DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZA A/H5 PADA
KUNING TELUR AYAM DARI BEBERAPA PASAR TRADISIONAL
DI KOTA SURABAYA
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
pada
Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga
Oleh
WIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
NIM 060313215
Menyetujui
Komisi Pembimbing,
Jola Rahmahani, M.Kes., Drh Rimayanti, M.Kes., Drh
Pembimbing Pertama Pembimbing Kedua
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi berjudul :
Deteksi Antibodi Terhadap Virus Avian Influenza A/H5 Pada Kuning Telur
Ayam Dari Beberapa Pasar Tradisional Di Kota Surabaya
tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di
suatu perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau
pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara
tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surabaya, Desember 2007
Wijayanti Liestiyoningtiyas
NIM 060313215
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Telah dinilai pada Seminar Hasil Penelitian
Tanggal : 11 Desember 2007
KOMISI PENILAI SEMINAR HASIL PENELITIAN
Ketua : Emmanuel Djoko Poetranto, M.S., Drh.
Sekretaris : Dr. Agnes Theresia Soelih Estoepangestie, Drh.
Anggota : Dr. Suwarno, M.Si., Drh.
Pembimbing I : Jola Rahmahani, M.Kes., Drh.
Pembimbing II : Rimayanti, M.Kes., Drh.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Telah diuji pada
Tanggal : 19 Desember 2007
KOMISI PENGUJI SKRIPSI
Ketua : Emmanuel Djoko Poetranto, M.S., Drh.
Anggota : Dr. Agnes Theresia Soelih Estoepangestie, Drh.
Dr. Suwarno, M.Si., Drh.
Jola Rahmahani, M.Kes., Drh.
Rimayanti, M.Kes., Drh.
Surabaya, 10 Januari 2008
Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Airlangga
Dekan,
Prof. Hj. Romziah Sidik, Ph.D., Drh.
NIP. 130687305
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
THE DETECTION OF ANTIBODY OF A/H5 AVIAN INFLUENZA VIRUS
IN EGG YOLK FROM TRADITIONAL MARKETS
IN SURABAYA
Wijayanti Liestiyoningtiyas
ABSTRACT
The aim of this study is to detect the antibody of A/H5 Avian Influenza (AI)
virus in egg yolk from consumption eggs sold in traditional markets in Surabaya.
Total of 300 eggs were collected from 15 markets of five districts in Surabaya using
Stratified Random Sampling method and were examined by Haemaglutination
Inhibition test. The result showed that there were significantly different (p<0,05)
among the five districts in Surabaya, North Surabaya was a district with the highest
AI A/H5 antibody titer and Central Surabaya was the lowest. The variable of egg type
showed that antibody titer against AI A/H5 of kampong chicken egg yolk was higher
then domestic (p<0,01). The combination of district and type of egg was significantly
different (p<0,01). The AI A/H5 antibody titer of kampong chicken egg yolk from
North Surabaya and domestic from West Surabaya were the highest.
Key words : Antibody, Avian Influenza virus, egg yolk, Haemagglutination Inhibition.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur Kehadirat Allah SWT atas karunia yang telah dilimpahkan
sehingga penulis dapat melaksanakan penelitian dan menyelesaikan skripsi dengan
judul Deteksi Antibodi Terhadap Avian Influenza A/H5 Pada Kuning Telur
Ayam Dari Beberapa Pasar Tradisional Di Kota Surabaya.
Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada :
Dekan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Prof. Hj. Romziah
Sidik, Ph.D., Drh., atas kesempatan mengikuti pendidikan di Fakultas Kedokteran
Hewan Universitas Airlangga.
Jola Rahmahani, M.Kes., Drh., selaku pembimbing pertama, Rimayanti,
M.Kes., Drh selaku pembimbing kedua dan Dr. Suwarno, M.Si., Drh., selaku
pembimbing penelitian sekaligus anggota penguji atas saran dan bimbingannya
sampai dengan selesainya skripsi ini.
Emmanuel Djoko Poetranto, MS., Drh., selaku ketua penguji dan Dr Agnes
Theresia Soelih Estoepangestie Drh., selaku sekretaris penguji.
Seluruh staf pengajar Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga atas
wawasan keilmuan selama mengikuti pendidikan di Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Airlangga.
Seluruh dosen dan staf di Laboratorium Virologi dan Imunologi Bagian
Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga atas bantuan teknik
dalam proses penelitian ini.
Ayahku Widji, ibuku Alm. Lissiyah serta kakak-kakakku Listiyanto D.,
Liestiyani W., dan Wiwik L. yang tercinta atas segala do’a, pengorbanan, kasih
sayang, dukungan dan nasehatnya selama ini.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Teman sepenelitian Mega Yunita atas semangat, do’a dan kesabarannya,
Nurma S. H., Yuni Widhi, dan teman-teman angkatan 2003 atas segala bantuan dan
nasehatnya.
Semua pihak yang telah membantu dalam penyusunan makalah ini yang tidak
dapat disebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa makalah ini jauh dari sempurna, untuk itu penulis
mengharap kritik dan saran dari pembaca sebagai upaya penyempurnaan makalah ini.
Semoga penelitian ini dapat bermanfaat dalam upaya pencegahan dan pengendalian
penyakit AI.
Akhir kata penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya.
Surabaya, Desember 2007
Penulis
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN PERNYATAAN ................................................................................ ii
HALAMAN IDENTITAS ....................................................................................... iii
ABSTRACT ............................................................................................................ v
UCAPAN TERIMA KASIH.................................................................................... vi
DAFTAR ISI ........................................................................................................... viii
DAFTAR TABEL.................................................................................................... x
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN............................................................................................ xii
BAB 1 PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
1.1. Latar Belakang .................................................................................... 1
1.2. Rumusan Masalah............................................................................... 4
1.3. Landasan Teori.................................................................................... 5
1.4. Tujuan Penelitian ................................................................................ 6
1.5. Manfaat Penelitian .............................................................................. 6
1.5.1. Manfaat Teoritis........................................................................ 6
1.5.2. Manfaat Praktis ......................................................................... 6
1.6. Hipotesis Penelitian ............................................................................ 6
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .............................................................................. 7
2.1. Virus Avian Influenza ........................................................................... 7
2.1.1. Etiologi dan Morfologi ............................................................. 7
2.1.2. Sifat Virus AI............................................................................ 8
2.1.3. Variasi Antigenik Virus AI...................................................... 9
2.1.4. Sumber dan Cara Penularan AI................................................. 10
2.1.5. Gejala Klinik............................................................................. 11
2.1.6. Diagnosis dan Diagnosis Banding ............................................ 12
2.1.7. Pencegahan, Pengendalian dan Pemberantasan AI................... 13
2.1.8. Pengobatan................................................................................ 15
2.2. Telur..................................................................................................... 16
2.2.1. Struktur Telur ........................................................................... 16
2.2.2. Komposisi Telur........................................................................ 16
2.2.3. Kualitas telur ............................................................................. 17
2.3. Hemaglutinasi Inhibisi ......................................................................... 18
2.3.1. Hemaglutinasi ........................................................................... 18
2.3.2. Hemaglutinasi Inhibisi .............................................................. 19
BAB 3 MATERI DAN METODE........................................................................... 20
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian.............................................................. 20
3.2. Bahan dan Materi Penelitian................................................................ 20
3.2.1. Bahan Penelitian ....................................................................... 20
3.2.2. Alat-alat Penelitian.................................................................... 20
3.3. Metode Penelitian ................................................................................ 21
3.3.1. Sampel Telur ............................................................................. 21
3.3.2. Ekstraksi Kuning Telur ............................................................. 21
3.3.3. Titrasi Antigen .......................................................................... 22
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
3.3.4. Retitrasi Antigen 4 HA Unit ..................................................... 22
3.3.5. Uji Hemaglutinasi Inhibisi (HI) Mikroteknik ........................... 23
3.4. Rancangan Penelitian........................................................................... 24
3.5. Peubah Yang Diamati .......................................................................... 24
3.6. Analisis Data........................................................................................ 24
BAB 4 HASIL PENELITIAN.................................................................................. 25
BAB 5 PEMBAHASAN.......................................................................................... 28
BAB 6 KESIMPULAN dan SARAN ...................................................................... 33
6.1 Kesimpulan ........................................................................................... 33
6.2 Saran ..................................................................................................... 33
RINGKASAN .......................................................................................................... 34
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 36
LAMPIRAN............................................................................................................. 40
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Rata-rata dan simpangan baku titer antibodi (log2) kuning telur ayam
buras dan ras di lima wilayah kota Surabaya ................................................. 25
4.2 Selisih rata-rata total titer antibodi (log2) pada perlakuan wilayah................ 26
4.3 Hasil uji BNJ 5% untuk perlakuan wilayah.................................................... 27
4.3 Hasil uji BNJ 5% untuk perlakuan kombinasi antara wilayah dengan jenis
Telur................................................................................................................ 27
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Ilustrasi virus Avian influenza......................................................................... 8
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1 Analysis of Variance ....................................................................................... 40
2 Bahan dan Alat Penelitian................................................................................ 43
3 Ekstraksi Kuning Telur Ayam Ras dan Buras ................................................. 44
4 Tabel Hasil Uji HI Telur Ayam Ras dan Buras ............................................... 45
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Sektor peternakan merupakan salah satu komoditas penting di Indonesia.
Menurut Sudaryani dan Sentosa (1997) ternak unggas, khususnya ayam, merupakan
komoditas ternak yang cepat berproduksi dan banyak dipelihara karena relatif murah
dan mudah pemeliharaannya jika dibandingkan dengan ternak lain. Perkembangan
usaha peternakan dipengaruhi oleh berbagai macam faktor salah satunya adalah
penyakit. Menurut Lusiastuti dkk (2006) penyakit dapat mempengaruhi kesejahteraan
ternak, produktifitas ternak dan secara langsung maupun tidak langsung akan
berpengaruh terhadap kehidupan manusia. Salah satu penyakit infeksi pada unggas
yang disebabkan oleh virus adalah avian influenza (AI) atau flu burung.
Keberadaan virus ini sudah ada sejak lama dan tersebar luas di dunia yang
dapat menyebabkan influenza pada babi, kuda dan unggas serta manusia (Fenner et
al., 1995). Avian influenza yang menyebabkan kematian sangat tinggi pada unggas
dilaporkan pertama kali di Italia tahun 1878 dan dikenal sebagai “fowl plaque”. Fowl
plaque telah dikenal di Eropa sejak abad ke-19 tetapi virus penyebabnya baru
diidentifikasi sebagai virus influenza A pada tahun 1955 (Tabbu, 2000). Diuraikan
oleh Murphy et al. (1999) bahwa pandemi AI di dunia telah terjadi pada abad ke-20,
yaitu Spanish Flu tahun 1918 yang menyebabkan 25 hingga 40 juta orang meninggal
dunia. Menurut Tabbu (2000) virus influenza A strain H5NI yang menyerang ayam
dan burung peliharaan pernah dilaporkan mewabah di Hong Kong pada tahun 1997.
