Actualités sur le dépistageActualités sur le dépistagedu cancer de la prostate etdu cancer de la prostate etle PSA en pratique courantele PSA en pratique couranteX. RébillardX. Rébillard -- Y. FullaY. FullaX. RébillardX. Rébillard -- Y. FullaY. Fulla
AtelierAtelier B08B08Modérateur : F. ThuillierModérateur : F. Thuillieravec la collaboration de Siemens Diagnosticsavec la collaboration de Siemens Diagnostics38ème Colloque National38ème Colloque Nationaldes Biologistes des Hôpitauxdes Biologistes des HôpitauxMontpellierMontpellier –– 28/09 au 02/10/200928/09 au 02/10/2009
ACNBH
Agrément FMCN° 100 168
DECLARATION D’INTERETDECLARATION D’INTERET
DANS LE CADRE DE MISSIONS DE FORMATIONDANS LE CADRE DE MISSIONS DE FORMATION
REALISEES POUR L’ACNBHREALISEES POUR L’ACNBH
3838èmeème Colloque NationalColloque Nationaldes Biologistes des Hôpitauxdes Biologistes des Hôpitaux
MontpellierMontpellier –– 28/09 au 02/10/200928/09 au 02/10/2009
CNBH2009
Dr. FULLADr. FULLAExerçant au CH COCHINExerçant au CH COCHINdéclare sur l’honneurdéclare sur l’honneurne pas avoir d'intérêtne pas avoir d'intérêt, direct ou indirect (financier) avec les entreprises, direct ou indirect (financier) avec les entreprisespharmaceutiques, du diagnostic ou d’éditionspharmaceutiques, du diagnostic ou d’éditionsen relation avec le DMDIV et/ou le sujet présentéen relation avec le DMDIV et/ou le sujet présenté..
Outils biologiques pour une meilleureOutils biologiques pour une meilleureprise en charge du cancer de la prostateprise en charge du cancer de la prostate
Objectifs : améliorer la sensibilité et laObjectifs : améliorer la sensibilité et la Objectifs : améliorer la sensibilité et laObjectifs : améliorer la sensibilité et laObjectifs : améliorer la sensibilité et laObjectifs : améliorer la sensibilité et laspécificité des moyens de dépistage duspécificité des moyens de dépistage ducancer de prostatecancer de prostate
Diminuer le nombre de biopsies “inutiles”Diminuer le nombre de biopsies “inutiles”
Objectifs : améliorer la sensibilité et laObjectifs : améliorer la sensibilité et laspécificité des moyens de dépistage duspécificité des moyens de dépistage ducancer de prostatecancer de prostate
Diminuer le nombre de biopsies “inutiles”Diminuer le nombre de biopsies “inutiles”
Importance du PSA et problématiqueImportance du PSA et problématique
Augmentation des prescriptions de PSA (dépistageAugmentation des prescriptions de PSA (dépistageindividuel)individuel)
PSAT au dépistage : seuil unique de prescription dePSAT au dépistage : seuil unique de prescription debiopsies (2 ou 4 ng/mL)biopsies (2 ou 4 ng/mL)
CNBH2009
biopsies (2 ou 4 ng/mL)biopsies (2 ou 4 ng/mL)
Quels paramètres en routine clinique : PSAT, PSAL ouQuels paramètres en routine clinique : PSAT, PSAL ouPSAC et ratio L/T ou C/TPSAC et ratio L/T ou C/T
PSATPSAT--PSACPSAC--PSAL : variabilité des dosages /automatesPSAL : variabilité des dosages /automates
Optimisation et perspectivesOptimisation et perspectives
PSA Prostate Specific AntigenPSA Prostate Specific Antigen
Glycoprotéine de 237 AA, PM 33 000, produiteprincipalement par la cellule épithéliale de la prostate (N,HBP, Prostatites et Cancer)
Sérine Protéase de la famille des Kallicréines (HK3) jouantun rôle majeur dans la liquéfaction du liquide séminal
Glycoprotéine de 237 AA, PM 33 000, produiteprincipalement par la cellule épithéliale de la prostate (N,HBP, Prostatites et Cancer)
Sérine Protéase de la famille des Kallicréines (HK3) jouantun rôle majeur dans la liquéfaction du liquide séminal
CNBH2009
un rôle majeur dans la liquéfaction du liquide séminal
Antigénicité importante
Demi-vie : 2-3 jours
Formes circulantes :» PSA libre : 33 kD, immunoréactif, forme prédominante pour N et HBP
» PSA-ACT (100 kD) : immunoréactif, forme prédominante pour cancer
» PSA-AMG (780 kD) : épitopes "occultés" (PSA encapsulé)
un rôle majeur dans la liquéfaction du liquide séminal
Antigénicité importante
Demi-vie : 2-3 jours
Formes circulantes :» PSA libre : 33 kD, immunoréactif, forme prédominante pour N et HBP
» PSA-ACT (100 kD) : immunoréactif, forme prédominante pour cancer
» PSA-AMG (780 kD) : épitopes "occultés" (PSA encapsulé)
IsoformesIsoformes du PSAdu PSA
Biology of Prostate-Specific AntigenSteven P. Balk, Yoo-Joung Ko, and Glenn J. BubleyJ. Clinical Oncology, vol 21, No 2, 2003: 383-391
Prépro-PSA clivé dans cellule
Pro-PSA clivé par HK2
PSA mature actif (237 AA)
Formes autres :- pro-PSA (-2 et -5)
- PSA clivé
Dans le sang le PSA actif estrapidement lié aux anti-protéasesLes autres produits circulent sousforme de PSA libre.
