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LABORATORIO N 8 BIOLOGIA MOLECULAR
GRUPO SANGUINEO
INDICE
I. INTRODUCCION ...................................................................................................... 1
II. OBJETIVOS ................................................................................................................ 5
III. MATERIALES Y METODOS.............................................................................. 5
IV. PROCEDIMIENTO: .............................................................................................. 6
V. DISCUSIONES ........................................................................................................ 13
VI. CONCLUSIONES ................................................................................................ 13
VII. BIBLIOGRAFIA. ................................................................................................. 14
VIII. CUESTIONARIO ................................................................................................ 15
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GRUPO SANGUINEO: SISTEMA ABO Y FACTOR Rh
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I. INTRODUCCION
Los grupos sanguneos humanos ocupan un lugar especial en la gentica, en primer
lugar por sus contribuciones al establecimiento de algunos principios genticos y luego
por su importancia clnica en la transfusin de sangre en obstetricia.
Antgenos del sistema ABO
Los antgenos del sistema ABO se detectan sobre los eritrocitos entre la quinta y sexta
semana del embrin y no se desarrollan completamente hasta despus del
nacimiento. Esta podra ser una razn para que la enfermedad hemoltica del feto y del
recin nacido por incompatibilidad ABO, sea usualmente leve. Durante el crecimiento,
se van adicionando los azcares terminales sobre la cadena de oligosacridos en la
membrana de los eritrocitos, dando origen a cada uno de los antgenos de forma
especfica. Entre los 2 y 4 aos de edad, los antgenos A y B estn completamente
desarrollados y permanecen constantes durante toda la vida.
Gentica: hay tres genes que controlan la expresin de los antgenos ABO. El gen H,
ubicado en el cromosoma 19, codifica para la produccin de una enzima transferasa
(transferasa H), que une una molcula de L-fucosa a la galactosa terminal (Gal) de un
precursor comn (sustancia precursora) unido a los lpidos o protenas de membrana
del eritrocito, dando origen al antgeno
H, el cual es el paso anterior en la formacin de los antgenos de los grupos sanguneos
ABO. Los individuos que son homocigticos para el gen nulo (h/h) no producen
antgeno H y desarrollan anticuerpos anti-H; por lo tanto, estas personas aparte de no
producir el antgeno H, tampoco producen los antgenos A o B, y su suero contiene
anti-A, anti-B y anti-H. Este fenotipo se conoce como el fenotipo Bombay.
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Desarrollo de los antgenos del sistema ABO.
El gen ABO, ubicado en el cromosoma 9, posee tres alelos que son el A, el B y el O, que
varan de acuerdo a las sustituciones de nucletidos, las cuales determinan las
especificidades de las enzimas para las cuales codifican. El alelo A codifica para la
enzima transferasa A que cataliza la adicin de un residuo de N-acetilgalactosamina
(GalNAc) al antgeno H, generndose as el antgeno A. El alelo B codifica para la
enzima transferasa B que cataliza la adicin de un residuo de D-galactosa (Gal) al
antgeno H, generndose el antgeno B. El alelo O slo difiere del alelo A en la delecin
de un nucletido (guanina G en la posicin 261), lo que tiene como consecuencia un
cambio en el marco de lectura o frameshift y la produccin de una protena sin
actividad de
transferasa . La figura 2 ilustra la sntesis de los antgenos ABO.
El gen Se, ubicado tambin en el cromosoma 19, codifica para una enzima
(fucosiltransferasa) que se expresa en el epitelio de tejidos secretores, incluidas las
glndulas salivares y los tractos respiratorio y gastrointestinal. Esta enzima cataliza la
produccin de antgeno H en secreciones del organismo; as, los individuos
secretores poseen al menos una copia del gen Se (Se/Se o Se/se) que codifica para
una enzima funcional, produciendo antgeno H en las secreciones, el cual a su vez es
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procesado como antgeno A y/o B, dependiendo del genotipo ABO del individuo. Por
su parte, los individuos no secretores son homocigticos para el gen nulo (se/se) y
por lo tanto no pueden producir la forma soluble del antgeno H.