Letupan wabah AI atau flu burung di Indonesia telah terjadi pada akhir 2003
sampai awal 2004. Wabah tersebut telah menyebabkan kematian unggas di beberapa
propinsi di Pulau Jawa seperti Jawa timur, Jawa Tengah, Jawa Barat, Banten dan
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Daerah Istimewa Yogyakarta (DIY). Pemerintah mengindikasikan penyebab kematian
ayam tersebut adalah penyakit Newcastle Disease velogenic viscerotropic (vvND).
Departemen Pertanian pada tanggal 25 Januari 2004 mengumumkan secara resmi
bahwa penyebab kematian unggas yang menyerang Indonesia adalah virus AI sub tipe
H5NI (Rahardjo, 2004).
Kejadian AI di Indonesia telah mengalami perkembangan. Bulan April tahun
2005, virus AI telah ditemukan pada babi di Tangerang - Propinsi Banten. Memasuki
bulan Juni, kasus AI pertama pada manusia terjadi di Tangerang-Banten. Kasus AI
pada manusia juga menimpa warga Kalideres - Jakarta Barat dan Serpong -
Tangerang yang diduga terkait dengan bangkai bebek yang dibuang di sungai (Poultry
Indonesia, 2007). Flu burung dipastikan telah menyerang wilayah Surabaya setelah
hasil uji laboratorium Balai Besar Veteriner di Wates, Yogyakarta, menyatakan
bahwa kasus di Kedurus, Surabaya, positif flu burung (Kompas, 2006). Dampak dari
merebaknya kasus ini sangatlah jelas, yaitu menurunnya permintaan broiler hingga
50%, melemahnya permintaan DOC dan menurunnya permintaan pakan mendorong
agrobisnis perunggasan menghadapi ancaman kebangkrutan (Poultry Indonesia,
2007). Selain itu, alokasi dana yang digunakan untuk pencegahan, pengendalian dan
pemberantasan penyakit avian influenza juga tidak sedikit jumlahnya.
Masalah avian influenza ini membutuhkan perhatian yang sangat serius dari
inter disiplin profesi, termasuk kerja sama diantara pemerintah, kalangan Kedokteran
Umum dan Kedokteran Hewan serta tak lepas dari dukungan masyarakat. Salah satu
upaya yang perlu dilakukan untuk mengatasi hal itu adalah tindakan pencegahan dan
pemberantasan penyakit yang didukung dengan diagnosis yang tepat.
Diagnosis avian influenza secara klinik pada umumnya tidak bisa digunakan
untuk meneguhkan diagnosis penyakit secara pasti karena gejala klinik yang beragam
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
(Murphy et al., 1999). Secara umum, diperlukan pemeriksaan laboratorium untuk
mendiagnosis penyakit virus hewan, meliputi isolasi dan identifikasi agen penyebab
penyakit dari bahan tersangka, uji serologi untuk mendeteksi dan mengukur antibodi
spesifik yang terbentuk selama kejadian penyakit, menemukan antigen virus dalam
lesi dengan menggunakan antibodi yang diwarnai dengan fluoresein atau peroksidase,
dan pemeriksaan dengan mikroskop elektron dari bahan tersangka dengan pewarnaan
positif dan negatif guna mengenal dan mengetahui ukuran partikel virus (Ernawati
dkk., 2002). Diungkapkan oleh Rahardjo (2004) bahwa pemeriksaan serologik yang
sering dipakai adalah uji Hemaglutinasi Inhibisi (HI) untuk mengetahui antibodi
terhadap Hemaglutinin (H) dan Agar Gel Presipitasi (AGP) untuk mengetahui adanya
antibodi terhadap Neuraminidase (N). Uji serologik yang lain adalah Netralisasi Virus
(VN), Neuraminidase-Inhibition (NI), Enzyme Linked Immuno- sorbent Assay
(ELISA), antibodi monoklonal, dan hibridisasi in situ.
Status avian influenza pada peternakan ayam dapat ditentukan dengan uji
serum darah. Metode uji serum darah merupakan uji serologis yang dapat digunakan
untuk mendeteksi antibodi terhadap virus AI (Beck et al., 2003). Metode ini dapat
menjadi suatu kendala tertentu karena membutuhkan tenaga intensif untuk
penanganan tiap individu ayam. Supernatan yang berasal dari kuning telur ayam dapat
digunakan sebagai uji serologis sebagai pengganti serum darah. Seperti halnya dengan
serum darah, kuning telur juga mengandung antibodi yang dapat digunakan sebagai
uji serologis. Menurut Camenish et al. (1999) sumber antibodi pada kuning telur
adalah imunoglobulin (IgY).
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka rumusan masalah dalam penelitian
ini adalah :
1. Apakah antibodi anti-AI A/H5 dapat dideteksi pada kuning telur
ayam?
2. Apakah terdapat perbedaan titer antibodi anti-AI A/H5 antara kuning
telur ayam ras dan buras ?
3. Apakah terdapat perbedaan lokasi pengambilan sampel terhadap titer
antibodi anti-AI A/H5 pada kuning telur ayam ras dan buras ?
1.3 Landasan Teori
Tindakan pencegahan dan pemberantasan penyakit AI yang didukung dengan
diagnosis yang tepat sangat dibutuhkan untuk mengatasi merebaknya kasus AI.
Murphy et al. (1999) menyatakan bahwa diagnosis secara klinik pada umumnya tidak
bisa digunakan untuk meneguhkan diagnosis penyakit secara pasti karena gejala
klinik yang beragam. Menurut Ernawati dkk. (2002) diperlukan pemeriksaan
laboratorium untuk mendiagnosis penyakit virus hewan, salah satunya adalah uji
serologi untuk mendeteksi antibodi spesifik.
Status avian influenza pada peternakan ayam dapat ditentukan dengan uji
serum darah untuk mengetahui adanya antibodi terhadap virus AI. Sebagai metode tes
alternatif, kuning telur ayam dapat digunakan untuk mendeteksi antibodi terhadap
virus avian influenza (Beck et al., 2003). Indriani dan Dharmayanti (2006)
mengungkapkan bahwa perpindahan unggas maupun produk asal unggas, baik di
dalam negeri maupun dari dan ke luar negeri, memerlukan sertifikat untuk menjamin
produk unggas tersebut bebas penyakit AI. Penentuan status AI pada suatu flok dapat
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
dilakukan dengan mendeteksi antibodi dalam sampel yang berasal dari kuning telur
dan dapat diperoleh tanpa mengganggu unggas saat pengambilan contoh sampel.
Suartha dkk (2003) menyebutkan bahwa antibodi spesifik (IgY) yang ada dalam darah
induk ayam dapat ditransfer secara baik ke dalam telur dalam jumlah yang cukup
banyak. Kandungan IgY pada kuning telur mencapai 10 hingga 20 mg/ml.
1.4. Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi antibodi terhadap virus AI A/H5
pada kuning telur ayam buras dan ras dari beberapa pasar tradisional di kota
Surabaya.
1.5 Manfaat Penelitian
1.5.1 Manfaat teoritis dari penelitian ini adalah sebagai landasan ilmiah bahwa
kuning telur mengandung antibodi yang dapat digunakan sebagai uji
serologis untuk mendeteksi antibodi virus AI.
1.5.2 Manfaat praktis dari penelitian ini adalah :
1. Sebagai metode alternatif pada uji serologis dengan menggunakan kuning
telur ayam sebagai pengganti serum darah.
2. Kuning telur dapat dimanfaatkan sebagai uji serologis dalam prosedur
monitoring penyakit AI pada peternakan ayam.
3. Penggunaan kuning telur dalam uji serologis merupakan salah satu upaya
untuk menentukan tindakan pencegahan penyakit AI.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
1.6 Hipotesis Penelitian
1. Terdapat perbedaan titer antibodi anti-AI A/H5 antara kuning telur ayam
buras dan ras.
2. Terdapat perbedaan lokasi pengambilan sampel terhadap titer antibodi
anti-AI A/H5 pada kuning telur ayam ras dan buras.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Virus Avian Influenza
2.1.1 Etiologi Dan Morfologi
Avian influenza disebabkan oleh virus influenza yang tergolong dalam famili
Orthomyxoviridae (Tabbu, 2000). Famili ini terbagi menjadi tiga tipe, yaitu virus
influenza tipe A, B, dan C (Cox et al., 2000; Indriani dan Dharmayanti, 2006;
Rantam, 2005). Virus influenza A patogen pada kuda, babi, mink, anjing laut, paus,
unggas dan manusia. Virus influenza B patogen pada manusia, sedangkan virus
influenza C dapat menginfeksi manusia dan babi (Murphy et al., 1999).
Virus avian influenza berbentuk spherical atau pleomorphic, mempunyai
amplop dan berdiameter 80-120 mm (Murphy et al., 1999). Jenis asam nukleat dari
famili Orthomyxoviridae adalah ribonukleat acid (RNA) dan beruntai tunggal (single
stranded) (Ernawati dkk., 2002).Virus ini dibungkus oleh glikoprotein dan dilapisi
oleh lapisan lemak ganda (bilayer lipid). Glikoprotein HA dan NA merupakan protein
permukaan yang sangat berperan dalam penempelan dan pelepasan virus dari sel
inang (Rahardjo, 2004).
Diungkapkan oleh Fouchier et al. (2005) yang dikutip oleh Indriani dan
Dharmayanti (2006) bahwa virus influenza A diklasifikasikan berdasarkan antigenitas
dari glikoprotein hemaglutinin (HA) dan neuraminidase (NA) yang diekspresikan
pada permukaan partikel virus. Virus AI mempunyai 16 subtipe HA dan 9 subtipe NA
yang telah dideteksi pada burung-burung liar dan unggas di dunia.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Gambar 2.1 Ilustrasi virus Avian influenza (Heinen, 2003)
2.1.2 Sifat virus AI
Virus influenza relatif tidak stabil terhadap lingkungan. Suhu yang panas,
perubahan pH yang ekstrim atau kondisi non isotonik dan kekeringan dapat
menyebabkan virus menjadi inaktif (www.agnr.umd.edu_avianflu, 2006). Lapisan
lemak ganda pada selubung virus menjadikan virus influenza ini sensitif terhadap
pelarut lemak, misalnya deterjen, sehingga virus menjadi tidak infektif lagi.
Infektivitas ini juga dirusak dengan cepat oleh formalin, asam encer, eter, dan
senyawa iodium. Virus juga akan mati pada temperatur 560C selama tiga jam atau
600C selama 30 menit atau lebih (Rahardjo, 2004). Sebaliknya virus ini masih dapat
bertahan hidup dalam air dengan suhu 22°C selama empat hari dan 0°C selama lebih
dari 30 hari (Departemen Pertanian, 2005). Virus avian influenza masih tetap infektif
dalam feses selama 30-35 hari pada temperatur 40C dan selama tujuh hari pada
temperatur 200C. Virus influenza dapat diisolasi dari air danau atau kolam yang
terletak di daerah yang banyak dihuni oleh unggas air. Virus ini dapat tumbuh di
dalam telur ayam bertunas umur 9-11 hari (Tabbu, 2000). Virus juga dapat diisolasi
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
dalam jumlah besar dari feses dan sekresi respirasi dari ayam yang terinfeksi (Beck et
al., 2003).