PSA sperme et sang
ACTACTACTACTACTACT
Gel séminal
Passage sang
PSA
PROSTATE
CNBH2009CNBH
2009
PSA
ACTACT
PSA
PSA
AMGAMG
PSA libre : 33 kDa (E. inactive : Lys 145)• prédominant pour N et HBP (20-90%)• ~ 10% dans le cancer de la prostate• demi-vie 1-2h
PSA libre : 33PSA libre : 33 kDakDa (E. inactive : Lys 145)(E. inactive : Lys 145)
•• prédominant pour N et HBP (20prédominant pour N et HBP (20--90%)90%)•• ~ 10% dans le cancer de la prostate~ 10% dans le cancer de la prostate•• demidemi--vie 1vie 1--2h2h
PSA-ACT : 100 kDa (PSA complexé)• minoritaire pour N et HBP• ~ 90% dans le cancer de la prostate• demi-vie 2-3 jours
PSAPSA--ACT : 100ACT : 100 kDakDa (PSA complexé)(PSA complexé)
•• minoritaire pour N et HBPminoritaire pour N et HBP•• ~ 90% dans le cancer de la prostate~ 90% dans le cancer de la prostate•• demidemi--vie 2vie 2--3 jours3 jours
PSA-AMG : 800 kDa (PSA occulté)• encapsulation complète des sites antigéniques• demi-vie très courte 2-3 minutes
PSAPSA--AMG : 800AMG : 800 kDakDa (PSA occulté)(PSA occulté)
•• encapsulationencapsulation complète des sites antigéniquescomplète des sites antigéniques•• demidemi--vie très courte 2vie très courte 2--3 minutes3 minutes
PSAPSAACTACTACT
PSAPSAPSA
PSAPSAPSA
AMGAMGAMG
PSAPSAACTACTACT
PSAPSAPSA
PSAPSAPSA
AMGAMGAMG
PSA SERIQUEPSA SERIQUE
22 -- 44 ngng//mLmL
5050 -- 95% PSA95% PSA--ACTACT
55 -- 50% PSA50% PSA librelibre
( PSA( PSA--AMG nonAMG non dosédosé))
PSA SEMINALPSA SEMINAL
0,30,3 -- 33 mg/mg/mLmL
6060 -- 70%70% actifactif
3030 -- 40%40% inactifinactif
< 5% PSA< 5% PSA -- PCIPCI
PSA
PSA
Liquéfaction
106
PSA : spécificité de tissu, pas de cancerPSA : spécificité de tissu, pas de cancer
Corrélation PSA et volume de la prostate»sécrétion par g de prostate :
tissu normal : sécrétion de 0,3 µg/L/g
tissu cancéreux : sécrétion de 3,5 µg/L/g
» index PSA/volume prostate (écho endorectale) : PSAD N et HBP : 0,044 et Cancer : 0,581 (p<0,002)
Corrélation PSA et volume de la prostate»sécrétion par g de prostate :
tissu normal : sécrétion de 0,3 µg/L/g
tissu cancéreux : sécrétion de 3,5 µg/L/g
» index PSA/volume prostate (écho endorectale) : PSAD N et HBP : 0,044 et Cancer : 0,581 (p<0,002)
CNBH2009
N et HBP : 0,044 et Cancer : 0,581 (p<0,002)
»vélocité : taux de croissance de PSA/an (seuil à 0,75µg/L/an)
Corrélation PSA et stade clinique (pronostic)
Suivi thérapeutique» témoin de la prostatectomie radicale (<LD après qq T)» taux détectable ou croissant : indicateur de récidive» témoin de la radiothérapie et du traitement aux anti-androgènes
N et HBP : 0,044 et Cancer : 0,581 (p<0,002)
»vélocité : taux de croissance de PSA/an (seuil à 0,75µg/L/an)
Corrélation PSA et stade clinique (pronostic)
Suivi thérapeutique» témoin de la prostatectomie radicale (<LD après qq T)» taux détectable ou croissant : indicateur de récidive» témoin de la radiothérapie et du traitement aux anti-androgènes
Variations du PSAVariations du PSAVariations du PSAVariations du PSA Stabilité in vitro
» à température ambiante : 24-48 h
» à 4°C : 14 j
» à -20°C : 6 mois à 12 ans
» après plusieurs cycles de décongélation
Variabilité individuelle
Stabilité in vitro» à température ambiante : 24-48 h
» à 4°C : 14 j
» à -20°C : 6 mois à 12 ans
» après plusieurs cycles de décongélation
Variabilité individuelle
T.R. : variabilité +/T.R. : variabilité +/--
Rétention aiguë des urinesRétention aiguë des urines
ProstatitesProstatites»» Aiguës ++ , ou SubaiguësAiguës ++ , ou Subaiguës
Ejaculation :Ejaculation :
T.R. : variabilité +/T.R. : variabilité +/--
Rétention aiguë des urinesRétention aiguë des urines
ProstatitesProstatites»» Aiguës ++ , ou SubaiguësAiguës ++ , ou Subaiguës
Ejaculation :Ejaculation :
CNBH2009
Variabilité individuelle» pas de cycle circadien
» diminution chez les patients
hospitalisés
(18-50% 24h après admission)
» augmentation avec l'âge
» variabilité ethnique
Variabilité individuelle» pas de cycle circadien
» diminution chez les patients
hospitalisés
(18-50% 24h après admission)
» augmentation avec l'âge
» variabilité ethnique
»» augmentation moyenne de 0,8 ng/mLaugmentation moyenne de 0,8 ng/mL
1 heure après (87 % des cas)1 heure après (87 % des cas)
»» Retour à la N en 48 h (97 % des cas)Retour à la N en 48 h (97 % des cas)
Echographie endorectale ?Echographie endorectale ?
Biopsie de la prostateBiopsie de la prostate
Finastéride (Chibroproscar) :Finastéride (Chibroproscar) :baisse de 50 % après 6 mois de traitementbaisse de 50 % après 6 mois de traitement
»» augmentation moyenne de 0,8 ng/mLaugmentation moyenne de 0,8 ng/mL
1 heure après (87 % des cas)1 heure après (87 % des cas)
»» Retour à la N en 48 h (97 % des cas)Retour à la N en 48 h (97 % des cas)
Echographie endorectale ?Echographie endorectale ?