Expresin de los genes ABO. Convenciones: Fuc: Lfucosa; Gal: Dgalactosa; GalNAc: N
acetilgalactosamina.
CARACTERSTICAS DEL SISTEMA ABO
Las personas con sangre del tipo A tienen glbulos rojos que expresan
antgenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antgenos B en el
plasma de su sangre.
Las personas con sangre del tipo B tiene la combinacin contraria, glbulos
rojos con antgenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los
antgenos A en el plasma de su sangre.
Los individuos con sangre del tipo O 0 (cero) no expresan ninguno de los dos
antgenos (A o B) en la superficie de sus glbulos rojos pero tienen anticuerpos
contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB expresan ambos
antgenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos.
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Esta clasificacin internacional, debida a Landsteiner, ha reemplazado a la de
Moss, en la cual el grupo I corresponde al grupo AB de la precedente, el grupo
2 al grupo A, el grupo 3 al grupo B, y el grupo 4 al grupo O. Estos cuatro grupos
sanguneos constituyen el sistema ABO.
A causa de estas combinaciones, el tipo 0 puede transfundir a cualquier
persona con cualquier tipo y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO.
FACTOR RH
El factor Rh es una protena integral de la membrana aglutingena de los
glbulos rojos. Son Rh positivas aquellas personas que presenten dicha
protena en sus eritrocitos y Rh negativa quienes no presenten la protena. Un
85% de la poblacin tiene en esa protena una estructura dominante, que
corresponde a una determinada secuencia de aminocidos que en lenguaje
comn son denominados habitualmente Rh+. Alrededor de la sexta semana de
gestacin, el antgeno Rh comienza a ser expresado en los glbulos rojos
humanos.
Tener Rh [erre hache negativo] significa que se tiene la misma protena pero
con modificaciones en ciertos aminocidos que determinan diferencias
significativas en la superficie de los glbulos rojos, y hacen a los humanos Rh
disponer de anticuerpos (aglutininas) en el plasma que reaccionan contra los
glbulos rojos Rh+ [erre hache positivo].
El principal antgeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de
antgeno D es el anti-D. Si el antgeno D est presente el fenotipo es Rh positivo
y si D est ausente es Rh negativo. Se han identificado ms de 45 antgenos del
sistema Rh, pero de todos ellos apenas cinco son frecuentes, estos son: D, C, E,
c, e. Los anticuerpos a los distintos antgenos Rh aparecen despus de
exponerse un individuo Rh negativo a eritrocitos de sangre Rh positivo. La
herencia de los antgenos Rh es determinada por un complejo de dos genes, de
los cuales uno codifica la protena transportadora de antgeno D y otro codifica
la protena transportadora de antgeno "C" o "c", o de "E" y "e". Las personas
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Rh positivas poseen genes RHD, que codifica la protena transportadora de
antgeno D y RHCE, que codifica la especificidad de la protena transportadora
de C y E. Mientras el Rh negativo tiene nicamente el gen RHCE. El 45% de los
individuos Rh positivos es homocigoto al factor D, y el 55% restante es
heterocigoto por haber heredado un factor D positivo y otro negativo de sus
progenitores.
La transfusin de sangre de un Rh+ a un Rh que no tiene dicho aglutingeno
induce la formacin de anticuerpos, que en sucesivas donaciones puede
aglutinar la sangre (formar cogulos). De ah que en las donaciones de sangre y
rganos se tenga en cuenta dicho factor.
II. OBJETIVOS
Entender la clasificacin de los grupos sanguneos humanos de acuerdo al
sistema ABO.
Determinar el grupo sanguneo de los estudiantes.
III. MATERIALES Y METODOS
Placas de microtubulacion
Mondadientes
Algodn, alcohol y lancetas
Suero anti-A
Suero anti-B
Suero anti-AB
Suero anti-D
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IV. PROCEDIMIENTO:
TIPO DE SANGRE A
1.- Se limpia el dedo ndice con algodn y alcohol.