2.1.3 Variasi Antigenik Virus AI
Virus influenza A bersifat sangat mudah mutasi, terutama pada HA dan NA
(Rahardjo, 2004). Variasi antigenik pada virus influenza dapat terjadi melalui dua
cara, yaitu drift dan shift (Tabbu, 2000). Antigenic drift merupakan keadaan virus
influenza yang mengalami mutasi kode genetik pada antigen permukaan HA dan NA
(Zage, 1998). Mekanisme tersebut menghasilkan strain virus baru yang menyebabkan
virus influenza tidak dikenali oleh antibodi. Antigenic drift dapat terjadi ketika
seseorang terinfeksi oleh virus influenza di mana antibodi telah terbentuk untuk
melawan virus tersebut. Strain virus baru yang dihasilkan dari mekanisme antigenic
drift menyebabkan antibodi dalam tubuh tidak dapat mengenali virus ini. Mekanisme
inilah yang menyebabkan seseorang dapat terinfeksi vius influenza lebih dari satu kali
selama hidupnya (www.cdc.gov/flu/ avian/gen-info/flu-viruses.htm, 2005).
Antigenic shift dapat terjadi melalui transmisi langsung dari unggas ke
manusia maupun melalui percampuran genetik (genetic reassortment) dari dua virus
influenza yang berbeda yang menginfeksi sel (Harimoto and Kawaoka, 2001).
2.1.4 Sumber dan Cara Penularan AI
Virus avian influenza bereplikasi di dalam epitel usus halus dan
diekskresikan melalui feses dengan konsentrasi yang tinggi dan dapat bertahan dalam
jangka waktu yang lama, terutama di dalam air pada suhu yang rendah (Murphy et al.,
1999). Unggas air merupakan reservoir alami dari virus influenza A
(www.agnr.umd.edu_avianflu, 2006). Hal serupa juga diungkapkan oleh Irawan
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
(1995), bahwa unggas air seperti itik dan angsa merupakan sumber utama penularan
penyakit flu burung.
Unggas air yang menjadi sumber penyakit avian influenza, umumnya memang
tidak memberi petunjuk adanya gejala-gejala terserang, tetapi akan mengeluarkan
virus selama jangka waktu yang lama. Apabila kalkun yang terserang penyakit AI,
virusnya tetap berada dalam tubuhnya selama beberapa bulan dan virus yang telah
diisolasi dari telur kalkun menunjukkan adanya pemindahan vertikal meskipun
virusnya akan membunuh embrio (Murtidjo, 1992).
Penularan penyakit AI dapat terjadi secara langsung maupun tidak langsung.
Penularan secara langsung terjadi ketika kontak dengan ternak yang sakit melalui
udara, cairan atau lendir yang berasal dari hidung, mulut, dan mata, serta kotoran dan
udara. Penularan tak langsung terjadi melalui air, peralatan, telur, pakan serta alat
transportasi yang terkontaminasi oleh virus AI (Departemen Pertanian, 2006).
2.1.5 Gejala Klinik
Menurut Franco and Herenda (1996) masa inkubasi AI bervariasi mulai dari
beberapa jam sampai tujuh hari, tergantung dari dosis infeksi virus, virulensi, umur
ayam yang terinfeksi, spesies dan status kekebalan dalam kandang, serta faktor
lingkungan. Virus dengan virulensi yang tinggi dapat menyebabkan morbiditas dan
mortalitas mencapai 100%.
Strain “Highly Virulent” menyebabkan kematian mendadak atau tiba-tiba
tanpa gejala klinis yang tampak (Murphy et al., 1999). Pada umumnya kematian dapat
terjadi dalam beberapa jam setelah gejala klinis yang muncul pertama kali. Sebelum
terjadi kematian temperatur akan menurun hingga menjadi subnormal (Barlough et
al., 1988). Jika unggas bertahan lebih dari 48 jam, maka akan terjadi penghentian
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
masa bertelur, kesulitan bernapas, lakrimasi, sinusitis, diare, edema kepala, muka dan
leher, serta sianosis pada kulit yang tidak berbulu, terutama pada pial dan jengger.
Virulen virus yang tidak ganas dapat menyebabkan anoreksia, menurunnya berat
badan, menurunnya produksi telur, penyakit respirasi dan sinusitis (Murphy et al.,
1999). Populasi yang padat, rendahnya sistem ventilasi dan munculnya infeksi yang
lain merupakan faktor predisposisi terjadinya penyakit (Quinn et al., 2002). Pada
beberapa kasus terlihat adanya kongesti, hemoragi, transudat dan fosi nekrotik pada
kulit dan pial. Eksudat fibrinous juga tampak pada kantung udara, perikardium,
peritonium dan oviduk. Pada limpa, hati, ginjal dan paru-paru dapat ditemukan fosi
nekrotik (Franco and Herenda, 1996).
2.1.6 Diagnosis dan Diagnosis Banding
Diagnosis secara klinik pada umumnya tidak bisa digunakan untuk
meneguhkan diagnosis penyakit secara pasti karena adanya gejala klinik yang
bervariasi (Murphy et al., 1999). Secara umum, diperlukan pemeriksaan laboratorium
untuk mendiagnosis penyakit virus hewan meliputi isolasi dan identifikasi (Ernawati
dkk., 2002). Isolasi virus dapat dilakukan pada telur ayam bertunas umur 10-11 hari
menggunakan jaringan trakea dan/atau kloaka dari unggas yang mati ataupun hidup
(Tabbu, 2000). Pemeriksaan serologis dapat dilakukan untuk mengetahui adanya
pembentukan antibodi terhadap virus influenza A (Tabbu, 2000). Antibodi anti-
influenza dapat dideteksi pada serum ayam betina tujuh hari pasca inokulasi virus
hidup, sedangkan deteksi antibodi pada kuning telur dilakukan 14 hari pasca inokulasi
(Beck et al., 2003). Pemeriksaan serologis yang sering dipakai adalah uji
Hemaglutinasi Inhibisi (HI) untuk mengetahui adanya antibodi terhadap Hemaglutinin
(H) dan Agar Gel Presipitasi (AGP) untuk mengetahui adanya antibodi terhadap
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Neuraminidase (N). Uji serologis yang lain adalah Netralisasi Virus (VN),
Neuraminidase-Inhibition (NI), Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA),
antibodi monoklonal, dan hibridisasi in situ (Rahardjo, 2004).
Diagnosis banding dari penyakit AI adalah viscerotropic velogenic Newcastle
Disease (vvND), Fowl Cholera, Clamydiosis dan Mycoplasmosis (Franco and
Herenda, 1996). Penyakit lain yang mirip dengan AI adalah Pigeon Paramyxovirus,
Infectious Bronchitis (IB) dan Swollen Head Syndrome. AI juga mirip dengan
Infectious Laryngotracheitis dari gejala gangguan pernapasan dan adanya eksudat
bercampur darah dari lumen trakea (Rahardjo, 2004).
2.1.7 Pencegahan, Pengendalian dan Pemberantasan AI
Prinsip dasar yang diterapkan dalam pencegahan, pengendalian, dan
pemberantasan avian influenza atau flu burung ini adalah mencegah kontak antara
hewan peka dengan virus AI, menghentikan produksi virus AI oleh unggas tertular,
meningkatkan resistensi (pengebalan) dengan vaksinasi, menghilangkan sumber
penularan virus dan peningkatan kesadaran masyarakat (public awarness)
(Departemen Pertanian, 2005).
Dalam pelaksanaannya dapat dilakukan melalui sembilan tindakan yang
merupakan satu kesatuan, yaitu peningkatan biosecurity, vaksinasi, depopulasi atau
pemusnahan terbatas di daerah tertular, pengendalian lalu lintas keluar masuk unggas,
surveilans dan penelusuran, pengisian kandang kembali atau peremajaan, stamping
out atau pemusnahan menyeluruh di daerah tertular baru, peningkatan kesadaran
masyarakat, serta monitoring dan evaluasi (Departemen Pertanian, 2005)
Biosecurity adalah semua tindakan yang merupakan pertahanan pertama untuk
pengendalian wabah dan dilakukan untuk mencegah semua kemungkinan kontak atau
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
penularan dengan peternakan tertular dan penyebaran penyakit. Tindakan biosecurity
yang harus dilakukan meliputi pengawasan lalu lintas dan tindak karantina atau isolasi
lokasi peternakan tertular dan lokasi tempat-tempat penampungan unggas yang
tertular serta dekontaminasi atau desinfeksi (Direktur Jenderal Bina Produksi
Peternakan, 2004).
Tindakan pemusnahan unggas selektif di daerah tertular dapat dilakukan
dengan cara pemusnahan selektif (depopulasi) dan disposal. Depopulasi adalah suatu
tindakan untuk mengurangi populasi unggas yang menjadi sumber penularan
penyakit. Disposal adalah prosedur untuk melakukan pembakaran dan penguburan
terhadap unggas mati (bangkai), karkas, telur, kotoran (feses), bulu, alas kandang
(sekam), pupuk dan pakan ternak yang tercemar serta bahan dan peralatan lain
terkontaminasi yang tidak dapat didekontaminasi atau didesinfeksi secara efektif
(Direktur Jenderal Bina Produksi Peternakan, 2004).
Vaksinasi merupakan pertahanan kedua dalam upaya mengendalikan dan
memberantas wabah penyakit AI. Tindakan vaksinasi dilakukan secara massal
terhadap seluruh unggas sehat pada daerah tertular dan vaksin yang dipergunakan
adalah vaksin inaktif. Monitoring pasca vaksinasi dilakukan untuk mengetahui tingkat
kekebalan unggas yang divaksin dengan metode pemeriksaan serologi HI tes
menggunakan antigen yang homolog dengan strain vaksin (Direktur Jenderal Bina
Produksi Peternakan, 2004).
Tindakan surveilans bertujuan untuk menetapkan sumber infeksi di daerah
baru tertular, menetapkan penyebaran atau perluasan penyakit di daerah tertular,
memantau epidemiologi dan dinamika penyakit untuk mengetahui perkembangan
pengendalian dan pemberantasan penyakit, menetapkan wilayah daerah bebas, daerah
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
terancam dan daerah tertular penyakit, serta mendeteksi tingkat kekebalan kelompok
pasca vaksinasi (Direktur Jenderal Bina Produksi Peternakan, 2004).
Pengisian kembali (restocking) unggas ke dalam kandang dapat dilakukan
sekurang-kurangnya satu bulan setelah dilakukan pengosongan kandang. Pada daerah
bebas atau terancam apabila timbul kasus avian influenza dan telah didiagnosis secara
klinis, patologi anatomis dan epidemiologis serta dikonfirmasi secara laboratoris,
maka dilakukan tindakan pemusnahan menyeluruh (stamping-out). Tindakan ini
dilakukan dengan cara memusnahkan seluruh ternak unggas yang sakit maupun yang
sehat pada peternakan tertular dan juga terhadap semua unggas yang berada dalam
radius 1 km dari peternakan tertular tersebut (Direktur Jenderal Bina Produksi
Peternakan, 2004).
Kegiatan monitoring dimaksudkan untuk mengetahui perkembangan kegiatan
dan dampak serta permasalahan yang timbul pada saat kegiatan dilaksanakan.
