Transcript
Page 1: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

������������� ��� ��� ��� ��� ������ ����� ����������� ���� �������� �� �������������� ������� ����� ������ ���� ����� �� !����� ����� �� ����

�������� ������ ����� �������� ������ ���� ��� ����� ����� ��������� �������� ����� ������ ������� � ��� ������ ������������������ �� ������� �� ����� �� ������� ���� ����� ��� ����� !��"����� ���� #����$ ����������� �� ������� ��

����� �� ������� �������� !��"����� �������� #����

"� ������� ��� ������ �� ��� ������������������� ��� �������� �� ��� ������# $� ���� ���� �� � ������� ��� �������� ������ ��������������� �� ��� ���������� �� �������� ������� %� ������������ �� ����� $��� �������� ���� �� �����& '�����# ��������# �� � ������������ (������������� ����������� �) ����� �����*���� ������ �� �������������� �� �� �������� ������ �# %�� ��� �������������+# ��� � ����� ������������ ���� ����# �� ,�, ����&������������� (�+-.��+-�, !) ����*������ ��� ����� ��� ��������� �� �������������� %� �� ,�,���� �� %��� ��� ������� �� /�� �� �� $����� ����� %� ������ ������ �� ��������# %�� ���%� ������������� ����������� �# $����� �������������� ����� �� �� ������& �� �������#������������� �� �� ������ �� ��� ��������� ���� �� ������ ������ � �� �������������+ %���� ������ �� ����� �� ,�, ����& ��������������� �%����� ���� ��� �� ���� ���� ��� ���� �� �������� ����� ����� ���� ����� �� �� ,�, ����0��$� ��# ��� ���� ����� ���� ����� %� �+-.��+-1

! �� ������������� $� �%�� � �� �� ,�, ������ ����� %� %��� ������ �� ��������# %�� ���%� ������������� ����������� �& ������� ���# ����������� ��������%� ��� ����%��� ��� ������������ �������������� ��������� �� ������������� %� �� ,�, ����& ���������� ��������%�� ��� � ��� �� ������� �%������ ��� ������������ �������������� ��������� ��� ���� %��������������# ��$� ��& "� ���� ��� ��� �������� ������������ ������ ����� ���� �����# �������� ��� $� ��� ��� %� ��������������� �%��������� ���& '����� $� ����� �� ����� �������� ����� �� �� ,�, ����& �� ������# ���� ���� ������ $� ��� ���� �� ��� ��������� ����� �� ,�, ���� �� ��� ������� �� �+-1��+-�+ ! �� ��������������& "�� ��� ���� ��2� ����� �������� %�������������� �� ��������� ��2��� ��� ��� ��������� �� �������������� ��������� %� ������������ ����� ������� ��� ����� �� ���� ����$��&�� ���� ������� ����������������������������������������������������������� � ������ �������� ��� � !"��#$#%%%

% ������������� &%'( ��"� )��� ���� �� �� ����*��+������� ���� ��� ���� ���� �� � � ������, -������� �������� ���� %' ������� ��� ��+����*��� �������� �� )��� ������� �����������"�� &'��(��� �������� �������� &����� �� �� .//0(, ������ %'

��� ������� ������� ��� ���)�� �� �������� 1��������� �� � ����� ��������� ��� �� � �� ��������� ��� �������� ����� �� ������'�� &%��))� ��� 1���� .//2(, ��3���������� ��� � �� )�������� �� �������� ������� ����)� *�����*������� ����� �����*.� &�1*.�( �3�������� ��� ��� ��� ������ �4 &�5*�4( ����"�����&-��� �� �� .//0(, ����� 6������ ������� ���� %' �� ����"���

��� ��� ������� ���� �� �5*�4 �� ������� ���������� �� �������� �������� �� ���� ��� ��� ��+������� �������� �� '�� ����������� ��������,

������������ ��� �� ����� �� � � � ��7�� �� � �� ������������� �� ������ ������� ���������� ��� '�� �������� &8�� ������� .//9�(, :�� �� ��� ��7�� �� �� �� ������������ �� ����������� ��� �� ���� �� �������� ���������� ��� ������ ���������� ����� �1*.� ����� �������� ������ � &��5*�( �1*; ������������ ������ ������ � &�%5*�( �%5*� ��� ����� �*���<���������� �� ��*����� ����� ������ &%*'�5( &4������� �� .//.(, ��� ���������� �� ��5*� ��� %*'�5 )������������ �� ������ ���� ) )��� � ������ ��� ��������� ��������1*.� �� ������ ���� ) � ������ )�� ��� ) ��������� &8�� ��� ���� .//9�(, 4��� �1*.� ��� ��5*� ��� �������� ) �����*�� ���������� ���� ) ��� ����� ����� �� ������������� ���� �� ����� �*����� ��������3�� 4 &�84( &�������� �� �� .//;$ �������� �� �� .//;(, ����� �1*.� ��� ��5*� ��� )��� �� ����� ��������� �������������� �� ����� ��� ��� ���������� �� ����� �������� ���������� ��� �������� �� ��� �� ����� ���� ��� ��� ���������� ����� �������� �� ���� �� ��� ���� ������� �� ��������� ��� �������� ��� � �������� ���� ��� ��������� ) ��� ������

��������� �����"�� :���)�� 92 .///$ ��"���� #��� 9; 9===$ ����������� ��) ������� #��� 9> 9===,

?������ ��@����� ��A ��, ����� �������� ���������� �� ������� �� ����� �� ������� ���� ����� ��� ����� !��"����� .*2*B2������� 4����*�� ���� ..C*>2./ #����,

�))��"�������A '�� ������� �����������"��$ ��4� 9 B*�������)��*������ ����� ���� ������ �� �$ %' � �������������$ � ���� �� �� ���$�5*�4 ��� ��� ������ �4$ D��' ���� ����� ���������)�����$ �84 ����� ������ ��������3�� 4$ ��4� 9 B ;*��������)�������� ����� ���������� �� �,

==99*9=9E<==<F.2,== G '������� � 9=== ) ��� ������ ��� ��"��������"� ������� �� ���,

34.