Biopsie de la prostateBiopsie de la prostate
Finastéride (Chibroproscar) :Finastéride (Chibroproscar) :baisse de 50 % après 6 mois de traitementbaisse de 50 % après 6 mois de traitement
P S A totalP S A totalDiscordances entre les dosagesDiscordances entre les dosages
P S A totalP S A totalDiscordances entre les dosagesDiscordances entre les dosages
Causes de variation du PSAAnalytique, physiologique, intertechniques
Architecture du dosage “sandwich”
Composition des Ag
Causes de variation du PSAAnalytique, physiologique, intertechniques
Architecture du dosage “sandwich”
Composition des Ag
CNBH2009
Composition des Ag
Spécificité des AC
RemèdesHarmonisation “Stanford”
Equimolarité
Importance d’un dosage correct de PSA
Composition des Ag
Spécificité des AC
RemèdesHarmonisation “Stanford”
Equimolarité
Importance d’un dosage correct de PSA
Y. Fulla2004
SignalSignal
ConcentrationConcentration
IRMAIRMA
11 22AgAg
Différences entre méthodesDifférences entre méthodes
Standardisation (YangStandardisation (Yang-- Hybritech)Hybritech)22°°IC on PSA Stanford (Sept 1994) désigneIC on PSA Stanford (Sept 1994) désignele Standard International :le Standard International :
-- 90% PSA90% PSA--ACTACT
Standardisation (YangStandardisation (Yang-- Hybritech)Hybritech)22°°IC on PSA Stanford (Sept 1994) désigneIC on PSA Stanford (Sept 1994) désignele Standard International :le Standard International :
-- 90% PSA90% PSA--ACTACT
CNBH2009
-- 10% PSA libre10% PSA libre
•• PSA total : standard OMS 96/670PSA total : standard OMS 96/670
•• PSA libre : standard OMS 96/668PSA libre : standard OMS 96/668
Spécificité des ACSpécificité des AC»»Polyclonaux, MonoclonauxPolyclonaux, Monoclonaux»»Reconnaissance EQM des formes libreReconnaissance EQM des formes libre--liéeliée
-- 10% PSA libre10% PSA libre
•• PSA total : standard OMS 96/670PSA total : standard OMS 96/670
•• PSA libre : standard OMS 96/668PSA libre : standard OMS 96/668
Spécificité des ACSpécificité des AC»»Polyclonaux, MonoclonauxPolyclonaux, Monoclonaux»»Reconnaissance EQM des formes libreReconnaissance EQM des formes libre--liéeliée
Contrôle de qualité externeContrôle de qualité externe
•• Probioqual : contrôle externeProbioqual : contrôle externe
CNBH2009
•• Afssaps : CQ et évaluationAfssaps : CQ et évaluation
Principaux systèmes de dosage PSATPrincipaux systèmes de dosage PSAT
Roche 26 %Roche 26 %
Abbott 24 %Abbott 24 %
Siemens 17 %Siemens 17 %(Bayer 8%, DPC 7%, Dade 2%)(Bayer 8%, DPC 7%, Dade 2%)
(Probioqual 2009 sur 600 PSAT)(Probioqual 2009 sur 600 PSAT)
Abbott 28 %Abbott 28 %
Biomérieux 25 %Biomérieux 25 %
Siemens 12 %Siemens 12 %(Bayer 6%, DPC 5%, Dade 1%)(Bayer 6%, DPC 5%, Dade 1%)
(Afssaps 2008 sur 1900 PSAT)(Afssaps 2008 sur 1900 PSAT)
CNBH2009
(Bayer 8%, DPC 7%, Dade 2%)(Bayer 8%, DPC 7%, Dade 2%)
Beckman 12 %Beckman 12 %
Biomérieux 9 %Biomérieux 9 %
Tosoh 8 %Tosoh 8 %
Kryptor 4 %Kryptor 4 %
(Bayer 6%, DPC 5%, Dade 1%)(Bayer 6%, DPC 5%, Dade 1%)
Roche 15 %Roche 15 %
Beckman 12 %Beckman 12 %
Tosoh 6 %Tosoh 6 %
Kryptor 2 %Kryptor 2 %
Divers 1 % ( dont Hybritech Tandem RIA, Prostatus Autodelfia)Divers 1 % ( dont Hybritech Tandem RIA, Prostatus Autodelfia)
ProbioqualProbioqual20062006
CNBH2009
ProbioqualProbioqual20082008
CNBH2009
Probioqual 2007Probioqual 2007
CNBH2009
PSA libre 2007PSA libre 2007
CNBH2009
Contrôles AfssapsContrôles Afssaps (M. Noël)(M. Noël)
Composition :Composition :»» Matrice sérique d’origine humaine (pool de donneurs)Matrice sérique d’origine humaine (pool de donneurs)»» Surchargée avecSurchargée avec
Liquide séminal humain (PSA libre)Liquide séminal humain (PSA libre)
PSAPSA--ACT (PSA total)ACT (PSA total)
CNBH2009
PSAPSA--ACT (PSA total)ACT (PSA total)
»» LyophilisésLyophilisés
Essais de conformités avant l’envoi :Essais de conformités avant l’envoi :»» Homogénéité du lotHomogénéité du lot»» Innocuité virale, stérilité bactérienneInnocuité virale, stérilité bactérienne»» Vérification des spécifications et stabilité desVérification des spécifications et stabilité des
échantillons après reconstitution (48 H à 4échantillons après reconstitution (48 H à 4°°C)……C)……
6 0
8 0
1 0 0
1 2 0L
/T%
IA4 1
IA4 0
IA3 7
IA3 6
IA3 3
IA3 2
IA2 9
IA2 8
C.N.Q. AFSSAPS1996
1999
2000
2001
CNBH2009
0
2 0
4 0
-5 0 5 1 0 1 5 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 4 5 5 0 5 5 6 0
P S AT
IA5 7
IA5 5
IA5 1
IA5 0
IA4 7
IA4 62003
2005
2007
2008Diagramme ratio PSA-L/PSA-T par type de contrôle
Plus l’échantillon est riche en PSA, plus la variabilité inter-techniques’accroît pour le PSA-T et pour le rapport PSA-L / PSA-T
La dispersion inter-technique du rapport PSA-L / PSA-T est toujourstrès importante et peut poser problème dans la zone décisionnelle.