Pelaporan meliputi laporan situasi penyakit dan perkembangan pelaksanaan
pengendalian dan pemberantasan penyakit. Evaluasi pelaksanaan pencegahan,
pengendalian dan pemberantasan dimaksudkan untuk mengetahui pencapaian target
fisik kegiatan dan dampak keberhasilannya serta permasalahan yang timbul di
lapangan. (Direktur Jenderal Bina Produksi Peternakan, 2004).
2.1.8 Pengobatan
Menurut Tabbu (2000) Avian influenza tidak dapat diobati, pemberian
antibiotik atau antibakteri hanya ditujukan untuk mengobati infeksi sekunder oleh
bakteri atau Mycoplasma. Di samping itu, perlu juga dilakukan pengobatan suportif
dengan multivitamin untuk membantu proses rehabilitasi jaringan yang rusak.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
2.2 Telur
2.2.1 Struktur Telur
Bentuk telur yang normal pada umumnya adalah bulat lonjong, tetapi ada
sebagian kecil yang berbentuk abnormal yaitu terlalu bulat atau terlalu lonjong.
Perbedaan tersebut terjadi karena faktor genetis, umur ayam sewaktu bertelur, sifat
biologis induknya, dan sifat fisilogis pada induknya sewaktu bertelur. Bentuk telur
ayam dinyatakan dalam indeks perbandingan antara lebar dan panjang telur (Sarwono,
1994). Hal ini sesuai dengan pendapat Sudaryani (1996) yang menyatakan bentuk
telur yang baik adalah proporsional tidak terlalu bulat dan juga tidak terlalu lonjong,
perbandingan antara panjang dan lebar adalah 5,7 cm dan 4,2 cm.
2.2.2 Komposisi Telur
Telur tersusun dari 11% cangkang, 58% putih telur (albumin) dan 31%
kuning telur (yolk) (Indartono, 2007). Kulit dan membran telur berfungsi sebagai
pelindung masuknya mikroba ke dalam telur yang dapat menurunkan kualitas dari
telur (Lubis dan Parimin, 2001). Menurut Taylor and Field (2004) kerabang telur
mengandung 94% mineral kalsium karbonat, 1% magnesium karbonat dan 1%
kalsium phospor. Putih telur atau albumin terdiri dari lapisan tipis bagian luar yang
disebut outer thin, lapisan tipis bagian dalam (inner thin), chalaziferous serta chalaza
yang berfungsi mempertahankan kuning telur agar tetap pada tempatnya. Kuning telur
terdiri dari light yolk layer, dark yolk layer, latebra, blastoderm dan membran vitelin.
Pada sebutir telur ayam dengan berat 50 gram akan diperoleh 6,3 gram protein, 0,6
gram karbohidrat, 5 gram lemak, serta sejumlah vitamin dan mineral penting. Selain
itu, telur juga mengandung asam amino esensial dan non esensial, juga mineral dan
semua vitamin, kecuali vitamin C. Vitamin A yang ada dalam telur dapat langsung
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
diserap oleh usus untuk dimanfaatkan tubuh manusia. Selain vitamin A, telur juga
kaya akan vitamin B yaitu vitamin B2, niasin, tiamin, dan riboflavin. Vitamin lain
yang juga cukup tinggi dalam telur adalah vitamin E dan D. Mineral penting yang
terkandung dalam telur yakni besi, fosfor, kalsium, tembaga, iodium, magnesium,
mangan, kalium, natrium, seng, klorida dan sulfur (Indartono, 2007).
Selain zat gizi, di dalam telur juga terkandung antibodi. Sumber antibodi pada kuning
telur adalah imunoglobulin (IgY). Embrio ayam dan anak ayam yang baru ditetaskan
memperoleh kekebalan pasif melalui perpindahan immunoglobulin maternal dari
serum ke kuning telur (Camenish et al., 1999).
2.2.3 Kualitas Telur
Mutu telur dapat dinilai melalui candling (peneropongan), yaitu dengan cara
meletakkan telur pada jalur sorotan yang kuat sehingga memungkinkan pemeriksaan
bagian dalam telur (Buckle dkk., 1987). Pemeriksaan melalui candling bertujuan
untuk mengetahui adanya keretakan kulit telur, blood spot, pertumbuhan benih
maupun ukuran kuning telur dan kantong udara (Koestanti, 2007).
Menurut Koestanti (2007) penilaian mutu telur ditentukan oleh beberapa
faktor, meliputi berat telur, keadaan putih dan kuning telur serta pergeseran posisi
kuning telur. Standart berat telur ayam ras adalah 58 gram sedangkan untuk ayam
lokal beratnya kurang dari 58 gram. Keadaan putih telur dapat dilihat pada kekentalan
putih telurnya, telur yang segar memiliki kekentalan yang lebih tinggi jika
dibandingkan dengan telur yang sudah lama disimpan. Keadaan putih telur ini dapat
diukur menggunakan metode Haugh Unit (HU) untuk mengetahui sifat keenceran
putih telur berdasarkan korelasi antara berat telur (gram) dan tinggi putih telur (mm)
dengan rumus : 100 log ( H + 7,57 - 1,7 W 0,37
). Telur segar memiliki nilai HU
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
berkisar antara 90-100 dan telur yang rusak memiliki nilai HU kurang dari 50. Posisi
kuning telur akan mengalami pergeseran ke bagian tepi apabila disimpan terlalu lama.
Menurut Ingham (1998) posisi kuning telur pada telur yang segar terletak di tengah-
tengah putih telur (upstanding), berbentuk bundar dan sedikit lebih tinggi dari putih
telur.
2.3 Hemaglutinasi Inhibisi
2.3.1 Hemaglutinasi
Beberapa virus memiliki kemampuan untuk mengadsorbsi sel darah merah
burung atau mamalia dan menimbulkan aglutinasi (Fudge, 2000). Virus dari golongan
Myxovirus, Enterovirus, Arbovirus dan Poxvirus dapat mengaglutinasikan eritrosit
dari spesies unggas dan mamalia. Kemampuan mengaglutinasi eritrosit ini disebabkan
karena virus mempunyai hemaglutinin, di mana pada golongan Myxovirus
hemaglutinin adalah partikel virus itu sendiri (virion). Di samping itu golongan ini
juga mempunyai enzim neuraminidase yang dapat melepas ikatan antara hemaglutinin
dengan permukaan eritrosit. Hal inilah yang menyebabkan ikatan antara virus dengan
eritrosit (hemaglutinasi) sifatnya hanya sementara (reversible) (Ernawati dkk., 2004).
Aglutinasi sempurna (100%) terlihat jelas berupa lapisan eritrosit secara
merata (difuse) pada dasar sumuran dan penjernihan dari cairan bagian atas tanpa
terjadinya pengendapan eritrosit berbentuk titik di tengah sumuran (Ernawati dkk.,
2004).
2.3.2 Hemaglutinasi Inhibisi
Antibodi spesifik terhadap hemaglutinin virus dapat menghambat terjadinya
hemaglutinasi. Reaksi penghambatan ini kemudian disebut uji hambatan
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
hemaglutinasi (Hemagglutination Inhibition). Reaksi hambatan ini dapat membantu
diagnosis laboratorium dalam melakukan identifikasi virus, selain itu uji ini dapat
digunakan untuk mengetahui titer antibodi hasil vaksinasi maupun hasil infeksi.
Hambatan aglutinasi sempurna (100%) adalah terjadinya pengendapan eritrosit pada
dasar lubang mikroplat (Ernawati dkk., 2004).
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BAB 3 MATERI DAN METODE PENELITIAN
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Virologi dan Imunologi, Bagian
Mikrobiologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya
mulai bulan Agustus 2006 hingga Mei 2007.
3.2 Bahan dan Materi Penelitian
3.2.1 Bahan Penelitian
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah sampel telur yang
diperoleh dari beberapa pasar tradisional di Surabaya. Jumlah keseluruhan sampel
telur yang digunakan adalah 300 sampel telur yang meliputi telur ayam ras dan buras.
Bahan lain yang digunakan untuk ekstraksi kuning telur dan uji HI adalah chloroform,
NaCl fisiologis, aquadest steril, alkohol 70%, antigen AI A/H5N1 dari laboratorium
Virologi dan Imunologi FKH Unair.
3.2.2 Alat-Alat Penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah pembakar bunsen, venoject,
mikroplate U, lemari es, rak tabung, sentrifuge, vorteks mixer, pinset, gunting, pipet
hisap, pipet pasteur, autoclave, microtube steril, alumunium foil, gelas beker, labu
erlenmayer, timbangan, mikropipet tunggal dan mikropipet multi.
3.3 Metode Penelitian
3.3.1 Sampel Telur
Penentuan lokasi pengambilan sampel menggunakan metode stratified
random sampling (Martin et al., 1987). Sampel telur dikoleksi dari beberapa pasar
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
tradisional yang ada di Surabaya dengan pembagian wilayah Surabaya Timur,
Surabaya Barat, Surabaya Pusat, Surabaya Utara dan Surabaya Selatan dengan
masing-masing wilayah diwakili oleh tiga pasar. Lokasi pengambilan sampel untuk
wilayah Surabaya Utara adalah pasar Pabean, Pegirian, dan Sidotopo sedangkan
sampel untuk wilayah Surabaya Timur diambil dari pasar Mulyosari, Rungkut, dan
Manyar. Sampel untuk wilayah Surabaya Selatan berasal dari pasar Wonokromo,
Gayung Sari, dan Pagesangan sedangkan untuk wilayah Surabaya Barat berasal dari
pasar Benowo, Tandes, dan Manukan. Sampel untuk wilayah Surabaya Pusat berasal
dari pasar Keputran, Kembang, dan Blauran. Penentuan besaran sampel menggunakan
rumus (t-1) (n-1) ≥ 15 (Rochiman, 1989). Masing-masing pasar diwakili oleh dua
pedagang dan tiap pedagang diambil 5 butir telur untuk tiap jenisnya, sehingga
didapatkan 150 butir telur ayam ras dan 150 butir telur ayam buras, total keseluruhan
sampel yang diperoleh adalah 300 butir.
3.3.2 Ekstraksi Kuning Telur
Ekstraksi kuning telur dilakukan dengan menambahkan satu bagian kuning
telur ditambah satu bagian NaCl fisiologis ( PZ ). Selanjutnya campuran dikocok
dengan mixer dan ditambahkan dua bagian Chloroform. Campuran ini diinkubasikan
pada suhu ruangan selama 30 menit dan dikocok dengan mixer setiap 5 menit.
Selanjutnya dilakukan sentrifugasi pada kecepatan 3000rpm selama 15 menit ( Beck
et al., 2003; Selleck, 2005; Indriani dan Dharmayanti, 2006). Hasil ekstraksi kuning
telur berupa cairan yang berwarna putih dan jernih terdapat pada lapisan paling atas
yang disebut supernatan.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
3.3.3 Titrasi Antigen
Antigen yang digunakan pada uji HI perlu dititrasi terlebih dahulu untuk
mengetahui titer antigen yang digunakan. Titrasi dilakukan untuk mendapatkan
antigen 4 HA unit yang akan dipakai pada uji HI. Sebelum dilakukan titrasi antigen,
antigen yang akan dipakai terlebih dahulu diinaktifkan dengan menggunakan formalin
0,1% dan didiamkan selama satu malam di dalam kulkas. Langkah pertama yang
dilakukan untuk titrasi antigen adalah mengisikan 0,025 ml PZ ke dalam lubang
mikroplate nomor satu sampai 12 dengan menggunakan mikropipet volume 0,025 ml.