Page 2: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

��� ����"��� ��6 ������� �� � &���� �� �� .//=(, � �� �1*.= �� ����� ��� ����*��+������� �������� �������� ) ������������ &8����� ���� .//9)$ ?�"�� ��� ! ���� .//9(, -� ���������@��������� ������� �� ��� %' ���� ��� ��� ���������� �� ������������� ���� �1*.� ��5*� ��� �1*.= ������� )������� ����� ���� ������������,

�5*�4 �� � ������������� ������ ���� ��� ����"��� ��+������������ �� �������� �� � ������"� �3��� ������������, ��� ����"������� �5*�4 �� ������� ) ������� �� ����� ������� �� �� � ��� ���)������ ����"�� �� �5*�4 ���� ���� ��� ������������� �� ����� ���������� ��� �������� �� ��� �� &'��)� �� �� �� .//2( � �������� ������� ��� ��� ������� ������� �� ��������� ��� ������ ��� ����������� �� �?�� ��� �������� �� �������� ) ������������������� ��� �5*�4 ������������� ������, �D*. �� � �� � ��7����� ��� ������ �� ��� ���������� �� �1*.�$ ����"�� �� �� ��� ��� ��� ������� �D*. �� ����"���� �� ��� �� ����������������� ���� ���� ������� �,

�� ���� ���� �� ����� �� � ���� ������� %' ���� ��� ������������� �� �������� ���� �� �1*.� ��5*� ��� �1*.= )������� ����� ���� ������������ ��� � �� �� � ������� ��������� ��� �������� ��� �������� ) ������� ����� ���� �� ����������������� "�� ��� ����"����� ������ �� �5*�4 �� �D*.,5���������� ��� ���� ���� ������ �� %' �� ��� ����"����� ���5*�4 �� ������� ����� ���� ������������ ��� �������� �����6�� ��� ���������� ���� ������ %' ��� ������� �������� �����+������� �������� �� )��� '�� ��� ��� �������� �������� �� ����,:�� 6������ ����������� ���� ������� ��������� ��� � ������������������� � �����6���� �� ���� �� �1*.� ��� ��5*� )�� ��� �1*.=���� ������������, %' ������ ���� ��� �1*.� ���������� ��������� ����� ���� ������������ )�� ��� ���� �� ��5*� ��� �1*.=, ��� ����"����� �� �5*�4 ��� �D*. ��� �������� ) %' �� �� ������������ ����� ���� ) ������� ��� ��������� ��� �������"����� �� �5*�4 ��� �� ������ �)������� ) �����3������,

��8?��1� ��� 8��:��

/������ 9 B ;*��������)������ �� ����� ���� ������ �� � &��4�( ��������� ����� �� ���� &���( ���� ��������� ���� ������� ���@��&���� #����( ���� �� �� ��� &�( ����� ������ ��������3�� 4 &�84( ���� ����� ���������)����� &D��'( ��� �����*9= ���� �����&��������� %�����( 9 B*�������)������ �� ����� ���� ������ �� �&��4�( ��� �3��� ��� ���� ���� ����� &���� #����( ����*��������� ���� -��� D��� '������ ���������� &:���� #����( +��������� ������������� &5��'( ���7������ �*�� ����)�� ����D������� &��� ����� '�( ���� )�"��� ����� &54�( ���� 5 ��1�)��������� &?���"� � �( ��3���� ������ ��3���� ���� 4���������������� &%�����( ?�H*9 ������������� ��@ ��� �� ������ �����)���� ���� ����)���� ���� ������ &#����( ���� �*��������� ������ ������� ��� �5*�4 ��� ����*�5*�4 �;2 ���� �� � ��� ����)�� ���� ����� '��� 4�������� �� &����� '��� '�( �������������� ����3�����*���7������ ���� ������))�� ������� �) �� �������� &�������(,

����� �� ���� ���� �� ��� ����������� �� ����� ����� ������ �� �������� �� ��� ����"�� ���� 4�14<' ����� D�� 9.9&����� �� �� ./>=( ��� ���� ���������� ��� �3���������, D�� 9.9 �� ����� �� ����� �� ��3*�� �� ���� � ���� &'������ 92>.=( �� �� )����I������� �������� ������ &�8( ���� ������� ���� 0J 54� 2 �� ������� .== ! ��� � �� ������ �� ��� .==�� ��� � �� �����������,� �3��������� ���� ��������� �� ��� �������+���� �����, 1����������� � ���� ��� �������) � �� D�� 9.9 �� � ����� �������� ���� 5��'*���7������ �*�� ����)��,

���� �������� �� � ���� ��� ���� ���� C*B*�*� � 4�14<' ����&#���� �1' #����( ) �������������, H��) � �� � ���� � ���� �� �8���������� 9=J 54� �� C0�' �� 2J ':9, :� ��� �� ����� �� ��������� ��� ��� ���� ���� �����*���� �8 �� ������� ��� �3���������,

�� ����� �� ������� �� ������������ $��� ��� ���� D�� 9.9 �� ����� �� ����� ��� 9B � �� C0�' ���� "����� �������������� �� ��4� &.,=K=,=. �( ��4� &.,=K=,=. �( ��� &.==K.�� ��� � ( � &.,=K=,=.J( ��� �84 &.,=K=,=.�� ��� � ( �� �����*���� �8 �� ����������� �� �)����� �� .=K;*.=K.; ������������� ��� ���� ���� ��������� ����)���� �� �8 ���� 0J 54�, ��� ��� ������ �3����������"�� �� ���� ��� ������ ������������� �� ��� ������� � �� ����� ���

������� ���������� �� ������������ ��� �� �� ���A =,. � ��4� =,. �� ��4� =,===9J �3��� ��� .=�� ��� � ��� =,=.J � .,=����� � �84, ���� ������ ������������� �� ������� � ��� ���� �� ����3��������� �� ����� ��� ������������, D��' ��� ����� �� ��� �� ����+���� ;= ��� )����� ��� �������� �� ������� �, ��� �� ���� ���������������� �� ����� ��� �������� ��� �����* ����� ���������)��� ����&81���(, ��� ��� �3������ �� D�� 9.9 �� � �� ����� ��� 9B � ���� ��������� ������� � ��� ������������� ���� ������� ��� -������) ������,

�5�6� �� �������� D�� 9.9 �� � ���� ����)���� �� ��3*�� �� ���� � ���� ���� =,.� ��4� =,. � ��4� .=�� ��� � ��� =,=.J � ��� .,= �� ��� � �84 �� ��� �������� �� �)����� ��.=K;*.=K.; ������������� �� C0�' ��� 9B �, ��� �� ���� ����� ������ ����� ��� ������ �� K0=�', ��� �� ���� �� �1*.� ��� ��5*� ���� ����� ���� ����� ��� ��������� ) ����� �� L��������� 81��� ��� &?M�������( ��� �� �1*.= ) �� ����� ����*.=E 81��� ��� &%�����(��������� �� ��� ���� ���I� ������������, ��� �������"�� �� ��� ���� ��� .= ����� � ,