2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estril.
3. se deja caer una gota en la placa de microtubulacion.
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4. Mezclar con mondadientes de manera independiente.
Se observa que glbulos sanguneos presenta una aglutinacin donde se coloc
el anticuerpo B por lo tanto la sangre es de tipo A
Se agrega una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
SE DEJAR REPOSAR POR
UN MINUTO
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TIPO DE SANGRE O
1.- Se limpia el dedo ndice con algodn y alcohol.
2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estril.
3. se deja caer una gota en los 3 pocillos
4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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Mezclar con mondadientes de manera independiente.
Se observa una aglutinacin en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos
anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es O
SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO
Se agrega una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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TIPO DE SANGRE Y FACTOR Rh
1.- Se limpia el dedo ndice con algodn y alcohol.
2.- Se pincha el dedo con la ayuda de una lanceta estril.
3. se deja caer una gota en los 3 pocillos
4. Agregar una gota de suero Anti-A, Anti-B Y Anti-D
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Anti- A Anti - B
Anti - D Factor Rh
El principal antgeno Rh es el D y el anticuerpo presente en quienes carecen de
antgeno D es el anti-D. Si el antgeno D est presente el fenotipo es Rh positivo y si
D est ausente es Rh negativo
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Mezclar con mondadientes de manera independiente.
Leer los pocillos y determine el grupo sanguneo y el factor Rh a cada
paciente.
SE DEJAR REPOSAR POR UN MINUTO
Se observa una aglutinacin en los pocillos donde se colocaron los anticuerpos anti-A y anti-B, lo que indica que el tipo de sangre es O
Con el anti D se observa que no hay formacin de aglutinaciones lo que indica que es un Rh +
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V. DISCUSIONES
Se identific la presencia de antgenos en los eritrocitos, utilizando reactivos
compuestos de anticuerpos conocidos como anti A anti B y anti D.
La prueba para la clasificacin sangunea de rutina se basa en una tcnica de
hemaglutinacin, se utilizan reactivos comerciales que contienen anticuerpos
especficos para cada antgeno, que se mezclan con la sangre a clasificar.
Despus de mezclar una gota del reactivo con una gota de sangre, se observa la
presencia de hemaglutinacin.
VI. CONCLUSIONES
Se entendi la clasificacin de los grupos sanguneos humanos de acuerdo
al sistema ABO.
Al realizar las reacciones de hemaglutinacin en los glbulos rojos se
determin el grupo sanguneo de los estudiantes obtenindose: sangre de
tipo A, y sangre de tipo O. Del mismo modo se obtuvo el factor Rh,
dando como resultado Rh (+).
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VII. BIBLIOGRAFIA.
1. Garca CAA. medigraphic. [Online].; 2009 [cited 2014 diciembre 8. Available
from: HYPERLINK "http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-
2009/myl097-8c.pdf" http://www.medigraphic.com/pdfs/medlab/myl-
2009/myl097-8c.pdf .
2. UNLP. amazonasws. [Online].; 2010 [cited 2014 diciembre 8. Available from:
HYPERLINK
"http://ecaths1.s3.amazonaws.com/hematologiaclinicafacena/477720561.TP%
206.doc"
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06.doc .
3. enciclopedia de salud dietetica y psicologia. [Online].; 2014 [cited 2014
diciembre 8. Available from: HYPERLINK "http://www.enciclopediasalud.com/"
http://www.enciclopediasalud.com/ .
4. S.L.U. EIT. Medicina molecular FIBAO. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8.
Available from: HYPERLINK "http://medmol.es/quienes_somos.cfm"
http://medmol.es/quienes_somos.cfm .
5. Definicion abc. [Online].; 2014 [cited 2014 Diciembre 8. Available from:
HYPERLINK "http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php"
http://www.definicionabc.com/salud/anticuerpo.php .