Setelah itu isi lubang nomor 1 dengan antigen yang telah diinaktifkan sebanyak 0,025
ml menggunakan mikropipet. Langkah selanjutnya adalah mencampur antigen dan PZ
pada lubang nomor satu menggunakan mikropipet dengan cara menghisap dan
mengeluarkan cairan pada lubang tersebut, kemudian ambil 0,025 ml dan masukkan
ke dalam lubang berikutnya sampai dengan lubang nomor 11. Lubang nomor 12
digunakan sebagai kontrol eritrosit (tanpa antigen). Setelah itu isi semua lubang
dengan 0,05 ml eritrosit ayam 0,5% dan inkubasikan pada suhu kamar selama 30
menit (Ernawati dkk, 2004).
3.3.4 Retitrasi Antigen 4 HA Unit
Untuk menguji ketepatan pengenceran perlu dilakukan retitrasi dengan cara
yang sama seperti pada titrasi antigen. Langkah pertama yang dilakukan untuk
retitrasi antigen 4 HA unit adalah mengisikan 0,025 ml PZ kedalam lubang
mikroplate nomor satu sampai lima dengan menggunakan mikropipet volume
0,025ml. Setelah itu isi lubang pertama dengan antigen yang telah diencerkan (
antigen 4 HA unit ) sebanyak 0,025 ml dengan menggunakan mikropipet volume
0,025 ml. Langkah selanjutnya adalah mencampur antigen dan PZ pada lubang nomor
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
satu menggunakan mikropipet dengan cara menghisap dan mengeluarkan cairan pada
lubang tersebut, kemudian ambil 0,025 ml dan masukkan ke dalam lubang berikutnya
sampai dengan lubang nomor empat. Lubang nomor lima digunakan sebagai kontrol
eritrosit (tanpa antigen). Selanjutnya semua lubang diisi dengan 0,05 ml eritrosit ayam
0,5% dan diinkubasikan pada suhu kamar selama 30 menit. Bila pengenceran pada uji
HA tepat, maka pada lubang nomor satu dan dua akan terjadi aglutinasi (Ernawati
dkk, 2004).
3.3.5 Uji Hemaglutinasi Inhibisi (HI) Mikroteknik
Langkah-langkah dalam uji HI mikroteknik adalah sebagai berikut: lubang
mikroplat diisi PZ sebanyak 0,025 ml dari lubang satu sampai dua belas. Lubang
nomor satu dan dua belas diisi dengan supernatan hasil dari ekstraksi kuning telur
sebanyak 0,025 ml dengan menggunakan mikropipet volume 0,025 ml. PZ dan
supernatan pada lubang nomor satu dicampur menggunakan mikropipet dengan cara
menghisap dan mengeluarkan cairan pada lubang tersebut, kemudian ambil 0,025 ml
dan masukkan ke dalam lubang berikutnya sampai dengan lubang nomor sepuluh.
Lubang nomor satu sampai sepuluh diisi antigen empat HA unit dengan menggunakan
mikropipet volume 0,025 ml. Selanjutnya diinkubasikan pada suhu kamar selama tiga
puluh menit. Semua lubang diisi eritrosit 0,5 % sebanyak 0,05 ml dengan
menggunakan mikropipet 0,05 ml. Selanjutnya diinkubasi lagi selama tiga puluh
menit pada suhu kamar atau sampai kontrol eritrosit pada lubang nomor sebelas
terbaca. Pada kontrol tersebut terjadi endapan eritrosit seperti titik merah pada dasar
lubang mikroplat. Pada lubang nomor dua belas merupakan kontrol supernatan yang
dalam hal ini tidak menjadi pembanding (Ernawati dkk., 2002).
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
3.4 Rancangan Penelitian
Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak
lengkap pola faktorial (Rochiman, 1990).
3.5 Peubah Yang Diamati
Adanya antibodi terhadap virus avian influenza A/H5 pada telur ayam ras dan
buras yang berasal dari beberapa pasar tradisional di kota Surabaya.
3.6 Analisis Data
Data yang diperoleh dianalisis dengan Analysis of Variance, apabila terdapat
perbedaan yang nyata maka dilanjutkan dengan uji BNJ 5% (Rochiman, 1989).
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BAB 4 HASIL PENELITIAN
Penelitian dari 300 sampel telur ayam buras dan ras di lima wilayah kota
Surabaya telah diperiksa dengan uji HI untuk mengetahui titer antibodi anti-AI A/H5.
Hasil penelitian yang menunjukkan rata-rata dan simpangan baku titer antibodi
kuning telur ayam buras dan ras di lima wilayah kota Surabaya disajikan pada Tabel
4.1.
Tabel 4.1 Rata-rata dan simpangan baku titer antibodi (log2) kuning telur ayam buras
dan ras di lima wilayah kota Surabaya
Wilayah Jenis Telur X ± SB
Surabaya Pusat Buras 0,70 ± 1,466
Ras 2,03 ± 2,025
Surabaya Utara Buras 1,30 ± 2,087
Ras 4,00 ± 2,087
Surabaya Selatan Buras 1,37 ± 1,921
Ras 2,47 ± 2,224
Surabaya Barat Buras 2,20 ± 2,670
Ras 1,50 ± 1,796
Surabaya Timur Buras 0,57 ± 1,832
Ras 3,17 ± 1,832
Total Buras 1,23a ± 2,089
Ras 2,63b
± 2,248
Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan terdapat perbedaan yang nyata
Data yang diperoleh dianalisis dengan Analysis of Variance (Lampiran 1) dan
didapatkan bahwa variabel wilayah memberikan hasil p<0,05 yang menunjukkan
terdapat perbedaan yang nyata diantara wilayah. Variabel jenis telur memberikan
hasil p<0,01 yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang sangat nyata antara
telur buras dan ras, dari tabel di atas terlihat bahwa telur ras memiliki titer antibodi
yang tinggi daripada buras. Variabel wilayah dengan jenis telur memberikan hasil
p<0,01 dan menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang sangat nyata diantara
variabel tersebut.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Adanya perbedaan yang nyata di setiap variabel, ternyata masih belum dapat
memberikan keterangan tentang variabel mana yang berbeda sehingga pengujian
sampel dilanjutkan dengan uji Tukey dengan Beda Nyata Jujur (5%) (Rochiman,
1989). Uji ini dilakukan dengan membandingkan variabel tersebut satu persatu untuk
menentukan variabel mana yang berbeda dengan yang lain. Selisih rata-rata total titer
antibodi pada variabel wilayah disajikan pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2 Selisih rata-rata total titer antibodi (log2) pada variabel wilayah
(I) Wilayah (J) Wilayah Selisih Hasil (I-J)
Surabaya Pusat Surabaya Utara -1,28a
Surabaya Selatan -0,55
Surabaya Barat -0,48
Surabaya Timur -0,50
Surabaya Utara Surabaya Pusat 1,28b
Surabaya Selatan 0,73
Surabaya Barat 0,80
Surabaya Timur 0,78
Surabaya Selatan Surabaya Pusat 0,55
Surabaya Utara -0,73
Surabaya Barat 0,07
Surabaya Timur 0,05
Surabaya Barat Surabaya Pusat 0,48
Surabaya Utara -0,80
Surabaya Selatan -0,07
Surabaya Timur -0,02
Surabaya Timur Surabaya Pusat 0,50
Surabaya Utara -0,78
Surabaya Selatan -0,05
Surabaya Barat 0,02 Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan terdapat perbedaan yang
nyata.
Hasil uji BNJ 5% yang disajikan pada Tabel 4.3. menunjukkan bahwa titer
antibodi anti-AI A/H5 yang tertinggi diperoleh wilayah Surabaya Utara yang berbeda
nyata dengan Surabaya Pusat namun tidak berbeda nyata dengan Surabaya Barat,
Timur dan Selatan. Titer antibodi terendah diperoleh wilayah Surabaya Pusat yang
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
berbeda nyata dengan Surabaya Utara namun tidak berbeda nyata dengan Surabaya
Barat, Timur dan Selatan.
Tabel 4.3 Hasil uji BNJ 5% untuk variabel wilayah
Wilayah Subset
Surabaya Pusat 1,37a
Surabaya Barat 1,85ab
Surabaya Timur 1,87ab
Surabaya Selatan 1,92ab
Surabaya Utara 2,65b
Superskrip a berbeda nyata dengan b. Superskrip a dan b tidak berbeda nyata dengan ab
Hasil uji BNJ 5% yang disajikan pada Tabel 4.4. untuk variabel wilayah
dengan jenis telur menunjukkan hasil bahwa titer antibodi anti-AI A/H5 yang
tertinggi pada telur ras berasal dari wilayah Surabaya Utara yang berbeda nyata
dengan wilayah Surabaya Barat dan Pusat namun tidak berbeda nyata dengan
Surabaya Timur dan Selatan. Titer antibodi anti-AI A/H5 tertinggi pada telur buras
berasal dari wilayah Surabaya Barat yang tidak berbeda nyata dengan Surabaya
Selatan, Utara, Pusat dan Timur.
Tabel 4.4 Hasil uji BNJ 5% untuk variabel wilayah dengan jenis telur
Wilayah * jenis telur Subset
Surabaya Timur * buras 0,57a
Surabaya Pusat * buras 0,70a
Surabaya Utara * buras 1,30ab
Surabaya Selatan * buras 1,37ab
Surabaya Barat * ras 1,50abc
Surabaya Pusat * ras 2,03abc
Surabaya Barat * buras 2,20abc
Surabaya Selatan * ras 2,47bcd
Surabaya Timur * ras 3,17cd
Surabaya Utara * ras 4,00d
Superskrip a berbeda nyata dengan bcd, cd dan d. Superskrip a tidak berbeda nyata dengan ab
dan abc. Superskrip d berbeda nyata dengan a, ab dan abc. Superskrip d tidak berbeda nyata
dengan bcd dan cd.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BAB 5 PEMBAHASAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan maka diperoleh hasil bahwa
antibodi anti-AI A/H5 dapat dideteksi pada kuning telur ayam buras dan ras dengan
uji HI. Hal ini menunjukkan bahwa kuning telur mengandung antibodi seperti halnya
serum darah yang dapat digunakan sebagai uji serologi. Menurut Purnama (2003)
antibodi humoral utama pada ayam adalah Imunoglobulin Y atau lazim disebut IgY,
ditemukan pertama kali oleh Klemperer pada tahun 1893 yang menggambarkan
adanya kekebalan pasif terhadap toksin tetanus yang diturunkan dari induk ke anak
ayam. Pemindahan IgY dimulai dari serum menuju kuning telur dan pada tahap
berikutnya adalah transmisi IgY dari kuning telur ke embryo ayam. Suartha dkk
(2003) menyebutkan bahwa antibodi spesifik (IgY) yang ada dalam darah induk ayam
dapat ditransfer secara baik ke dalam telur dalam jumlah yang cukup banyak.
Konsentrasi IgY pada kuning telur mencapai 10 hingga 20 mg/ml.
