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IMPACT DE CERTAINES
PHYTOMOLECULES SUR LASANTE. CAS DE RESVERATROL
SOURSES, METHODE DANALYSE ET
IMPORTANCE DU RESVERATROL ENPHARMACOGNOSIE
Philippe Muk. Mul.
Philippe MUKULBAYI MULUMBA
PAR
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PLAN
CHIMIE DU RESVERATROLBIOSYNTHESE
SYNTHESE RECOMBINANTE
SOURCES
METHODES DANALYSEPROPRIETES PHYSIQUES
PROPRIETES BIOLOGIQUES
ACTIVITES ET USAGES
MECANISME DACTION
ABSORPTION ET METABOLISME
EVALUATION DE LACTIVITE BIOLOGIQUE
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CHIMIE DU
RESVERATROL
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Il sagit dun polyphenol de la classe des stilbenode
Cest le 5-[(E)-2-(4-hydroxyphnol)-ethenyl)] benzne-1,3-diol. Il se prsente sous
deux formes isomres trans et cis dont la plus abondante est la forme trans
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BIOSYNTHESE DU
RESVERATROL
Une polyketide synthase III catalyse 3 rx de
condensation successives de lunit acetate
partir du malonylSCoA avec le p-
coumaroylSCoA
Clivage thiolytique du thioesterDecarboxylation pour former le resveratrol
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L'utilisation du resv dans les produits commerciaux, parexemple dans les produits ceutiques, les produits de
soins personnels, les compositions antifongiques, les
compositions anti-oxydantes, les supplments dittiques,
etc. est limite en raison du prix actuel de cette molculeLes mthodes d'extraction de resv des tissus vgtaux tels
que les peaux des raisins rouges, les arachides ou les
tissus de la racine de Polygonum cuspidatum ne sont pas
rentables ; de mme que les moyens pour produire le resvpar synthse chimique sont difficiles, inefficaces et coteux
Il est donc ncessaire de mettre au point des mthodes
efficaces, rentables et de cot moyen pour produire le resv.
SYNTHESE RECOMBINANTEDU RESVERATROL I
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SYNTHESE RECOMBINANTEDU RESVERATROL II
La production microbienne industrielle du resv offre un moyen conomiquede produire des quantits commerciales de resv
Elle ncessite une expression fxnel du gne de la resv synthase et descell htes ayant la capacit de produire la fois le malonylSCoA et lePCSCoA dans des qtts importantes partir d'un substrat de carbone.
Les Mo tel E. coli, S cerevisiae presentent naturellement la capacit deproduire le malonylSCoA m1 en faible qtt alorsque une cell hte capablede synth des qtts import de petrol tel le Mo olagineux peut le produir endes qtts import
On trouve le PCSCoA en qtt faible ds les cells htes de nombreuseMobes. A ce titre la cell hte Mobienne selectn pr la production du resv
doit tre modifi en vue de produire efficacement le PCSCoA
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SOURCES DURESVERATROL II
Parmi les plantes alimentaires: le raisin, les fve decacao, les baies rouges du genre vaccinum, larachide(Arachis hypogea, la rubarbe (Rheum tataricum, lamre (Morus spp.) la grenade (Punica granatum) et lesorghoDes nombreuses plantes mdicinales contiennet du
resvratrol, le cas de la rnoue (Reynoutria japonica)
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METHODES DANALYSE Extraction par le mthanol ou mlange mthanol/eau (80:20)Les extrais schs ou lyophiliss sont en suite dissout dans le
mthanol ou de leau ou de lacetone avant dinverser la phasedanalyse HPLC
Extraction dans 100% dacetone suivit par un schage sous azote
et la dissolution dans du mthanol 70%. Lextrait est en suiteanalys par HPLC en phase inverse. Pour les glycosides, extraction dans du mthanol 100%. Aprs
traitement par la glycosidase, lchantillon est sch, dissout danslacetone 50% et analys par HPLC et spectromtrie de masse.