50
60
70
80
90
100
110L
/T%
Réponse CNQ Afssaps par technique(2005)
PSA US MagiaPSA 3G ImmuliteMagia 120LKryptorImxImmuno1ImmuliteI1/CisElecsysCobas Core IICisbioAxsym/AEFSMArchitectAIAACS 180/Advia CentaurACS 180Access/Access Hybritech
CNBH2009
0
10
20
30
40
50
-,5 0 ,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5
Ln PSAT
VitrosVidasPSA US Magia
Diagramme ratio L/T par système de dosage
Le ratio L/T % est estimé de façon très différented’une trousse à l’autre. Quel que soit l’échantillon,le comportement des trousses est similaire :
* Elecsys et Cobas Core : L/T % le plus bas
* Vidas : L/T % le plus élevé
Réponses par technique (2008)
60
80
100
120
L/T
% Hybritech Tandem
Elecsys
Dimension
Cobas Core II
Cisbio
Axsym/AEFSM
Architect
AIA
ACS 180/Advia Centaur
ACS 180
Access/Access Hybritech
CNBH2009
0
20
40
60
L/T
%
-,5 0 ,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5
LnPSAT
VitrosVidiaVidasRIA
PSA US Magia
PSA 3G Immulite
Magia 120L
Kryptor
Imx
Immuno1
Immulite
I1/Cis
50
60
70
80
90
100
L/T
%
2000
2005
2001
Vidia
Vidas
PSA 3G Immulite
Kryptor
Imx
Immulite
Hybritech Tandem
Elecsys
Dimension
Cobas Core II
Axsym/AEFSM
Architect
AIA
ACS 180/Advia Centaur
Access/Access HybritechRéponses par technique
50
60
70
80
90
100
L/T
%
2000
2005
2001
CNBH2009
IA57
IA55
IA51
IA50
IA47
IA46
IA41
IA40
IA37
IA36 2000
2001
2003
2005
20072008
0
10
20
30
40
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10PSAT
2007
20082003
2005
Vidia
0
10
20
30
40
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10PSAT
2007
20082003
2005
Contrôle de marché PSAContrôle de marché PSA (G. Lebrun)(G. Lebrun)
ProblématiqueProblématique
»» CNQ PSA total : CV inter techniques satisfaisants 1999, 2000, 2001CNQ PSA total : CV inter techniques satisfaisants 1999, 2000, 2001
(10%). CV accru en 2002 (14(10%). CV accru en 2002 (14--16%). Augmentation dûe à16%). Augmentation dûe à
l’apparition de nouvelles techniques ?l’apparition de nouvelles techniques ?
»» CNQ PSA libre (ou complexé) : CV très important (30%)CNQ PSA libre (ou complexé) : CV très important (30%)
CNBH2009
»» CNQ PSA libre (ou complexé) : CV très important (30%)CNQ PSA libre (ou complexé) : CV très important (30%)
Mise en place d’un contrôle du marché PSA :Mise en place d’un contrôle du marché PSA :
»» Exactitude PSA total (par rapport au standard)Exactitude PSA total (par rapport au standard)
»» Equimolarité PSA totalEquimolarité PSA total
»» Exactitude PSA libre (par rapport au standard)Exactitude PSA libre (par rapport au standard)
»» Evaluation des notices (Directive 98/79/CE)Evaluation des notices (Directive 98/79/CE)
Protocole techniqueProtocole technique
* Dosage des échantillons 2, 4 et 10 ng/ml de* Dosage des échantillons 2, 4 et 10 ng/ml dePSA total présentant des taux de 0, 25, 50, 75 etPSA total présentant des taux de 0, 25, 50, 75 et100% de PSA libre100% de PSA libre
* Ces échantillons ont été préparés à partir des* Ces échantillons ont été préparés à partir des
CNBH2009
* Ces échantillons ont été préparés à partir des* Ces échantillons ont été préparés à partir desstandards (PSA libre, PSA complexé) destandards (PSA libre, PSA complexé) del’Université de Stanford (Stamey), dilués dans dul’Université de Stanford (Stamey), dilués dans dutampon PBS + BSA 1%tampon PBS + BSA 1%
* Dosage en triple par site (45 dosages/trousse)* Dosage en triple par site (45 dosages/trousse)
Environ 1800 dosages réalisésEnviron 1800 dosages réalisés
Résultats ExactitudeRésultats ExactitudePSA totalPSA total
8 dispositifs sur 21 présentent des résultats8 dispositifs sur 21 présentent des résultats
satisfaisants selon expertssatisfaisants selon experts
* ADVIA CENTAUR PSA (Siemens)* ADVIA CENTAUR PSA (Siemens)
* ACS 180 PSA (Siemens)* ACS 180 PSA (Siemens)
* ADVIA IMS PSA (Siemens)* ADVIA IMS PSA (Siemens)
PSA librePSA libre8 dispositifs sur 19 présentent des résultats8 dispositifs sur 19 présentent des résultats
satisfaisants selon expertssatisfaisants selon experts
* ARCHITECT PSA Libre (Abbott)* ARCHITECT PSA Libre (Abbott)
* IMX PSA Libre (Abbott)* IMX PSA Libre (Abbott)
* AXSYM PSA Libre (Abbott)* AXSYM PSA Libre (Abbott)
CNBH2009
* ADVIA IMS PSA (Siemens)* ADVIA IMS PSA (Siemens)
* KRYPTOR PSA Total (Brahms),* KRYPTOR PSA Total (Brahms),
* TPSA FLEX DIMENSION (Siemens)* TPSA FLEX DIMENSION (Siemens)
* PSA Total IRMA (Diasorin),* PSA Total IRMA (Diasorin),
* IMMULITE 2000 PSA 3G (Siemens)* IMMULITE 2000 PSA 3G (Siemens)
* PROSTATUS AUTODELFIA* PROSTATUS AUTODELFIA
PSA libre/PSA total (Perkin Elmer)PSA libre/PSA total (Perkin Elmer)
* AXSYM PSA Libre (Abbott)* AXSYM PSA Libre (Abbott)
* ACS 180 CPSA (Siemens)* ACS 180 CPSA (Siemens)
* TANDEM HYBRITECH R PSA Libre* TANDEM HYBRITECH R PSA Libre
(Beckman)(Beckman)
* PROSTATUS AUTODELFIA PSA* PROSTATUS AUTODELFIA PSA
libre/PSA total (Perkin Elmer)libre/PSA total (Perkin Elmer)
* FREE PSA ELECSYS (Roche)* FREE PSA ELECSYS (Roche)
* AIA PACK UCPA (Tosoh).* AIA PACK UCPA (Tosoh).