Berdasarkan Analysis of Variance (Lampiran 1) variabel wilayah memberikan
hasil p<0,05 yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang nyata diantara
variabel. Setelah dilanjutkan dengan uji BNJ 5% didapatkan hasil bahwa titer antibodi
anti-AI A/H5 tertinggi diperoleh dari sampel yang berasal dari wilayah Surabaya
Utara. Titer antibodi terendah diperoleh dari sampel yang berasal dari wilayah
Surabaya Pusat. Hasil tersebut mengindikasikan bahwa sampel telur yang berasal dari
Surabaya Utara memiliki titer antibodi anti-AI A/H5 paling tinggi dibandingkan
dengan sampel dari wilayah yang lain, dengan kisaran titer antibodi antara 2-7 log2.
Titer antibodi terendah didapatkan pada sampel yang sama dari wilayah Surabaya
Pusat dengan kisaran titer 1-6 log2. Adanya titer antibodi pada telur mengindikasikan
bahwa di dalam tubuh induk ayam tersebut terdapat antibodi anti-AI A/H5 yang
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
bersumber dari vaksinasi maupun infeksi. Bila telur tersebut berasal dari peternakan
ayam petelur yang belum pernah melakukan program vaksinasi, maka perlu dicurigai
bahwa titer antibodi tersebut disebabkan karena ayam terserang oleh virus AI.
Menurut Trampel et al. (2006) antibodi yang terdapat pada kuning telur dapat
diisolasi serta dapat digunakan untuk mengukur titer antibodi dan juga untuk melihat
status infeksi pada seekor unggas.
Berdasarkan Analysis of Variance variabel jenis telur memberikan hasil p<0,01
yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang sangat nyata diantara dua variabel
yaitu antara telur buras dan ras. Hasil tersebut menunjukkan bahwa titer antibodi anti
AI A/H5 pada telur ayam ras lebih tinggi jika dibandingkan dengan telur ayam buras.
Perbedaan tinggi rendahnya titer antibodi pada kedua jenis telur tersebut mungkin
disebabkan oleh faktor pemeliharaan. Umumnya, terdapat perbedaan sistem
pemeliharaan diantara kedua jenis ayam tersebut. Ayam buras petelur banyak
dipelihara secara tradisional di lingkungan rumah tangga. Sistem pemeliharaan secara
tradisional umumnya tidak menerapkan program vaksinasi seperti halnya pada ayam
ras petelur, sehingga titer antibodi pada ayam yang divaksin akan lebih tinggi
daripada ayam yang tidak divaksin. Ditemukannya antibodi anti-AI A/H5 pada ayam
dapat mengindikasikan bahwa dalam tubuh ayam tersebut terdapat virus AI. Tabbu
(yang dikutip oleh Poultry, 2006) menyebutkan bahwa dari hasil pemeriksaan
serologis pada unggas yang tidak divaksinasi didapatkan hasil yang positif terhadap
H5N1. Menurut Chaidir (2005) vaksinasi dapat merangsang terbentuknya perlawanan
dalam tubuh ayam yang dikenal dengan istilah antibodi. Timbulnya anitibodi
merupakan simbol perlawanan tubuh terhadap masuknya virus. Ada atau tidaknya dan
tinggi rendahnya kadar antibodi dapat diidentifikasi melalui uji laboratorium. Tabbu
(2006) mengungkapkan bahwa vaksinasi dapat meningkatkan ketahanan terhadap
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
tantangan virus lapang, menekan tingkat penyebaran virus dan menekan dinamika
penyebaran virus AI. Baratawidjaja (2006) mengungkapkan bahwa di antara berbagai
spesies ada perbedaan kerentanan yang jelas terhadap berbagai mikroba. Saat antigen
masuk ke dalam tubuh pertama kali, maka tubuh akan bereaksi membentuk zat anti
yang disebut antibodi (www.infeksi.com/articles, 2007). Ketika tubuh berusaha
mempertahankan diri dari serangan penyakit, reaksi yang ditimbulkan mungkin
berbeda antara satu individu dengan individu lainnya, ada yang rentan dan ada yang
kebal terhadap penyakit tertentu.
Hasil Analysis of Variance untuk variabel wilayah dengan jenis telur
memberikan hasil p<0,01 yang menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang sangat
nyata diantara variabel tersebut. Setelah dilanjutkan dengan uji BNJ 5% didapatkan
hasil bahwa titer antibodi anti-AI A/H5 yang tertinggi pada telur ras berasal dari
wilayah Surabaya Utara dan terendah berasal dari Surabaya Barat. Titer antibodi anti-
AI A/H5 yang tertinggi pada telur buras berasal dari wilayah Surabaya Barat dan
terendah berasal dari Surabaya Timur. Hasil tersebut menunjukkan bahwa kejadian AI
yang bersumber dari hasil vaksinasi atau infeksi pada telur ayam ras di wilayah
Surabaya Utara lebih tinggi dari Surabaya Barat, sedangkan telur ayam buras di
wilayah Surabaya Barat lebih tinggi dibandingkan dengan Surabaya Timur.
Status penyakit AI di Jawa Timur telah menjadi epizootik di lima daerah pada
tahun 2005, yaitu Tuban, Bojonegoro, Magetan, Trenggalek dan Tulung Agung.
Epizootik merupakan kejadian penyakit yang meningkat secara tajam melebihi rata-
rata kejadian dalam satu tahun dengan waktu yang relatif singkat, serta penyakit yang
belum pernah terjadi atau penyakit baru (Dinas Peternakan Provinsi Jawa Timur,
2007). Hal tersebut dapat membuat kita untuk lebih waspada terhadap penyakit AI,
sehingga tindakan pengendalian, pencegahan dan pemberantasan AI dapat dilakukan
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
oleh seluruh komponen masyarakat secara terpadu dan bertanggung jawab. Chaidir
(2005) menyebutkan ada beberapa hal yang perlu dipertimbangkan dalam tindakan
pencegahan dan pengendalian penyakit AI melalui maximum security dengan
pengawasan yang ketat di setiap pintu masuk resmi maupun tidak resmi dan
pelarangan pengangkutan unggas atau hewan sejenisnya dari daerah tertular dengan
alasan apapun. Disadari bahwa tindakan tersebut memerlukan tenaga pihak Karantina
Hewan yang cukup banyak dan biaya yang tidak sedikit jumlahnya.
Salah satu prinsip dasar yang diterapkan dalam pencegahan, pengendalian, dan
pemberantasan avian influenza adalah meningkatkan resistensi (pengebalan) dengan
vaksinasi (Departemen Pertanian, 2005). Antibodi yang terkandung dalam kuning
telur ayam dapat disebabkan oleh vaksinasi, selain dari infeksi virus A. Beck et al.
(2003) mengungkapkan bahwa antibodi anti-AI dapat dideteksi pada kuning telur
ayam 14 hari pasca inokulasi virus dan 18 hari pasca vaksinasi.
Berdasarkan hasil uji HI yang menunjukkan bahwa di dalam kuning telur
ayam terdapat antibodi anti-AI A/H5, sebenarnya tidak menjadi cukup alasan untuk
membuat masyarakat takut mengkonsumsi telur unggas. Trisna (2005) menyatakan
bahwa AI merupakan penyakit zoonosis, bukan termasuk penyakit food borne
disease. Menurut Rahardjo (2004) virus AI akan mati pada temperatur 560C selama
tiga jam atau 600C selama 30 menit atau lebih. Berdasarkan sifat inilah daging unggas
dan telurnya aman dikonsumsi jika dimasak pada suhu yang sesuai, yaitu 800C selama
satu menit untuk memasak daging unggas dan 640C selama lima menit untuk
memasak telur (Kompas, 2007).
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Kesimpulan dari penelitian ini adalah :
1. Antibodi anti-AI A/H5 dapat dideteksi pada kuning telur ayam.
2. Titer antibodi anti-AI A/H5 pada kuning telur ayam ras lebih tinggi daripada
buras.
3. Terdapat perbedaan lokasi pengambilan sampel terhadap titer antibodi anti-AI
A/H5 pada kuning telur ayam ras dan buras. Titer antibodi anti-AI A/H5
tertinggi yang bersumber dari vaksinasi atau infeksi pada kuning telur ayam ras
berasal dari Surabaya Utara sedangkan pada ayam buras berasal dari Surabaya
Barat.
6.2 Saran
Berdasarkan kesimpulan di atas, saran yang dapat disampaikan adalah :
1. Dalam usaha pencegahan penyakit AI, perlu dilakukan diagnosis laboratorium
dengan uji serologis untuk mendeteksi antibodi anti-AI A/H5 pada kuning telur
ayam guna mengetahui tingkat kekebalan terhadap penyakit AI pada peternakan
ayam.
2. Perlu penelitian lebih lanjut untuk mendeteksi adanya antigen AI A/H5 pada
telur ayam buras dan ras dari beberapa pasar tradisional di kota Surabaya
dengan menggunakan sampel yang proporsional.
3. Perlu dilakukan tindakan surveilans terhadap penyakit AI guna mengetahui
sejauh mana penyebaran AI subtipe H5 baik tingkat regional maupun nasional.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
RINGKASAN
Avian influenza (AI) atau yang lebih dikenal dengan flu burung adalah
penyakit pada unggas yang disebabkan oleh virus dari golongan Orthomyxoviridae.
Penyakit ini bersifat zoonosis dengan morbiditas dan mortalitas pada unggas
mencapai 100%. AI merupakan problema bagi masyarakat perunggasan karena dapat
mengakibatkan kerugian ekonomi yang cukup besar seperti penurunan permintaan
broiler hingga 50%, melemahnya permintaan DOC, penurunan permintaan pakan
serta alokasi dana untuk pencegahan, pengendalian dan pemberantasan penyakit AI.
Unggas yang pernah terinfeksi maupun yang pernah divaksinasi AI akan
memproduksi antibodi sebagai perlawanan tubuh terhadap masuknya virus. Selain
pada serum darah, antibodi juga dapat ditemukan pada kuning telur. Penelitian ini
bertujuan untuk mendeteksi antibodi anti-AI A/H5 pada kuning telur ayam ras dan
buras dari beberapa pasar tradisional di Surabaya.
Penentuan lokasi pengambilan sampel dilakukan dengan metode stratified
random sampling yang membagi Surabaya menjadi lima wilayah, yaitu Surabaya
Timur, Barat, Utara, Selatan dan Pusat. Masing-masing wilayah diwakili oleh tiga
pasar, sebanyak 20 sampel dikoleksi dari tiap pasar untuk dua jenis sampel telur ayam
ras dan buras. Setelah sampel telur terkumpul kemudian dilakukan ekstraksi pada
kuning telur untuk mendapatkan antibodi dan tahap selanjutnya adalah melakukan uji
serologis Haemagglutination Inhibition (HI) untuk mengetahui ada tidaknya serta
tinggi rendahnya kadar antibodi. Data yang diperoleh dianalisis dengan Analysis of
Variance dan dilanjutkan dengan uji BNJ 5%.
