HOPITAL SAINT LOUIS
UMRS_976
Amélioration de la couverture épidermique chez les patients AEC avec érosions cutanées sévères par PRIMA-1MET / APR-246
Daniel AberdamINSERM UMR S976, Paris
24 JUIN, 2020
FUNCTIONS DE LA PEAU
- PROTECTION CONTRE LES AGRESSIONS EXTÉRIEURES (chaleur, eau, UV, infections)
- MAINTIEN DE LA TEMPÉRATURE CORPORELLE ET DE LA TENEUR EN EAU DE L’ORGANISME
- RÔLE IMMUNOLOGIQUE (Adaptation et activation du système immunitaire)
- RÔLE SENSORIEL (nerfs sensitifs, thermorécepteurs,...)
- SYNTHÈSE DE LA VITAMINE D
Ichthyosiform dermatosesIchthyosis vulgarisX-linked ichthyosisLamellar ichthyosisCongenital ichthyosiformerythrodermaEpidermolytic hyperkeratosisHarlequin fetusPalmoplantar keratodermasDarier diseaseWaardenburg syndromeIncontinentia pigmenti
Neurofibromatosis type ½Tuberous sclerosisAtaxia-telangiectasiaHereditary hemorrhagictelangiectasiaEpidermolysis bullosaKindler syndromeAnhidrotic ectodermal dysplasiaHidrotic ectodermal dysplasiaPachyonychia congenitaXeroderma pigmentosumectodermal dysplasia syndromes
GENODERMATOSESSevere skin erosions
Dermis
Epidermis
Severe skin blistering
150 genodermatoses :
Pluripotent stem cells
Pluripotent Stem Cells and epithelial commitment
ectodermal progenitors
(K8/K18)
epidermal cells(K5/K14)
K10
collagen VII
Clinical trials for gene/cell therapy of:-Recessive dystrophic Epidermolysis Bullosa (Collagen VII):
Jakub Tolar (Minnesota Univ)
Joseph Penninger (Vienna Univ)
Angela Christiano (Columbia, NY)
-Junctional Epidermolysis Bullosa (laminin-5):Antony Oro (Stanford Univ)
Dermis
Epidermis
Dermal fibroblasts
Current Biol. 2003
ChristelleCoraux
BMP-4Ascobate
DF-ECMserum
P63-RELATED ECTODERMAL DYSPLASIA (EEC/AEC) SYNDROMESIncidence: 1: 1000.000 (autosomal, dominant)
ectodermal dysplasia
Cleft lip/palate
ectrodactyly
(Celli, Cell 1999)
AnkyloblepharonLimbal Stem Cell Deficiency
EECAEC
AUCUN TRAITEMENT, SAUF PALLIATIF
Pluripotentstem cells
epidermalCells
(K5+/K14+)
neuralCells
(sox1+ cells)
ectodermalProgenitor(K8+/K18+)
BMP-4
Cell Death Diff. 2006
BMP-4 blocks neural fate for epidermal commitment
p63
Plos One 2008Cell Death Diff. 2012
p63-/-p63 WT
iPS cells from Ectodermal Dysplasia patient cells
Hans van BokhovenJo Zhou
EEC/AEC-DF
IsabellePetit
EEC/AEC-iPSCOSKM
+/+
R204W/+
Oct4 TRA-1-80 AP
R304W/+
ED-DF ED-iPSC K18-ectodermalprogenitors
K14-epidermal cells
cell reprogramming
ControlR304WR204W
RubyShalom-Feuerstein
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
R304W R204W L518F R304W R204W L518F
Klf4 KrtDap GJB6 Pcad Dlx5
**
Relative gene expression (normalized to WT)
WT-iPSC control
L518F
% o
f pos
itive
cells
FACS analyses (K14+ epidermal cells)
**
0
5
10
15
20
25
30
35
40
WT R304W R204W L518F WT R304W R204W
K14
**
p53
apoptosis
p53
p63
p73
mut p53
X
Cancer
Superimposition of the DNA binding domains of p63 and p53
p53
apoptosis
p53
p63
p73
mut p53
Cancer
Superimposition of the DNA binding domains of p63 and p53
Klas WIMAN
p53-reactivating drugs:
PRIMA-1MET
MIRA-1STIMA-1CP-31398
NSC319726P53R3
PhilKan083CDB3
PK7088X
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
R304W R204W L518F R304W R204W L518F
Klf4 KrtDap
GJB6 Pcad
Dlx5
****
Relative gene expression (normalized to WT)
