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BACTERIASREPLICACION
INTRACELULARREPLICACION
EXTRACELULAR
Neumococo Mycobacterium tuberculosis
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BACTERIAS
Gram negativasGram positivas
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Replicación de los virus
VIRUS
Herpes simplex
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Parásitos
Helmintos Protozoos
Taenia Tripanosoma Crusi
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Hongos
Histoplasma capsulatum
Trichophyton
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Respuesta Inmune
Innata Adaptativa
• Inmediata (horas)
• Menos específica
• Lenta (días)
• Más específica
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Redundancia y especialización
Respuesta inmune innata
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Adherencia al epitelio Penetración sub- epitelial Infección local de tejidos
Flora Normal
Factores químicos locales (ácidos grasos antibacterianos, lisozima, transferrina, lactoferrina, defensinas, etc)
Factores físicos (descamación, secreciones, oscilaciones ciliares, movimiento peristáltico, etc)
Fagocitos (especialmente a nivel alveolar)
Péptidos y proteínas antibacterianas
Fagocitos
Células T
Células fagocíticas (neutrófilos, macrófagos, dendríticas)
Mastocitos
Células NK
Complemento
Protección contra la infección
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Respuesta inflamatoria aguda
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1-ACTIVACION DEL
COMPLEMENTOVIA CLASICA VIA LECTINAS VIA ALTERNA
Complejo Ag-ACUnión de la lectina de unión a manosa (MBP) a carbohidratos ricos en manosa de la superficie de microorganismos
SUPERFICIE DEL
MICROORGANISMO
MEDIADORES INFLAMATORIOS
RECLUTAMIENTO FAGOCITOS
Remoción complejos ines.
MBP
C3a,C5a
B,D,PC3
C3b
ComponentesTerminalesC5b, C6, C7,
C8 y C9
OPSONIZACION
REMOCION DE MICROORGANISMOS
COMPLEJO ATAQUE LITICO
C3 CONVERTASA
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COMPLEMENTO
INFLAMACION OPSONIZACION
CITOTOXICIDAD POTENCIACION DE LA RESPUESTA B
C3b
C5-C9C3bi y productos degradación
C3aC5a
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Flujo sanguíneo
El desplazamiento (rolling) celular sobre la superficie del endotelio vascular, se debe a la débil unión de las selectinas
Adhesion y rolling Unión estable Diapédesis Migración
Quimoquinas (IL-8)
RcIL-8IL-8
(Activación de integrinas) (A favor de gradiente de quimioatractantes)
S-Lex
E-Selectin
ICAM-1
Mac-1
Cascada de extravasación leucocitaria
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2-ACTIVACION DE CÉLULAS DE LA INMUNIDAD INNATA
(MACRÓFAGOS, NEUTRÓFILOS)
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Los RRP (receptores de reconocimiento de patrones) reconocen PMAP (patrones moleculares asociados a
patógenos)
Características de los PMAPCaracterísticas de los PMAP
son patrimonio de los patógenos pero no de sus huéspedes
son esenciales para la sobrevida o patogenicidad del microorganismo
son estructuras invariantes compartidas por clases enteras de patógenos (conservadas evolutivamente)
Ejemplos de PMAPEjemplos de PMAP LPS
Peptidoglicano
Acido lipoteicoico
manosa de oligosacáridos microbianos
DNA conteniendo motivos CpG no metilados
RNA doble cadena
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Los RRP mejor estudiados son los Receptores Tipo Toll (TLR)
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El macrófago destruye al microorganismo por mecanismos dependientes e independientes del
oxígeno
1- Reconocimiento del patógeno.
2- Fagocitosis.
3- Destrucción del patógeno por mecanismos microbicidas:
Dependientes del oxígeno (O2-, H2O2, OH-, 1O2, hipohalitos,
cloraminas, etc.)
Independientes del oxígeno (Enzimas lisosomales, péptidos anti-microbianos como defensinas, catelicidinas, BPI, etc.)