Hasil penelitian menunjukkan terdapat perbedaan yang nyata pada variabel
wilayah (p<0,05). Titer antibodi anti-AI A/H5 tertinggi diperoleh dari sampel
Surabaya Utara dan terendah diperoleh dari Surabaya Pusat. Variabel jenis telur
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
memberikan hasil p<0,01 menunjukkan terdapat perbedaan yang sangat nyata diantara
dua jenis telur. Titer antibodi anti-AI A/H5 pada kuning telur ayam ras lebih tinggi
dibandingkan buras. Perbedaan ini mungkin disebabkan oleh perbedaan sistem
pemeliharaan yang berhubungan dengan pelaksanaan vaksinasi. Variabel wilayah
dengan jenis telur memberikan hasil p<0,01 menunjukkan terdapat perbedaan yang
sangat nyata diantara dua variabel. Titer antibodi anti-AI A/H5 yang tertinggi pada
telur ras berasal dari wilayah Surabaya Utara dan terendah Surabaya Barat. Titer
antibodi anti-AI A/H5 yang tertinggi pada telur buras berasal dari wilayah Surabaya
Barat dan terendah Surabaya Timur.
Berdasarkan hasil penelitian ini maka disarankan untuk melakukan diagnosis
laboratorium dengan uji serologis untuk mendeteksi antibodi anti-AI A/H5 pada
kuning telur ayam guna mengetahui tingkat kekebalan terhadap penyakit AI pada
peternakan ayam dalam usaha pencegahan penyakit AI. Diperlukan penelitian lebih
lanjut untuk mendeteksi adanya antigen AI A/H5 pada telur ayam buras dan ras dari
beberapa pasar tradisional di kota Surabaya dengan menggunakan sampel yang
proporsional. Tindakan surveilans terhadap penyakit AI juga perlu dilakukan guna
mengetahui sejauh mana penyebaran AI subtipe H5 baik tingkat regional maupun
nasional.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
DAFTAR PUSTAKA
Baratawidjaja, K. G. 2006. Imunologi Dasar. Edisi ke-7. Balai Penerbit Fakultas
Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Barlough, J. E., F.W. Scott., J. H. Gillespie and J. F. Timoney. 1988. Hagan and
Bruner’s Microbiology and Infectious Diseases of Domestic Animals.
Comstoc Publishing. USA. 784-788.
Beck, J. R., D. E. Swayne, S. Davison, S. Casavant and C. Gutierrez. 2003. Validation
of Egg Yolk Antibody Testing As a Method to Determine Influenza Status in
White Leghorn Hens. Avian Diseases. 47:867-71.
Buckle, K. A., R. A. Edward, G. H. Fleet and M. Weaton. 1987. Ilmu Pangan.
Terjemahan. Universitas Indonesia press. Jakarta. 306-312.
Camenish, G., M. Tini, D. Chilov, I. Kvietikova, V. Srinivas, J. Caro, P. Spielmann,
R. H. Wenger and M. Gassmann. 1999. General applicability of chicken egg
yolk antibodies the performance of IgY immunoglobulins raised againts the
hypoxia induciblefactor1. TheFaseb Journal. http://www.fasebj.org/cgi/content
/full/13/1/81. [21 November 2006]
Chaidir. 2005. Flu Burung Akhirnya Tiba. Tabloid Mingguan Mentari. Edisi 221/Th
V/19-25 Desember.http://www.chaidir.com/?m=bc&id=313. [1 November
2007].
Cox, N. J., F. Fuller, N. Kaveria, H. D. Klenk, R. A. Lamb, B. W. J. Mahy, J.
McCauley, K. Nakamura, P. Palese and R. G. Webster.2000.Orthomyoviridae,
p.585-597. In:M. H. V. Van Rogenmortel, C. Malinoff, M. A. Myo, D. J.
McGeoch, C. R. Pringle and R. B. Wickner (ed). Virus Taxonomy:seventh
report of the International Commite on Taxonomy of Viruses. Academic
Press. San Diego. California.
Departemen Pertanian. 2005. Pencegahan dan Pengendalian Flu Burung (AI).
http://www.litbang.deptan.go.id/berita/one/221. [15 April 2007]
Departemen Pertanian. 2006. Pedoman Pencegahan dan Pengendalian Flu Burung
(Avian Influenza) Pada Peternakan Unggas Skala Kecil. Biro Hukum dan
Humas Departemen Pertanian.
Dinas Peternakan Provinsi Jawa Timur. 2007. Situasi Penyakit Avian influenza Di
Jawa Timur Tahun 2005. http://www.disnak-jatim.go.id. [1 November 2007].
Direktur Jenderal Bina Produksi Peternakan. Keputusan Direktur Jenderal Bina
Produksi Peternakan No:17/Kpts/PD.640/F/02.04 tanggal 4 Februari 2004
Tentang Pedoman Pencegahan, Pengendalian dan Pemberantasan Penyakit
Hewan Menular Influenza Pada Unggas (Avian Influenza).
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Ernawati, R., Soelistiyanto, A. P. Rahardjo, N. Sianita, F. A. Rantam, J. Rahmahani
dan Suwarno. 2002. Diktat Virologi Veteriner. Laboratorium Virologi dan
Imunologi Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya.
Ernawati, R., A. P. Rahardjo, N. Sianita, F.A. Rantam, J. Rahmahani, Suwarno dan T.
Wahyu. 2004. Petunjuk Praktikum Pemeriksaan Virologi dan Serologi.
Laboratorium Virologi dan Imunologi Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Airlangga. Surabaya.
Fenner, F. J., E. P. J. Gibbs, F. A. Murphy, R. Rott, M. J. Studdert and D. O. White.
1995. Veterinary Virology 2nd
Ed. Harya Putra dkk., trans. IKIP Semarang
Press.
Fouchier, R. A. M., M. Vincent, A. Wallansten, T. M. Bestebroer, S. Herfst, D. Smith,
G. F. Rimmelzwaan, B. Olsen and A. D. M. E. Osterhuas. 2005.
Characterization of Novel Influenza A Virus Haemagglutinin Subtype (H16)
Obtained from black-headed Gulls. J. Virol. 79. (5): 2814-2822.
Franco, D. A., and D. C. Herenda. 1996. Poultry Diseases and Meat Hygiene. A Color
Atlas. Exotic or unusual diseases of poultry. Avian Inluenza. Iowa State
University Press.
Fudge, A. M. 2000. Laboratory Medicine. Avian and Exotic Pets. Avian Viral
Diagnostic. W. B. Saunders Company. USA.
Harimoto, T. and Y. Kawaoka. 2001. Pandemic Threat Posed by Avian Influenza A
Viruses. Clinical Microbiology Reviews. Vol. 14, No. 1. Copyright © 2001,
American Society for Microbiology. All Rights Reserved.
Haryoto. 1996. Pengawetan Telur Segar. Kanisius. Yogyakarta.
Heinen, P. 2003. Swine influenza: a zoonosis.http://www.vetscite.org/publish/articles
/000041/print.html. [25 Oktober 2007]
Indartono, A. S. 2007. Telur Kapsul Alami Bergizi Tinggi. Poultry Indonesia. Edisi
Maret. Vol II. 44-45.
Indriani, R., dan NLP I. Dharmayanti. 2006. Deteksi Antibodi Avian Influenza dalam
Kuning Telur Ayam Pasca Vaksinasi (AI) Subtipe H5N1. Media Kedokteran
Hewan. Edisi Mei Vol 22, No. 2. 84-87.
Irawan, A. 1995. Menanggulangi Berbagai Penyakit Ayam. Memberantas, Mencegah
dan Mengobati Penyakit Ayam. CV. Aneka. Solo.
Koestanti, E. 2007. Penilaian Mutu Telur. Disampaikan Pada Kuliah Kesehatan
Masyarakat Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.
Surabaya.
Kompas. 2006. Flu Burung Ditemukan Di Surabaya. Edisi 20 Februari 2006.
http://www.kompas.com/kompas-cetak/0602/20/jatim/49776.htm
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Kompas. 2007. http://www.kompas.com/kesehatan/news/0401/31/091249.htm. [30
Mei 2007].
Lubis, A. M., dan F. B. Parimin. 2001. Delapan Kiat Mencegah Penurunan Produksi
Telur Ayam. Penebar Swadaya. Jakarta.
Lusiastuti, A. M., G. C. de Vries, H. P. Siswanto, A. T. S. Estoepangestie, M. H.
Effendi, dan Budiarto. 2006. Bahan Ajar Epidemiologi dan Ekonomi
Veteriner. Bagian Kesehatan Masyarakat Veteriner Fakultas Kedokteran
Hewan Universitas Airlangga. Surabaya.
Martin, S. W., A. H. Meek and P. Willeberg. 1987. Veterinary Epidemiology.
Principles and Methods. Iowa State University Press. USA.
Murphy, F. A., E. P. J. Gibbs, M. C. Horzinek and M. J. Studdert. 1999. Veterinary
Virology. Third Edition. Orthomyxoviridae. Academic Press. USA.
Murtidjo, B. A. 1992. Pengendalian Hama dan Penyakit Ayam. Penyakit Flu Ayam
(Avian Influenza). Kanisius. Yogyakarta.
Poultry Indonesia. 2007. Demam Flu Burung. Edisi Maret. Vol II. 12-13.
Purnama, J. 2003. Telur Ayam Sebagai Imunoterapi. http://mma/mb.ipb.ac.id/
today/artikelview.html?topic=rubrikagribisnis&sizenum=1862343336&page=
telur ayam sebagai imunoterapi.html.
Quinn, P. J., B. K. Markey, M. E. Carter, W. J. Donnelly and F. C. Leonard. 2002.
Veterinary Microbiology and Microbial Disease. Blackwell Publishing.
Rahardjo, Y. 2004. Avian Influenza, Pencegahan, Pengendalian dan
Pemberantasannya. Hasil Investigasi Kasus Lapangan. Gallus Indonesia
Utama. Jakarta.
Rantam, F. A. 2005. Virologi. Airlangga University Press. Surabaya.
Rochiman, K. 1990. Perancangan Percobaan: Rancangan Acak Kelompok, Rancangan
Bujursangkar Latin, dan Percobaan Faktorial. Universitas Airlangga.
Surabaya.
Rochiman, K. 1989. Dasar Perancangan Percobaan dan Rancangan Acak Lengkap.
Universitas Airlangga. Surabaya.
Sarwono, B. 1994. Pengawetan dan Pemanfaatan Telur. Cetakan Ketiga. Penebar
Swadaya. Jakarta.
Selleck, P. 2005. Internet communication. Paul [email protected].
Suartha, I. N., Y. L. R. Tulung, H. Hetharie, H. Mahatmi, J. A. N. Masrikat, J. P.
Saerang dan I. W. Batan. 2003. Telur Sebagai Imunoterapi Penyakit Menular.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Makalah Kelompok 14 Pengantar Falsafah Sains Program Pasca Sarjana / S3
Institut Pertanian Bogor. http://tumoutou.net/702_07134/71034_14.htm
Sudaryani, T. 1996. Kualitas Telur. Penebar Swadaya. Cetakan Pertama. Jakarta.
Sudaryani, T dan H. Sentosa.1997. Pemeliharaan Ayam Ras Petelur Kandang Baterai.
Cetakan ketujuh. Penebar Swadaya. Jakarta.
Tabbu, C. R. 2000. Penyakit Ayam dan Penanggulangan Penyakit Bakterial, Mikal
dan Viral. Kanisius. Yogyakarta.