/�� ����������# �� ��� ������������# �� ���� ���� ������������� (/"���/) ?�� ��� �3������� ���� D�� 9.9 �� � �� ������� �����*���� �8 ��� 9 � ���� �� ������� ������ ������� � ��������������� ) ����� ?��*�� &4����3 '�.=.(, ��� ��"����������������� ��3���� ��� �������� ) ��3��� B� �� .=� )�����&.== � ����*�' �� >,C 2== � �' .2 � �' 9( B� ����3���� ������ ��3���� &;9,2 �9;= ! ��� � ( B� �� .== �������������� &���( 9� �� ���D &9,2 � ����( B� �� 9= ! ���� ��)���� ���� ����)���� B� �� C ! ���� �� ?�H*9 ������������� ��� >� �� �����, �� ��� ���� ��� �"�� ���� � ��� � �@����� �� C=� ��� ��)� ����> �� ��� .=� �� ���� ?��, ��� ��)�� ���� "����3�� ���� )���+ ��� ��� ��� .= ��� �� ���� ����������� ��� ��� ;= ��� �� B9�', ?�"����������������� ��� ������"���� �� /2�' ��� 2 ���, ��� ��"���� ���������������3���� ������� �� ���� �� ��� ������ �� K0=�', ��� D'? ��3������������� ��"����*��������)�� ?�� &=,.�� ���� ?��( 2� �� .= �)����� B� �� ���D &9,2 � ����( 9,2� �� 9=� ��*������ ��� 9,2� �� 9=� ����*������ =,B� �� 2 ! ���� ��@ ��� �� ������ ���C=,. � �� �����, ���������� ��� ��)�� ���� ����������� �� � ������ �� ��&��� ��� �6�� D'*0==$ ���8' #����(, ��� �6������ ��� ��������� ���9; �� �� �� /B�' ��� . ��� �� ;=�' ��� . ��� ��� �� 09�' ��� 9 ��� ������� �� �1*.� ��� ��� 99 �� �� ��� ���� �� �*�����, ��� �1*.�������� ���� 2�*��% ��% �'' ��' ��' �'' ��' ��% %�%�%' '%*C� �������� ��� 2�*��% �'% %�' �'� '�� ''� %�%��% �%� ��� %%*C� ����������, ��� ���� �*����� ������� ���� 2�*%�% %%' '%' �'� �%% '�' '��*C� �������� ��� 2�*'�' ���%�� %�' �'% '�' %�� ��'*C� ����������, ��� D'? ������������ ������6�� ) � ������������� �� .,0J ������� �� ���������� =,2����� � �������� )������ ��� ������������ ����� � ���"�� �� ����, �������� �������� ��� ����@���������� ) ����� � ������������� ������� &8D�C=== D' ���� #����(,

��������������� �%����� ���� ��� (�!6�) D�� 9.9 �� � ������ ����� �� � 2= � �� ���� +��� ���� ������ ��4� ��4� ��� �� � ����� �������� �� �)����� �� ������������� ��� 9 �, ��� �� � ���� ������)��@���� ��� �� � ���� �� � �3�������� )����� ���������� 9= ��8D8� �� 0,2 B== � ��' . � �' 9 =,2 � ��� ��������������������� ���� &8���( =,. � ��� ���� �� *)��&�*�������� �����(*� � �� ��*����������� ���� .J ������� D*B= =,2 � ��� ��� . ����� ���� �� ��� +������ &D�5( ��� ���� ����)���� ��� C= ��� �����, ��� ����� ��� ��� �3����� ��� ������������ ��� ������ �� K>=�'&��� ��*:������ �� �� .//C(, ����� �������)����� ���� 9�� �� &��*�'( ����������6� ���������� ��� .2�� �� ��� ����� ��� ��� �3����� ��������)���� �� � )������ )����� ���������� .= � ����*�' �� 0,/ =,. �8��� 9 � ��� . � D�5 2J � ���� ��� .== � �' ���������3����� .= === ��� �� ����� �� C9D* �)� �� ���)� ��� C= ��� ������ �����������, ��� ��@������ �� ���� �*�������� � ������ ������� ����5*�4 ���� 2�*�%� �%� %%% %�' ��� ''' �%% '*C� &�����'��� 4�������� ��( ��� ��� )������ ���� ��� �5*�4 ��� 2�*�%� �%�%%' %�' ��� ''' �%% '*C� &����� '��� 4�������� ��( ��� �������� �5*�4 �����, ��� ��@������ �� ���� �*�������� � ������ ���������� �D*. ���� 2�*'%'��%�'�%�'�'�%''%%��*C� &����� '���4�������� ��(, ��� )������ �������� ��3����� ���� ��������� ���� ����� ������ ������ ���)�� ) � ������������� �� � ����"� 2J &��<"� (�� ��� ����� �� �� ������)�� ) ������)�� �� �� &./>/(, 5�� �������������� B�� �� ����*�5*�4 �;2 ����)�� �� ��������� ��))�� ����� ��������� �� ��� �������� ��3���� ���� ������� ���� ��� ��� ��� �3�����, ����������� ��3���� ��� ��)7����� �� � ������������� �� ���"���� ������)����� ���������� ��� �� � ���� ����� ��� ����������������,

H:1, ..2 �:, B :'�:48? 9=== %1!':':?��':��� �!%8�� '��:���8 D?:�!'��:� :5 �8?����:'��8� 343

Page 3: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

7����� � ���%��� ������ ��� ��� �3������ ���� �������� ��������)�� �)�"� &1������ �� �� .//;(, -������ ������) �� ��� ��� ������������� ) ��� ������ ������)�� ���"���� , 8@�� ������� �� ��� ����� ���� ����� �3����� ������� &2=��( �� ���������� ) � 4������� ����&4��*��� ?������� '�( ���� ����� ���� ���� ��� �� �������� /J���*�� ��� ����� �� �, ����� ��������� �������� ���� ����������� ������ "�� ����� ��+������ &DH�5( ���)����� &���� ���� #����(, ������)����� ���� ���� �������)���� �"������� �� B�' �� ���������*)������� �� ��� &D4�( �� 0,; ���������� =,=2J �����*9= ��� 2J ������ � ��� ���� ����)���� �� ����*�5*�4 �;2 ����)�� �� ���� .A9== ��D4� �� B�' ��� > �, ��� ���� �������� ������ �� D4� ���������� =,=2J�����*9= ��� ����)���� ��� C= ��� �� ����������� ����3�����*���7���������� ������))�� ������� �) �� �� ���� .A.=== �� D4�, ������������"�������� ��� �������� ���� �� �������� ����� ����������� ��������� ���&�������� ������������ !,�,(,

?8�!1��

�5��� �� "���� %�� ��� �5��+ �� �� ,�, ���� ��� ��������� �� ,�, ���� %� ��� �� ������� �� ������# ��������#�� ����������� ��� ������� �� ���� ���� D�� 9.9 �� � ����������� ) ����)����� D�� 9.9 �� � ���� ��� ������

������������� �� ������� �A =,. � ��4� =,. � ��4� ��������� =,=.J � .=�� ��� � ��� �� ��������� ��� .,=�� ��� � �84 �� � ������������, ��� ���������� �� �1*.� ��� �������� )����� ����� ���� ������� ��������� ������������ �� �� �� �������,��5*� ��� � �� ������ �������� ) D�� 9.9 �� � ����� ���� )� ����� ������� �, �� �������� �������� ���������� �� �1*.= ������ �)���"�� �� D�� 9.9 �� � ����� ���� ) �� �� ��� ������� �&��� �(, ���� �� ���� �� ���� �)������ �� ��� ����������� ��������� ����� ���� �������� �� � �� 4�14<' ���� &���� ��������(, �1*.� ��� ���� ������ �������� ) D�� 9.9 �� ������ ���� ) ��4� ������� �84 ������� ��� ��������� ����������� ��5*� ���� D�� 9.9 �� � &��� �(,