Résultats EquimolaritéRésultats EquimolaritéCapacité du système à reconnaître de façon identique les formes libre et liée
8 dispositifs sur 21 présentent des résultats satisfaisants selon experts :
* ARCHITECT PSA TOTAL (Abbott)
* AXSYM PSA TOTAL (Abbott)
CNBH2009
* AXSYM PSA TOTAL (Abbott)
* TANDEM HYBRITECH R PSA (Beckman)
* PSA TOTAL IRMA (Diasorin)
* IMMULITE 2000 PSA 3G (Siemens)
* VITROS (Ortho Clinical Diagnostics)
* PROSTATUS AUTODELFIA PSA libre/PSA total (Perkin Elmer)
* AIA PACK PA (Tosoh Bioscience).
Bilan CNQ et évaluation AfssapsBilan CNQ et évaluation Afssaps Malgré l’utilisation par un nombre à peu près constant deMalgré l’utilisation par un nombre à peu près constant de
laboratoires, de trousses présentant à titre individuel unelaboratoires, de trousses présentant à titre individuel uneprécision correcteprécision correcte
Les données recueillies par le CNQ depuis 1999 montrentLes données recueillies par le CNQ depuis 1999 montrentl’existence de dispersions interl’existence de dispersions inter--techniques non négligeablestechniques non négligeablespour les dosages du PSA total et du PSA libre.pour les dosages du PSA total et du PSA libre.
CNBH2009
pour les dosages du PSA total et du PSA libre.pour les dosages du PSA total et du PSA libre.
Il en découle une variabilité du rapport PSAIl en découle une variabilité du rapport PSA--L / PSAL / PSA--TTtoujours très importante difficilement conciliable avec latoujours très importante difficilement conciliable avec lanotion de seuil diagnostic uniquenotion de seuil diagnostic unique
Besoin de recommandations pour harmoniser les résultatsBesoin de recommandations pour harmoniser les résultats(standardisation,…)(standardisation,…)
Résultats et annales sur :Résultats et annales sur : www.afssaps.sante.fr
Optimisation des performances du PSAOptimisation des performances du PSA Données connuesDonnées connues
»» PSAT : zone grise de 4 à 10 ng/L (2 à 10)PSAT : zone grise de 4 à 10 ng/L (2 à 10)
»» PSAD : fiabilité estimation US volume prostatePSAD : fiabilité estimation US volume prostate
»» Ajustement PSAT à l’âgeAjustement PSAT à l’âge
Ratio PSAL/PSATRatio PSAL/PSAT
CNBH2009
Ratio PSAL/PSATRatio PSAL/PSAT»» Zone grise de 10% à 25%Zone grise de 10% à 25%
PSA complexé et ratio PSAC/PSATPSA complexé et ratio PSAC/PSAT
Formes moléculaires du PSA libreFormes moléculaires du PSA libre
Cinétique d’un marqueur tumoralCinétique d’un marqueur tumoral»» Ajustement monoexponentielle , TDAjustement monoexponentielle , TD
Algorithme probabilité de cancer de prostateAlgorithme probabilité de cancer de prostate
Normes en fonction de l'âgeNormes en fonction de l'âge
Age (ans) 40-49 50-59 60-69 70-79
PSA µg/L 0-2,5 0-3,5 0-4,5 0-6,5
Age (ans) 40-49 50-59 60-69 70-79
PSA µg/L 0-2,5 0-3,5 0-4,5 0-6,5
CNBH2009
PSA µg/L 0-2,5 0-3,5 0-4,5 0-6,5
Volume P mL 13-51 15-60 17-70 20-82
PSAD µg/L / mL 0-0,08 0-0,10 0-0,11 0-0,13
PSA µg/L 0-2,5 0-3,5 0-4,5 0-6,5
Volume P mL 13-51 15-60 17-70 20-82
PSAD µg/L / mL 0-0,08 0-0,10 0-0,11 0-0,13
Oesterling et Coll.Oesterling et Coll.
JAMA 1993 / 270, 7, 860JAMA 1993 / 270, 7, 860--864864
Oesterling et Coll.Oesterling et Coll.
JAMA 1993 / 270, 7, 860JAMA 1993 / 270, 7, 860--864864
PSAL : PSA libre par dosage direct.ex : IRMA Cisbio, AxSym Abbott, Vidas Biomérieux, ...
PSA complexé ou PSAL indirect : PSA libre calculépar différence entre les dosages de PSA total et PSAcomplexé à l’ACT (FPSAi = TPSA – CPSA).
PSAL : PSA libre par dosage direct.ex : IRMA Cisbio, AxSym Abbott, Vidas Biomérieux, ...
PSA complexé ou PSAL indirect : PSA libre calculépar différence entre les dosages de PSA total et PSAcomplexé à l’ACT (FPSAi = TPSA – CPSA).
