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Biotério de experimentação: setorialBiotério de experimentação: setorial
• Instalação dotada de características próprias, com a finalidade única de alojar (bem-estar) espécies animais destinadas a servir como reagentes biológicos em diversos tipos de reagentes biológicos em diversos tipos de ensaios controlados, atendendo as necessidades dos programas de pesquisa, ensino, produção e controle de qualidade nas áreas biomédicas.
André Carissimi, 2010
Biotério de experimentaçãoBiotério de experimentação
• Instalações adequadas para os padrões necessários à manutenção de animais de laboratório devem:– possuir programas de gerenciamento das
condições físicas e ambientaispossuir programas de gerenciamento das condições físicas e ambientais
– garantir cuidados que favoreçam o desenvolvimento dos animais
– manter a sanidade e bem-estar, bem como...
– minimizar as variações que podem interferir nos resultados dos ensaios
NIH,2002
Localização Localização
Biotérios de experimentação
Sala Sala
de de manipulaçãomanipulação
Sala Sala
de de
LaboratóriosLaboratórios
de de
experimentaçãoexperimentação
experimentação de de manipulaçãomanipulaçãode de
cirurgiacirurgia
Sala Sala
de de
eutanásiaeutanásia
Sala Sala
de de
comportamentocomportamento
InstalaçõesInstalações
• Salas de animais
EspécieEspécie
• Salas de animais LinhagemLinhagem
SexoSexo
InstalaçõesInstalações
• Sala de lavagem, esterilização e preparo de materiais;
• Quarentena – mínimo 15 dias
• Estoque – maravalha , ração• Estoque – maravalha , ração
• Área de recepção – animais e usuários
• Área administrativa
• Sanitários e vestiários
InstalaçõesInstalações
Acesso independenteaos sanitários
EPIs: touca, propé, avental Descartável, luvas, máscara
Quarentena de animais
Condições higiênicasDe todas dependências
Proteção contra entradade insetos e outros animais
Limpeza dos ArredoresDo Edifício
CondiçõesCondições
Registros/POP dasatividades de biotério: rotina
aos sanitários
Identificaçãodas atividades
Instalações de laboratórios deapoio independentes
De todas dependências
Ventilação/ar condicionadode biotério independente
Local e POP de dejetose cadáveres de animais
CondiçõesCondiçõesdasdas
InstalaçõesInstalações
www.anvisa.gov.br
InstalaçõesInstalações
• Uso de instalações físicas adequadas às atividades de risco com animais;
• Disponibilidade de equipamento e materiais em quantidade e qualidade requeridas;quantidade e qualidade requeridas;
• Adoção de práticas operacionais padronizadas que determinem a qualidade e a segurança das
• Atividades com agentes de riscos, animais e organismos geneticamente modificados (OGM);
InstalaçõesInstalações
• Barreiras sanitárias– É obrigatória a existência de barreiras físicas que
separem áreas distintas, evitando o cruzamento de contaminações dentro do biotério e proporcionando seu isolamento do meio proporcionando seu isolamento do meio externo, onde há circulação de pessoas e outros animais.
– Inversamente, as barreiras devem impedir que animais e patógenos saiam para o meio externo.
– Multiusuários
InstalaçõesInstalações
• Controle genético estrito.
• Ambiente padronizado(segundo a espécie)
• Técnicos treinados e qualificados
• Ética. • Ética.