������ �� ������������ �� ��� �5��� ��������� �� �� ,�, ���� �� ����� %� ��� ���� ��� �������� �� ����*��������� �� ��� D�� 9.9 �� �� ���� �������� �1*.� ������������ D�� 9.9 �� �, ���� ����������� ��� �� �)���"�� D�� 9.9�� � ����� ���� ) ������� ��� ���������, ������������*����� ����D�� 9.9 �� � ��� ��� ���� ���� ����������� �� �1*.����������� &��� ,&(, ��� ���������� �� ��5*� ��� �1*.= )������� ����� ���� D�� 9.9 �� � ��� ��� ������ ���� ) .=K.= ������������� &��� ,' ((, ��� ����������� �� �1*.� )������������� ��� �)���"�� �� ��4�*����� ���� �������� �� ��� 4�14<' ���� &��� ,�(,

��� ����*��������� ������ �� ������������� ��� ��� ��� ��������� ����� ���� D�� 9.9 �� �, ?� ���"� ���� ���������*����� �� ������������� .=K.9*.=K> ������ �������� �1*.����������� �� D�� 9.9 �� � ����� ���� ) ������ =,. � ��4� =,=.J � &��� 8& '( ��4� �� ��� &���� ��� �����( �������������������� ��� ��� ������� �1*.� ���������� �� D�� 9.9 �� ������ ���� ) �84 &��� 8((, ��� ������ �� �1*.� �������� �� ����� ���� ����� ��� ��� ��� �� �� ����� ������ ) ��� �����3�������� �� ��4� �� ������������� �� "��)� �� �� D�� 9.9 �� �)����� ��� ����� ��� �3��������� ��� ���������� �� ���� ���� /0J���� �������� ) ��� ����� ) �� �� �3� ����� ����,

'����������� ������� ��� �������� �� �5��� /���� ����� ���� ����� �� �� ,�, ���� �� ����� %������� ��� ���������� �� �1*.� ������� ) ��4�*�������D�� 9.9 �� � ��� ������ ���� ) ������������� ���������, ?�*D'? ��� ��������� �� ������ ��� �?�� �3�������� �� �1*.� )D�� 9.9 �� � ����� ���� ���� ������� ��� �������������, ������� �� ��� 4 ��� ����� ����� �� D�� 9.9 �� � ���� =,. ���4� �� =,. � ��4� ��� 9 � ���� ��� �� � B*�� � ������ ������� �1*.� �?�� �3��������, ���� ������ ���� �?�� �3����������� ������� �������� .,/ ��� .,2 ����� ��������"� ) .=K>

������ �& ������� �� �������� ������ �� ��� ������ �� �����������������& D�� 9.9 �� � ���� ����)���� ��� 9B � ���� "���� � � ���&'����� ( �� ���� =,. � ��4� =,. � ��4� =,=.J � .=�� ��� � ��� .,=�� ��� � �84 �� �8, ��� �� ���� ������������ ������ ����� ��� �1*.� ��5*� ��� �1*.= ���� �������� ) 81���, ������������� ��� ����� � �� �� ���� ����������� �3���������, � ���������� ��� ��� ��� ��������� ����� �������I� � ���� ���� �� N =,=2 ��� ��� N =,=.����� ������ &"���� � � ���(,

������ ,& ������ �� ������������ �� ��������� �� ����� �������� %� �� ,�, ������ ����� �� ���� �� ����� $��� "��6#9��6# 696# !6# �� 6��& D�� 9.9 �� ����� ����)���� ��� 9B � ���� "���� � � ��� &'��*��� ( �� ���� =,. � ��4� =,. � ��4� =,=.J � .=�� ��� � ��� .,=�� ��� � �84�� �8 �� ��� �������� �� �)����� �� .=K.= �������������, ��� �� ���� ������������ ������ ����� ��� �1*.� & ( ��5*� &�( ��� �1*.=&�( ���� �������� ) 81���, ��� �� ���� �����*������� �� ��4�*����� ���� ����� �������� �� � ���� �������� �1*.� &�(, ��� ���� �� �����*���� ��� ���� �� ����� ����������� �3���������,H� ��� ��� ��� ���� � �� �� ����� ��������*������, � ���������� ��� ��� ��� ���� ������������I� � ���� ���� �� N =,=2 ��� ��� N =,=. ������ ��4� ��������� �� ��� �)����� �� ���������*����,

341 ���O��� �� � ��8 #:!?��1 :5 ��H8���%���H8 �8?��:1:%�

Page 4: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

������������� &��� 4(, � -������ ) �� ��� ��� �� �5*�4 ��"�� ������ ������������� �������� ��� ��� ��� ����� ������� �� �;2 ���5*�4 �� ��4�*����� ���� &��� :# ���� �( �� ��4�*����� ����&��� :# ���� �( D�� 9.9 �� �,

����� ���� ����� ����� %� ������ ��������� ����%��� %��9"� �� 8�� ��� ��������� �� ��"�������� ������� �� ���������� ��������� �� �84 ���� ��"� "�� �� ��� ����"����� �� �5*�4, �5*�4 ����"����� ��� ������� �� D�� 9.9 �� � ) ���������������� ������������ ��� �������, =,. � ��4� =,==9J�3��� ��� ��� .,=�� ��� � �84 ����"���� �5*�4 ������ ���=,. � ��4� .=�� ��� � ��� ��� =,=.J � ����"������������ &��� .&(,

D��' �� �� �����3����� ���� ���� �� � ������ ���"�����, �� �� ������� ����)���� �� �5*�4 ����"����� ��� 2=� D��' �� �� ������� ����)����� �� ��4�*������) � ��� )������ �� �5*�4&��� .'# ���� �(, � .==*�� � �� �� �3���� �� ��� �5*�4� ������ ������ ���� ��� � �������� )������ �� ��� �3����� ������4�*������� D�� 9.9 �� � &��� .'# ���� �(, �� �������� � .==*�� � �� �� �3���� �� ��� ������ �5*�4 � ������ ������ ��� ��� ������� &��� .'# ���� �(,

'����������� ������� ��� �������� �� ����� %��������� ��� �� ��������� ����� �� ����������� �����# %����� 6����� �����# �� ,�, ���� ������������� ����������� �5*�4 ����"����� �� D�� 9.9 �� � ����� ���� ) ������� �, �

������������� �� .=K;K.=K> ������������� �������� ������������ �� �5*�4 )������ ����"�� �� ��4�*����� ���� D��9.9 �� � ������� .=K.= ������������� ��� �� ������ �� ���)������ ����"�� &��� 3&(, ��� �5*�4 ���� �3 ��� ������������ )�������� ������� �;2 )�� ��� ) ��� ������ ��% &��� 3'(,'������������� �� .=K> ��� .=K.9 ������������� ������������"����� �� �5*�4 �� �*����� ���� D�� 9.9 �� � &��� 3((,������������� ����)���� ������ ���� �������� ��� ��������� ���5*�4 �� �84*����� ���� D�� 9.9 �� � ����"�� &��� 3�(,

�9"� ����%�� ������������������ ����� ���� ������� �5��� ������ ��� ��������� ����� �� ,�,���� D��' ����)���� ������ �5*�4 ����"����� ) ��4�,D��' �� ���������� �� ����)�� ������������ �� �1*.� �� ������� �5*�4 ����"����� ) �������������, �� ����� �� ��� 1 2= � D��' ������ ����)���� �1*.� ���������� ) D�� 9.9�� � ����� ���� ) ������ =,. � ��4� � ��� �� � ���)������� ��=,. � ��4� ��� .=K> �������������, ��� ����)���� ���� ���5*�4 ����"����� �� D�� 9.9 �� � ����� ���� ) ��4� � ��� ������� ��������� ���� ���� �� �1*.� ���������� ������� �� ���� ���� ��� ���� �� �1*.� ���������� �� ��� ���� �� D�� 9.9 �� ������ ���� ) � ���)������� �� ��4� ��� ������������� &��� 1(,

������ 8& 9��������� ��� � �� �5��� ��������� ��� �� ,�,���� �� ����� $��� ������ �� �������� �� ��� ������� �� ������� �� ������������& D�� 9.9 �� � ���� ����)���� ��� 9B � ����=,. � ��4� & ( =,=.J � &�( . �� ��� � �84 &�( �� �8 �� ����������� �� �)����� �� ������������� &.=K;K.=K.; (, ��� �� ���������������� ���� �� ����� ��� �1*.� ��� �������� ) 81���, ������� �� ��������� ��� ���� �� ����� ����������� �3���������, H� ��� ��� ������� � �� �� ����� ��������������, � ���������� ��� ��� ��� ���� ������������I� � ���� ���� �� N =,=2 ��� ��� N =,=. ����� ��� �1*.� �� ����������� ) =,. � ��4� �� ��� �)����� �� �������������,

������ 4& "�� �������� �� �5��� /�� �� �� ,�, ������ ����� $��� ������ �� ��� ������� �� �%���� �� �������������& D�� 9.9 �� � ���� �������� �� ������)�� �� �������� ��� �������,��� �� � ���� ����� ���� ��� 9 � ���� =,. � ��4� ��� =,. � ��4��� ��� �������� �� �)����� �� ������������� & (, ���� ��� �3������� �� ����� ���"� ������������� "� ��� ����� ���� �� "��������� �� �*����� ���� ������� ) �� &�(, ��� ���� �� ��������� ��� ���� �� ����� ������������3���������, H� ��� ��� ��� ���� � �� �� ����� ��������������, ����������� ��� ��� ��� ���� ����� �������I� � ���� ���� �� N =,=2 ����� ����1*.� �?�� �3�������� ������� ) =,. � ��4� �� =,. � ��4� ����� �)����� �� �������������,

H:1, ..2 �:, B :'�:48? 9=== %1!':':?��':��� �!%8�� '��:���8 D?:�!'��:� :5 �8?����:'��8� 34;

Page 5: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

���� �� ���� �� ���� � �� �)���"�� �� D�� 9.9 �� � ����� ���� ����� &���� ��� �����(,

'����������� ������� ��� ���� %����� ���� ��� ��"��6��� ����� �� ,�, ���� ��4� &=,. �( ��������D*. )������ ����"��, � �� .=K>K.=K.= ������������� ����������� �D*. )������ ����"�� �� ��4�*����� ���� D�� 9.9 �� �

������� .=K; �� .=K.9 ������������� ��� �� ������ �� ���)������ ����"�� &��� ;(,

���'!���:�

��� ������ ����������� &��4� ��� ��4�( ��� ��������� &� ������( ��� �84 ������� ��� ���������� �� )��� �1*.� ��� ��5*�)�� ��� �1*.= ���� �� ����� ������ D�� 9.9 �� � &��� �(, ��4���� ��� ��������� ������� �� �1*.� ������� �84 ��� ��� ���������������� �� ��5*�, ����� ���� �������� ���� ��� ��������� �������� ��������� ���������� ��� ������� ��������� ��� ���� ������������ ������� �� ������� ����� ��� ���� ��������� ���������)������ ������� ����������� ��������� ��� �84,

������� ��������� ��� � ������������ ����� ���� ��� ����������������� �� ������������, ��� ���������� �� �1*.� ��� ��5*�

������ :& ������ �� ������������ �� ������� ������������ �� �������� �.: �� �� ,�, ���� �� ����� $��� "��6 �� 9��6& D��9.9 �� � ���� ����)���� ��� 9 � ���� =,. � ��4� &����� � �( =,. ���4� &����� � �( �� �8 �� ��� �������� &����� � � �( �� �)����� &������ � �( �� .=K> �������������, 83����� �������� &2=�� ��� ���( ������������� ) ���*�� ��� ����� �� � ������������� ��� ���� ����� �����*) ����� �� DH�5 ���)�����, ������*�������� �� ��� ���)�������� ��������� ���� �������� �����6� ��� ��� �;2 �� ��� ������ ������������)�� ��� ����������� ����3�����*���7������ ����� ������))�� ����������� ��� ��������� ����� ��� ����)��, ������) ��� ���� ��"� ���� ������� �������� ����� ����������� -������ ) ������ ���, ����� ���� ����������� ��� 6������ �� ����� ����������� �3���������,

������ .& ���� ����� �� ������������ ������ ����� �� �� ,�, ������ ����� $��� ����� ��� ����& D�� 9.9 �� � ���� ������� ���� ��������� =,. � ��4� =,. � ��4� =,===9J �3��� ��� .= �� ��� � ��� =,=.J � ��� .,=�� ��� � �84, ��� ��� ������� �3������ ������������ ��� ����)���� ���� ����� �)� �� � ������ ������ ���)��, ������� ���� �������*��� ���� �3�� ���� ��� ��� ) �� 8�� & (, D��9.9 �� � ���� ������� ���� 2=� D��' ��� . � ��� =,. � ��4� ������� ����)���� ��� 9 � &�(, ��� ���� .==*�� � �� � ������ �������������������� �� ��� ������ "������ �� ��� �5*�4 ����� ���� ������� ����� )������ �������� &�(, ����� ���� �� ��������� ��� 6������ �� ��������������� �3���������,