+ PRIMA-1MET
RubyShalom-Feuerstein
PRIMA-1MET
P53 Reactivation and Induction of Massive Apoptosis
% o
f pos
itiv
e ce
lls
FACS analyses (K14+ epidermal cells)
**
0
5
10
15
20
25
30
35
40
WT R304W R204W L518F WT R304W R204W L518F
K14
*
+ PRIMA-1MET
Shalom-Feuerstein, Petit 2013 PNAS
CULTURE PRIMAIRE DE BIOPSIES CUTANÉES DE PATIENTS AEC
Edith Aberdam
Primary culture of patient keratinocytes
Ca2+-induceddifferentiation
(day 10)K5/K14
K1/K10
TGaseInvolucrin
AEC patient (13 year old) (02-01-SC)
severe skin erosions with no heal
Pr. Smail Hadj-Rabia (Hopital Necker; Paris)
ED patient (13 year old)
AEC (02-01-SC)
Ca2+-induced differentiation (day 10 +/- PRIMA-1MET)
AEC cells, untreated
AEC cells, treated with PRIMA-1MET
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
K14 K1 ZNF750 Tgase Inv
qRT-PCR of target genes
NHK control cells* **
**
AEC (02-01-SC)
(x 20; 400 ms exposure)
AEC keratinocytes
no treatment
K1
Control NHK
TGase 1
ZNF750
Involucrin
+ PRIMA-1MET
Compassional care with topical application of PRIMA-1MET
p53
apoptosis
mut p53
APR-246 (PRIMA-1MET)
Autorisation par l’ADSM en application topique pour AECFormulation par pharmaciens Necker (Pr. Salvatore Cisternino)
Pr. Smail Hadj-Rabia (Hôpital Necker; Paris)
November 19, 2018
Epidermisation presque complete mais pas cornifiée
La douleur a diminué de 5 à 1
Ouverture significative des doigts
Right hand treated with PRIMA-1MET as cream
April 2, 2018
(patient AEC #1; 13 y old) (c.1727T>C; p.Ile576Thr)
Aberdam 2020 Cell Death & Disease
April 10, 2018
Nov. 19, 2018
untreated left hand (patient AEC #1)
Aberdam 2020 Cell Death & Disease
SuintementAbsence d’épidermeDouleur permanente
Impossibilité de greffe
Hôpital Necker (Paris) Pr. Smail Hadj-Rabia
AEC patient (15 year old) (29-10-BX)
M0
Disparition du suintementEpaississement de l’épiderme Gain de poids importantDiminution des douleurs aux soins quotidiens (5 à 1)Greffe autologue programmée
M4 M8
Aberdam 2020 Cell Death & Disease
Hôpital Necker (Paris) Pr. Smail Hadj-RabiaAEC patient (15 year old) (29-10-BX)
M0
M8
p63 aggregates
WT tetramer
p63 aggregates
monomer
dimer
tetramer
MÉCANISME D’ACTION ?
AEC70% conf AEC
100% conf
8 days0 day
AEC keratinocytes
no treatment
Control NHK
ZNF750
+ PRIMA-1MET
PRIMA-1MET stimule la différenciation épidermique
PRIMA-1MET pourrait soigner d’autres pathologies liées à des défauts de cicatrisation cutanée :
ulcères de jambes, diabète, épidermolyses, ...
EN COURS ET À FAIRE
1. BREVET DE REPOSITIONNEMENT (DÉPOSÉ)
2. MÉCANISME D’ACTION ET TEST SUR D’AUTRES PATHOLOGIES (EN COURS)
3. DÉSIGNATION COMME MÉDICAMENT ORPHELIN (ODD) (EN COURS)
4. PRÉPARATION D’ESSAIS CLINIQUES MULTI CENTRIQUES/TRANSNATIONAUX
AFDE (France), NFED (IL, USA), EDS (UK), ANDE (Italy). European Reference Network (ERN-SKIN)
5. FINANCEMENTS: - EJP-RD 2020 (en cours d’évaluation)
- EADV 2020 (en cours d’évaluation)- Université de Paris - RECHERCHE DE PARTENAIRE INDUSTRIEL
COLLABORATORS:
Smail HADJ-RABIA (Paris)
Eddy PICHINUK/Ruth ASHERY-PADAN (Tel Aviv)
Jo Huiqing ZHOU (Nijmegen)
Caterina MISSERO (Napoli) Société Française de Dermatologie
Edith ABERDAM
Isabelle PETIT
INSERM U976, HOPITAL ST-LOUIS, PARIS
RubySHALOM FEUERSTEIN
(TECHNION, Haifa)