IDENTIFIKASI BAKTERI PADA SALIVA PASIEN
DIABETES MELLITUS BERDASARKAN
PEWARNAAN GRAM PADA PUSKESMAS CIPUTAT
TANGERANG SELATAN
Laporan penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar SARJANA KEDOKTERAN
Oleh :
Herlin Oktaviyani
NIM : 1113103000021
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN DAN PROFESI DOKTER
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA
1438H/ 2016M
LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
ii
LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
iii
iv
v
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT, Tuhan
semesta alam yang atas ridho, rahmat, dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat
menyelesaikan laporan penelitian yang berjudul “IDENTIFIKASI BAKTERI
PADA SALIVA PASIEN DIABETES MELLITUS BERDASARKAN
PEWARNAAN GRAM PADA PUSKESMAS CIPUTAT TANGERANG
SELATAN” sebagai salah satu syarat dalam menyelesaikan jenjang program
sarjana kedokteran di Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif
Hidayatullah Jakarta.
Penulis menyadari bahwa penelitian ini dapat terwujud karena adanya
dukungan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh sebab itu, penulis ingin
menyampaikan penghargaan, rasa hormat, dan terima kasih kepada:
1. Prof. Dr. H. Arif Sumantri, M.Kes, selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
2. dr. Achmad Zaki, M.Epid, SpOT, selaku Ketua Program Studi Kedokteran
dan Profesi Dokter Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas
Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
3. dr. Intan Keumala Dewi,Sp.MK dan dr. Sri Dhuny Atas Asri,Sp.P selaku
dosen pembimbing riset yang telah banyak menyediakan waktu, tenaga,
dan pikiran untuk mengarahkan dan membimbing penelitian dari awal
hingga terselesaikannya penelitian ini.
4. Kepala Puskesmas, pak Iskandar, dr. Tuti, dan seluruh Jajaran Staf
Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan yang telah memberikan kesempatan
bagii peneliti untuk pengambilan data dan penelitian.
5. Kedua orangtua penulis, Muhamad Rohmain dan Rina Herlina, yang
selalu mendoakan, memberi semangat dan motivasi, serta memberikan
dukungan baik moral maupun material.
6. Kakak penulis, Yuliyana Rahmawati, yang selalu mendukung dan
memberi motivasi dalam menyelesaikan penelitian ini.
vi
7. Para dosen dan staf Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas
Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
8. Teman-teman seperjuangan riset, Lutfiana Ulfah Uswandi, Nur Zahara
Irwan, dan Azizah Hasanatul Fikriyah Lubis yang sejak awal hingga
selesai selalu membantu dalam melewati berbagai hal dalam penelitian ini.
9. Kak Novi, Kak Karima dan Mas Fio yang membantu kelancaran saya
melakukan penelitian di Laboratorium Mikrobiologi kapanpun waktunya.
10. Teman-teman sejawat Program Studi Kedokteran dan Profesi Dokter
angkatan 2013 yang ikut memberi dukungan dalam penelitian ini.
11. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah
membantu penulis dalam menyelesaikan penelitian ini.
Demikian yang dapat penulis sampaikan, semoga penelitian ini dapat memberi
banyak manfaat bagi kita semua.
Jakarta, 20 Oktober 2016
Herlin Oktaviyani
vii
ABSTRAK
Herlin Oktaviyani. Progran Studi Kedokteran dan Profesi Dokter.
Identifikasi Bakteri pada Saliva Pasien Diabetes Mellitus Berdasarkan
Pewarnaan Gram pada Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan.
Latar Belakang: Diabetes Mellitus merupakan penyakit gangguan metabolik
akibat pankreas yang tidak mampu memproduksi cukup insulin atau keadaan
dimana tubuh tidak dapat menggunakan insulin yang diproduksi secara efektif.
Terdapat tiga keluhan khas dari penderita diabetes mellitus yaitu poliuria,
polidipsia, dan polifagia. Peningkatan kadar glukosa darah dalam tubuh
berpengaruh terhadap peningkatan kadar glukosa saliva yang memungkinkan
peningkatan pertumbuhan bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
bakteri dominan pada saliva pasien diabetes mellitus di puskesmas Ciputat
Tangerang Selatan. Metode: Penelitian ini menggunakan metode deskriptif
potong lintang. Sampel diinkubasi dalam agar darah selama 24-48 jam dalam suhu
370C dan dilakukan uji pewarnaan Gram. Hasil: Dari 35 sampel yang diuji
ditemukan 51 bakteri, ditemukan Gram positif coccus: Streptococcus 47% dan
Staphylococcus 19,6 %. Gram positif batang 31,4% dan Gram negatif batang 2%.
Kesimpulan: Bakteri dominan pada saliva pasien DM adalah Gram positif
Streptococcus.
Kata Kunci: Bakteri, pewarnaan Gram, saliva, diabetes mellitus
ABSTRACT
Herlin Oktaviyani. School of Medicine. Indentification Bacteria in Saliva of
Diabetes Mellitus Patient Based on Gram Staining in the Clinic Ciputat of
South Tangerang.
Background: Diabetes mellitus is a metabolic disorder due to the pancreas can
not produce enough insulin or the circumstances in which the body can not use the
insulin that is produced effectively. There are three typical symptom of people
with diabetes mellitus are polyuria, polydipsia, and polyphagia. Increased blood
glucose levels in the body, give affect of the increased glucose levels in saliva that
enables increased bacterial growth. This study aims to determine the dominant
bacteria in the saliva of patients with diabetes mellitus in the clinic Ciputat South
Tangerang. Methods: This study used descriptive cross sectional methods.
Samples incubated in blood agar for 24-48 hours in 370C and used Gram staining.
Result: From the 35 samples tested that find 51 bacteria. The bacteria are gram-
positive coccus, there are Streptococcus is 47% and Staphylococcus 19,6% , Gram
positive rods 31,4%, and Gram negative rods 2%. Conclutions: Dominant
bacteria in the saliva in diabetic patients is Gram positive Streptococcus.
Keywords: Bacteria, Gram staining, saliva, diabetes mellitus.
viii
DAFTAR ISI
LEMBAR JUDUL .............................................................................................. i
LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ......................................... ii
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................ iii
PENGESAHAN PANITIA UJIAN ................................................................. iv
KATA PENGANTAR ....................................................................................... v
ABSTRAK ....................................................................................................... vii
DAFTAR ISI ................................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... x
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xi
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. xii
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiii
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang .............................................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................... 2
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................................... 2
1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................................ 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 4
2.1 Landasan Teori .............................................................................................. 4
2.1.1 Diabetes Mellitus ................................................................................ 4
2.1.1.1 Definisi Diabetes Mellitus ...................................................... 4
2.1.1.2 Prevalensi Diabetes Mellitus .................................................. 4
2.1.1.3 Klasifikasi Diabetes Mellitus.................................................. 5
2.1.1.4 Patofisiologi Diabetes Mellitus .............................................. 6
2.1.1.5 Diagnosis Diebetes Mellitus ................................................... 7
2.1.2 Saliva ................................................................................................... 9
2.1.2.1 Definisi Saliva ........................................................................ 9
2.1.2.2 Anatomi dan Sekresi Kelenjar Saliva ..................................... 9
2.1.2.3 Komponen dan Fungsi Saliva ............................................... 10
2.1.3 Flora Normal Saliva .......................................................................... 11
2.1.3.1 Streptococcus viridans .......................................................... 11
2.1.3.2 Staphylococcus sp ................................................................. 12
2.1.3.3 Lactobacillus sp .................................................................... 14
2.1.4 Cara Identifikasi Bakteri ................................................................... 15
2.1.4.1 Pewarnaan Gram................................................................... 16
2.1.5 Agar Darah ........................................................................................ 18
2.1.6 Manifestasi Diabetes Mellitus dalam Rongga Mulut ........................ 19
2.2 Kerangka Teori............................................................................................ 20
2.3 Kerangka Konsep ........................................................................................ 20
2.4 Definisi Operasional.................................................................................... 21
BAB III METODE PENELITIAN ................................................................ 23
3.1 Desain Penelitian ......................................................................................... 23
ix
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ...................................................................... 23
3.3 Populasi Penelitian dan Sampel Penelitian ................................................. 23
3.3.1 Populasi Penelitian ............................................................................ 23
3.3.1.1 Populasi Target ..................................................................... 23
3.3.2 Sampel Penelitian .............................................................................. 23
3.3.3 Identifikasi Variabel .......................................................................... 24
3.3.3.1 Variabel Bebas ...................................................................... 24
3.3.3.2 Variabel Terikat .................................................................... 24
3.3.4 Kriteria Inklusi dan Eksklusi ............................................................ 24
3.3.4.1 Kriteria Inklusi ...................................................................... 24
3.3.4.2 Kriteria Eksklusi ................................................................... 24
3.4. Alat dan Bahan ........................................................................................... 24
3.4.1 Alat .................................................................................................... 24