������ 3& ������ �� ������������ �� ��� ���� ��� �� ������������������ ����� �� �� ,�, ���� �� ����� $��� "��6& D�� 9.9 �� ����� ������� ���� �� ������� =,. � ��4� �� ��� �������� �� �)����� ��������������� &.=K;*.=K.= ( & (, ��� ��� ������� �3������ ���� ����������� ����)���� ���� ����� �)� �� � ������ ������ ���)��, ��� ���� �����������*��� ���� �3�� ���� ��� ��� ) �� 8��, (�( ��� ����� ���������� ���� ����� ��� ����)����� ������� �;2, D�� 9.9 �� � ��������� ���� ���� =,=.J � &�( . �� ��� � �84 &�( �� ��� �������� ���)����� �� ������������� &.=K;*.=K.9 (, ����� ���� �� ��������� ���6������ �� ����� ����������� �3���������,

3:+ ���O��� �� � ��8 #:!?��1 :5 ��H8���%���H8 �8?��:1:%�

Page 6: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

��� ������ ���� )�� ���� �� �1*.= �������� ���) �, ��� �������� ��.=K;*.=*.9 ������������� �� ��� ������� ����� ���� ��������*���� ��������� �1*.� ����������, �� ���� ������������ ����)���"�� �� ������ ��� ��5*� �� �1*.= ���������� �� ���� ���� ����"��, �� �������� �� ����� ���� ������ �� �� �������� ���� .=K2*.=K; ������������� ������� )��� ��� ����������"� ��� � ���"��* ��*� ������ �� ���� �� �������� ������� ����"����� ������ &8��5() D�� �� � &������ ��� ������ ./>;(, ��� ������ ��� �������������� )������ ��� ���� ��� ����� �� ������ �� �� ������������� �� )� ��� �� ��� ��������� ����� ����� ������ �� D���� � ��� ��� ��������� ���� ������ �� ��� ����� ��� ����� �����, ����� ����� D�� 9.9 �� � ���� ����� ���� ) ������� �$ ����"�� �� ����� ����� ��� ���� ����� ���� ) � ���"�� �� ���������, -���� ��� ������� ����"�� ����� ��� 81��� ������ ������� ������ ���� � )������ ������@�� �� ��������� ��� 8��5 ����"��, ���8��5 ����"�� �� � ���)������� �� �1*.� �1*; ��� ��5*�����"�����, 8"�� �� ��� ����� ������ �������������� &.=K;( �� %'����)���� ��� ���������� �� �1*; ������� ����� ����� &���� ��������( ��� ��� ��� ������� ��� ���������� �� �1*.� ��� ��5*��� D�� 9.9 �� � ������� ����� ����� &��� 8&-((, ����� ������������� ���� ��� 8��5 ����"�� �� ���� )� ����)���� ) .=K; %'���� D�� 9.9 �� � ������� �� ����� ����� �"�� �� ��� �����, �� ��� ���� ����� �)���"������ ���)��� ������ �������� ���� ������� �� �������������� �������� '�� ������� ���� ����� ���������������� ����)���� '�� &���)��� ��� �8��� .///(,

%' ����)�� �� ��+������� �������� ) ��������� � "����� ����������� � ������, %' ��"� )��� ����� �� ������ ��� ������������ ���*��+������� �������� ���� �� �1*. &����� �� �� .//C( ��5*� &����� �� �� .//C( ����������*� &'������ � �� �� .//2( �1*9 &H���� �� �� .//=( ��� ��������� ����)���� ������ &�5(&'� ����� �� �� .//2(, :� ��� ����� ���� %' ������ ��� ����3�������� �� ���� ������� ��������� �� �1*;? �1*.? ��� %*'�5*? &����� �� �� .//=$ � ���� �� �� .//;(, �� ��� � �� ������ )��� ������������ ���� ��� ������ ��� ������� �� %' ��������)��� � ����� ��� ���� ����� ��������� �������� &�)���� �� �� ./>B$����� �� �� .//0( ������� ��� ���� ���� ��� ������ ��� ������� �� %'���������� ��� ���)�� �� �������� �K�P 1��������� �� � �� ������������ ��� � ��� ����� ������ �� ���� &�)���� �� �� ./>B(, ���

������� ��������� �� %'*������� ������������ �� ������������������ ����"�� ������� �� )� �� � ��������,

� �� ���� �� %' ������ ���� �1*.� ���������� ) D�� 9.9�� � ����� ���� ) ������� ��� ��������� &��� ,&( ������� ������������� �� ��5*� �� �1*.= ) ������� ����� ���� D�� 9.9�� � ��� ��� �����6���� �������� �� ��� �������� �� %' &��� ,'#((, %' � �� ������ ���� ��� �3�������� �� �?�� ��� �1*.� ��������*����� ���� D�� 9.9 �� � &��� 4(, ����� 6������ ������������ � �� ���� �� %' ��� ��� �)� �� �� ������� '�� ������������� ����� �� �1*.� ���������� �� ������������, ��� �� ������������������ �� %' ��� )��� �������� �� ������ ��� ��� ���)���� �5*������"� �� � �� ������� ���������� &� ��� �� �� ./>>( ��� �� �����6���� ������� ���� �� ���*��� �����������"���������� ��������� � �����6���� �������� �� ��� ���)�� �� � �� ��� ��� ��� ����� �������� ��� �� ���*��� �����������"���������� ���� &���)��� �� �� .///(, %' ������� ��� ���������� ���������� �� ���� ��� ��� ���� ��������,

��� ������) � �3�������� �� �1*.� �� ���� ���� "�� �������������������� ���� �5*�4 ��� �D*. &1�� �� �� .//B(, ���)�� ��� ��� *����� �������� ��������� �1*.� �������� ��� �5*�4����"����� �� ������ ������������ &'������ �� �� .//;(, '����������������� ���� �� ��' 9 ��� '�' 9 ������� �5*�4 )����������"�� ���� ��)��@���� ���� ���� ��� ������������� �� �1*; ���H'�*. ����� �� ����� ������� �� �� � &'��)� �� �� �� .//2(,����� ����� ) ����������� ���� ���� ��� ������ �� )� ���������� �������������� �� ������� �� �� � �� )�� �� � �� ���� �� ����� �� ���� ���� �� ����������� �������� ��� 6)��) ���� &���� ���

������ 1& ������ �� �9"� �� �5��� ������ �� ��� ���� ��� �������������� ������ ����� �� �� ,�, ���� �� ����� $��� "��6�� '�& D�� 9.9 �� � ���� ������� ���� 2=� D��' ��� . � ������ ��� ���� ����)���� ��� 9B � ���� "���� � � ��� &'����� ( �� ���� =,. ���4� �� ��� �������� �� �)����� �� .=K> �������������, ��� ���������� �3������ ���� �������� ��� ����)���� ���� ����� �)� �� � ���*��� ������ ���)��, ��� ���� ���� �������*��� ���� �3�� ���� ��� ���) �� 8��, ��� �� ���� ������������ ���� �� ����� ��� �1*.� ����������� ) 81���, ��� ���� �� ��������� ��� ���� �� ����� ������������3���������, H� ��� ��� ��� ���� � �� �� ����� ��������������, ����������� ��� ��� ��� ���� ����� �������I� � ���� ���� �� N =,=2 ����� ����1*.� �� ���� ���� D�� 9.9 �� � ����� ���� ���� ��4� � �� ����*��������� �� ��� �)����� �� D��', ����� ���� �� ��������� ��� 6������ ������� ����������� �3���������,