Différentes déterminations du PSA libreDifférentes déterminations du PSA libre
CNBH2009
complexé à l’ACT (FPSAi = TPSA – CPSA).ex : Immuno 1, Centaur (Bayer)
PSA non complexé : PSA libre obtenu après blocagedu PSA complexé à l’ACT par le réactif ACTPR(Scantibodies) puis dosage par un réactif TPSA.ex : d’origine pour AIA 21 (Tosoh), possible pour d’autressystèmes (Immuno 1 Bayer, ...)
complexé à l’ACT (FPSAi = TPSA – CPSA).ex : Immuno 1, Centaur (Bayer)
PSA non complexé : PSA libre obtenu après blocagedu PSA complexé à l’ACT par le réactif ACTPR(Scantibodies) puis dosage par un réactif TPSA.ex : d’origine pour AIA 21 (Tosoh), possible pour d’autressystèmes (Immuno 1 Bayer, ...)
CPSACPSACPSACPSACPSA ng/mLCPSA ng/mLCPSA ng/mLCPSA ng/mL
60606060
70707070
80808080
90909090
100100100100
C / T %C / T %C / T %C / T %
C/T%C/T%C/T%C/T% L/T%L/T%L/T%L/T%
60606060
70707070
80808080
90909090
100100100100
FPSA / PSAT %FPSA / PSAT %FPSA / PSAT %FPSA / PSAT %
NNNNKKKKAAAA
10101010
100100100100
CNBH2009
0000
10101010
20202020
30303030
40404040
50505050
60606060
0000
10101010
20202020
30303030
40404040
50505050
60606060
0,10,10,10,1
1111
5050
6060
7070
8080
9090
100100
KK
AA
RVVTRVVT
PP
NN
F Cis / T I1 %F Cis / T I1 %
PSAL/PSAT (n = 450)PSAL/PSAT (n = 450)PSAL/PSAT (n = 450)PSAL/PSAT (n = 450)
L/T% Sensibilité Spécificité
seuil 10% 35% 99%
seuil 18% 70% 90%
seuil 25% 90% 50%
Sujet jeune (<50 ans) :
L/T% Sensibilité Spécificité
seuil 10% 35% 99%
seuil 18% 70% 90%
seuil 25% 90% 50%
Sujet jeune (<50 ans) :
CNBH2009
00
1010
2020
3030
4040
0.10.1 11 1010 100100 10001000 PSAT I1PSAT I1
privilégier la SensibilitéPSAT 2 ng/mL, Ratio haut 25%
Sujet agé (>70 ans) :privilégier la SpécificitéPSAT 6 ng/mL, Ratio bas 10%
privilégier la SensibilitéPSAT 2 ng/mL, Ratio haut 25%
Sujet agé (>70 ans) :privilégier la SpécificitéPSAT 6 ng/mL, Ratio bas 10%
Active PSAActive PSA
Inactive PSAInactive PSAPro-PSA
Prostate cancerProstate cancer ::
La désorganisation des cellulesLa désorganisation des celluleset de la membrane basaleset de la membrane basalesentraîne une diminution de laentraîne une diminution de latransformation luminale du protransformation luminale du pro--PSA en PSA actif et du PSAPSA en PSA actif et du PSAactif en PSA inactif. On observeactif en PSA inactif. On observealors une augmentation relativealors une augmentation relativede PSA lié et de prode PSA lié et de pro--PSA dansPSA dansle sang. Une perte partielle desle sang. Une perte partielle des
Isoformes du PSAIsoformes du PSA
CNBH2009
ACTACT ACTACT
Prostate normaleProstate normale ::
L’épithélium sécrétoire entouré par les cellules et la membrane basale sécrète leL’épithélium sécrétoire entouré par les cellules et la membrane basale sécrète lepropro--PSA dans la lumière où HK2 scinde le proPSA dans la lumière où HK2 scinde le pro--peptide en PSA actif. Une partie depeptide en PSA actif. Une partie dece PSA actif diffuse dans le sang où il se lie rapidement aux inhibiteurs dece PSA actif diffuse dans le sang où il se lie rapidement aux inhibiteurs deprotéases (principalement l’alpha1protéases (principalement l’alpha1--antichymotrypsine ACT). Ce PSA actif subitantichymotrypsine ACT). Ce PSA actif subitaussi dans la prostate des clivages pour donner du PSA inactif qui peut passer dansaussi dans la prostate des clivages pour donner du PSA inactif qui peut passer dansle sang où il ne se liera pas aux antile sang où il ne se liera pas aux anti--protéases et circulera sous forme de PSA libre.protéases et circulera sous forme de PSA libre.
le sang. Une perte partielle desle sang. Une perte partielle descellules basales est observéecellules basales est observéedans les états PIN (Prostaticdans les états PIN (ProstaticIntraepith. Neoplasia)Intraepith. Neoplasia)
Steven Balk, Yoo-JoungKo, and Glenn BubleyJ. Clin. Oncol., vol 212,2003: 383-391
Cinétique du PSA au dépistageCinétique du PSA au dépistage Le profil cinétique est informatif dans le cadre du dépistage du cancer de la
prostate avec calcul des paramètres cinétiques : pente de croissance, temps
de doublement (la vélocité annuelle linéaire est une interpolation simplifiée).» Le seuil de PSAV usuellement fixé à 0,75 ng/mL/an a été abaissé à 0,35 ng/mL/an,
» correspondant à un TD de 4 ans calculé d’après le modèle de croissance exponentielle.
Possibilité d’une exploitation cinétique : un profil cinétique permet de suivre
l’évolution du cancer par l’évolution du PSA circulant.
CNBH2009
l’évolution du cancer par l’évolution du PSA circulant.» différencier K et NK selon le type de croissance du PSA.