3.4.2 Bahan ................................................................................................ 25
3.5 Cara kerja .................................................................................................... 25
3.5.1 Pengambilan Sampel ......................................................................... 25
3.5.1 Pemeriksaan Laboratorium ............................................................... 26
3.5.2.1 Kultur Bakteri ....................................................................... 26
3.5.2.2 Pembuatan Preparat .............................................................. 26
3.5.2.3 Pewarnaan Gram................................................................... 27
3.5.2.4 Penilaian Mikroskopis .......................................................... 28
3.6 Pemantapan Kualitas Mikrobiologi............................................................. 28
3.6.1 Pemantapan Kualitas Pewarnaan ...................................................... 28
3.6.2 Pemantapan Kualitas Media Kultur .................................................. 28
3.6.3 Pemantapan Kualitas dalam Mengidentifikasi Kuman ..................... 28
3.7 Alur Penelitian ............................................................................................ 29
3.8 Manajemen Data ......................................................................................... 30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 31
4.1 Gambaran Umum Lokasi Penelitian ........................................................... 31
4.1.1.Gambaran Umum .............................................................................. 31
4.2 Hasil Penelitian ........................................................................................... 32
4.3 Pembahasan ................................................................................................. 41
4.4 Keterbatasan Penelitian ............................................................................... 44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 45
5.1 Kesimpulan ................................................................................................. 45
5.2 Saran ............................................................................................................ 45
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 46
LAMPIRAN ..................................................................................................... 50
x
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Anatomi Kelenjar Saliva ................................................................. 9
Gambar 2.2 Streptococcus sp ............................................................................ 12
Gambar 2.3 Staphylococcus sp ......................................................................... 14
Gambar 2.4 Lactobacillus sp ............................................................................ 15
Gambar 2.5 Gambaran Observasi Mikroskopis pada Pewarnaan Gram ........... 18
Gambar 2.6 Hemolisis pada Agar Darah .......................................................... 19
Gambar 3.1 Koloni pada Agar Darah Setelah Diinkubasi Selama 24 Jam pada
Suhu 370C ....................................................................................... 26
Gambar 4.1 Gambaran Karakteristik Kelompok Usia dan Jenis Kelamin pada
Pasien DM di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016 .... 32
Gambar 4.2 Gambaran Karakteristik Kadar Gula Darah Puasa Pasien DM di
Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016 ........................... 33
Gambar 4.3 Gambaran Karakteristik Kadar Gula Darah 2 Jam Setelah Makan
Pasien DM di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016 .... 34
Gambar 4.4 Gambaran Distribusi Bakteri Berdasarkan Kadar Gula Darah Pasien
DM di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016 ................ 36
Gambar 4.5 Gram Positif Streptococcus ........................................................... 37
Gambar 4.6 Gram Positif Staphylococcus ........................................................ 38
Gambar 4.7 Gram Positif Batang ...................................................................... 39
Gambar 4.8 Gram Negatif Batang .................................................................... 40
xi
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Klasifikasi Diabetes Mellitus .............................................................. 6
Tabel 2.2 Kriteria Diagnostik Diabetes Mellitus ................................................ 8
Tabel 4.1 Karakteristik Subjek Penelitian Menurut Lama Menderita DM (tahun)
pada Pasien di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016 ..... 34
Tabel 4.2 Gambaran Jenis Bakteri pada Saliva Pasien DM di Puskesmas Ciputat
pada Bulan September 2016 ............................................................. 35
xii
DAFTAR SINGKATAN
ADA : American Diabetes Association
DM : Diabetes Mellitus
ESP : Ekstraseluler Polisakarida
GD : Gula Darah
Ig A : Immunoglobulin A
IMT : Indeks Masa Tubuh
PERKENI : Perkumpulan Endokrinologi Indonesia
PMN : Polimorfonuklear
PTRM : Pusat Terapi Rumatan Metadon
RISKESDAS : Riset Kesehatan Dasar
S. aureus : Staphylococcus aureus
S. epidermidis : Staphylococcus epidermidis
S. mutans : Streptococcus mutans
S. viridans : Streptococcus viridans
TTGO : Tes Toleransi Glukosa Oral
WHO : World Health Organization
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
1. Surat Izin Penelitian .............................................................................. 50
2. Form Inform Consent ............................................................................ 51
3. Alat dan Bahan Penelitian ..................................................................... 52
4. Pewarnaan Gram ................................................................................... 53
5. Tabel Data Identifikasi Bakteri ............................................................. 54
6. Riwayat Hidup Peneliti ......................................................................... 55
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Diabetes Mellitus (DM) merupakan penyakit gangguan metabolik
menahun akibat pankreas yang tidak mampu memproduksi cukup insulin atau
keadaan dimana tubuh tidak dapat menggunakan insulin yang diproduksi
secara efektif. Insulin adalah hormon yang mengatur keseimbangan kadar gula
darah, akibatnya terjadi peningkatan konsentrasi glukosa di dalam darah atau
bisa disebut hiperglikemia. Diabetes sudah merupakan suatu ancaman utama
bagi kesehatan manusia pada abad 21. World Health Organization (WHO)
telah menetapkan Diabetes Mellitus (DM) sebagai global epidemic, yang
kebanyakan mempengaruhi sebagian negara dimana dapat menyebabkan 80%
kematian. 1,2
Di Indonesia, kejadian DM Tipe 2 pada wanita lebih tinggi daripada
laki-laki. Wanita lebih berisiko mengidap diabetes karena secara fisik wanita
memiliki peluang peningkatan indeks masa tubuh (IMT) yang lebih besar
dibanding laki-laki. Hasil Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS) pada tahun
2013, menunjukan prevalensi DM di Indonesia mencapai 3,6% berdasarkan
diagnosis tenaga kesehatan dan gejalanya. Pada tahun 2000, angka kejadian
DM di dunia mencapai 171 juta jiwa dan meningkat hingga 382 juta jiwa pada
tahun 2013. Angka kejadian ini diperkirakan akan meningkat hingga 592 juta
jiwa pada tahun 2035. 1,3, 4
DM adalah kondisi yang telah dikaitkan dengan perubahan dari
respon kekebalan. Menurut penelitian Eirini dkk tahun 2013 menunjukkan
pasien diabetes dengan riwayat kontrol DM yang kurang optimal, berpotensi
memiliki risiko yang lebih tinggi mengalami infeksi dibandingkan dengan
penderita DM dengan riwayat dengan baik DM terkontrol. 5
Berdasarkan penelitian Juli Handayani (2005) ditemukan peningkatan
kadar glukosa tubuh berefek pada peningkatan kadar glukosa pada saliva. Hal
2
ini erat kaitannya dengan penderita DM dimana kadar gula darahnya
mengalami peningkatan. Pada penderita DM yang tidak terkontrol, proses
Self-Cleansing pada saliva terjadi penurunan di mana pada keadaan normal
berfungsi sebagai pembilas sisa-sisa makanan dan kotoran dari dalam mulut.
Hal tersebut dapat meningkatkan pertumbukan mikroorganisme pada mulut
sehingga oral hygiene pada penderita DM terbilang buruk. 6 , 7
Angka kejadian penderita DM yang terus meningkat dari tahun ke
tahun, dapat pula meningkatkan risiko infeksi pada rongga mulut akibat
peningkatan kadar glukosa pada saliva pasien DM. Berdasarkan uraian
tersebut, maka peneliti melakukan identifikasi bakteri pada saliva pasien
penderita DM di puskesmas Ciputat Tangerang Selatan melalui metode
pewarnaan Gram untuk melihat bakteri yang paling dominan pada saliva
pasien DM .
1.2 Rumusan Masalah
Bagaimana pola bakteri pada saliva pasien penderita DM di Puskesmas
Ciputat Tangerang Selatan berdasarkan metode pewarnaan Gram.
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Untuk mengetahui bakteri dominan yang terdapat pada saliva
penderita DM
1.3.2 Tujuan Khusus
Untuk mengetahui jenis bakteri pada saliva pasien DM berdasarkan
pemeriksaan dengan pewarnaan Gram.
3
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Bagi Peneliti
- Menambah pengetahuan dan informasi mengenai pola kuman pada
saliva pasien penderita DM berdasarkan sifat perwarnaan Gram.
- Menambah keterampilan dalam melakukan pemeriksaan mikrobiologi
klinik pada saliva.
- Sebagai syarat kelulusan untuk mendapatkan gelar sarjana kedokteran.
- Keterampilan penulisan hasil penelitian.
1.4.2 Manfaat Bagi Institusi
- Menambah literatur mengenai pola bakteri pada saliva pasien penderita
DM berdasarkan sifat perwarnaan Gram.
- Menambah publikasi ilmiah dalam bidang mikrobiologi klinik.
- Menambah sumber rujukan untuk penelitian selanjutnya.
1.4.3 Manfaat Bagi Tenaga Kesehatan
- Menambah pengetahuan dan informasi mengenai pola bakteri pada
saliva pasien penderita DM berdasarkan sifat pewarnaan Gram.
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Landasan Teori
2.1.1 Diabetes Mellitus
2.1.1.1 Definisi Diabates Mellitus
Diabetes Mellitus (DM) merupakan penyakit gangguan metabolik
menahun akibat pankreas yang tidak mampu memproduksi cukup insulin atau
keadaan dimana tubuh tidak dapat menggunakan insulin yang diproduksi
secara efektif, akibatnya kadar glukosa dalam darah meningkat atau melebihi
batas normal. 1
Menurut American Diabetes Association (ADA), diabetes mellitus
merupakan kelompok penyakit metabolik dengan karakteristik hiperglikemia
yang terjadi karena gangguan pada sekresi insulin, kerja insulin, atau
keduanya.8
2.1.1.2 Prevalensi Diabetes Mellitus
Prevalensi DM di dunia cukup tinggi dengan perkiraan 8,3% pada
orang dewasa. Tahun 2000, angka kejadian DM di dunia mencapai 171 juta
jiwa dan meningkat hingga 382 juta jiwa pada tahun 2013. Angka kejadian ini
diperkirakan akan meningkat hingga 592 juta jiwa pada tahun 2035.