������ ;& ������ �� ������������ �� ��� ���� ��� �� ������������������ ���� �� �� ,�, ���� �� ����� $��� "��6& D�� 9.9 �� ����� ������� ���� �� ������� =,. � ��4� �� ��� �������� �� �)����� ��������������� &.=K;*.=K.9 (, ��� ��� ������� �3������ ���� �������� �������)���� ���� ����� �)� �� � ������ ������ ���)��, ��� ���� ���� �������*��� ���� �3�� ���� ��� ��� ) �� 8��, ��� 6���� ����� ���� .=K>*.=K.= ������������� �������� ��� ����"����� �� �D*. �� ��4�*����� ���� D�� 9.9 �� �, ����� ���� �� ��������� ��� 6������ �� ���������������� �3���������,

H:1, ..2 �:, B :'�:48? 9=== %1!':':?��':��� �!%8�� '��:���8 D?:�!'��:� :5 �8?����:'��8� 3:�

Page 7: Glucocorticoids Augment the Chemically Induced Production and Gene Expression of Interleukin-1alpha through NF-kappaB and AP-1 Activation in Murine Epidermal Cells

�� �� .//B(, ��� �� ��������� )�� � �� ������� ��� �84 ��������5*�4 ����"����� �� D�� 9.9 �� � �� ���� �3�������� &��� .&(,������������� �� � ������������� �� .=K> �������� ������������� �� �;2 ������� ��� �� ��� �5*�4 � ������ ) D��9.9 �� � ����� ���� ���� ������ ��4� �� ��4� &��� :( ������������ ��� )������ �� �5*�4 �� ������* �� ��������*����"����D�� 9.9 �� � &��� 3&# ((, ��3���������� �������� ����)� *�����*������� �1*.� ���� �3�������� ��� �5*�4 ����"����� �� ��������� ������� �� ��� &-��� �� �� .//0(, %' �� ��"� ���)� �� �� ������� �5*�4 ����"����� �� ������� ����� ���� �� ���� ����� ������������ ��� ��������,

��� ����������� �� �5*�4 ����"����� ��� �������� �� ��4�*�� �*����� ���� D�� 9.9 �� � �� ����� �� ��� �������� �� .=K;*.=K> ������������� &��� 3&# (( ������� ��� ����������� ���1*.� ���������� ��� �)���"�� ��� � ����� �� ��������������������������� )������ .=K; ��� .=K.9 , � �� ���"� ������������������� �� ������������� ����"���� �5*�4 �� ��������)� ����1*.� ���� �� ��� ��� ���� ������� � ���� ���� ��������������� �� ������ "������ �������������� ����� � ��������� �5*�4 �� ��������� �1*.� �� ��� �� �� ��� �����,

�5*�4 ����"����� �� ������ ������ �� ) ������"� �3���������� ��� ��� �� � �� ����3 ����� ��� ��� )� ����)���� )�����3�����, �� ���� �3�������� ��4� ������� ��� ������ ����"������� �5*�4, ���� ����"����� ��� ������ ����)���� ) D��'&��� .'( )�� ��� ) ����*��5*� ����� ��� ����)����� ������*�1*.� ����� ��� ����)����� &���� ��� �����(, D����������� �1*.� ������� )��� ) ��4� � ��� ��� ) ��4� � ��������������� ��� � �� ������ ����)���� ) D��' &��� 1(, :��6������ �������� ���� ��� ����3*��������� ������� ���� ��"� "����� %'*��������� ����������� �� �1*.� ���� �������������, ����� ����)����� �� �1*.� �?�� �3�������� ��� �1*.� ������������� ������ ��� �� ��� �3�������� �� �� ��� ���� ������������������� ������� ��� � �� ��"� "�� �� ��� �1*.� ����������������� �� ��4�*������� ��� ��4�*� ��*�������������*������� �1*.� �����������, �� �D*. �� ���������� �� )� ��� �������)�) � ��������� �� ��� ����� �������������� ������ �� �1*.������������ &1�� �� �� .//B$ '������ �� �� .//;( ��� �D*. ����"���� D�� 9.9 �� � ��� � �� �3������ ) 8��, ��4� ��������D*. ����"����� �� D�� 9.9 �� � ��� �� �� ����� ���� ����������� �D*. ����"����� ��� �)���"�� �� D�� 9.9 �� ������ ���� ) ��4� �� ��� �������� �� ���� ����� &.=K>*.=K.=(�� %' &��� ;(, ����� ���� ��������� ���� %' ��������� ������������� �� �1*.� �� ��� D�� 9.9 �� � ����� ���� ) ��4�������� ��� ����"����� �� ��� �� �5*�4 )�� �D*. �� �� ,� ������ ������� ��� ����"��� ������������� ������ �5*�4 ����D*. ����� ��������� ��� ���)�) �� ��� �� ��� ������� ����������� �3���, ��� ���� �� %' ������� ��� ������*������� �5*�4 ��� �D*. ����"�����Q %' � ��� ��� ��� ������ �1*.� �� �������� D�� 9.9 �� � ��� ��� ��� ����"��� ������ �5*�4 ��� �D*., ��%' ������� ����� ������������� ������� �� �� ��� �������� ��������� �� ��������� )�� ��� �84 %' ���� ������ �������� ������� ������* �� ��������*������� ����� ������������ ������ ���"������ ��� ������ �� ��� �5*�4 �� �D*. �3��������, ������������) � ��������� �� ���� %' �� ���� ��� � ������"���� �����D �������� � ����� )������ ������� ����� ���� ��������� ������� ����"����� �� �5*�4, ��� �3��� ��������� �� ��� ����� ������������ ������ ���� �� �������� ) %' �� ��� �������� ��������� �� ��������� ����"�� �� ��� ��� ���, �� � ���� ��������������� ������� ��"����������� ���� � )� ���� �� ��� ����������,

�� ���� ����� &�( ��� �� ������� ��� ��������� )�� � �������������� ������� ��� ���������� �� �1*.� ��� ��5*� )����� �1*.= ���� D�� 9.9 �� �$ &��( %' ������� ��� �������������� ��� �3�������� ��� ���������� �� �1*.� �� D�� 9.9 �� ������ ���� ) ������ ������� �� ���������$ ��� &���( ��� ����"����� ���5*�4 ��� �D*. �� ��"� "�� �� ��� ������������ �� �1*.����������� �� ������*����� ���� ������ ������������ ������� )%', 4���� �� ����� 6������ ��� ��������� ��+������� ��������) %' �� ��+��� ��� ������������ �� �1*.� ���������� )