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Citoquinas Quimioatractantes
IL-1, IL-6, TNF IL-12, IL-18 IL-8 LTB4
• Aumento de expresión de moléculas de adhesión
Extravasación leucocitaria
• Aumento de la permeabilidad vascular
Incrementado ingreso de componentes del
complementos, Igs, proteínas de fase aguda
Drenaje incrementado a los ganglios linfáticos
• Activación de células NK
• Reclutamiento de neutrófilos al foco
inflamatorio
Efectos localesEfectos locales
El macrófago activado por los microorganismos secreta citoquinas y quimioatractantes
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IL-1, IL-6, TNF IL-12, IL-18
Activación de células NK
MEDULA OSEA
HIGADO
HIPOTALAMO
Síntesis de Proteínas de Fase Aguda
Movilización de neutrófilos
Aumento de la temperatura corporal
Inducción de la diferenciación de células T CD4 al
fenotipo TH1
Respuesta de Respuesta de fase agudafase aguda
El macrófago activado por los microorganismos secreta citoquinas que también ejercen efectos
sistémicos
Efectos sistémicosEfectos sistémicos
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Cinética de la respuesta inmuneCinética de la respuesta inmune
IFN TNFIL-12
Células NK
Células T citotóxicas
Anticuerpos
Carga viral
Días post-infección
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3- Activación de células NK durante procesos infecciosos: IFN-, IFN- e IFN-
Macrófago
Células NK
BacteriasProductos bacterianos
IFN-, IFN-
IFN-
IL-18
IL-15
IL-12
Célula infectadacon virus
LPS
Efectivo frente a bacterias intracelulares
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Funciones conocidas de las células NK
Actividad anti-tumoral y anti-viral (citotoxicidad mediada por receptores NK y secreción de IFN-)
Inmunidad contra infecciones por bacterias y parásitos intracelulares (activación de macrófagos por secreción de IFN-)
CCDA: citotoxicidad celular dependiente de Ac (receptores para fracción constante de Ac)
Regulación de la respuesta inmune a través de un diálogo recíproco con CDs y secreción de citoquinas
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La lógica del sistema inmune y las células NK
“lo microbiano no-propio” RRPs
“lo propio ausente” NKRs“lo propio alterado/inducido”
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RECEPTORES DE LAS CÉLULAS NK
(NKRs):
KIRs, NKG2, etc.
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UN PATÓGENO PODRÁ TRANSFORMAR UNA
CÉLULA DEL HUÉSPED EN BLANCO
POTENCIAL DE LAS CÉLULAS NK POR DOS
MECANISMOS:
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Inmunidad Innata Inmunidad Adaptativa
Inmediata
Lenta
No es clonal
Es clonal
Reconoce motivos conservados: RRP pesentes en
la línea germinal
Antígeno-específica: TCR y BCR generados por
reordenamientos génicos
No genera memoria Genera memoria
INTERACCION
Diferencias entre inmunidad innata y adaptativa
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Diferenciación de la respuesta adaptativa
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![Page 42: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/42.jpg)
PROCESAMIENTO DE ANTÍGENOS Y SU
PRESENTACIÓN A LOS LINFOCITOS T
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Células Dendrítica
s
Macrófagos Linfocitos B
Células Presentadoras de
Antígenos
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El TCR reconocen tanto el MHC como el peptido
Linfocito T
CPA
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¿cómo llega el péptido hasta este sitio?
1. Vía endógena o biosintética
2. Vía endocítica
péptidos presentados por
CMH de clase I a LT CD8+
péptidos presentados por
CMH de clase II a LT CD4+
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Vía endógena o biosintética
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Vía endocítica
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Clase I Clase II
Complejo Mayor de Histocompatibilidad
LT citotoxicos
(CD8+)
LT helpers (CD4+)
En todas las células del organismos
En células pesentador
as de antígeno
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Características del MHC
POLIMORFISMO POLIGENISMO
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Tipo de patógenos
citoplasmático Intravesicular Extracelular
Sitio de degradación
citosolVesículas
endocíticasVesículas
endocíticas
Unido a Clase I Clase II Clase II
Presentado a LT citotóxico LT helper LT helper
Ejemplos virus MicobacteriasHongos,
bacterias
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LINFOCITOS T
ONTOGENIA,
MECANISMOS DE
ACTIVACIÓN Y FUNCIONES
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Los timocitos generan su receptor antigénico (TCR) por recombinación
somática
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SELECCIÓN NEGATIVA
SELECCIÓN POSITIVA
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![Page 58: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/58.jpg)
Ingresa al ganglio por las
HEV
Ingresa al endotelio activado de un tejido
inflamado
Cambios en el patrón de expresión de moléculas de adhesión inducidos a consecuencia de la
activación T
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Linfocito T CD8+ naive
Linfocito T CD4+ naive
Linfocito T CD8+ citotóxico
Linfocito Th1Linfocito Th2Linfocito Th17Linfocito Treg
Linfocito B naive
Plasmocito secretor de Ac
ACTIVACION
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Weaver y col., 2007, Annu. Rev. Immunol
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Perfil Th1 y activación del macrófago
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Weaver y col., 2007, Annu. Rev. Immunol
LB
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Weaver y col., 2007, Annu. Rev. Immunol
Th17
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Paradigma Th1/Th2
• El camino de diferenciación esta determinado por el patrón de citocinas presente en el ganglio linfático durante la activación, el cual depende de las señales que recibió la CD en el tejido infectado a través de sus RRPs.• Los linfocitos Th1 y Th2 secretan diferentes citocinas las cuales marcan el perfil completo de la respuesta inmune que se montara.