Berdasarkan angka kejadian sebesar 382 juta jiwa di tahun 2013, diperkirakan
175 diantaranya belum terdiagnosis. 1 , 9
Indonesia merupakan salah satu negara dengan prevalensi DM yang
tinggi dengan prevalensi sebesar 5,5% dan angka kejadian 8,5 juta
penduduknya. Menurut International Diabetes Federation (IDF), Indonesia
menempati peringkat ke-7 di dunia. Tahun 2035 mendatang diperkirakan
angka kejadian DM di Indonesia akan mencapai 14,1 juta jiwa. Berdasarkan
5
hasil riskesdas tahun 2013 menunjukan terjadi peningkatan angka kejadian
DM dari 1,1 % pada tahun 2007 menjadi 2,4 % pada tahun 2013. 1, 4 , 10
Berdasarkan data statistik 2003, Indonesia diperkirakan jumlah
penduduk dengan usia diatas 20 tahun sebanyak 133 juta jiwa, dengan
prevalensi DM sebesar14,7% pada daerah urban dan 7,2%, pada daerah rural,
dimana diperkirakan terdapat sejumlah 8,2 juta penyandang DM di daerah
urban dan 5,5 juta di daerah rural. Berdasarkan pola pertambahan penduduk,
diperkirakan pada tahun 2030 nanti akan ada 194 juta penduduk yang berusia
di atas 20 tahun dan dengan asumsi prevalensi DM pada urban (14,7%) dan
rural (7,2%) maka diperkirakan terdapat 12 juta penyandang diabetes di
daerah urban dan 8,1 juta di daerah rural.11
2.1.1.3 Klasifikasi Diabetes Mellitus
DM diklasifikasikan berdasarkan proses patogenesis yang
mendasari terjadinya hiperglikemia. Diabetes tipe 1 disebabkan oleh
adanya kerusakan autoimun pada sel-β pankreas, sehingga pankreas tidak
dapat mensekresikan hormon insulin. Sedangkan diabetes tipe 2
disebabkan oleh resistensi hormon insulin, ketidakmampuan tubuh untuk
menggunakan hormon insulin dengan efektif. Diabetes tipe lain
merupakan defek genetik tertentu yang berakibat pada gangguan sekresi
maupun kerja insulin, gangguan metabolik yang berhubungan dengan
sekresi insulin, abnormalitas mitokondria, dan keadaan yang
berhubungan dengan toleransi glukosa terganggu. Diabetes gestational
terjadi akibat kondisi hiperglikemia pada wanita hamil, hal ini terjadi
akibat perubahan metabolik pada kehamilan dapat menyebabkan
resistensi insulin. 12 , 13
6
Tabel 2.1 Klasifikasi Diabetes Mellitus
Sumber: Harrison’s, 2015
2.1.1.4 Patofisilogi Diabetes Mellitus
Hiperglikemia pada diabetes mellitus terjadi akibat penurunan
sekresi insulin yang berakibat pada penurunan pemakaian glukosa dan
peningkatan produksi glukosa dalam tubuh sehingga akhirnya
menyebabkan tidak dapat terjadinya homeostasis bahan bakar yang tidak
optimal. 13
DM tipe 1 maupun tipe 2 diawali dengan fase homeostasis glukosa
yang abnormal. Diabetes tipe 1 terjadi defisiensi insulin absolut yang
disebabkan oleh adanya destruksi autoimun pada sel β, yang dapat dipicu
oleh infeksi virus dan faktor lingkungan. Sedangkan pada DM tipe 2
terjadi penurunan sensitivitas jaringan terhadap efek metabolik insulin,
atau kondisi yang dikenal dengan resistensi insulin.14
Defisiensi insulin akan berdampak pada berkuranggnya
penyerapan glukosa di jaringan perifer yang mengakibatkan terjadinya
kadar gula dalam darah meningkat (hiperglikemia). Hal ini disertai juga
dengan peningkatan pengeluaran glukosa oleh hati melalui proses
glikogenolisis dan glukoneogenesis yang tidak terkendali akibat tidak
adanya insulin. Kadar glukosa yang tinggi di darah ini menyebabkan
reabsorpsi glukosa di ginjal mencapai ambang, sehingga urin jadi
mengandung glukosa, suatu kondisi yang disebut glukosuria. Glukosa di
7
urin menimbulkan efek osmotik yang menarik H2O sehingga
menyebabkan diuresis osmotik yang ditandai oleh peningkatan frekuensi
dalam berkemih atau yang disebut poliuria. Berdasarkan hal tersebut,
kadar glukosa yang tinggi di plasma juga menyebabkan kondisi
hiperosmolaritas, sehingga terjadi penarikan cairan dari intraselular. Hal
ini menyebabkan tubuh kehilangan cairan. Besarnya cairan yang yang
keluar dari tubuh menyebabkan dehidrasi yang dimana tubuh akan
mengkompensasikannya dengan rasa haus yang berlebihan atau yang
disebut polidipsi. Penderita DM juga mengalami kondisi polifagi atau
peningkatan nafsu makan. Hal ini disebabkan akibat peningkatan
katabolisme protein dan lemak akibat efek defisiensi insulin. 14, 15
2.1.1.5 Diagnosis Diabetes Mellitus
Diagnosis pada DM ditentukan berdasarkan pemeriksaan kadar
glukosa darah. Pemeriksaan glukosa yang dianjurkan adalah pemeriksaan
glukosa secara enzimatik dengan bahan darah plasma vena dan angka
kriteria diagnostik ditentukan sesuai dengan pembakuan oleh WHO.
Pemeriksaan dapat dilakukan dengan menggunakan pemeriksaan glukosa
darah kapiler dengan glucometer untuk pemantauan hasil pengobatan. 11
Perlu dicurigai adanya diabetes mellitus jika ditemukan keluhan
klasik pada DM seperti poliuria, polidipsia, polifagia, dan penurunan
berat badan yang tidak dapat dijelaskan sebabnya, atau keluhan lain
seperti lemah badan, kesemutan, gatal, mata kabur, disfungsi ereksi pada
pria, dan pruritus vulvae pada wanita. 11
Diagnosis DM dapat ditegakkan melalui tiga cara:
1. Jika keluhan klasik ditemukan, maka pemeriksaan glukosa
plasma sewaktu >200 mg/dL sudah cukup untuk menegakkan
diagnosis DM.
2. Pemeriksaan glukosa plasma puasa ≥ 126 mg/dL dengan adanya
keluhan klasik.
8
3. Tes toleransi glukosa oral (TTGO). Meskipun TTGO dengan
beban 75 g glukosa lebih sensitif dan spesifik dibanding dengan
pemeriksaan glukosa plasma puasa, namun pemeriksaan ini
memiliki keterbatasan tersendiri. TTGO sulit untuk dilakukan
berulang-ulang dan dalam praktek sangat jarang dilakukan karena
membutuhkan persiapan khusus.
Tabel 2.2 Kriteria Diagnostik Diabetes Mellitus
Sumber: PERKENI, 2011
9
2.1.2 Saliva
2.1.2.1 Definisi Saliva
Saliva atau liur adalah suatu cairan mulut yang kompleks, tidak
berwarna, dan disekresikan dari kelenjar saliva yang terletak di luar rongga
mulut dan mengeluarkan liur melalui duktus pendek ke dalam mulut untuk
mempertahankan homeostasis dalam rongga mulut.15, 16
2.1.2.2 Anatomi dan Sekresi Kelenjar Saliva
Saliva disekresikan oleh kelenjar saliva mayor dan minor. Kelenjar
saliva mayor terdiri dari tiga pasang kelnjar diantaranya kelenjar parotis,
submandibular, dan sublingual. Kelenjar saliva minor atau kelenjar saliva
aksesoris dapat ditemukan di bagian bawah bibir, lidah, palatum, buccal,
dan faring. Rata-rata saliva dapat di sekresikan sebanyak 1000-1500 mL
dalam sehari. Kelenjar saliva terdiri dari sel asinar, sel duktus, sel
myoepitel, sistem saraf, dan jaringan ikat.17, 18
Gambar 2.1 Anatomi Kelenjar Saliva
Sumber: Tortora, 2009
10
Pengeluaran saliva stimulasi terhadap kelenjar saliva dapat berupa
rangsangan olfaktorius, melihat dan memikirkan makanan, rangsang
mekanis, kimiawi, neuronal, dan rasa sakit. Rangsangan mekanis terjadi saat
kegiatan mengunyah. Rangsangan kimiawi ditimbulkan dengan cara
mengecap makanan, rasa asam merupkan yang paling sering menstimulasi
sekresi saliva dan rasa manis paling rendah dalam menstimulasi sekresi
saliva. Rangsangan neuronal merupakan rangsang yang datang melalui saraf
simpatis dan parasimpatis. Stress dan kondisi psikis, rasa sakit,
mengonsumsi obat-batan tertentu, dan penyakit lokal maupun sistemik
lainnya juga dapat menstimulasi sekresi saliva.18
2.1.2.3 Komponen dan Fungsi Saliva
Saliva mengandung 99,5% air dan 0,5% elektrolit dan protein yang
meliputi ion-ion (sodium, potassium, chloride, bikarbonat, dan fosfat) serta
substansi organik lainnya meliputi urea dan asam urat, mukus,
immunoglobulin A (IgA), enzim lisozim, dan enzim amilase. Ion chlor
berfungsi menstimulasi enzim amilase yang berfungsi untuk memecah pati
dalam proses pencernaan. Bikarbonat dan fosfat berfungsi sebagai buffer
yang mengatur keasaman dalam mulut sehingga pH saliva cenderung asam
(pH 6,35 - 6,85). Mukus berfungsi melubrikasi makanan sehingga makanan
mudah dicerna. 15, 17
Mukoprotein pada saliva memberikan penghalang untuk desikasi,
penetrasi, ulserasi dan paparan dari epitel oral terhadap racun dan
karsinogen. Tingkat glikasi dari mukoprotein adalah kunci untuk
kemampuan protektif. Jumlah protein terikat gula dalam air liur yang
normal adalah di kisaran 300-400 mg/mL. Glikosaminoglikan pada saliva
memberikan visco-elastisitas, menghalangi terjadinya pengendapan,
proteolisis dan memiliki fungsi antigenik. IgA pada saliva berfungsi
mencegah penetrasi mikroba di epitel rogga mulut, dan enzim lisozim
berfungsi untuk menghancurkan bakteri dengan cara merusak dinding sel
bakteri dan membilas makanan yang mungkin berfungsi sebagai sumber
11
makanan untuk bakteri. Kadar lisozim dan mukus yang redah dapat
meningkatkan kolonisasi bakteri dan jamur serta pembetukan plak. 15, 17, 19
2.1.3 Flora Normal Saliva
Flora normal adalah sekumpulan mikroorganisme yang hidup pada
kulit dan selaput lendir/mukosa manusia yang sehat maupun sakit.
Pertumbuhan flora normal pada bagian tubuh tertentu dipengaruhi oleh
suhu, kelembaban, nutrisi dan adanya zat penghambat. Keberadaan flora
normal pada bagian tubuh tertentu mempunyai peranan penting dalam
pertahanan tubuh karena menghasilkan suatu zat yang menghambat
pertumbuhan mikroorganisme lain. Keberadaan flora normal pada bagian
tubuh tidak selalu menguntungkan, dalam kondisi tertentu flora normal
dapat menimbulkan penyakit, misalnya bila terjadi perubahan substrat atau
berpindah dari habitat yang semestinya.20
Flora normal pada saliva diantaranya Streptococcus viridans,
Staphylococcus sp, dan Lactobacillus sp. Saliva pada orang dewasa
dikabarkan mengandung 6 miliar mikroorganisme per mililiter. Bakteri-
bakteri tersebut bisa berubah menjadi patogen jika jumlahnya melebihi
normal. Hal ini dapat terjadi jika keadaan lingkungan di dalam rongga mulut
mengalami perubahan salah satu faktor predisposisinya yaitu kebersihan
mulut. 21, 22
2.1.3.1 Streptococcus viridans
Streptococcus viridans meliputi Streptococcus mitis,
Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, Streptococcus sanguinis,
dan lain-lain. Morfologi sel: bentuk coccus, susunan berderet, tidak
berflagel, tidak berspora, tidak berkapsul, Gram positif. Morfologi koloni
Streptococcus pada umumnya di media Agar Darah : bentuk koloni bulat,
ukuran 1 - 2 mm, tidak berwarna/jernih, permukaan cembung, tepi rata,
membentuk hemolisa α (disekitar koloni terdapat zona hijau) tetapi dapat
12
juga tidak terjadi hemolisis. Hal yang membedakan dengan
Streptococcus pneumoniae adalah dengan optokin dan kelarutannya
dalam empedu, S. viridans resisten terhadap optokin dan tidak larut
dalam empedu sedangkan S. pneumoniae sensitif terhadap optokin dan
larut dalam empedu. Sifat fisiologi : bersifat anaerob fakultatif, tumbuh
baik pada suasana CO2 5-10 % dan suhu 370C, resisten terhadap optokin,
koloni tidak larut dalam empedu, dan memilliki pola fermentasi
karbohidrat, contohnya S. mutans menyintesis polisakarida besar seperti
dekstran atau levans dari sukrosa dan berperan penting pada
pertumbuhan karies gigi. Contoh spesies Streptococcus yang lain adalah
Streptococcus β hemolyticus dan Streptococcus γ hemolyticus.20, 23
Gambar 2.2 Streptococcus sp
Sumber: Sherris Medical Microbiology, 2014
2.1.3.2 Staphylococcus sp
Genus Staphylococcus terdiri dari sekurangnya 30 spesies. Tiga
spesies utama yang penting secara klinik adalah Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis, dan Staphylococcus saprophyticus.