InstalaçõesInstalações
• Aprovação do CEUA
• Animais devem ser adquiridas em estabelecimentos legalmente autorizados à sua criação; sua criação;
• Laudo técnico: sanidade
• Autorização do coordenador do biotério de experimentação/setorial
= = = = = = = = 11111111
x x x x x x x x 4 4 4 4 4 4 4 4 ++++++++
77777777
Capacidade matrizCapacidade matriz
Nº de fêmeas = Nº de fêmeas = acasaladasacasaladas (NP + TC) Fd
365
Nº a s + MS
F % O
Chegada dos animaisChegada dos animais
• Transporte
• Estresse: provoca mudanças fisiológicas
> 5 dias de observação pós - transporte
• Quarentena
• > 5 dias de observação pós - transporte antes do início de experimentos
ADAPTAÇÃO ADAPTAÇÃO -- ADAPTAÇÃO ADAPTAÇÃO -- ADAPTAÇÃOADAPTAÇÃO
Identificação das gaiolas em experimentação
– Cada gaiola deve possuir um cartão identificador modelo devidamente preenchido;
1. Identificação da linhagem
2. Identificação da idade dos animais (data de nascimento) nascimento)
3. Sexo
4. Identificação do usuário e docente responsável
5. Identificação do material inoculado
6. Data do início do experimento
7. Telefone para contato
• Necessitando de imobilização física ou química e/ou de privação alimentar ou hídrica, os pesquisadores devem procurar manter estas condições pelo menor período de tempo possível, evitando prolongar a angústia, desconforto e dor.
• Gaiolas com animais que requeiram especial atenção por parte dos funcionários do biotério, além do cartão de identificação, deverão ser
Identificação das gaiolas em experimentação
funcionários do biotério, além do cartão de identificação, deverão ser identificadas de maneira especial:
NÃO DAR ÁGUA
NÃO DAR
RAÇÃO
NÃO TROCAR
MARAVALHA
Restrição hídrica Restrição alimentar Restrição ao bem-estar
Rotina do biotério
• Conta com um serviço de limpeza ininterrupta, autoclavagemdo material utilizado como cama, oferta diária de água e ração, manejo da criação, entrega dos animais e atendimento aos usuários.
gaiolagaiolatemperaturatemperatura
umidadeumidade
raçãoraçãoáguaágua
arar
Fatores Fatores
limpezalimpeza delineamento delineamento exp.exp.
tratadortratador
Fatores que influenciam no estado de Fatores que influenciam no estado de saúde e bemsaúde e bem--estar animalestar animal
iluminaçãoiluminaçãoruídoruído
feromôniosferomônios POPULAÇÃO/caixaPOPULAÇÃO/caixa
amôniaamôniaforraçãoforração
Fatores Fatores genéticosgenéticos
idadeidade sexosexo
eutanásiaeutanásiaprotocolo protocolo experimentalexperimental
Considerações na elaboração do protocolo experimental• O objetivo e a necessidade do experimento animal
• Se não é uma repetição desnecessária
• Se um experimento in vitro poderia ser realizado ou o animal poderia ser substituído por uma espécie filogeneticamente inferior(utilização de métodos alternativos)
• �•• Se uma mudança poderia ser feita para um método menos invasivo•• Educação e experiência do pesquisador e técnicos
• Razões porque gaiolas especiais e ambiente de criação são necessárias
• Qualidade genética e microbiológica
• O número de animais e disposição dos grupos.
�
Considerações na elaboração do protocolo experimental
• Medidas para aliviar a dor
– Uso de sedativos, analgésicos e anestésicos
• Pós-Operatório
• Eutanásia• Eutanásia
– Pesagem do Animal
- Comportamento
- Peso
- Lesões na pele
Exame Físico:
Avaliação antes do experimento
- Lesões na pele
- Hidratação
- Temperatura
- Parâmetros hematológicos
- secreções oculares ou nasais
- distensão abdominal
- fezes e urina alteradas
- rarefação do pelo
Avaliação antes do experimento
- pruridos, etc
Não utilizar o animal
- Animal saudável- Uso de antibiótico:amoxilicilina – 1mL/500mL p/1 semana(bebedouro) - CLAVAMOX®;
Cuidados pré-cirúrgicos
- aclimatação;
- Jejum não é obrigatório – aumento daabsorção de anestésicos intraperitonealmente;
- Anestesia;
- Tricotomia;
- Álcool iodado: passar somente no sítiocirúrgico – risco hipotermia;
Preparação do animal
cirúrgico – risco hipotermia;- Campo cirúrgico operatório- sem perder
visibilidade do paciente;- Instrumentos usados para fazer uma
incisão na pele deve ser dedicado exclusivamente aesse fim e separado de instrumentos utilizadospara manipular os tecidos e órgãos expostos.
