7/30/2019 DETERMINACIN DE GLICEMIA

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DETERMINACIN DE GLICEMIA

I. IN TR OD UCC IN .

Los carbohidratos o sacridos (del griego: sakcharon, azcar) son compuestos

esenciales de los organismos vivos y son la clase ms abundante de molculas

biolgicas. El nombre carbohidratos significa literalmente hidratos de carbono y

proviene de su composicin qumica, que para muchos de ellos es (CH2O)n,

donde n 3. Es decir, son compuestos en los que n tomos de carbono parecen

estar hidratados con n molculas de agua. En realidad se trata de

polihidroxialdehidos y polihidrohicetonas (y algunos derivados de stos), cadenas

de carbono que contienen un grupo aldehdo o cetnico y varios grupos hidroxilos.

Las unidades bsicas de los carbohidratos son los monosacridos, no

hidrolizables en unidades ms pequeas. La glucosa es el monosacrido ms

abundante; tiene 6 tomos de carbono y es el combustible principal para la

mayora de los organismos. Los oligosacridos contienen de dos a diez unidades

de monosacridos unidas covalentemente. Por su parte, los polisacridos estn

constituidos por gran nmero de unidades de monosacridos unidos

covalentemente, alcanzando pesos moleculares de hasta 106 dalton

(g/mol). Los polisacridos desempean dos funciones biolgicas principales:

algunos almacenan energa metablica y otros sirven de elementos estructurales a

la clula.

Como resultado de la hemiacetalizacin de los monosacridos aparece en su

estructura el denominado carbono anomrico. Este carbono tiene caractersticas

especiales que determinan entre otras cosas la aparicin de un tipo deismeros (los anmeros) y le confiere a estas molculas la propiedad de

polimerizarse y as constituir los oligosacridos y los polisacridos.

Cuando se produce la unin de dos monosacridos a travs de un enlace

glicosdico se obtienen los denominados disacridos, de gran importancia en el

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metabolismo de los glcidos y particularmente en su proceso de digestin, por lo

que resulta necesario conocer a los principales representantes de este grupo de

compuestos.

Cuando se observa disacridos, se aprecia que al menos uno de loscarbonos anomricos ha quedado comprometido en la formacin del enlace

glicosdico, en tanto que es comn que otro de estos carbonos quede libre y

permita que la molcula vaya creciendo hasta alcanzar dimensiones que permitan

considerarla como un polisacrido. En todo este proceso los enlaces glicosdicos

que van apareciendo irn comprometiendo a los carbonos anomricos de manera

que slo uno, el de uno de los extremos permanecer libre. Debido a las

caractersticas reductoras que posee el carbono anomrico a ese extremo

se le denominar extremo reductor, en tanto que al otro extremo de la molcula,

al no presentar dicho carbono anomrico se le denomina extremo no reductor.

Esta nomenclatura es de gran utilidad cuando se estudia el metabolismo de los

polisacridos y en particular el del glucgeno.

Por otro lado, la glucosa aparece en la sangre de los hetertrofos

directamente de la degradacin de polisacridos complejos o de su sntesis a

partir de distintas fuentes por gluconeognesis y penetra en la mayor parte de

las clulas a travs de un transportador especfico que la traslada hasta el

citosol donde se degrada.

En la prctica conoceremos la tcnica de determinacin de glucosa en el proceso

metablico del organismo.

La hemoglobina glucosilada (o glicosilada) es una heteroproteina de la sangre,

que resulta de la unin de la hemoglobina con carbohidratos libres. Como

sabemos la hemoglobina hace que los eritrocitos o glbulos rojos de la sangre

sean de ese color. Un glbulo rojo vive 120 das y durante ese tiempo la glucosa

que ingresa al organismo se pega a estas clulas. Cuando esto sucede se dice

que han sido glucosiladas. Una vez adherida la glucosa al glbulo rojo no puede

desprenderse, por ello la hemoglobina permanece glucosilada, durante todo el

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periodo de vida del eritrocito. La prueba de hemoglobina glucosilada puede

decirnos cuantos glbulos rojos tienen adherida glucosa, es decir cuanta

hemoglobina ha sido glucosilada. Y como el eritrocito vive 120 das, esta prueba

es de gran utilidad en la evaluacin del control de glicemia a largo plazo.

II. OBJETIVOS:1. Determinar la concentracin de glucosa srica basal.

III. MATERIALES:3.1 Materiales y e q u ip o s

3.1.1. Ma te r ial e s : A. Biolgico:

Sangre total

Suero sanguneo

B. De vidrio:

3 Tubos de ensayo 13 x 100

C. Reactivos:

Reactivo glicemia enzimtica

3.1.2. Equipos e in s tr um e n to s :

1 Bao mara

1 Espectrofotmetro

1 CentrfugaMicropipetas de 10 - 100

2 Gradillas

3.1.3. Otr o s :

Pares de guantes descartables

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1 Marcador indeleble

Torundas de algodn

Agujas descartables N 21

Tips de micropipetas

3 Cubetas para espectrofotmetro 1 mL

1 Ligadura

Cronometro

IV. PROCEDIMIENTO:

FUNDAMENTO DEL MTODOLa glucosa, presente en el suero sanguneo es oxidada por la glucosa oxidasa

(GOD), a cido glucnico y agua oxigenada. El perxido de hidrgeno, en

presencia de peroxidasa (POD) produce la unin oxidativa del fenol con la 4 -

aminofenazona, presentes en el reactivo de trabajo, dando lugar a la formacin de

un cromgeno rojo- cereza con absorbancia mxima a 505 nm.

La reaccin es la siguiente:

GO D

glucosa + O2 + H2O cido glucnico + H2O 2

P O D

2 H 2O2 + 4-AF + fenol quinona coloreada + 4 H2O

La quinona coloreada es la 4 (p -b e n zo q u inona -m ono imi no f e na zona )

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GLUCEMIAObtener una muestra de sangre de la persona. Obtener suero de manera usual y

realizar la prueba de determinacin de glucosa de acuerdo a lo siguiente:

Tubo Blanco Standard Mu e s tr a

(B) (S) (D)

Muestra (suero) (L) --- --- 10Standard (L) --- 10 ---Reactivo de trabajo (mL) 1.0 1.0 1.0Mezclar e incubar 10 minutos a 37C y lee r en

espectofotgrafo 505 nm, llevando el aparato a cero

Clculos:

Valores de referencia en ayunas: 70 110 mg/dL

Valores de referencia en glucosa al azar: 110 126 mg/dL

V. RESULTADOS:

Datos obtenidos:

Absorbancia de blanco: 0.038

Absorbancia de standard: 0.363

Absorbancia de muestra: 0.400

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VI. CONCLUSIN:

Los resultados obtenidos de glucemia en el laboratorio fue 111.38 mg/dL,

podemos concluir que estos valores se encuentran dentro de los rangos normales

de glucosa al azar que es 110 126 mg/dL.