Staphylococcus aureus (S. aureus) merupakan bentuk koagulasi positif,
hal ini membedakannya dengan spesies lain. Staphylococcus aureus
merupakan patogen utama bagi manusia. Hampir setiap orang akan
mengalami beberapa tipe infeksi S. aureus sepanjang hidupnya,
13
bervariasi dalam beratnya mulai dari keracunan makanan atau infeksi
kulit ringan, sampai infeksi berat yang mengancam jiwa.20, 23
Sifat biakan Staphylococcus, sp.:
Staphylococcus mudah tumbuh pada kebanyakan pembenihan
bakteri pada keadaan aerobik atau mikroaerofilik. Bakteri ini tumbuh
paling cepat pada suhu 370C, tetapi membentuk pigmen paling baik pada
suhu kamar (20-250C). Koloni Staphylococcus terbentuk bulat, licin,
cembung, dan mengkilat pada lempeng Agar Darah. Koloni S. aureus
berwarna kuning keemasan dan bersifat hemolitik, sedangkan pada
staphylococcus non patogen seperti S. epidermidis cenderung
nonhemolitik. Pigmen dari Staphylococcus sp tidak terbentuk pada
keadaan anaerob atau bila tumbuh pada medium cair. Koloni S.
epidermidis biasanya berwarna abu-abu hingga putih pada isolasi
pertama tetapi kebanyakan koloni hanya menghasilkan pigmen setelah
inkubasi lama. Pigmen tidak dihasilkan pada keadaan anaerob atau pada
kaldu. 20, 23
Sifat pertumbuhan:
S. aureus menghasilkan katalase, yang membedakannya dengan
Streptococcus sp. Bakteri ini meragikan banyak karbohidrat dengan
lambat, menghasilkan asam laktat, tetapi tidak menghasikan gas. S.
epidermidis bersifat koagulase negatif.23
Mekanisme dari S. aureus dalam menyebabkan penyakit
merupakan multifaktor, melibatkan toksin, enzim, dan komponen seluler.
Patogenitasnya merupakan efek gabungan dari berbagai macam metabolit
yang dihasilkannya. Kuman patogen (S.aureus) bersifat invasif,
penyebab hemolisis, membentuk koagulase, mencairkan gelatin,
membentuk pigmen kuning emas dan meragi manitol. 24
Infeksi yang berasal dari rongga mulut lebih sering bersifat
campuran (polimikrobial), biasanya terdiri dari dua kelompok
mikroorganisme atau lebih. Karena flora normal dalam mulut terdiri dari
14
kuman Gram-positif aerob dan anaerob Gram-negatif maka yang
menyebakan infeksi tentu saja kuman tersebut, apabila mikroba anaerob
terlibat dalam suatu infeksi polimikrobial atau campuran, pengaruh dari
organisme lain akan meningkat. Mikroba anaerob cenderung
menghambat fagositosis aerob, karena bakteri aerob mengkonsumsi
oksigen sehingga mendukung pertumbuhan mikroorganisme anaerob.
Infeksi mulut pada umumnya disebabkan oleh Streptococcus dan
Staphylococcus serta mikroorganisme Gram negatif yang terbentuk
batang dan bersifat anaerob.24
Gambar 2.3 Staphylococcus sp
Sumber: Sherris Medical Microbiology, 2014
2.1.3.3 Lactobacillus sp
Genus Lactobasillus merupakan kuman yang mampu memproduksi
sejumlah asam laktat dari karbohidrat sederhana, dengan demikian
menciptakan suasana asam yang mampu mematikan kuman lain yang
tidak berspora. Morfologi sel dari Lactobacillus berbentuk batang
pendek, tidak berspora, tidak berflagel, tidak berkapsul, Gram positif.
Morfologi koloni pada media Agar Darah berbentuk koloni bulat kecil,
warna putih susu, cembung, tepi rata, permukaan mengkilap. Sifat
15
fisiologi dari lactobacilus bersifat anaerob fakultatif, dengan suhu
optimal 450C, mereduksi nitrat menjadi nitrit, memfermentasi glukosa,
laktosa dan sukrosa, dan tidak mempunyai enzim katalase. Lactobacillus
dapat dibagi menjadi dua golongan utama atas dasar produk peragian
glukosa yang dihasilkannya. Golongan homofermentatif mengubah hasil
peragian gula menjadi asam laktat, sedangkan golongan
heterofermentatif merupakan kelompok penghasil produk peragian
lainnya.22, 25, 26
Gambar 2.4 Lactobacillus sp
Sumber: Sherris Medical Microbiology, 2014
2.1.4 Cara Identifikasi Bakteri
1. Pemeriksaan Langsung
Pemeriksaan langsung digunakan untuk mengamati pergerakan dan
pembelahan secara biner, mengamati bentuk dan ukuran sel yang alami,
dimana bakteri ini pada saat mengalami fiksasi panas serta selama proses
pewarnaan mengakibatkan beberapa perubahan. Teknik pengamatan
mikroskop yang baik adalah dengan membuat sediaan tetesan gantung,
karena bakteri yang diamati dalam keadaan utuh.
16
2. Pewarnaan
Pewarnaan mikroba dengan suatu cat yang mengutamakan struktur
tertentu saja, misalnya bagian-bagian sel. Mikroorganisme sulit dilihat
dengan mikroskop cahaya, karena tidak mengabsorbsi atau membiaskan
cahaya.
Dalam mikrobiologi, dikenal beberapa cara pewarnaan, yaitu:
a. Pewarnaan sederhana (simple staining)
Hanya menggunakan 1 macam zat warna untuk meningkatkan kontras
agar mikroorganisme dan sekelilingnya. Zat warna yang biasanya
digunakan yaitu zat warna basa seperti kristal violet, methylen blue,
karbol fuksin basa, safranin atau hijau malakit, kadang digunakan juga
zat warna negatif dan zat warna asam. Pewarnaan ini sering digunakan
untuk melihat bentuk, ukuran, penataan mikroorganisme.
b. Pewarnaan differensial (differential staining)
Pengamatan jelas tentang perbedaan antara sel bakteri / bagian sel
bakteri. Bertujuan untuk mengetahui bagian-bagian sel bakteri yang
tidak dapat diamati dengan pewarnaan sederhana. Contohnya adalah
pewarnaan Gram dan tahan asam seperti Ziehl Neelsen dan Kinyoun
Gabhet. 28
2.1.4.1 Pewarnaan Gram
Pewarnaan Gram merupakan prosedur yang sangat membantu
dalam mikrobiologi dan sering menjadi salah satu pemeriksaan uama
dalam mengidentifikasi bakteri. Metode pewarnaan Gram pertama kali
dijelaskan pada tahun 1844 oleh Denmark Hans Christian Gram.
Bakteri dibagi dalam golongan dalam pewarnaan Gram yaitu, Gram
positif dan Gram negatif berdasarkan reaksinya terhadap pewarnaan
Gram. Perbedaan antara bakteri Gram positif dan Gram negatif
diperlihatkan dari perbedaan dinding sel.23, 29
17
Dinding sel pada bakteri Gram positif seperti Staphylococcus
aureus dan Streptococcus sp. sebagian besar terdiri atas beberapa
lapisan peptidoglikan yang akan membentuk suatu struktur tebal dan
kaku. Hal ini menyebabkan penyerapan iodin pada dinding bakteri
sehingga bakteteri ini dapat mempertahankan warna primer dari gentian
violet dan menghasilkan warna ungu atau biru tua. Bakteri Gram
negatif seperti Escherichia coli dan Pseudomonas sp. terdiri atas satu
atau sangat sedikit lapisan peptidoglikan pada dinding selnya. Bakteri
Gram negatif tidak dapat mempertahankan zat warna primer sehingga
bakteri ini menyerap zat warna sekunder yaitu safranin atau karbol
fuksin sehingga menghasilkan warna pink atau merah. Beberapa bakteri
Gram positif yang tidak hidup dapat berwarna seperti Gram negatif. 23,
29, 30
Pewarnaan Gram merupakan prosedur yang sangat membantu
dalam mikrobiologi diagnostik. Teknik pewarnaan Gram juga
digunakan untuk pewarnaan jamur tertentu seperti Candida dan
Cryptococcus yang diamati Gram ragi positif. Sejauh ini pewarnaan
Gram merupakan prosedur yang paling utama dalam mengidentifikasi
bakteri, namun tidak semua bakteri dapat diidentifikasi dan di
klasifikasikan dalam metode ini contohnya seperti pewarnaan tahan
asam. 23, 29
18
Gambar 2.5 Gambaran Observasi Mikroskopis pada Pewarnaan Gram
Sumber: Capuccino Microbiology, 2014
2.1.5 Agar Darah
Agar merupakan media yang mendukung dalam pertumbuhan bakteri.