6. Diaz Y. slideshare. [Online].; 2012 [cited 2014 Diciembre 8. Available from:
HYPERLINK "http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupos-
sanguineos" http://es.slideshare.net/Yuleivi/laboratorio-no-12-grupos-
sanguineos .
7. Lau LGFM. farmaciaulat. [Online].; 2011 [cited 2014 Diciembre 8. Available
from: HYPERLINK "http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-
factor-rh.html" http://farmaciaulat.blogspot.com/p/grupo-sanguineo-y-factor-
rh.html .
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VIII. CUESTIONARIO
1. QU ES UN ANTGENO Y QUE ES UN ANTICUERPO? Antgeno
Un antgeno es una molcula capaz de producir una respuesta del sistema inmune
adaptativo mediante la activacin de linfocitos. Esta definicin ampla el concepto
de antgeno ms all del concepto clsico que defina antgeno como la sustancia
que desencadena la produccin de anticuerpos. As dentro de esta definicin de
antgeno se incluyen las molculas que, previa presentacin antignica, son
capaces de desencadenar la activacin de clulas T citotxicas capaces de destruir
las clulas diana sin la participacin de anticuerpos.
La mayora de los antgenos son de naturaleza peptdica, aunque tambin pueden
actuar como antgenos molculas de distintos tipos como lipopolisacridos e
incluso ADN. Los antgenos pueden ser molculas enteras pero generalmente son
el resultado del procesamiento por clulas presentadoras de antgenos. A las
regiones especficas de los antgenos que son reconocidas por los anticuerpos o
por los receptores de clulas T (TCRs) se les conoce como eptopos o
determinantes antignicos. Los anticuerpos reconocen eptopos conformacionales
que deben ser accesibles en la protena original. Los TCR reconocen la estructura
que adopta un antgeno, ya procesado, dentro de la binding-groove de las
molculas MHC. En el proceso de presentacin antignica las clulas
presentadoras de antgeno procesan y presentan tanto protenas propias como
extraas a las clulas T. A los pptidos propios que son reconocidos como extraos
por el sistema inmune se les llama autoantgenos. La respuesta descontrolada
frente a autoantgenos puede ocasionar procesos patolgicos.
Anticuerpo
Un anticuerpo es una glucoprotena o una protena unida a uno o varios hidratos
de carbono que se puede encontrar en forma soluble en la sangre o en algn otro
fluido corporal de los seres vivos vertebrados. La razn de ser o funcin ms
importante que despliega un anticuerpo en el cuerpo es que son la principal
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herramienta con la que cuenta el sistema inmunitario para defenderse y
neutralizar la accin de algn elemento extrao que ingresa en el, como puede ser
el caso de una bacteria, un parsito o cualquier virus.
Si bien por supuesto puede haber variaciones, el anticuerpo tpico est formado
por unidades estructurales bsicas, ostentando cada una de estas de dos cadenas
pesadas y dos ligeras ms pequeas.
Asimismo, los anticuerpos tambin despliegan y tiene una importante
participacin en la medicina en lo inherente al diagnstico de las enfermedades,
ya que a travs de una prueba conocida como prueba serolgica, los profesionales
mdicos pueden determinar si hay anticuerpos presentes y si por el contrario,
luego del test se comprueba que los mismos no estn, entonces, ah si se podr
confirmar fehacientemente que la persona no se encuentra infectada.
2. CUL ES EL FUNDAMENTO DE LA PRUEBA DE TITULACIN EMPLEADA
EN EL RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUNEOS?
Los glbulos rojos del paciente se ponen en contacto con Reactivo Anti-A, Anti-B o
Anti-A, B monoclonal. Si existen en la superficie de los eritrocitos los antgenos
correspondientes, se producir una aglutinacin visible macroscpicamente. La
ausencia de aglutinacin en todos los casos, implica grupo O.
Los glbulos rojos del paciente se ponen en contacto con suero anti-D (anti-Rho).