- Observação periódica da respiração;
- Cor das mucosas e avaliação da cor dos
Monitoramento e Avaliação da Anestesia
- Cor das mucosas e avaliação da cor dos olhos refletida em animais albinos;
- Perda do reflexo podal;
- Evitando dor:• Buprenorfina: 0,3mg+14mL solução salina: 2X ao dia por 7 a 10 dias-
•Ratos: 400μL – SC• Camundongos: 100 μL – SC• Analisar parâmetros de dor
Cuidados pós-cirúrgicos
• Analisar parâmetros de dor
- amoxilicilina – 1mL/500mL p/1 semana (bebedouro) -CLAVAMOX®;
- Material da cama pode machucar nariz, olhos e boca de animais anestesiados ou ser aspirado durante a recuperação:
• substituir a cama por toalhas;
Cuidados pós-cirúrgicos
- Fornecimento de calor durante a recuperação:
• lâmpada incandescente (50-75 watts) 12-14 centímetros de distância do roedor, posicionado de modo que o roedor pode escapar da fonte de luz, se desejar.
- Fornecimento de calor durante a recuperação:
• Uma meia cheia de feijão ou grão de bico podem ser aquecidos por microondas e
Cuidados pós-cirúrgicos
podem ser aquecidos por microondas e colocado junto ao animal;•Aquecer solução salina: SC ou IP• Uma garrafa ou luva de látex com água quente;
•uma garrafa / luva pode resfriar rapidamente abaixo da temp. do animal
Deiscência incisional
• animais podem remover suturas;
• padrões de sutura contínua podem levar à completa deiscência incisional;
• limpeza regular das incisões ajudam a • limpeza regular das incisões ajudam a controlar as infecções localizadas.
• não apertar suturas: pesquisadores familiarizados com sutura de pele humana tendem a suturar pele animal com muita força.
Sinais de dor
–Diminuição do apetite (perda de peso);–Diminuição de urina e fezes;–Diminuição da atividade normal;–Piloereção e dorso curvado;–Automutilação (lamber-se ou coçar-se);–Automutilação (lamber-se ou coçar-se);–Aumento da freqüência respiratória;–Secreção porfirina (lágrima vermelha), olhos
e nariz (cromodacriorréia);–Vocalização;–Agressividade, se tocado.
– Pós-cirúrgico
• Acompanhar a recuperação dos reflexos dos animais (possibilidade do animal de alimentar sozinho), da respiração e da cor das mucosas e olhos;
Outras considerações
Outras considerações
• Identificação: marcação
• Dieta
• Controle versus experimento
• Experimentos que envolvem acasalamento• Experimentos que envolvem acasalamento
• Rotina
Outras considerações
• Manejo
• “Esquecimento”
• Multiusuários
– Problemas comportamentais humanos– Problemas comportamentais humanos
Amor ao próximo...
RuídoIluminaçãoManipular outros animaisSem EPIs
Enredo científico: antes
– Atores principais: reagentes e tratamento
• Coadjuvantes: vidrarias...
– Figurantes: animais
Marcel Frajblat, 2010
Enredo científico: depois
– Atores principais: animais e tratamento
• Coadjuvantes: reagentes...
– Figurantes: vidrarias
Marcel Frajblat, 2010
gaiolagaiolatemperaturatemperatura
umidadeumidade
raçãoraçãoáguaágua
arar
Fatores Fatores
limpezalimpeza delineamento delineamento exp.exp.
tratadortratador
Fatores que influenciam no estado de Fatores que influenciam no estado de saúde e bemsaúde e bem--estar animalestar animal
iluminaçãoiluminaçãoruídoruído
feromôniosferomônios POPULAÇÃO/caixaPOPULAÇÃO/caixa
amôniaamôniaforraçãoforração
Fatores Fatores genéticosgenéticos
idadeidade sexosexo
eutanásiaeutanásiaprotocolo protocolo experimentalexperimental