Sedangkan penambahan darah dan nutrisi lain pada agar berguna untuk
mendorong pertumbuhan sebagian besar bakteri. Agar Darah juga merupakan
media yang diperkaya atau yang disebut dengan enriched media. Media ini
juga disebut sebagai media differensial yang ditentukan berdasarkan
kemampuan bakteri melisiskan darah atau yang disebut dengan hemolisis. 26,
30
Agar Darah dibuat dengan komposisi agar Darah base sebanyak 40 gram
untuk 1 liter pembuatan media yang kemudian di destilasi dan di sterilkan
kedalam autoklav pada suhu 1210C selama 15 menit. Dinginkan hingga suhu
sekitar 500C kemudian ditambahkan darah domba steril dengan konsetrasi
7%. 1 liter base Agar Darah mengandung Lab-Lemco powder 25%, pepton
25%, sodium cloride 12,5%, dan agar 37,5%. 31
19
Gambar 2.6 Hemolisis Pada Agar Darah
Sumber: Cappuccino Microbiology, 2014
2.1.6 Manifestasi Diabetes Mellitus dalam Rongga Mulut
DM menjadi salah satu penyakit yang berperan sebagai faktor
predisposisi terjadinya penyakit infeksi dalam rongga mulut. Penyakit-
penyakit yang dapat ditimbulkan seperti karies gigi, disfungsi saliva, penyakit
pada mukosa mulut, infeksi rongga mulut seperti kandidiasis, rasa, dan
gangguan neurosensorik lainnya seperti mulut terasa terbakar dan disfagia.32
Penderita DM dengan kontrol buruk dapat terjadi peningkatan
pembentukan karies gigi namun hal tersebut bukan juga sebagai indikator
mutlak karakteristik untuk penderita DM. Penurunan sistem imunitas tubuh
karena berkurangnya fungsi leukosit Polimorfonuklear (PMN) yang
berdampak penurunan kemotaksis dan melemahnya fagositosis, serta
kemungkinan peningkatan faktor risiko terjadinya infeksi yang mengarah
pada penyakit periodontal. 16
Pasien DM yang memiliki neuropati, menyebabkan berkurangnya aliran
saliva sehingga hal tersebut merupakan salah satu faktor dari terjadinya karies
gigi dan xerostomia atau mulut kering pada pasien DM. Kandidiasis oral juga
merupakan salah satu temuan dari akibat keadaan immunocompromised pada
pasien DM, dan penurunan aliran saliva juga merupakan salah satu faktor
risiko terjadinya kandidiasis oral. 32
20
2.2. Kerangka Teori
2.3 Kerangka Konsep
Variabel Bebas Variabel Terikat
Kadar glukosa
darah meningkat
Peningkatan
kadar glukosa
saliva
Pertumbuhan
bakteri
meningkat
Peningkatan
risiko infeksi
Defek fungsi sel-
sel imun dan
pertahanan tubuh
Disfungsi
Saliva
Self Clearance
menurun
Perubahan bakteri
flora normal saliva
Identifikasi bakteri
Pewarnaan Gram
Pola bakteri
pada saliva
Diabetes
Mellitus
Pasien DM
21
2.4 Definisi Operasional
No. Variabel Definisi Alat Ukur Hasil Ukur Skala
1. Diabetes
Mellitus
Pasien yang didiagnosis
DM berdasarkan
kriteria diagnosis
PERKENI
Buku rekam
medik pasien
di Puskesmas
Ciputat
Tangerang
Selatan pada
bulan
September
2016
- Kategorik
2. Saliva Air liur tanpa stimulasi
pada pasien DM yang
ditampung dalam pot.
- - Kategorik
3. Kadar
gula darah
Kadar gula darah pasien
DM (puasa dan post
prandial)
Hasil
pemeriksaan
laboratorium
di Puskesmas
Ciptat
Tangerang
Selatan
gram / dL Kategorik
4. Lama
mengidap
diabetes
mellitus
Lamanya pasien
mengidap DM sejak
terdiagnosis.
Buku rekam
medik pasien
di Puskesmas
Ciputat
Tangerang
Selatan pada
bulan
September
2016 dan
wawancara
dengan
Bulan / tahun Kategorik
22
pasien.
5. Jenis
kelamin
Diklasifikasikan
berdasarkan laki-laki
dan perempuan
Data
administrasi
Puskesmas
Ciputat
Tangerang
Selatan
Laki-laki /
perempuan
Kategorik
6. Usia Usia pasien saat bulan
September 2016
Berdasarkan
buku rekam
medik pasien
di Puskesmas
Ciputat
Tangerang
Selatan pada
bulan
September
2016 dan
wawancara
dengan
pasien.
Tahun Kategorik
7. Pewarnaan
Gram
Pewarnaan diferensial
untuk menenetukan
sifat dan morfologi
bakteri
Pewarna
ungu kristal
karbol ungu,
lugol, alkohol
96%,
safranin,
mikroskop
olympus
Gram (-) atau
(+), coccus /
batang
kategorik
23
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Penelitian ini bersifat Deskriptif dengan pendekatan studi potong lintang
berdasarkan morfologi pada pewarnaan Gram.
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas
Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarief Hidayatullah
Jakarta dan bekerjasama dengan Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan.
Penelitian ini dilakukan selama bulan September 2016.
3.3 Populasi Penelitian dan Sampel Penelitian
3.3.1 Populasi Penelitian
Populasi pada penelitian ini adalah pasien penderita DM.
3.3.1.1 Populasi Target
Populasi target pada penelitian ini adalah pasien DM yang berobat
di puskesmas Ciputat Tangerang Selatan.
3.3.2 Sampel Penelitian
Teknik sampling yang digunakan dalam penelitian ini adalah dengan
consecutive sampling. Sampel pada penelitian ini adalah pasien DM yang
berobat di puskesmas Ciputat Tangerang Selatan pada bulan September 2016.
Pasien diminta untuk mengeluarkan saliva yang kemudian ditampung dalam
pot yang disediakan peneliti.
24
3.3.3 Identifikasi Variabel
3.3.3.1 Variabel Bebas
Pasien penderita DM yang berobat ke Puskesmas Ciputat Tangerang
Selatan pada bulan September 2016.
3.3.3.2 Variabel Terikat
Morfologi bakteri yang ditemukan pada saliva pasien tersebut yang sudah
di isolasi selama 24-48 jam menggunakan media Agar Darah yang dilanjutkan
dengan pewarnaan Gram.
3.3.4 Kriteria Inklusi dan Eksklusi
3.3.4.1 Kriteria Inklusi
Kriteria inklusi pada penelitian ini adalah pasien DM di Puskesmas
Ciputat Tangerang Selatan yang bersedia mengikuti penelitian ini.
3.3.4.2 Kriteria Eksklusi
Kriteria eksklusi pada penelitian ini adalah pasien menolak atau tidak
bersedia untuk dilakukan pengambilan sampel.
3.4 Alat dan Bahan
3.4.1 Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah pot untuk
menampung saliva, glass objek, lampu spiritus/bunsen, ose, botol semprot
air, pinset, rak untuk meletakan objek glass ketika melakukan pewarnaan,
NaCl 0,9%, cawan petri, pipet tetes, mikroskop, minyak imersi, incubator,
handscoon, masker, korekapi, alcohol swab, tissue, alat tulis, spidol,
25
kamera, pinset, spiritus, dan kapas kering.
3.4.2 Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah saliva pasien DM, Agar
Darah, larutan pewarnaan Gram (gentian violet 2%, lugol, alkohol 95%,
safranin 0,25%), dan aquades.
3.5 Cara Kerja
Sampel diambil dengan cara setiap pasien DM yang datang di
Puskesmas Ciputat pada saat penelitian dan memenuhi kriteria inklusi diambil
sebagai sampel penelitian. Sampel saliva diambil dengan cara meminta pasien
untuk meludah yang sebelumnya telah diberi inform consent terlebih dahulu.
3.5.1 Pengambilan Sampel
Cara pengambilan saliva dengan cara memberikan pot kepada pasien
DM, kemudian meminta pasien berkumur-kumur terlebih dahulu dan
meminta pasien untuk mengeluarkan air liurnya. Sampel segera di masukan
ke dalam ice box dan dibawa ke laboratorium segera untuk dilakukan kultur.
Ambil sedikit saliva menggunakan ose dan di oleskan di media Agar
Darah untuk di biakkan. Biakkan dibiarkan selama 24-48 jam di dalam
inkubator dengan suhu 370C, setelah itu baru di lakukan pewarnaan Gram.
Lihat hasil pewarnaan Gram di mikroskop dengan perbesaran 100x, lalu
identitifikasi bakteri yang terdapat pada saliva pasien yang menderita DM.
26
3.5.2 Pemeriksaan Laboratorium
3.5.2.1 Kultur Bakteri
Pemeriksaan kultur bakteri terhadap saliva dari pasien DM
adalah untuk menumbuhkan bakteri atau mendapatkan bakteri yang
dapat tumbuh pada saliva pasien DM. Caranya adalah sebagai berikut
a) Sampel diambil dengan menggunakan ose ditanam pada media
padat Agar Darah kemudian dimasukkan kedalam inkubator 370
C selama 24 - 48 jam
b) Kemudian dibaca dan dilihat pertumbuhan dari bakterinya.
c) Jika tumbuh dibuat preparat dan dilakukan pewarnaan Gram
Gambar 3.1
Koloni pada Agar Darah Setelah Diinkubasi Selama 24 Jam pada Suhu 370C.
6.1.2.2 Pembuatan Preparat 33
a) Tandai objek glass menggunakan spidol untuk menandai luas
area preparat yang akan dibuat.
27
b) Nyalakan api spiritus menggunakan korek api kemudian
lewatkan objek glass diatas api guna untuk menghilangkan
lemak yang menempel di objek glass.
c) Bakar Ose diatas api hingga menyala. Kemudian ambil NaCl
0,9% sebanyak 1 ose dan di letakkan di atas objek glass. Ulangi
hingga NaCl yang terambil sebanyak 1-2 tetes.
d) Bakar ose diatas api hingga menyala. Kemudian ambil sedikit
koloni menggunakan ose tersebut. Campurkan bersama NaCl
tadi pada objek glass dan ratakan. Diamkan hingga kering.
e) Bakar ose kembali hingga menyala. Letakkan ose kembali di
rak.
f) Lewatkan preparat diatas api sebanyak 2-3 kali guna untuk
fiksasi.
3.5.2.3 Pewarnaan Gram 23, 25
a) Teteskan larutan gentian violet 2% diatas sediaan. Diamkan
selama 5 menit kemudian bilas dengan air mengalir.
b) Teteskan larutan lugol, diamkan selama 45-60 detik kemudian
bilas dengan air mengalir.
c) Teteskan larutan alkohol 95% selama 10-30 detik. Kemudian
bilas dengan air mengalir.
d) Teteskan sediaan dengan larutan safranin 0,25% diamkan
selama 10-30 detik kemudian bilas dengan air mengalir.
e) Keringkan menggunakan tissue dengan cara ditekan, jangan di
usap.
f) Tetesi dengan 1 tetes minyak imersi dan lihat dibawah
mikroskop dengan menggunakan pembesaran 100x.
28
3.5.2.4 Penilaian Mikroskopis
Pewarnaan Gram dilakukan penilaian bakteri berdasarkan
warna, bentuk dan susunan. Nilai bakteri yang paling dominan.