Si existe en la superficie del eritrocito el antgeno correspondiente, se producir
una aglutinacin visible macroscpicamente.
La presencia del antgeno D se determina enfrentando los hemates problema, en
un medio proteico alto, con suero anti-D (RHo). La aglutinacin o no aglutinacin
de los hemates ensayados, son indicativos de la presencia o ausencia del
correspondiente antgeno en los mismos.
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La variante Du, forma dbil del antgeno D, puede detectarse mejor incubando la
suspensin de hemates con suero anti-D, efectuando la prueba de la
antiglobulina.
3. CUL ES LA DIFERENCIA ENTRE EL ANTGENO A, EL ANTGENO B Y EL
FACTOR RH?
Estos grupos sanguneos estn determinados por diferencias en los
monosacridos terminales expuestos en los globsidos de la membrana de las
clulas, los que corresponden a antgenos que en el laboratorio se detectan
mediante reacciones de hemaglutinacin en glbulos rojos. En el grupo
sanguneo A se expone una N-acetilgalactosamina, en el grupo B una galactosa,
en el grupo AB se exponen ambas, N- acetilgalactosamina y galactosa, mientras
que en el grupo O no se expone ninguna de estas.
Dependiendo de estos antgenos el cuerpo desarrolla anticuerpos contra el
antgeno no expuesto, por ejemplo, las personas que expongan solo el antgeno
A desarrollarn anticuerpos contra el antgeno B, y visceversa. Las personas de
grupo AB no desarrollan ningn anticuerpo, mientras que los del grupo O
desarrollan anticuerpos tanto para el antgeno A como el B. La presencia de
antgenos y anticuerpos determina la compatibilidad entre donantes
sanguneos y sus receptores.
Respecto al sistema Rhesus (Rh), las personas pueden ser Rh positivo o Rh
negativo, lo cual tambin est implicado en la compatibilidad sangunea entre
donantes receptores. El antgeno Rh implicado en este sistema tambin se
denomina antgeno D. A diferencia del sistema ABO, cuya herencia es de tipo
codominante, en el sistema Rhesus el Rh (+) es de tipo dominante y el Rh (-) es
recesivo. Esto puede generar la eritroblasto fetal debido a "incompatibilidad
Rh" la cual es una afeccin que se desarrolla cuando una mujer embarazada
tiene sangre Rh (-) y el beb que lleva en su vientre tiene sangre Rh (+)
heredado del pap.
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4. CUL ES EL FENOTIPO BOMBAY?
El fenotipo Bombay clsico (Oh) se caracteriza por la ausencia de los antgenos
A, B y H tanto sobre los eritrocitos como en las secreciones, debido a la
herencia de dos genes hh en el locusH; por lo tanto, la sntesis de los antgenos
A y B est bloqueada por la ausencia del antgeno H necesario para su
expresin. En otras palabras, para que se produzca antgeno H, debe existir al
menos una copia funcional del gen H (H/H o H/h); si ambas copias del gen son
inactivas (h/h) se produce el fenotipo Bombay. Debido a que estas personas
son deficientes en los antgenos A, B y H, ellos producen anti-H, anti-A y anti-B
de origen natural. En las pruebas iniciales los eritrocitos Bombay se clasifican
como grupo O. Los eritrocitos no reaccionan con anti-A, anti-B ni anti-AB,
mientras que el suero reacciona con clulas A, B, AB y O. Por lo tanto, las
personas con el fenotipo Bombay deben ser transfundidas slo con eritrocitos
de fenotipo Bombay. La ausencia de los antgenos ABH en este fenotipo no est
asociada con defectos de membrana o cambios en la vida media de los
eritrocitos. La presencia de los anticuerpos en el suero hace muy difcil la
transfusin sangunea, ya que todos los eritrocitos, excepto aquellos de otro
fenotipo Bombay, son incompatibles. La frecuencia del fenotipo Bombay clsico
es de 1 en 13.000 en India, y raramente se encuentra en otras poblaciones.