Tabbu, C. R. 2006. AI, Virus vs Vaksinasi. Poultry Indonesia. http://www.Poultryin
donesia.com/modules.php?name=News&file=article&sid=1125. [1 November
2007]
Taylor, R. E. and T. G. Field. 2004. Scientific Farm Animal Production; An
Introduction to Animal Science. 8th
ed. Pearson Education, Inc., Upper Saddle
River New Jersey.
Trampel, D. W., En-Min Zhoi, Kyoung-Jin Yoon Ang Kenne and J. Koehler. 2006.
Detection or Antibodies in Serum and Egg Yolk Following Infection of
Chickens with an H6N2 Avian Influenza Virus. Journal of Veterinary
Diagnostic Investigation Vol. 18 Issue 5, 437-442 Copyright © 2006 by
American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians.
Trisna, A. A. I. N. 2005. Dampak Ekonomi Penyakit Flu Burung. Harian Bali
Post. Edisi 27 Juli 2005.
http://www.balipost.co.id/balipostcetak/2005/7/27/o3.htm
www.agnr.umd.edu_avianflu_images_scrap1.gif.htm. 2006. The Molecular Basis of
Interspecies Transmission, Pathogenesis and Cross-Protection of Influenza A
viruses. [21 September 2006]
www.cdc.gov/flu/ avian/gen-info/flu-viruses.htm. 2005. Influenza Viruses.
www.infeksi.com/articles. 2007. Kekebalan Tubuh. [5 Agustus 2007].
Zage, D. 1998. Antigenic Drift. http://www.cs.bsu.edu/homepages/dmz/david/drift.
html.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Lampiran 1. Analysis of Variance
Between-Subjects Factors
S_Pusat 60
S_Utara 60
S_Selatan 60
S_Barat 60
S_Timur 60
Buras 150
Ras 150
1
2
3
4
5
Wilayah (Surabaya)
1
2
Jenis Telur
Value Label N
Descriptive Statistics
Dependent Variable: Titer pd Uji HI (2log)
.70 1.466 30
2.03 2.025 30
1.37 1.877 60
1.30 2.087 30
4.00 2.181 30
2.65 2.517 60
1.37 1.921 30
2.47 2.224 30
1.92 2.134 60
2.20 2.670 30
1.50 1.796 30
1.85 2.284 60
.57 1.832 30
3.17 2.230 30
1.87 2.411 60
1.23 2.089 150
2.63 2.248 150
1.93 2.278 300
Jenis Telur Buras Ras
Total
Buras
Ras
Total
Buras Ras
Total
Buras Ras
Total
Buras Ras
Total
Buras Ras
Total
Wilayah (Surabaya) S_Pusat
S_Utara
S_Selatan
S_Barat
S_Timur
Total
Mean Std. Deviation N
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: Titer pd Uji HI (2log)
1431.167 a 10 143.117 33.529 .000
50.780 4 12.695 2.974 .020
148.403 1 148.403 34.768 .000
114.513 4 28.628 6.707 .000
1237.833 290 4.268
2669.000 300
Source
Model
Wilayah
Jenis_telur
Wilayah * Jenis_telur
Error
Total
Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.
R Squared = .536 (Adjusted R Squared = .520)a.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Homogeneous Subsets
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Titer pd Uji HI (2log) Tukey HSD
-1.28 * .377 .007 -2.32 -.25
-.55 .377 .591 -1.59 .49
-.48 .377 .703 -1.52 .55
-.50 .377 .676 -1.54 .54
1.28 * .377 .007 .25 2.32
.73 .377 .296 -.30 1.77
.80 .377 .214 -.24 1.84
.78 .377 .233 -.25 1.82
.55 .377 .591 -.49 1.59
-.73 .377 .296 -1.77 .30
.07 .377 1.000 -.97 1.10
.05 .377 1.000 -.99 1.09
.48 .377 .703 -.55 1.52
-.80 .377 .214 -1.84 .24
-.07 .377 1.000 -1.10 .97
-.02 .377 1.000 -1.05 1.02
.50 .377 .676 -.54 1.54
-.78 .377 .233 -1.82 .25
-.05 .377 1.000 -1.09 .99
.02 .377 1.000 -1.02 1.05
(J) Wilayah (Surabaya) S_Utara S_Selatan
S_Barat
S_Timur
S_Pusat
S_Selatan
S_Barat
S_Timur
S_Pusat
S_Utara S_Barat
S_Timur
S_Pusat
S_Utara S_Selatan
S_Timur
S_Pusat
S_Utara S_Selatan
S_Barat
(I) Wilayah (Surabaya) S_Pusat
S_Utara
S_Selatan
S_Barat
S_Timur
Mean
Difference (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
95% Confidence Interval
Based on observed means.
The mean difference is significant at the .05 level. *.
Titer pd Uji HI (2log)
Tukey HSD a,b
60 1.37 60 1.85 1.85 60 1.87 1.87 60 1.92 1.92 60 2.65
.591 .214
Wilayah (Surabaya) S_Pusat S_Barat S_Timur S_Selatan
S_Utara Sig.
N 1 2 Subset
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) = 4.268.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 60.000. a.
Alpha = .05.b.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Homogeneous Subsets
Titer pd Uji HI (2log)
Tukey HSD a
30 .57
30 .70
30 1.30 1.30
30 1.37 1.37
30 1.50 1.50 1.50
30 2.03 2.03 2.03
30 2.20 2.20 2.20
30 2.47 2.47 2.47
30 3.17 3.17
30 4.00
.072 .468 .060 .118
Perlakuan Kombinasi
S_Timur*Buras
S_Pusat*Buras S_Utara*Buras
S_Selatan*Buras
S_Barat*Ras
S_Pusat*Ras
S_Barat*Buras
S_Selatan*Ras
S_Timur*Ras
S_Utara*Ras
Sig.
N 1 2 3 4
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Uses Harmonic Mean Sample Size = 30.000. a.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Lampiran 2. Bahan dan Alat Penelitian
Telur Ayam Buras
Telur Ayam Ras
Peralatan Uji HI
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Lampiran 3. Ekstraksi Kuning Telur Ayam Ras dan Buras
Ekstraksi kuning telur sebelum sentrifugasi
Ekstraksi kuning telur setelah sentrifugasi
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
Lampiran 4. Tabel Hasil Uji HI Telur Ayam Ras dan Buras
WILAYAH ASAL PASAR JENIS TELUR TITER ANTIBODI
(log2)
BURAS (B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 2
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 6
(R) 4
(R) 0
(R) 0
(R) 2
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
P
A
S
A
R
K
E
M
B
A
N
G
(R) 0
BURAS (B) 4
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 3
(B) 4
(B) 0
(B) 0
(B) 4
(B) 0
RAS (R) 0
(R) 5
(R) 4
(R) 4
(R) 1
(R) 3
(R) 3
(R) 2
(R) 1
P
A
S
A
R
T
E
M
B
O
K
(R) 2
BURAS (B) 0
(B) 4
(B) 0
S
U
R
A
B
A
Y
A
P
U
S
A
T
(B) 0
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 3
(R) 2
(R) 0
(R) 0
(R) 6
(R) 2
(R) 3
(R) 2
(R) 6
S
U
R
A
B
A
Y
A
P
U
S
A
T
P
A
S
A
R
K
E
P
U
T
R
A
N
(R) 0
BURAS (B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 5
(B) 0
(B) 6
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 2
(R) 0
(R) 3
(R) 3
(R) 5
(R) 0
(R) 6
(R) 7
(R) 4
P
A
S
A
R
P
A
B
E
A
N
(R) 3
BURAS (B) 0
(B) 0
(B) 4
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 3
RAS (R) 5
S
U
R
A
B
A
Y
A
U
T
A
R
A
P
A
S
A
R
(R) 4
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
RAS (R) 6
(R) 7
(R) 3
(R) 5
(R) 6
(R) 5
(R) 5
P
E
G
I
R
I
A
N (R) 4
BURAS (B) 5
(B) 3
(B) 5
(B) 4
(B) 4
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 4
(R) 5
(R) 7
(R) 6
(R) 0
(R) 7
(R) 2
(R) 4
(R) 0
S
U
R
A
B
A
Y
A
U
T
A
R
A
P
A
S
A
R
S
I
D
O
T
O
P
O
(R) 2
BURAS (B) 3
(B) 4
(B) 0
(B) 1
(B) 6
(B) 4
(B) 6
(B) 5
(B) 7
(B) 4
RAS (R) 4
(R) 4
(R) 5
(R) 0
(R) 4
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
S
U
R
A
B
A
Y
A
B
A
R
A
T
P
A
S
A
R
M
A
N
U
K
A
N
(R) 0
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
BURAS (B) 0
(B) 7
(B) 7
(B) 5
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 2
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 3
(R) 0
P
A
S
A
R
B
E
N
O
W
O
(R) 0
BURAS (B) 0
(B) 4
(B) 0
(B) 0
(B) 3
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 5
(R) 1
(R) 2
(R) 2
(R) 2
(R) 2
(R) 2
(R) 0
(R) 2
S
U
R
A
B
A
Y
A
B
A
R
A
T
P
A
S
A
R
T
A
N
D
E
S
(R) 5
BURAS (B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 2
(B) 4
(B) 0
(B) 1
P
A
S
A
R
(B) 5
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
(B) 3
(B) 0
RAS (R) 2
(R) 1
(R) 4
(R) 4
(R) 3
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
W
O
N
O
K
R
O
M
O
(R) 0
BURAS (B) 0
(B) 2
(B) 4
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 2
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 6
(R) 4
(R) 7
(R) 2
(R) 0
(R) 3
(R) 2
(R) 7
(R) 2
P
A
S
A
R
P
A
G
E
S
A
N
G
A
N
(R) 1
BURAS (B) 0
(B) 4
(B) 4
(B) 0
(B) 4
(B) 6
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 0
(R) 6
(R) 2
(R) 2
(R) 2
S
U
R
A
B
A
Y
A
S
E
L
A
T
A
N
P
A
S
A
R
G
A
Y
U
N
G
(R) 0
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
(R) 2
(R) 4
(R) 6
S
A
R
I (R) 2
BURAS (B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 7
(B) 0
(B) 7
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 6
(R) 0
(R) 5
(R) 4
(R) 5
(R) 2
(R) 4
(R) 0
(R) 3
P
A
S
A
R
M
U
L
Y
O
S
A
R
I
(R) 1
BURAS (B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 0
(R) 5
(R) 4
(R) 4
(R) 6
(R) 4
P
A
S
A
R
M
A
N
Y
A
R
(R) 0
BURAS (B) 0
(B) 3
(B) 0
S
U
R
A
B
A
Y
A
T
I
M
U
R
(B) 0
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
(B) 0
RAS (R) 4
(R) 4
(R) 6
(R) 5
(R) 0
(R) 3
(R) 6
(R) 5
(R) 4
S
U
R
A
B
A
Y
A
T
I
M
U
R
P
A
S
A
R
R
U
N
G
K
U
T
(R) 5
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Skripsi DETEKSI ANTIBODI TERHADAP VIRUS AVIAN INFLUENZAWIJAYANTI LIESTIYONINGTIYAS