3.6 Pemantapan Kualitas Mikrobiologi
3.6.1 Pemantapan Kualitas Pewarnaan 23
Hasil pemeriksaan dilihat dalam mikroskop, jika ditemukan kuman dengan
hasil pewarnaan berwarna ungu, menandakan bahwa bakteri tersebut
memiliki sifat Gram positif, namun jika hasil pewarnaan kuman berwarna
merah, bakteri tersebut bersifat Gram negatif.
3.6.2 Pemantapan Kualitas Media Kultur 33
Setelah di inkubasi selama 24-48 jam, koloni akan tumbuh di Agar Darah.
Nilai koloni berdasarkan ukuran, warna, berlendir atau tidak, dan jenis
hemolisisnya apakah alfa (α), beta (β), atau gamma (γ), guna untuk menduga
tipe bakteri apa yang akan muncul saat di lihat di mikroskop.
3.6.3 Pemantapan Kualitas dalam Mengidentifikasi Kuman 23
Terdapat tiga kriteria dalam mengidentifikasi kuman yang di lihat di
mikroskop, yang di nilai yaitu warna, bentuk, dan susunan.
Warna yang mungkin dapat ditemukan adalah warna ungu atau biru
tua yang menunjukkan sifat bakteri Gram positif dan warna pink atau
merah yang menunjukkan sifat bakteri Gram negatif.
Bentuk yang mungkin dapat ditemukan adalah bulat (coccus), batang
(basil), spiral, atau batang pendek (coccobasil).
29
Susunan yang mungkin ditemukan adalah berkelompok
(Staphylococcus), tersusun rapih seperti rantai (Streptococcus),
susunan tunggal, ataupun tersusun atas masing-masing dua bakteri
(diplococcus).
3.7 Alur Penelitian
Membuat surat izin
penelitian
Disetujui oleh Dinkes Tangerang Selatan
dan Puskesmas Ciputat
Pengambilan sampel saliva pada pasien DM di puskesmas
Ciputat yang ditampung dengan menggunakan pot.
Kultur bakteri dalam
Agar Darah
Nilai perubahan pada agar
darah setelah diinkubasi
selama 24-48 jam.
Pewarnaan Gram
Interpretasi Hasil
30
1.8 Manajemen Data
Data hasil penelitian pola bakteri pada saliva pasie DM di
Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan pada bulan September 2016,
dijelaskan secara deskriptif berbentuk tabel dan diagram untuk
menjelaskan distributi data dan morfologi bakteri yang ditemukan
berdsarkan hasil biakan di media Agar Darah dan metode pewarnaan
Gram.
31
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Gambaran Umum Lokasi Penelitian
4.1.1 Gambaran Umum
Puskesmas Ciputat terletak 6 Km sebelah Utara kota Tangerang Selatan.
Luas wilayah kecamatan Ciputat kira-kira 13.311 Ha dengan sebagain besar
berupa wilayah kecamatan tanah darat/kering (93,64%), sisanya adalah tanah
rawa/danau. Puskesmas Ciputat adalah satu dari tiga puskesmas yang ada di
wilayah kecamatan Ciputat. 34
Letaknya berbatasan dengan:
Sebelah Utara : Wilayah kerja Puseksmas Kampung Sawah
Sebelah Selatan : Wilayah kerja Puskesmas Pamulang
Sebelah Barat : Wilayah kerja Puskesmas Benda Baru
Sebelah Timur : Wilayah kerja Puskesmas Ciputat Timur
Puskesmas Ciputat terletak di jalan Ki Hajar Dewantara No.7 Kelurahan
Ciputat, Kota Tangerang Selatan, Provinsi Banten. Dibangun diatas tanah seluas
693 m2 dengan luas bangunan kurang lebih 1200 m
2 terdiri dari 2 (dua) lantai.
Kegiatan pelayanan puskesmas di lantai 1 (satu) sedangkan lantai 2 difungsikan
sebagai ruang pimpinan, staf, data dan ruang rapat. Di lantai dua juga terdapat
pelayanan pengobatan TB paru, klinik sanitasi, klinik PTRM (Pusat Terapi
Rumatan Metadon) dan laboratorium. 34
Wilayah kerja puskesmas Ciputat terdiri dari dua kelurahan yaitu
Kelurahan Ciputat dan Kelurahan Cipayung. 34
32
4.2 Hasil Penelitian
Data hasil penelitian tentang identifikasi bakteri pola kuman pada saliva
berdasarkan pewarnaan Gram pada pasien penderita DM di puskesmas Ciputat
Tangerang Selatan pada bulan September 2016 disajikan dalam bentuk tabel
distribusi. Pengelompokan distribusi berdasarkan penelitian sebelumnya oleh
Wulan (2013). 35
Gambar 4.1 Gambaran Karakteristik Kelompok Usia dan Jenis Kelamin pada
Pasien DM di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016
Gambar 4.1 menunjukkan bahwa dari 35 pasien DM yang berobat ke
puskesmas Ciputat pada bulan September 2016 terdiri dari 14 laki-laki dan 21
perempuan. Berdasarkan pengelompokan usia, paling banyak berusia antara 50-59
tahun yaitu sebanyak 14 orang yang terdiri dari 4 orang laki-laki (11,4%) dan
perempuan sebanyak 10 orang (28,6%). Jumlah terbanyak kedua yaitu yang
berusia ≥ 60 tahun sebanyak 13 orang yang terdiri dari 8 orang laki-laki (22,9%)
dan 5 orang perempuan (14,3%), dan yang paling sedikit adalah pasien yang
berusia antara 40-49 tahun sebanyak 8 orang yang terdiri dari 2 orang laki-laki
(5,7%) dan 6 orang perempuan (17,1%).
5,7%
2/35
11,4%
4/35
22,9%
8/35
17,1%
6/35
28,6%
10/35
14,3%
5/35
0
2
4
6
8
10
12
40-49 50-59 ≥60
Frek
uen
si (
n)
Usia (tahun)
Laki-laki
Perempuan
33
Gambar 4.2 Gambaran Karakteristik Kadar Gula Darah Puasa Pasien DM di
Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan pada Bulan September 2016
Pada gambar 4.2 didapatkan pasien yang mempunyai kadar gula darah
puasa sedang (100-126mg/dL) ialah 11 penderita (31,4%), sedangkan yang
mempunyai kadar gula puasa buruk (>127 mg/dL) ialah 20 penderita (57,15%)
dan yang mempunyai kadar gula darah puasa baik (<100) ialah 4 penderita
(11,4%).
11,4%
4/35
31,4%
11/35
57,15 %
20/35
0
5
10
15
20
25
<100 mg/dL 100-126 mg/dL >127 mg/dL
Fre
ku
ensi
(n
)
Kadar Gula Darah
Jumlah dan Persentase
34
Gambar 4.3 Gambaran Karakteristik Kadar Gula Darah 2 Jam Setelah Makan
Pasien DM di Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan pada Bulan September 2016
Pada gambar 4.3 didapatkan pasien yang mempunyai kadar gula darah 2 jam
sesudah makan sedang (140-200 mg/dL) ialah 17 penderita (48,6%), sedangkan
yang mempunyai kadar gula darah 2 jam sesudah makan buruk (>200 mg/dL)
ialah 15 penderita (42,9%) dan yang mempunyai kadar gula darah 2 jam setelah
makan baik (<140) ialah 3 penderita (8,6%).
Tabel 4.1 Karakteristik Subjek Penelitian Menurut Lama Menderita DM
(tahun) pada Pasien di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016
Variabel Minimal Maksimal Mean Median SD
Lama
Menderita
DM
< 1 20 6,57 5,00 6,055
Hasil analisa data untuk variabel lama menderita DM diperoleh nilai
median 5. Dalam melihat lama menderita diabetes ini peneliti tidak
8,6 %
3/35
48,6%
17/35 42,9%
15/35
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
<140 mg/dL 140-200 mg/dL >200 mg/dL
Fre
ku
ensi
(n
)
Kadar Gula darah
Jumlah dan Persentase
35
menggolongkan dengan kategori apapun, tetapi menggunakan angka numerik
pertahun. Hasil yang didapatkan adalah rata-rata pasien lama menderita DM
adalah 6,57 tahun, dengan nilai minimal kurang dari 1 tahun dan maksimal 20
tahun.
Berdasarkan hasil pemeriksaan mikroskopis, pada penelitian ini penelitian
diperoleh empat jenis bakteri yaitu Streptococcus, Staphylococcus, Batang Gram
positif, dan Batang Gram negatif. Distribusi jenis bakteri tersebut tertera dalam
tabel seperti dibawah ini.
Tabel 4.2 Gambaran Jenis Bakteri Berdasarkan Pewarnaan Gram pada
Saliva Pasien DM di Puskesmas Ciputat pada Bulan September 2016 36
Sifat Gram Bentuk Susunan Frekuensi (n) Persentase (%)
Positif Coccus Streptococcus 24 47
Batang
16 31,4
Coccus Staphylococcus 10 19,6
Negatif Batang
1 2
Total 51* 100
*Jumlah bakteri hasil identifikasi dari 35 sampel
Berdasarkan tabel 4.2 dari 35 sampel saliva pasien DM terdapat 51 jenis
bakteri yang dapat diidentifikasi. Jenis bakteri yang paling banyak ditemukan
yaitu Gram positif Streptococcus pada saliva pasien DM sebanyak 24 bakteri
(47%). Jumlah terbanyak kedua yaitu ditemukannya bakteri batang Gram positif
pada saliva pasien DM sebanyak 16 bakteri (31,4%). Jumlah terbanyak ketiga
yang ditemukan pada saliva pasien DM yaitu bakteri Gram positif
Staphylococcuss sebanyak 10 bakteri (19,6%). Jumlah yang paling sedikit
ditemukannya bakteri Batang Gram Negatif pada saliva pasien DM sebanyak 1
bakteri (2%).
36
Gambar 4.4 Gambaran Distribusi Bakteri Berdasarkan Kadar Gula Darah Pasien
DM di Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan pada Bulan September 2016
Pada gambar 4.4 didapatkan dari 35 pasien, didapatkan jumlah pasien yang
mempunyai kadar gula darah (GD) terkontrol sebanyak 21 orang dan yang
memiliki kadar GD yang tidak terkontrol sebanyak 14 orang. Berdasarkan
distribusi bakteri didapatkan 51 bakteri hasil identifikasi 35 sampel didapatkan
paling banyak adalah Gram positif Streptococcus, pada GD terkontrol
didapatkkan sebanyak 15 bakteri (29,4%) dan pada GD tidak terkontrol sebanyak
9 bakteri (17,6%). Bakteri terbanyak kedua adalah Gram positif batang, pada GD
terkontrol didapatkan sebanyak 9 bakteri (17,6%) dan pada GD tidak terkontrol
sebanyak 7 bakteri (13,7%). Bakteri terbanyak ketiga yang di temukan adalah
Gram positif Staphylococcus, pada GD terkontrol dan tidak terkontrol ditemukan
sama banyak masing-maisng 5 bakteri (9,8%). Bakteri yang paling sedikit
ditemukan adalah Gram negatif batang yang ditemukan pada GD terkontrol
sebnyak 1 bakteri (2%).
