solução
aquosa (doadora)
Solução doadora
129 10:24
![Page 130: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/130.jpg)
Determinação de anfetaminas em urina e sangue por LPME-GC/MS
130 Lorena, 2012
Propriedades das principais anfetaminas
![Page 131: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/131.jpg)
131 Pragst & Baliková, 2006
Determinação de anfetaminas em urina e sangue por LPME-GC/MS
Biotransformação do MDMA
![Page 132: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/132.jpg)
Determinação de anfetaminas em urina e sangue por LPME-GC/MS
132
1,0 mL da amostra em pH 13
Extração com tolueno em HF de 4 cm
por 15 min a 30°C e 500 rpm100 μL
LD: 0,5 a 3 ng/mL
Methamphetamine hydrochloric (MA),
Amphetamine sulfate (AM),
3,4-methylenedioxymethamphetamine hydrochloric (MDMA),
3,4-methylenedioxyamphetamine hydrochloric (MDA),
Methcathinone hydrochloric (MACT),
Ketamine hydrochloric (K),
Meperidine hydrochloric,
Methadone hydrochloric.
Meng, L. et al. J. Chromatogr. B. 2015
![Page 133: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/133.jpg)
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
133
Propriedades das principais anfetaminas
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 134: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/134.jpg)
134 Pragst & Baliková, 2006
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
Biotransformação do MDMA
![Page 135: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/135.jpg)
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
135
50 mg cabelo
HF-LPME
Derivatização
GC/MS
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 136: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/136.jpg)
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
136
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 137: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/137.jpg)
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
137
Espectro de massas da anfentamina derivatizada
![Page 138: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/138.jpg)
Determinação de benzodiazepínicos em cabelo por SPE-GC/MS
138
Lorena, 2012
Espectro de massas do diazepan
![Page 139: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/139.jpg)
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
139
Limites de detecção e quantificação
Pantaleão,L.N., 2012
![Page 140: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/140.jpg)
Determinação de anfetaminas em cabelo por LPME-GC/MS
140
Resultados para amostras de cabelo (6 a 9 cm) de usuários de anfetaminas.
Anf: anfetamina, Femp: femproporex Pantaleão,L.N., 2012
![Page 141: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/141.jpg)
141 Website: http://cmca.qui.ufmg.br/
![Page 142: Cromatografia e os jogos olímpicos de 2016: uma corrida ...joinqui.qui.ufmg.br/download/MC6_Prof_Helvecio.pdf · Histórico do uso de substâncias proibidas 10 Áustria (1910) Primeiro](https://reader030.vdocuments.pub/reader030/viewer/2022021808/5be5f39209d3f2c44d8cdd97/html5/thumbnails/142.jpg)
Obrigado!
A Consciência é um singular para o qual não existe plural.
[Erwin Schrödinger]
142