» différencier K rapidement évolutif (agressif et/ou métastatique) et K d’évolution lente
K évolutif = croissance importante, d’où taux de production de PSA important avec TD court (< 4 ans)
K peu évolutif = croissance lente avec TD long (> 10 ans)
(d’après Benecchi,Urol 2007) Statut Pente de croissance (k)
Type decroissance TD
Contrôle Non-Cancer <0,1 ng/mL/an Linéaire > 70 ans
HBP Non-Cancer 0,1 à 0,3 ng/mL/an Linéaire 12 à 17 ans
Cancer localisé Cancer 0,5 à 3 ng/mL/an Exponentielle < 3 ans
Cancer métastasé Cancer 1 à 26 ng/mL/an Exponentielle < 2 ans
2525
3030
3535
4040
4545
5050
PSA µg/LPSA µg/L
06 /9106 /91YangYang
04 / 9104 / 91YangYang
11 / 9411 / 94
07 / 9207 / 92YangYang
**
**
**
****
****
CochinCochin
LAMLAM
TPSA et FPSATPSA et FPSAR = 31 %R = 31 % (97/02)(97/02)
R = 29 %R = 29 % (97/04)(97/04)
Opéré en Mai 97Opéré en Mai 97Histo : Adénome sans signe deHisto : Adénome sans signe de
malignitémalignité
TPSA et FPSATPSA et FPSAR = 31 %R = 31 % (97/02)(97/02)
R = 29 %R = 29 % (97/04)(97/04)
Opéré en Mai 97Opéré en Mai 97Histo : Adénome sans signe deHisto : Adénome sans signe de
malignitémalignité
CNBH2009
00
55
1010
1515
2020
2525
Zone de NormalitéZone de Normalité
09 / 9309 / 93HybritechHybritech
02 / 9702 / 97BayerBayer
11 / 9411 / 94Elsa 1Elsa 1
10 / 9610 / 96Elsa 2Elsa 2
04 / 9704 / 97BayerBayer
******
**
**
Cinétique PSACinétique PSA
CNBH2009
00
55
1010
1515
2020
2525
3030
3535
4040
4545
5050
19901990 19911991 19921992 19931993 19941994 19951995 19961996 19971997 19981998
Zone de référenceZone de référence
PSA µg/LPSA µg/L
RTUPRTUP
RTUPRTUP
01/9101/91Elsa 1Elsa 1
01/9001/90YangYang
04/9604/96BayerBayer
05/9705/9701/9801/98LCLLCL
11/9811/98DiaconnessesDiaconnesses
03/9903/99LCLLCL
R=16%R=16%R=23%R=23%
R=18%R=18%
BiopsieBiopsieBB--
BB --
BB --BB --
BB --BB --
BB --
Suivi de PSA total pendant 10 ansSto. (né en 1929)
Suivi de PSA total pendant 10 ansSuivi de PSA total pendant 10 ansStoSto. (n. (néé en 1929)en 1929)
ChibroChibroChibro
XatralXatralXatral
ChibroChibroChibro
XatralXatralXatral
CNBH2009
Suivi de PSA total (WSuivi de PSA total (W…… , 1927), 1927)
000
555
101010
151515
202020
252525
303030
353535
PSA µg/LPSA µg/LPSA µg/L
Zone de référenceZone de référenceZone de référence
RTUPRTUPRTUP
1°B-1°B1°B--
198919891989 199019901990 199119911991 199219921992 199319931993 199419941994
ScalScalScal
2°B-2°B2°B--
3°B-3°B3°B--
4°B+4°B+4°B+
LCLLCLLCL
LCLLCLLCLR=8%R=8%R=8%
199519951995 199619961996
ScalScalScalScalScalScal
CNBH2009CNBH
2009
00
55
1010
1515
2020
2525
3030
3535
4040
4545
5050
00 500500 10001000 15001500 20002000 25002500 30003000 35003500
1° B1° B-- 2° B2° B-- 3° B3° B-- 4° B4° B-- 6° B6° B-- 7° B7° B--RTUPRTUP
Modèle exponentiel :Taux initial 13,5 ng/mL
Croissance 1,06 fois par anTD 13 ans
Modèle exponentielModèle exponentiel ::Taux initial 13,5Taux initial 13,5 ngng/mL/mL
Croissance 1,06 fois par anCroissance 1,06 fois par anTD 13 ansTD 13 ans
Temps (j)Temps (j)
PSAPSA ngng/mL/mL
PSATPSAT
CroissanceCroissance
R%R%
Cinétique PSATCinétique PSAT
StoSto.. (9/09/29)(9/09/29)
0%0%
5%5%
10%10%
15%15%
20%20%
25%25%
30%30%
35%35%
40%40%
45%45%
50%50%
R%R%
RTUPRTUP
5° B5° B--
CNBH2009
00
55
1010
1515
2020
2525
3030
3535
4040
4545
5050
00 500500 10001000 15001500 20002000 25002500 30003000
Temps (j)Temps (j)
0%0%
5%5%
10%10%
15%15%
20%20%
25%25%
30%30%
35%35%
40%40%
45%45%
PSATPSAT
CroissanceCroissanceCroissance
R%R%R%
Modèle exponentiel :
Taux initial 9,8 ng/mLCroissance 1,2 fois par an
TD = 3,6 ans
Modèle exponentielModèle exponentiel ::
Taux initial 9,8Taux initial 9,8 ngng/mL/mL
Croissance 1,2 fois par anCroissance 1,2 fois par anTD = 3,6 ansTD = 3,6 ans
AdénoKAdénoK GleasonGleason 2+32+3
CinCinéétique W.H.tique W.H.