Les stilbenodes peuvent galement tre detecter par 1H-RMN.
La dtermination des teneurs en trans- stilbenodes peut se faire parHPLC avec dtection fluorimetrique aprs extraction lacetatedthyl. La phase mobile utilise est un gradient spcifiquecompos dacide actique et de mthanol.
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PROPRIETES
PHYSIQUESSoluble dans leau (20,03mg/ml), dans lthanol
(50mg/ml) et dans le dithylsulfoxyde ( 16mg/ml)
Se prsente sous deux formes isomres trans et cis,
avec passage de la forme trans la forme cis parirradiation UV
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Phytoalexine, activit antifongique, certaines plantesproduisent le rsveratrol comme mcanisme naturel dedfense antifongique
Puissant antioxydant, contribue la diminution de lipides de
faible densit (LDL)Diminue le niveau de cholestrol sanguin et les incidences de
maladies du cur. Cet effet a t attribu un phenomneconnu, le paradoxe franais: les citoyens franais quiconsomment rgulirement du vin rouge sont souvent moinsexpos aux maladies du cur et presentent des niveaux basde cholesterol mme lorsquils consomment des alimentsriches en graisses et en cholesterol .
IMPORTANCE EN
PHARMACOGNOSIE I.
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IMPORTANCE EN
PHARMACOGNOSIE II.Effets anti-inflammatoire associ linhibition de la
Cyclo-oxygnase (COX1 et COX2)
Prvention contre le cancer
Allongement de la dure de vieInhibition de lagrgation plaquettaire
Prvention contre les maladies neurodgnrative
(Huntington, Alzheimer, Parkinson)
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MECANISMEDACTION DU RESVERATROLACTIVITE ANTIOXYDANTE
Rayonnement s U.V,
stress, pollution,
alcoolisme, tabagisme
protines ADN
lipidesPhilippe Muk. Mul.
http://dgl.microsoft.com/mgnsrv.dll?1,en,j0168020 -
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Dpt des lipides
oxyds sur les
vaisseaux
Plaques
graisseuses
Perturbation du
fonctionnement des
membranes cellulaires
Drivs
carcinognes
Radicauxlibres
MECANISME DACTION DU RESVERATROL
ACTIVITE ANTI-OXYDANTE
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Radicaux
libres
protines
ADN
Mutations
carcinognes
enzymes
Drglement des signaux
cellulaires de prolifration ou de
dfense
MECANISME DACTION DU RESVERATROL
ACTIVITE ANTI-OXYDANTE
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Rayonnement s U.V,stress, pollution,
alcoolisme, tabagisme
protines ADN
lipides
Fe, Cuchlateurs +
scavangers
MECANISME DACTION DU RESVERATROL
ACTIVITE ANTI-OXYDANTE
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MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
ACTIVITE ANTI -INFLAMMATOIRE
Lendothlium est la paroi interne de vaisseaux
Un tissu dynamique cps de cell squameuses directement implique ds largulation de process entraitenant le tonus, les actions de vx sanguins et le systme
cardiovasculaire en gnral.En contact direct avec les constituants toxiques du sang tel que le LDL-Chol oxydDysfonctionnement = un de deux principaux responsables de maladies occlusives
des artres
dysfonctionnement Suractivation de plaquettes
Artriosclrose
inflammationCaillot sanguin
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MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
ACTIVITE ANTI -INFLAMMATOIRE
De NO2 svt cause par
loxydation du LDL et
cpsants du sang est lun de
1re mcanisme impliqu ds le
dysf de lendothlium
vasculaire
NO2Rgule llasticit vasculaireParticipe la protection contre
lartriosclroseEntretient les contractions cardiaques
Prvient les lsions sur les vx
Les propriete vasculoprotectrices du resveratrol ont t
mises en vidence par lobservation de lamelioration
de la fonction endothliale.
