ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA 12DIGESTIÓN DE MACROMOLÉCULAS

INTRODUCCIÓN

La diversidad metabólica que existe entre los microorganismos, permite la realización de los ciclos biogeoquímicos.

Células

Auxótrofas

Protótrofas

Ácidos grasos esenciales

Vitaminas

Factores de Crecimiento.

Requerimientos nutricionales y clasificación fisiológica

Fuente de Proceso fisiológico

Energía Física (luz) Fototrofía

Química Quimiotrofía

Carbono Únicamente CO2 Autotrofía

Orgánico Heterotrofía

Donador inicial de electrones

Inorgánico Litotrofía

Orgánico Organotrofía

Aceptor final de electrones

Orgánico Fermentación

Inorgánico Respiración anaerobia

O2 Respiración aerobia

CO2 Autotrofía, fotosíntesis, metanogénesis

CELULOSA Principal componente de la membrana celular de la mayor parte de las

plantas. Una célula vegetal joven contiene aproximadamente un 40% de celulosa y la madera un 50 %. El ejemplo más representativo lo constituye el algodón que contiene más de 90% de celulosa.

HIDRÓLISIS DE FOSFOLÍPIDOS

PROTEINASAS

Son enzimas que catalizan la hidrólisis de las proteínasUnas proteasas liberan neurotransmisores y hormonas a partir de ciertos precursores inactivos

OBJETIVOMontar ensayos de degradación de polímeros por enzimas extracelulares microbianas.

Hidrólisis de Gelatina

- Prueba de licuefacción de la gelatina

MÉTODOS

- Prueba de la digestión de la gelatina y la caseína en caja.

Hidrólisis de almidón

1.- 2.-

3.- Incubar a 37ºCDurante 48 horas

4.- 5.- Resultado. + Bacillus subtilis

“HIDRÓLISIS DE

FOSFOLÍPIDOS”

Etiquetar y marcar loas placas de agar gelosa

sangre y yema de huevo

Sembrar los microorganismos por estría abierta en su sector respectivo.

Incubar los cultivos a 37˚c durante 48h.

Observar las placas de agar yema de huevo y gelosa sangre,

para determinar la presencia de zonas de hidrólisis.

Hemólisis alfa: si el halo es opaco, indica la hidrólisis de los enlaces éster fosfato

con la acumulación extracelular de di glicéridos.

Hemólisis beta: el halo es translúcido, indica la

hidrólisis de los enlaces éster y la utilización de los

productos de los ácidos grasos.

Hemólisis gamma : ausencia de halo.

Leche Tornasolada

Principio:

Medio diferencial utilizado para determinar diversas funciones metabólicas de un microorganismo:

Fermentación de la lactosa.Reducción del tornasol.Formación de un coágulo.Peptonización (digestión).Formación de gas.

Procedimiento

37°C

+

Lactosa

Lactosa

CO2 + H2

Fermentación de Lactosa

Fermentación de la lactosa o alcalinización.

1 2 3

1. Tubo sin inocular.2. Acidificación3. Alcalinización

Reducción del tornasol.

1 2

1. Tubo sin inocular.2. Reducción de tornasol

Formación del coágulo y digestión:

1 2 3 4

1. Tubo sin inocular.

2. Coagulación (ácida)

3. Coagulación (alcalina)

4. Digestión

Formación de gas y fermentación tormentosa

1 2

1. Tubo sin inocular.

2. Fermentación tormentosa

Autotrofía. Es la capacidad de ciertos organismos de sintetizar todas las sustancias esenciales a partir de sustancias inorgánicas.

Hydrodictyon reticulatum.

Heterotrofía. Son aquellos organismos que deben alimentarse con las sustancias orgánicas sintetizadas por otros organismos.

Las enzimas extracelulares que rompen proteínas se llaman Proteasas, las que rompen polisacáridos Amilasas, y las que rompen lípidos son las Lipasas.

Un ejemplo de polisacárido estructural es Celulosa. Un ejemplo de polisacárido nutricional es Glucógeno.

La caseína es una proteína de origen Animal, la gelatina es de origen Vegetal.

La descomposición de los alimentos por degradación de triglicéridos provoca Rancidez.

BIBLIOGRAFÍA:

- MacFaddin, Pruebas Bioquímicas para la Identificación de Bacterias de Importancia Clínica, Editorial Médica Panamericana, Tercera edición, Buenos Aires, 2003.

- http://enzymeindia.com/enzymes/cellulase-spanish.asp - http://www2.uah.es/alorente/invest/nucleasas/nucleasas.htm- http://www.ujat.mx/publicaciones/uciencia/diciembre2005/celu

lasa_art6.pdf