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Citometria de Fluxo
Detecção de Múltiplos Clones
Glicínia Pimenta
Serviço de Hematologia/UFRJ
Laboratório Sergio Franco/DASA
Caso 2
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Caso 2
RL,44 anos, branco ,administrador, natural do Rio de Janeiro
QP: febre, astenia, sintomas de infecção aguda que evoluiu
para pneumonia, poliadenomegalias e hepatoesplenomegalia.
Hemograma:Hb: 13,5 g/dl Ht: 40,6% WBC: 20.000/mm3
Eosinófilos: 3%
Neutrófilos: 13%
Linfócitos: 73%
Monócitos: 11%
Plaquetas: 283mil/mm3
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Examinado por um infectologista
Investigação para infecção aguda
Testes laboratoriais e sorológicos
Busca de etiologia - exames negativos
Após 2 semanas novos exames para infecção
revelou: positividade para CMV.
Diagnóstico ficou como virose por CMV
Caso 2
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Linfócitos atípicos
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Continuou com leucocitose e linfocitose (mais de 3
semanas), sem melhora do hemograma. Encaminhado a
um Hematologista foi solicitado uma imunofenotipagem do
Sangue Periférico que revelou:
• Detectado 2 populações de linfócitos:
• Células T: 51%-Celularidade global- inversão
CD4/CD8-
• Células B : 22%-Celularidade global- Clonais para
Kappa.
População inesperada ??
Caso reacional ?
Infiltração neoplásica ?
Caso 2
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Caso 2
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CD45 X SSC
Caso 2
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Neutrófilos
Monócitos Eosinófilos Linfócitos
Caso 2
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Linfócitos T
CD4+CD8-: 28,8%
CD4-CD8+: 68,1%
2
aso 2
Caso 2
Caso 2
Caso 2 Caso 2 Caso 2
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CD3+/CD8+/CD57-
Caso 2 Caso 2
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Caso 2
CD7 Heterogênio
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Linfócitos B CD19+: 22%
Caso 2
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CD19+/CD25-/CD11C-
Caso 2
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CD19+/FMC7-/CD5+
Caso 2
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CD19+/CD23+/IGM+
Caso 2
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CD19+/KAPPA+/LAMBDA-
Caso 2
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CD19+/CD20+/CD22+
Caso 2
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CD19+/CD43-/CD79B-
Caso 2
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CD19+/CD38-/CD10-
Caso 2
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Caso 2
( )1-Inversão célula T CD4/ CD8- reacional a processo viral
( )2-Células B clonais para Kappa
( )3-morfologia do sangue periférico com linfócitos atípicos
e basofílicos
( )4-Acompanhamento com imunofenotipagem e
hemograma.
Qual das opções abaixo mais ajudam no esclarecimento
do diagnóstico?
Pergunta 1
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Caso 2
( )1-Inversão célula T CD4/ CD8- reacional a processo viral
( )2-Células B clonais para Kappa
( )3-morfologia do sangue periférico com linfócitos atípicos
e basofílicos
( X )4-Acompanhamento com imunofenotipagem e
hemograma.
Qual das opções abaixo mais ajudam no esclarecimento
do diagnóstico?
Pergunta 1
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Caso 2
O que você espera do caso ?
( )1-Diminuição de células T
( )2-Aumento % de células B
( )3-Normalização do % de linfócitos e leucócitos
( )4-Aumento do número de leucócitos e linfocitose
mantida
Pergunta 2
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Caso 2
O que você espera do caso ?
( )1-Diminuição de células T
( )2-Aumento % de células B
( )3-Normalização do % de linfócitos e leucócitos
( X)4-Aumento do número de leucócitos e
linfocitose mantida
Pergunta 2
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Caso 2
Qual é o melhor diagnóstico na sua opinião ?
( )1-LLC-B
( )2-Linfocitose B de significado indeterminado
( )3- Linfocitose B relacionado a processo autoimune
( )4-Linfocitose T reacional
Pergunta 3
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Caso 2
Qual é o melhor diagnóstico na sua opinião ?
( X )1-LLC-B
( )2-Linfocitose B de significado indeterminado
( )3- Linfocitose B relacionado a processo autoimune
( )4-Linfocitose T reacional
Pergunta 3
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Importância da CF
Revelou a população de células B clonais antes do
paciente apresentar 5000 linfócitos CD19+.
Chamou a atenção para a Virose X LLC-B
Após o acompanhamento, o paciente apresentou mais dois
quadros de pneumonia .Continua sendo acompanhado por
hematologista e ainda não fez nenhum tratamento
específico para LLC, mas a dúvida persiste
Será que o processo viral revelou a doença ou já tinha a LLC ?
Conclusão
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caso 2
Manchas de Gumpretch
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LAUDO
• 1- Linfócitos T apresentando inversão CD4/CD8. Correlacionar com dados clínicos, laboratoriais (sorológicos) a probabilidade de processos virais.O perfil imunofenotípico sugere perfil reacional, sendo necessário busca de etiologia.
• 2-Imunofenótipo de células B(CD5+/CD23+/CD20+ e clonalidade para Kappa sugestivo de doença linfoproliferativa B tipo-LLC-B.
• 3-A critério clinico sugerimos acompanhamento imunofenotípico para melhor definição diagnóstica.
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BIBLIOGRAFIA
• The number of cytomegalovirus-specific CD4+ T cells is
markedly expanded in patients with B-cell chronic
lymphocytic leukemia and determines the total CD4+ T-
cell repertoire Blood 2010 116:2968-2974; published
ahead of print June 18, 2010, doi:10.1182/blood-2009-
12-257147
• The silent war against CMV in CLL.Arne N. Akbar.Blood
• 2010 116: 2869-2870 doi:10.1182/blood-2010-07-
293431
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NOSSA EQUIPE:
Lucia Monteiro L. Netto;
Marise Príncipe G. Coelho;
Roberto Magalhães;
Luciene C. Lázaro;
Anna Beatriz Salgado;
Priscila F dos Santos;
Juliana Veppo;
Rodrigo Gonçalves;
Lourdes Vieira.