Efeito do ectoplasma utilizandoAllium cepa como sistema teste
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ROSANA SILISTINORICCHARD HALLAN HERNANDE LEITE
OBJETIVO
Investigar os efeitos do ectoplasma sobrecélulas de Allium cepa como modelo teste.
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Ectoplasmia: objeto do estudo
• O pesquisador Charles R. Richet (1850-1935), em 1906, propôs o nome“ectoplasma”.
• Ectoplasmia: aparecimento temporário desubstâncias protoplasmáticas mais oumenos organizadas, de essência plástica,física e extrafísica, de fácil decomposição,em graus diversos de solidificação, comformas instáveis, ora como tênues vapores,bastões [...] (VIEIRA, 1999, RICHET, 2008,apud ROSSA, 2011).
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O uso do Allium cepa como organismo
teste
• O Allium cepa (cebola) teve seu uso como sistema-teste em1938 (LEVAN, 1945).
• Vegetais são um importante modelo para teste das alteraçõesgenéticas e reconhecidos como indicadores de efeitoscitotóxicos, genotóxicos e mutagênicos de ambientes compresença de substâncias químicas (YI & MENG, 2003).
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Vantagens do uso de testes em plantas1. Detectar a genotoxicidade mais rápida e eficientemente do que ensaios
animais, são mais simples e econômicos, e usados, com sucesso, emmonitoramento ambiental (YI & MENG, 2003);
2. Indicadores de efeitos tóxicos: respondem com alta sensibilidade(GRANT, 1994); pelo crescimento rápido de suas raízes, grande númerode células em divisão, alta tolerância a diferentes condições de cultivo,disponibilidade durante o ano todo, fácil manuseio e por possuircromossomos em número reduzido (2n = 16) e de grande tamanho(QUINZANI-JORDÃO, 1987);
3. Validados em estudos de colaboração internacional: “United NationsEnvironmental Program” (UNEP), “World Health Organization” (WHO) e“US Environmental Protection Agency” (USEPA), (FERNANDES et al.,2007). 5
MATERIAL E MÉTODOS
a) Material: ectoplasma de indivíduos ectoplastas(N= 12), do sexo feminino (G1) e masculino (G2);
b) Faixa etária: 30 a 80 anos;
c) Ectoplasta: entrevista e autorização do uso dosresultados, por meio do termo de consentimentolivre e esclarecido;
d) Local: sala de experimentos – Ectolab – Foz doIguaçu;
e) Tempo do experimento: 15 minutos.
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Sementes de A. cepa (2n = 16 cromossomos), de um mesmo lote (variedade Baia Periforme).
A. Cepa como modelo teste
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GRUPO EXPERIMENTAL
ECTOPLASTA a 3 mA. cepa
Placas 1s/2r
ECTOPLASTA alcance da mãoA. cepa
Placas 3s/4r
ECTOPLASTA a 3 m A. cepa + HERBICIDA
Placas 5s/6r
ECTOPLASTA alcance da mãoA. cepa + HERBICIDA
Placas 7s/8r
raíz
MATERIAL E MÉTODOS
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CONTROLE
A. Cepa(CONTROLE NEGATIVO)
9s/10r
A. Cepa + HERBICIDA(CONTROLE POSITIVO)
11s/12r
Em outra sala, os dois grupos controle serão colocados para germinar nomesmo horário e nas mesmas condições de temperatura e de umidade da salaexperimental.
raíz
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PROCESSAMENTO DAS AMOSTRAS
Germinação: quando as raízes de A. cepa atingirem 2 cm decomprimento serão fixadas por 24 horas e armazenadas para oprocessamento de acordo com as análises.
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AnálisesAvaliar possíveis alterações no potencial mutagênico,
citotóxico e genotóxico nas células expostas ao ectoplasma etratadas com o herbicida por meio das análises de:
• aberrações cromossômicas;
• freqüência de quebras , micronúcleos
• nucléolos: número de nucléolo por célula; o tamanhode um único nucléolo e a porcentagem de células comum par de nucléolos heteromórficos;
• ultraestrutura por meio da MET ;• Metabolômica;
ECTOPLASTAS - sangue
• Estudo estrutural utilizando o ML;• Análise ultraestrutural por meio do MET
A. CEPA
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS• ABNEY, K. R.; KOPSELL, D. A.; SAMS, C. E.; ZIVANOCIC S.; KOPSELL, D. E. UV-B radiation
impacts shoot tissue pigment composition in Allium fistulosum L. cultigens. The Scientific World Journal, 2013, http://dx.doi.org/10.1155/2013/S13867.
• CABARAVDIC, M. Induction of chromosome aberrations in the Allium cepa test systemcaused by the exposure of cells to venzo(a) pyrene. Med Arh., v. 64, p. 215-8, 2010.
• FERETTI, D.; CERETTI, E.; ZERBINI, I.; LIMINA, R. M.; DOMINICI, L.; MORETTI, M.; MONARCA, S.; DONATO, F. Assessmente of the genotoxic effects of gaseous emissions and percolates from three municipal landfills using plant bioassays. Ann Ig., v. 21, p. 153-9, 2009.
• FERNANDES, T. C. C.; MAZZEO, D. E. C.; MORALES, M. A. M. Mechanism of micronuclei formation in polyploidizated cells of Allium cepa exposed to trifluralin herbicide. PesticideBiochemistry and Physiology, v. 8, p. 252-259, 2007.
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