Respuesta celular
Th1
Respuesta humoral
Th2
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Activación de linfocitos T CD8+
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Colaboración de LT CD4 en la activación de LT CD8
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LINFOCITOS B
ONTOGENIA,
MECANISMOS DE
ACTIVACIÓN Y FUNCIONES
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Recombinación somática de los genes de inmunoglobulinas
(médula ósea)
IgMIgDIgGIgEIgA
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INDUCCIÓN DE TOLERANCIA CENTRAL DE LINFOCITOS B (médula
ósea)
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ZONA PARACORTICAL
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Señal 1
Señal 2
![Page 77: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/77.jpg)
Funciones de los anticuerpos
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Activación de complemento
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Degranulación de mastocitos
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Estimulación de ADCC en neutrófilos
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Transporte de IgA a través de mucosas
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Homeostasis Homeostasis
del sistema del sistema
inmuneinmuneInducción de tolerancia
Central Periférica
Regulación post-
activación
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Inducción de anergia clonal de linfocitos T
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Inducción de anergia clonal de linfocitos B
![Page 87: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/87.jpg)
Células T regulatorias
![Page 88: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/88.jpg)
Apoptosis inducida por activación
![Page 89: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/89.jpg)
Resolución del proceso inflamatorio agudo
![Page 90: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/90.jpg)
CTLA-4 en el control de la expansión clonal T
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![Page 92: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/92.jpg)
LT CD8+ citotóxico
LT CD4+ Th1
Plasmocitos Secreción de Ac específicos contra el agente patógeno
LT CD4+ Th2
LT CD4+ Treg
LT CD4+ Th17
Apoptosis de células infectadas
Colaboración con macrófagos y LT CD8+
Colaboración con LB
Regulación de la respuesta inmune
Inmunidad antiparasitaria?, autoinmunidad?
FUNCIONES EFECTORAS
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Hepatitis Autoinmune Hepatitis Autoinmune Pediátrica (HAIp) o Adulta Pediátrica (HAIp) o Adulta
(HAIa) (HAIa)
Las manifestaciones autoinmunes extrahepáticas son más frecuentes en HAIa.
La HAIp tiene una evolución más severa a pesar de emplearse dosis mayores de inmunosupresores.
La HAIp se asocia con HLA DRB1*1301 y DRB1*03. La HAIa con HLA DRB1*03 y DRB1*04.
Presentan características serológicas e histológicas similares
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El infiltrado portal predominante de LT CD4+, junto con la asociación con el HLA de clase II, es indicativo de la participación de estos linfocitos en la
patogénesis de la HAIp y la HAIa
![Page 95: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/95.jpg)
Definir el patrón de citocinas secretadas por las células CD4+ en
el hígado de pacientes con Hepatitis Autoinmune tipo I.
Objetivo: Objetivo:
![Page 96: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/96.jpg)
Expresión de citocinas Th1 y Th2 en el hígado de pacientes HAIp y HAIa: INF-
e IL-4
** p<0.01 y *** p<0.001 en comparación con los controles sanos; # p<0.05 en comparación con los HAIp (test U de Mann-Witney)
***
***
**#
(n=9)
(n=11)
(n=3)
(n=11)
(n=7)(n=3)
RT-PCR-Southern blot
![Page 97: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/97.jpg)
La IL-12 juega un papel central en la diferenciación
hacia LTh1La IL-12 es un heterodímero formado por las subunidades p35 y p40, reguladas independientemente.
El receptor de IL-12 está constituido por 2 subunidades: IL-12R1 e IL-12R2. La IL-12R2 se induce con la diferenciación hacia LTh1.
La IL-18 colabora con la IL-12 en la inducción de las respuestas Th1 y en la secreción de IFN-.
El IFN-es la principal citocina efectora de las respuestas Th1.
![Page 98: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/98.jpg)
Sobreexpresión de otras citocinas Th1 en el hígado de HAIp: IL-12p40, IL-12R2
e IL-18
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
CSHAIp
40 Kda-
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
CSHAIp
24 Kda-18 Kda-
** p<0.01 pacientes HAIp vs. controles sanos (test U de Mann-Witney)
**
**
**
(n=5)(n=5)
(n=5)(n=5)
(n=11)
(n=6)
Western blot IL-12p40
Western blot IL-18
RT-PCR-Southern blot
![Page 99: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/99.jpg)
Expresión de otra citocina Th2 en el hígado de HAIp: IL-10
(n=8)
(n=8)
RT-PCR-Southern blot
Estos resultados sugieren que la IL-10 no estaría implicada en la
patogénesis de la HAI
El análisis del polimorfismo de IL-10, tampoco mostró
diferencias entre pacientes y controles
![Page 100: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/100.jpg)
El aumento de la citocina Th2 IL-4 no se acompaña de IL-10.
Sin embargo, se encontró un incremento de la cadena del TCR
V24 en estos pacientes.
La IL-4 podría provenir de linfocitos NKT V24+
![Page 101: BACTERIAS REPLICACION INTRACELULAR REPLICACION EXTRACELULAR Neumococo Mycobacterium tuberculosis](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022061506/5665b4421a28abb57c9075bb/html5/thumbnails/101.jpg)
Transcriptos Predominantes en Transcriptos Predominantes en
HAIpHAIp Mayor expresión de moléculas asociadas a
respuestas Th1 en HAIp respecto del hígado control:
Estos resultados confirman la
diferenciación Th1 local
• IFN-
• IL-12p40
• IL-12R2
• IL-18