Hasil pengamatan bentuk sel bakteri pada saliva pasien DM menunjukan
bahwa diperoleh bentuk bakteri Gram positif yaitu Streptococcus sp,
29,4%
15/51
17,6%
9/51
9,8%
5/51
2%
1/35
17,6% 9/51
13,7% 7/51
9,8% 5/51
0% 0
2
4
6
8
10
12
14
16
Gram positif
Streptococcus
Gram Positif
Batang
Gram Posotif
Staphylococcus
Gram Negatif
Batang
GD terkontrol GD tidak terkontrol
37
Staphylococcus sp, dan batang. Ditemukan juga bakteri Gram Negatif yang
berbentuk batang. Bakteri tersebut dapat diidentifikasi melalui pewarnaan Gram
dan diamati dengan mikroskop binokuler dengan pembesaran 100x. Bakteri
tersebut dapat dilihat dari gambar berikut:
Gambar 4.5 Gram positif Streptococcus: berwarna ungu-kebiruan, bentuk
kokus/bulat, tersusun seperti rantai, pada penelitian Identifikasi Bakteri pada
Saliva Psien Diabetes Mellitus Berdasarkan Pewarnaan Gram pada Puskesmas
Ciputat Tangerang Selatan.
38
Gambar 4.6 Gram positif Staphylococcus: berwarna ungu-kebiruan, bentuk
kokus/bulat kecil, susunan berkelompok menyerupai anggur, pada penelitian
Identifikasi Bakteri pada Saliva Psien Diabetes Mellitus Berdasarkan Pewarnaan
Gram pada Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan.
39
Gambar 4.7 Gram Positif Batang: berwarna ungu-kebiruan, bentuk basil/batang
pendek, susunan tunggal hingga berkelompok, pada penelitian Identifikasi Bakteri
pada Saliva Psien Diabetes Mellitus Berdasarkan Pewarnaan Gram pada
Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan.
40
Gambar 4.8 Gram Negatif Batang: berwarna merah, bentuk basil/batang pendek,
susunan tunggal hingga berkelompok, pada penelitian Identifikasi Bakteri pada
Saliva Psien Diabetes Mellitus Berdasarkan Pewarnaan Gram pada Puskesmas
Ciputat Tangerang Selatan.
41
4.3 Pembahasan
Berdasarkan grafik 4.1 menunjukkan bahwa dari 35 pasien DM yang
berobat ke puskesmas Ciputat pada bulan September 2016 paling banyak berjenis
kelamin perempuan yaitu sebanyak 21 orang, sedangkan pasien yang berjenis
kelamin laki-laki adalah sebanyak 14 orang. Hal ini berbanding terbalik dengan
jumlah penduduk usia 40 tahun keatas di Kecamatan Ciputat pada tahun 2015
laki-laki lebih banyak dari perempuan dengan jumlah laki-laki 4.203 jiwa dan
perempuan 4.014. Berdasarkan hasil penelitian ini sesuai dengan teori yang
mengatakan bahwa wanita lebih berisiko mengidap diabetes karena secara fisik
wanita memiliki peluang peningkatan indeks masa tubuh (IMT) yang lebih besar
dibanding laki-laki.3, 34
Berdasarkan gambar 4.1, pasien DM yang berkunjung paling banyak yang
berusia diatas 50 tahun. Hal ini dapat dikaitkan dengan dengan meningkatnya usia
maka terjadi proses aging. Terjadi perubahan dan kemunduran fungsi kelenjar
saliva, kelenjar parenkim hilang dan akan digantikan oleh jaringan ikat dan lemak.
Keadaan ini mengakibatkan pengurangan jumlah aliran saliva dan self clearance
menurun sehingga memungkinkan terjadinya peningkatan infeksi pada rongga
mulut.37
Setiap manusia memiliki berbagai macam organisme didalam lingkungan
mulutnya, salah satunya adalah yang berjenis bakteri aerob. Bakteri aerob adalah
bakteri yang memerlukan udara atau oksigen agar dapat hidup atau tumbuh.
Terdapat dalam dua kelompok yaitu bakteri gram positif aerob dan bakteri gram
negatif. Bakteri gram positif aerob meliputi bakteri coccus (Streptococcus,
Staphylococcus), bacillus (saprofit), spiral (Treponema dan Leptospira), batang
(Corinebacteria) dan lain-lain. 23
Berdasarkan pengamatan yang dilakukan dengan menggunakan mikroskop
diperoleh data bahawa bakteri yang diisolasi adalah bakteri aerob diantaranya
Gram positif Streptococcus 47%, Gram positif batang 31,4%, Gram positif
Staphylococcus 19,6 %, dan Gram negatif batang 2 % (Gambar 4.2). Data tersebut
menunjukan bahwa bakteri yang paling banyak ditemukan pada saliva pasien DM
42
adalah Gram positif Streptococcus dan bakteri yang paling sedikit ditemukan pada
saliva pasien DM adalah bakteri batang Gram negatif.
Penelitian yang dilakukan oleh Suha (2014) yang menemukan flora
normal pada ronngga mulut pada 45 pasien DM diantaranya Streptococcus mutans
(28%), Klebsielia pneumonia (25,7%) , Staphylococcus epidermidis (11,5%) dan
Streptococcus sangious (11,1%), sedangkan pada saliva 15 orang sehat ditemukan
bakteri paling dominan adalah Staphylococcus epidermidis (41%) dan
Streptococcus mutans (37,5%).38
Menurut penelitian Gufriani (2014) bakteri yang
paling banyak ditemukan pada pasien DM yang mengalami karies gigi adalah
Streptococcus mutans sebanyak 21,87% dari 30 sampel, karena S. mutans
memiliki sifat asidogenik yang dapat membentuk asam dari mengubah bentuk
ekstraseluler polisakarida (ESP) yang ada pada sukrosa, fruktosa dan glukosa.39
Hal ini sesusai dengan hasil yang peneliti lakukan dimana paling banyak
ditemukan bakteri Gram positif Streptococcus yaitu sebanyak 47 % dari 30
sampel yang menunjukkan jenis flora normal rongga mulut pasien DM masih
sama, namun ada kemungkinan pasien yang di teliti pada saat itu sudah mempuyai
karies gigi.
Menurut Debora (2002) Meningkatnya kadar glukosa dalam darah maupun
saliva penderita diabetes mellitus menyebabkan peningkatan substrat bakteri dan
pembentukan plak gigi. Pemeriksaan kadar glukosa dalam cairan gingival pada
penderita diabetes mellitus ternyata lebih tinggi bila dibandingkan penderita non
DM. Hal ini yang menyebabkan perubahan kualitatif mikroflora yang berakibat
buruk terhadap jaringan periodontal.40
Perubahan kualitas mikrof1ora subgingival
ini dibuktikan dengan penelitian Gufriani (2014) yang menemukan flora
subgingival pada periodontitis penderita diabetes mellitus mengandung terutama
S. mutans yang dimana paling banyak menyebabkan keluhan pada rongga mulut.39
Pemeriksaan kadar glukosa darah dilakukan dengan tujuan untuk
mengetahui apakah sasaran terapi telah dicapai dan untuk melakukan penyesuaian
dosis obat, bila belum tercapai sasaran terapi.11
Berdasarkan hasil penelitian ini,
pada grafik 4.2 dan grafik 4.3 memperlihatkan bahwa penderita DM di puskesmas
Ciputat mempunyai kadar gula darah di atas 126 mg/dL untuk kadar gula darah
puasa dan di atas 140 mg/dL untuk kadar gula darah 2 jam sesudah makan.
43
Menurut Nasution (2008), pada penderita DM dengan kadar gula darah yang
tinggi (hiperglikemia) dapat menimbulkan kelainan pada rongga mulut.41
Berdasarkan gambar 4.4 didapatkan pada kadar gula darah terkontrol dan
tidak terkontrol terdapat bakteri yang paling banyak ditemukan adalah Gram
positif Streptococcus dan Gram positif batang. Berdasarkan penelitian Kampoo
dkk (2013) ditemukan bahwa pada pasien DM yang memiliki karies gigi, bakteri
yang paling banyak pada plak supragingival pasien tersebut adalah Streptococcus
sp dan Lactobacillus sp.42
Streptococcus sp merupakan Gram positif
Streptococcus dan Lactobacillus sp adalah Gram positif batang. Pasien DM
dengan keadaan gula darah yang tidak terkontrol dapat menimbulkan gangguan
pada rongga mulut diantaranya karies gigi, xerostomia, dan oral trush.7 Pasien
yang ditiliti kemungkinan memiliki gangguan rongga mulut tersebut.
Penelitian mengenai lama menderita DM didapatkan dari 30 penderita DM
di Puskesmas Ciputat rata-rata pasien lama menderita DM adalah 6,57 tahun,
dengan nilai minimal kurang dari 1 tahun dan maksimal 20 tahun. Penelitian
sebelumnya (Zahtamal, 2007) dikatakan, semakin lama pasien menderita DM
dengan kondisi hiperglikemia, maka semakin tinggi kemungkinan untuk
terjadinya komplikasi kronik.43
Hal ini dikaitkan dengan penelitian yang
dilakukan Tarigan (2003) mengemukakan, bahwa manifestasi penderita DM pada
mulut mempunyai bentuk yang bermacam-macam tergantung pada kebersihan
mulut, lamanya menderita DM dan beratnya DM tersebut.44
Hal ini didukung pula
oleh penelitian Wulan (2013) yang mengatakan rata-rata lamanya DM selama
6,45 tahun sudah mengalami keluhan xerostomia yang dimana terjadi penurunan
aliran saliva sehingga memungkinkan terjadinya peningkata risiko infeksi.35
Kemungkinan besar pasien DM di puskesmas Ciputat sudah mengalami
xerostomia karena rata-rata lama DM yang di derita selama 6,57 tahun.
44
4.4 Keterbatasan Penelitian
Dalam penelitian ini ditemukan beberapa keterbatasan yaitu:
Biaya untuk membeli bahan dan alat yang cuckup mahal
Penyesuaian jadwal dalam pengambilan data karena jadwal
akademik.
