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Interceptação do Wheat mosaic virus (WMoV) no Brasil em
sementes de milho provenientes dos Estados Unidos
Márcio Martinello SanchesEmbrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia
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Caracterização do Problema
Vírus em Poaceae
● Hospedeiros de importância econômica
● Vetores
● Sintomas similares
● Vírus transmitidos por Aceria tosichella:
Wheat streak mosaic virus (WSMV)Wheat mosaic virus (Wmov) = High plains virusTriticum mosaic virus (TriMV)
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Caracterização do ProblemaComplexo Aceria tosichella – vírus transmitidos“Patossistema em expansão na América do Sul”
Argentina: A. tosichella (2005) WSMV (2002), WMoV (2008), TriMV (2012) Brasil: A. tosichella (2006) WSMV (2010)
Uruguai: A. tosichella (2007)
Fotos: Douglas Lau
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Wheat mosaic virus
Skare et al., 2006
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Desenvolvimento métodos diagnose
Projeto cooperação bilateral Embrapa-INTA
Vírus transmitidos por semente (quarentena)
Testes de validação - WmoVPCR convencional (Lebas et al., 2005) – baixa sensibilidade
Real-time PCR – (presente trabalho)
WSMV- Detecção a partir de semente de trigo (PCR convencional) (Botelho et al., 2016)
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PCR em tempo real- SYBR green
● Primers desenhados para WMoV
HPVFW414 5’ GAGTGCTGGTTTTTCTAAGGAGCACA 3’
HPVREV565 5’ CTGACCATAGGTGCCACAAGGTCTGA 3’
Amplificação até diluição 10-8 ng/μl
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Análises quarentenárias
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Interceptação de WMoV
Teste Elisa – absorbância limite
qPCR – Ct 30 e 35
Melting analysis – single peak
Sequenciamento: 99% - 100% de identidade com isolados do GenBank
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Importância Econômica
● Milho: 50-60% das plantas infectadas não produzem espigas ou espigas possuem sementes imaturas; Redução produção até 75% em híbridos suscetíveis (E.U.A.);
● Infecta trigo, aveia, cevada e centeio;
● Sintomas podem ser mais severos que de WSMV, especialmente em infecções mistas;
● Doença emergente – 1°relato “High Plains” E.U.A. (1993) (relatos: Austrália, Argentina, Chile, China, Israel);
● Aumento na taxa de transmissão por semente em milho (4% nos E.U.A.)
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● Até o momento, não há relatos da presença de WMoV no Brasil;
● O WMoV possui sintomas difíceis de se identificar, necessitando de analises sorológicas e moleculares para confirmação;
● Tem potencial de causar grandes danos à economia agrícola nacional.
Perspectivas
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Redes de Monitoramento ?
Truol et al., 2009
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Melhoramento preventivo?
Projetos de cooperação internacional
Lista de pragas quarentenárias ausentes
Inclusão?Monitoramento prévio?
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Agradecimentos
Stephanie BotelhoMacária DuarteAndreza Barbosa
Douglas Lau – Embrapa Trigo
Denise Návia – Embrapa Cenargen
Graciela Truol – INTA/Argentina
Fernanda Rausch Fernandes – Embrapa Quarentena
Apoio Financeiro – Embrapa/INTA
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Obrigado [email protected]