������������ �������� ������ ������� ��� ����"����� �� ��� �5*�4 ������,

���� ��� ��� ���! �� ���� "! #����������� $%��& '��(')�� '(��(�)*

�'�('()�+ ,�- ��� ������! �, ���.����� �, /� ��&

?858?8�'8�

�)���� - ����� 1 D�������� � ����� %A 8����� �� � ������������������ ���������� �� *������� ������ ���������, / 0--���� .CCA0/9K0/0 ./>B

� ���� -� 4���� �� ?����� �� ?����� #A ?��� ����� �� ������� ���������� �������� �3�������� ) � ������������, / ����� ���� ;=A2;CK209 .//;

����� � 1�� �- � ���� �'A ����)����� ) � ������������� �� ��� ��������� �� �1*.� �1*.� ��� �1*;A ��������� ) �������� �?�� ���)� ��, ��� 1��-�.��BCA.0BK.>9 .//C

���� # D��� D 4���� # �� ��A '������ ���� ����� �� ����������� ��������,/ 0����� ��-���� /BA.=.�K.=0� .//=

���� ��� � %����� D �� ��)���� �5 H����� ' ����� �4 -� ���� 4A ����� ����3 ���)����� ��������� ����� �������� ������ � ��� ��� ����� �����*;��������� ) � "�� �� �����������, / � ��2�.�� .BAC02KC0/ .//B

4����� #�-� ���� ?� %���6��� %8 ��3�� H ����� ��� 4#A ������������ ������������ �� ��+��������, ���.�� CC0A9..K9.B .//.

'� ����� � 4�������� # ��� '� �� ��A �5 �� � � ������������*����������� ���� �� ������� ����������, %���� C00A;>K0. .//2

'������ � ���� � H������� H %���� #�D 4����� # ����� ��A ������"��������������� ���� ����� �� ��� �5�*� �������� ) � ������������� ����������� ������"� ������� �� �*#��, / ���� ���- 90=A.92B>K.922; .//2

'��)� �� ?��� 4������ 84 ���� ' ���� ��*:������ �A ����"����� ����� ��� ������*�4 ��� ���� �3�������� �� ����� ������� �� �� � ) ��������� ������� ����� ��� ��)� �, / 0--���� .22A9B2/K9B;0 .//2

'������ 8 ����)��� ' �����"��� %� � '1A ?� � �� ������������ �����)�� ���*������� ����� �����*. ���������� �� ������ ������������, / 0�������-���� .=0A09=K092 .//;

���)��� 5� �8��� 4�A 8�������� "����� ���������"� ������ �� ������ �������� ������ ������ ��������, 1�. %��� .�� 3.� 43 /;A.=2/K.=;B .///

8�� �� ���� ��A 8�� �� ��� �� �"���� �� ��� ��������� ����� �� ������� �������"��,1�. %��� .�� 3.� 43 >/A.C/>K.B=9 .//9�

8�� �� ���� ��A ������6������ ��� ��������� �� �����������*����"�� �1*.=,/ 0--���� .B/A/9K/2 .//9)

%��))� � 1���� ��A ?���"� �� ��� ��7���� �� �������� 1��������� �� � )������ �� ������� ������� ��� ������� �������� ��� �������� ����� �� ������������� �����������"��, / 0--���� .22AB9=0KB9.0 .//2

����� � ������� � ��������� � ����� � �������� � �������� �A ������ � ������������ �������� )��� � ����� ��� ���*� ����� ��������� ��������� ������ ���� ��� ��� �� �������� ����� �� ������� �������"��, ���#�� 0�� B;ACCKB. .//0

������ �� ������ #A ������������� ������� )��� ����������"� ��� !H*� �������� ���� �� �������� ������� ����"����� ������ &8��5( ) �� �����������������, / 0����� ��-���� >0A20=K20C ./>;

1������ #� 1��� #� ��� � ?��� � 1������� ��A ?��� ����� �� �5*�4 ����"������� � �� ��� . ��� � �� ��� 9 �� �, / 0--���� .2;A2;K;C .//;

1�� -� 4�� �� �D 1�������� 5 5����� �A ����� ������������ ���������"� "�� �� ����)� ����� ��� ��������� ��������� �� ����� �����*.� �?�� �������� ������������, / ���� ���- 9;/A.0/0.K.0/>= .//B

� ��� ! ����� # 4��������� % ���� 'A ������������������ ��������������� ��������� ����)���� ������ &�5( �� �3��������� � ����� ������� ����������,���� �2 0--���� 0.A.;B ./>>

�������� � ������� � �������� � �������� �A ������������*������� ��������3�������� �� �����*�� ����� ����� ����, / ��-���� 3.� ..A.=BK..= .//;

?�"�� # ! ���� �8A ������� ���������� �� �� ���*��� �����������"�� )������������ ���� !H*���������� ������������, �� �������� �� � ��� ����������*����"�� �1*.=, / 0--���� .2AC>;2KC>0. .//9

�������� % D������*8 ��� � 4������ �A ������������ ������� 1��������� �� ��� ����� �� �������� ) �������� �� *����"�� �1*.� ��� ��5*�, ����0--���� .0.A9B=K9B2 .//;

��� ��*:������ � 4����� ? H����)����� H �������� % 5���� -A ��� ����� ����� ������������ � ������ ��������� �)������� ��� �����3�� ��� ����*�������"� ������� �� ��5, ���5 / .9AC=/2KC.=B .//C

������)�� 8D ������� ��������� -A ?���� ��������� �� ��������� )�������������� ���� R����*�3������I �������� ���� � ��� ���)�� �� �� �, %�.� .���6�� .0A;B./ ./>/

����� 1 -�� �1 '������ #A % ������������ ��*���� ����� �� ����*��6�������� ����� ; ��������� �� ����� ������ �� �� �, 1�. %��� .�� 3.� >0A9>C>K9>B9 .//=

H���� � ��������� � ��������� � �� ��A �������������� ���� ����� �� ��� �1*9 ����) � ������������ ��������A �� � �� ������� �������� ��� �������*��������"�2�*+������ ��@������, / ���� ���- 9;2A>=02K>=>= .//=

-��� � O���� ## ��� - 1�� �� D��� -A ��3���������� ������ ������������)� �����*������� �1*.� ���� �3�������� ��� ��� ��� ������ �5*�4����"�����, / 0--���� B2/A2CBK2C0 .//0

����� �� ��� �*�� ��� D ���� �� 4 ���� � #?A � ���"� �� ��������������������� �� ��������������� �������� �� ���� �� �� ����, ���.� 6�� B=AB;/BKB0=C ./>=

3:, ���O��� �� � ��8 #:!?��1 :5 ��H8���%���H8 �8?��:1:%�


Top Related