Hanya mengidentifikasi bakteri aerob.
Identifikasi bakteri hanya sebatas sifat pewarnaan Gram dan tidak
di identikasi hingga spesiesnya.
Tidak menambahakan distribusi data berdasarkan penghitungan
jumlah koloni bakteri.
45
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Kesimpulan dari hasil penelitian ini yaitu:
1. Bakteri yang paling dominan ditemukan pada saliva pasien Diabetes
Mellitus adalah Gram positif Streptococcus, bakteri lain yang ditemukan
adalah Gram positif Staphylococcus, Gram Positif batang, dan Gram
negatif batang.
2. Bakteri yang paling dominan ditemukan pada saliva pasien Diabetes
Mellitus dengan kadar gula darah terkontrol adalah Gram positif
Streptococcus dan pada gula darah tidak terkontrol adalah Gram positif
Streptococcus.
3. Jenis kelamin wanita lebih banyak mengidap Diabetes Mellitus dibanding
laki-laki.
4. Rata-rata lamanya menderita Diabetes Mellitus adalah 6,57 tahun.
5.2 Saran
Saran-saran yang dapat diberikan dari penelitian ini sebagai berikut:
1. Perlu penelitian lebih lanjut untuk mengetahui spesies bakteri agar
lebih spesifik.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai hubungan kadar gula
darah terhadap jumlah dan jenis bakteri pada pasien DM.
46
DAFTAR PUSTAKA
1. Kementrian Kesehatan RI. Situasi dan Analisis Diabetes. Pusat Data
Informasi Kementrian Kesehatan RI; 2014
2. World Health Organization. Definition and Diagnosis of Diabetes Mellitus
and Intermediate Hyperglycaemia; 2006.
3. Fatimah, Restyana Noor. Diabetes Melitus Tipe 2. Medical Faculty,
Lampung University. J MAJORITY. 2015; 4 (5). Hal 93-101.
4. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, Kemenkes RI. Riset
Kesehatan Dasar; 2013.
5. Tsakiridoi, Erini et al. Clinical Study Diabetes and Hemoglobin A1c as
Risk Factors for Nosocomial Infections in Critically Ill Patients. Hindawi
Publishing Coorporation Critical Care Researches and Practice; 2013.
6. Handayani, Juli. Pemeriksaan Komposisi Saliva pada Pendeita Diabetes
Melitus. Medan: FKG Universitas Sumatera Utara; 2005.
7. Lubis, Irawati. Manifestasi Diabetes Melitus dalam Rongga Mulut.
Available from:
http://poltekkesjakarta1.ac.id/file/dokumen/74artikel_bu_irwati.pdf
Accessed on September 6, 2016
8. American Diabetic Association. Diagnosis and Classification of Diabetes
Mellitus. Diabetes Care. 2013; 35(1).
9. World Health Organization. IDF Diabetes Atlas 6th Edition; 2013.
10. Sudoyo AW, Setiyohadi B, Alwi ISK, Marcellus, Setiati S. Buku ajar ilmu
penyakit dalam. Jilid III ed IV. Jakarta: Pusat Penerbitan Departemen Ilmu
Penyakit Dalam FKUI; 2009.
11. Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. Konsensus Pengelolaan dan
Pencegahan Diabetes Mellitus Tipe 2 di Indonesia; 2011.
12. Kumar V, Abbas AK, et al. Robbins and Cotran Pathologic Basis of
Disease 9th Edition. Philadelphia: Elsevier; 2014.
13. Longo DL, et al. Harrisons Principles of Intenal Medicine 18 th Edition.
USA: Mc.Graw-Hill; 2015.
47
14. Guyton AC. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi-11. Jakarta; EGC 2009.
15. Sherwood, Lauralee. Fisiologi Manusia: dari sel ke sistem. Edisi 7.
Jakarta: EGC; 2011.
16. Sukminingrum, Ninin, Masudi, Sam’an. Diabetes mellitus management in
dental practice (penatalaksanaan diabetes mellitus di praktek dokter gigi).
J Dent: Dentika. 2012; 17(1): 93-4.
17. Tortora, J Gerard. Principles of Anatomy and Physiology. 14th edition.
USA: John Wiley and Sons. Inc; 2014.
18. Sue PH & Russel TW. A review of saliva: Normal composition, flow, and
function. The Journal of Prosthetic Dentistry. 2001; 85 (2):162-16.
19. Pandey AK. Literature rivew: Physiologi of Saliva. Journal of Dentistry
Indonesia. 2014; 21(1): 32-3.
20. Michael TM, John MM, Jack P. Brock, Biology of Microorganisms Tenth
Edition. New Jersey: Pearson prentice Hall; 2006.
21. Majumdar S et al. Normal Microbial Flora of Oral Cavity. Journal of
Advanced Medical and Dental Sciences Research. 2014; 2 (4): 62-66.
22. Harvey RA, Champe PC, Fisher BD. Microbiology (2nd Ed.). USA:
Lippincot Williams & Wilkins; 2007.
23. Brooks, Geo F, Janet SB, Stephen AM. Mikrobiologi Kedokteran Jawetz,
Melnick, & Adelberg (Edisi. 23). Alih bahasa oleh: Huriawati Hartanto et
al. Jakarta: EGC; 2008.
24. Kayser FH, Bienz K, Eckert J. Color atlas of Medical Microbiology.
Stuttgart, New York: Thieme; 2005.
25. Staf Pengajar FK UI. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Edisi Revisi.
Jakarta: FKUI; 2002
26. Prescott LM, Harley JP, Aklein D. Microbiology, 9th edition. McGrawHill
Companies Inc. Boston; 2014.
27. Ryan JK. Sherris Medical Microbiology: An Introduction to Infectious
Diseases. 4th ed. New York: McGraw-Hill Companies; 2004.
28. Tarigan J. Pengantar Mikrobiologi. Jakarta: Depdiknas; 1988.
29. Public Health England. Bacteriology – Test Procedures. 2015; Issue no 2.
England: NHS
48
30. Cappuccino, James G, Sherman, Natalie. Manual Laboratorium Biologi.
Jakarta: EGC; 2013.
31. Oxoid. CM005 Blood Agar Base - Product Detail. Available from:
http://www.oxoid.com/UK/blue/prod_detail/prod_detail.asp?pr=CM0055
Accessed on September 27, 2016.
32. Lamster IB, Lalla E, Borgnakke WS, Taylor, G.W. The Relationship
Between Oral Health and Diabetes Mellitus. JADA. 2008; 139 (10): 19-24
33. Staf Pengajar FK UI. Penuntun Praktikum Mikrobiologi Kedokteran.
Jakarta: FK UI; 2012
34. Anonim. Profil Puskesmas Ciputat Tangerang Selatan. 2015.
35. Wulan GW. Gambaran Xerostomia pada Penderita Diabetes Mellitus Tipe
2 di Poliklinik Endokrin RSUP Prof. dr. R. D. Kandou Manado. Jurnal e-
Gigi: Universitas Sam Ratulangi. 2013; 1 (2).
36. Tompodung V, Rares F, Seoliongan S. Bakteri Aerob pada Spurum
Kelompok Geriatri dengan Infeksi Saluran Pernapasan di Puskesmas
Ranotana Weru. UNSRAT; 2014. Available from
http://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/ebiomedik/article/viewFile/3693/321
7 Accessed on November 16, 2016
37. Kidd EAM, Bechal SJ. Dasar-Dasar Karies. Jakarta; Penerbit Buku
Kedokteran EGC. 1992.
38. Sami, Suha M. Comparation Between Normal Oral Bacterial Flora in
Healthy and Diabetes Patiens. Journal of Kebala University. 2014; 12 (3):
257-263.
39. Gufriani, Nurul. Identifikasi Bakteri Pada Karies Gigi Penderita Diabetes
Mellitus. Makasar: Universitas Hasanuddin; 2014.
40. Tumilisar, Debora L. Komplikasi Diabtes Mellitus Pada Rongga Mulut.
Meditek Ukrida. 2002; 4 (9): 24-31
41. Nasution M. Kandidiasis Oral pada Diabetes Melitus. Majalah Kedokteran
Gigi. 2008; 41(3): 200-206
42. Kampoo K, Teanpaisan R, Ledder RG, McBain. AJ. Oral Bacterial
Communities in Individuals with Type 2 Diabetes Living in Southern
49
Thailand. American Society for Microbiology. 2013. Available from
http://aem.asm.org/ Accessed on October 18, 2016
43. Zahtamal, et al. Faktor-Faktor Risiko Pasien Diabetes Melitus. Berita
Kedokteran Masyarakat. 2007; 23(3): 142-147
44. Tarigan, MU. Diabetes Melitus dan Hubungannya dengan Perawatan
Kedokteran Gigi Anak. Jurnal Kedokteran Gigi USU. 2003; 8(1): 17-22
50
LAMPIRAN
LAMPIRAN 1
Surat Izin Penelitian
51
LAMPIRAN 2
Form Inform Consent
52
LAMPIRAN 3
Alat dan Bahan Penelitian
Agar Darah Set pewarnaan Gram
Pot spesimen Inkubator Mikroskop
Lemari es Ice Box
53
LAMPIRAN 4
Pewarnaan Gram
54
LAMPIRAN 5
Tabel Data Identifikasi Bakteri
No
Gram Positif
Streptococcus
Gram Positif
Staphylococcus
Gram Positif
Batang
Gram Negatif
Batang
1 √
2
√
3
√ √
4
√
5
√
6
√
7 √
8
√
9
√
10 √
11 √
12 √
13 √
√
14 √
15 √
√
16 √
√
17 √
18
√ √
19 √
√
20
√
21 √
22 √ √
23 √
√
24 √ √
25 √
26
√
27 √
√
28 √
√
29 √
30 √
√
31 √ √
32 √
33
√
34 √
√
35 √
√
55
LAMPIRAN 6
Riwayat Hidup Penulis
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
Nama : Herlin Oktaviyani
Tempat, Tanggal Lahir : Jakarta, 26 Oktober 1995
Alamat : Jl. Pasir RT 09/01 No.20 Ciganjur, Jakarta Selatan
Email : [email protected]
No. Telepon : 085776738124
Riwayat Pendidikan
2001- 2007 : MI El-Syifa Ciganjur Jakarta Selatan
2007- 2010 : SMPN 85 Jakarta
2010- 2013 : SMAN 49 Jakarta
2013- sekarang : Program Studi Kedokteran dan Profesi Dokter,
FKIK Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.