Effets attribuables la neutalisation des radicaux libreset ltouffement des mdiateurs pro inflammatoires et
aussi un renforcement de NO2 bioactif (un mdiateur
anti-inflammatoire et un vasodilatateur avec une
activit concomitante antiplaquettaire
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MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
INHIBITION DE LAGREGATION PLAQUETTAIRE
Suite une lsion de la paroi artrielle,
les plaquettes viennent saccrocher aux
parties endommages du vaisseau sanguin et
produisent de lADP et du Thromboxane A2.Ces composs dclenchent lagrgation des
plaquettes entre elles et le Thromboxane A2
provoque de surcrot une vasoconstriction.
Laccumulation dun grand nombre de
plaquettes forme une masse compactepouvant obstruer le vaisseau.
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MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
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Phospholipides membranaires
Phospholipase A2
lipooxygnase
leucotrine
COX
PGH2
PGG2
mastocytesthromboxane
plaquettes
ASA
INFLAMMATIO
N
RESVE
RATRO
L
MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
INHIBITION DE LAGREGATION PLAQUETTAIRE
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MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
PROTECTION CONTRE LES MALADIES CARDIOVASCULAIRES
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MECANISMES DACTION DU RESVERATROL
MECANISME ANTICANCEREUX
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METABOLISME DU RESVERATROL
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EVALUATION DE LACTIVITE
BIOLOGIQUE DU ESVERATROL
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EVALUATION DE LACTIVITE
BIOLOGIQUE DU ESVERATROL
TEST KRL
Il sagit de soumettre des hmaties une agression de
type oxydatif dans des conditions strictement contrles
et standardises.Dans ces conditions, les hmaties mettent en jeu tout
leur quipement enzymatique et molculaire pourrsister cette agression jusqu ce que la membrane
cellulaire soit modifie au point o elle laisse chapper
le contenu cellulaire.La rsistance de la population dhmatie teste
sexprime donc par le temps de libration de 50% du
contenu en hmoglobine.
reflte de faon globale le
potentiel de dfense dunindividu vis--vis de
lagression des radicaux
libres impliqus dans des
nombreuses pathologies permet daprcier
prventivement dans unepathologie donne, le
glissement du capital de
dfense de lindividu vers une
valeur basse,
prpathologique, qui tient
compte de tous les facteurspositifs (vitamines, capital
enzymatique de dfense) ou
des facteurs ngatifs
(tabagisme, alcoolisme,
stress, alimentation
dsquilibr, pollution).Philippe Muk. Mul.
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EVALUATION DE LACTIVITE
BIOLOGIQUE DU ESVERATROL
TEST KRL
utilis pour le suivi du pouvoir anti-radicalaire des molcules
pharmaceutiques in vitro et in vivo , ce test permet de
connatre leffet ngatif ventuel li un mtabolite mme si le
mtabolite incrimin nest pas encore identifi. Do son intrtpour la recherche pharmaceutique.tient compte du patrimoine gntique dun individu vis--vis de
sa dfense radicalaire, de son mode de vie, de sa situation
dagression connue ou inconnue et se prsente comme un test
de premire intension pour la mdecine prventive, dentretien,
de dpistage et de suivi thrapeutique.
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EVALUATION DE LACTIVITE
BIOLOGIQUE DU ESVERATROL
AUTRE METHODE
Il sagit dadministrer aux souris de la Rifampicine pour induire
une hepatotoxicit, puis administrer simultanment leresvratrol et une drogue de rfrence, la Silymarine par
exemple.
On dtermine alors :le niveau des enzymes marqueurs (SGOT, SGPT et SALP),
de lalbumine et des protines totales dans le srumOn value la peroxydation des lipides, la glutathione rduite
ainsi que les activits de la SOD, de la catalase, de la
glutathione peroxydase et de la glutathione rductase dans le
foie pour valuer lactivit anti-oxydant du resvratrol.
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