Colorazione di Gram1a. Da brodocoltura: 1 o 2 ansate, strisciate su vetrino pulito.
1b. Da piastra: Deporre una goccia di acqua, e stemperarvi un ago caricato
sulla colonia, fino a formare un sottile velo
2. Asciugare all’aria; fissare al calore; far raffreddare
3. Coprire con Cristal Violetto per un minuto. Sciacquare con acqua.
4. Coprire con la soluzione iodo-iodurata per 1 minuto. Sciacquare con
acqua
5. Decolorare per 3 secondi con l’alcool, e sciacquare immediatamente con
acqua
6. Per il contrasto, coprire con Safranina per 30 secondi; sciacquare con
acqua.
7. Asciugare con carta bibula..
Schema dei passi nella colorazione di Gram
Fasi nella colorazione di Gram
Gram Gram PositivePositive
Gram NegativeGram Negative
GRAM POSITIVEGRAM POSITIVE
GRAM NEGATIVEGRAM NEGATIVE
CytoplasmCytoplasm
CytoplasmCytoplasm
Lipoteichoic acid Peptidoglycan-teichoic acid
Cytoplasmic membrane
Inner (cytoplasmic) membrane
Outer Membrane
LipopolysaccharidePorin
Braun lipoprotein
Peri
plas
mic
spa
ce
Confronto delle superfici
GRAM STAIN