1°B-1°B1°B-- 2°B-2°B2°B-- 3°B-3°B3°B-- 4°B+4°B+4°B+
PSAPSA ngng/mL/mL
Pics PSAPics PSA
Cinétique PSA
0,1
1,0
10,0
100,0
déc-96 déc-97 déc-98 déc-99 déc-00 déc-01 déc-02 déc-03 déc-04 déc-05
PS
AT
ng
/mL
0%
1%
10%
100%
PSAT
Croissance
R% (N>18%)
Modèle exponentiel :
Taux initial 1,05 ng/mL
Croissance x1,10 par an
TD = 7 ans
CNBH2009
Gar. (1923)
0
5
10
15
20
25
0 365 730 1095 1460 1825 temps (j)temps (j)
PSA ng/mL
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
45%
50%
TPSA
Croiss. expo
Ratio %
:Modèle exponentielPSA initial 7,28 ng/mLCroissance x 1,3/an
TD = 3 ans
1°B-(6)
3°B±(6)
2°B-(8)
4°B+(8)
4°B+ : AdénoK Gleason 6/10PR 28/05/97 Gleason 5/10
Gar.Gar. (1923)(1923)
06/92 06/93 06/94 06/95 06/96 06/97
CNBH2009
CinétiquePSA
0
5
10
15
20
25
30
0 183 365 548 730 913 1095 1278 1460 1643 1825 2008 2190 2373 2555
Temps (j)
PS
AT
ng/m
L
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
45%
50%
55%
60%
PSAT
Croissance
R%(N>18%)
Modèle exponentiel :
Tauxinitial 2,86ng/mL
Croissance x1,1par an
TD=5,8ans
1°B- 2°B-
CinétiquePSA
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
0 183 365 548 730 913 1095 1278 1460 1643 1825 2008 2190
Temps (j)
PS
AT
ng/m
L
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
45%
50%
PSAT
Croissance
R%(N>18%)
Modèle exponentiel :
Tauxinitial 2,5ng/mL
Croissance x1,13par an
TD=5,9ans
Modèle exponentiel sans pics :
Taux initial 2,37 ng/mL
Croissance x1,08 par an
TD=9,5 ans
Calcul de risque de KPCalcul de risque de KP
CNBH2009
Risque nRisque néégatif : cas 1gatif : cas 1
CNBH2009
Risque positifRisque positif
CNBH2009CNBH
2009
Risque nRisque néégatif : cas 2gatif : cas 2
CNBH2009
ProstataClassProstataClassDr. StephanDr. Stephan (AACC 2002)(AACC 2002)
•• 6 centres : All6 centres : All--HollHoll--CanCan
•• 1200 biopsies K ou HBP1200 biopsies K ou HBP
•• Se détection KP > ratioSe détection KP > ratio
•• PSA entre 2 et 4 : ANN a détecté 72% et 65%PSA entre 2 et 4 : ANN a détecté 72% et 65%de K avecde K avec SpSp 90% et 95% respectivement.90% et 95% respectivement.
•• ROC :ROC : tPSAtPSA = 0.54= 0.54%%fPSAfPSA = 0.76= 0.76
ANN = 0.88ANN = 0.88
www.charite.de/ch/uro/SitemapProstatabiopsieProClass.zip
Les marqueurs d’agressivité tumoraleLes marqueurs d’agressivité tumorale Marqueurs ARN :Marqueurs ARN : PCA3PCA3 (ARNm mesuré dans les urines après massage prostatique exprimé(ARNm mesuré dans les urines après massage prostatique exprimé
en score PCA3 ou rapport ARNm PCA3/ARNm PSA x 1000 avec seuil à 35)en score PCA3 ou rapport ARNm PCA3/ARNm PSA x 1000 avec seuil à 35)
Métabolomes (profil protéomique) :Métabolomes (profil protéomique) : SarcosineSarcosine (dérivé N-methyl de la glycine trèsélevé dans les KP en progression métastatique et détecté dans les urines)
Marqueurs protéiques :» PSCA (Prostate Stem Cell Antigen) : protéine membranaire fortement exprimée dans le K
métastatique, marqueur cellulaire urinaire après massage prostatique et marqueur pourl’imagerie In Vivo avec Ac humanisé marqué.
» EPCA (Early Prostate Cancer Antigen) : protéines matrice nucléaire dont les altérations sont
CNBH2009
» EPCA (Early Prostate Cancer Antigen) : protéines matrice nucléaire dont les altérations sontcommunément associées au KP.
» uPA (Sérine Protéase) et uPAR (Récepteur spécifique ou urokinase-type PlasminogenActivator Receptor) : ces protéines semblent liées à la progression tumorale.
»» gènes de fusion sur CTC, marqueurs urinaires potentielsgènes de fusion sur CTC, marqueurs urinaires potentiels
» AMACR (Alpha-MethylAcyl-CoA Racemase) enzyme impliquée dans le métabolismeoxydatif et la biosynthèse des AG, surexprimée dans les tissus P tumoraux (Ac sur biopsie)
Antibodyomes (profil immunomique) :Antibodyomes (profil immunomique) : détection d’autodétection d’auto--Ac contre Ag tumeurAc contre Ag tumeur
Autres :Autres : Annexine 3,Annexine 3, kallikrein-related peptidase 2 (KLK2), marqueurs sécrétées oumembranaires des cellules circulantes, etc…
ConclusionConclusion
Harmonisation analytique :Harmonisation analytique :»» PSA total : ouiPSA total : oui
»» PSA libre et ratio L/T ou C/T : nonPSA libre et ratio L/T ou C/T : non
Utilisation clinique usuelle :Utilisation clinique usuelle :
CNBH2009
Utilisation clinique usuelle :Utilisation clinique usuelle :»» PSA total et ratio L/T % ou C/T % au dépistagePSA total et ratio L/T % ou C/T % au dépistage
»» Cinétique PSA total ou PSA complexéCinétique PSA total ou PSA complexé
en suivi thérapeutique : nadiren suivi thérapeutique : nadir -- T1/2T1/2 -- TDTD
possible au dépistagepossible au dépistage
Nouveaux marqueurs à validerNouveaux marqueurs à valider»» PCA3, Sarcosine, Annexine ….PCA3, Sarcosine, Annexine ….
Modalités de pratique du PSAModalités de pratique du PSA
Questionnaire à remplir sur l’adresse suivante: http://enquetes.urologie.org/index.php?sid=18
Objectifs : état des lieux sur les pratiques du dosage PSA
Au niveau technique : choix des systèmes recommandés
CNBH2009
Standardisation internationale reconnue
Contrôle de Qualité pour guider le choix des réactifs
Interprétation des résultats (+/- données cliniques)
Utilisations particulières : cinétique, calcul de risque,marqueurs nouveaux
Dialogue biologiste-clinicien et patient