![Page 1: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/1.jpg)
Richiamo delle puntate
precedenti…..
1. Gli antigeni ABH sono composti da:
a. Carboidrati
b. Proteine
c. Lipidi
2. L’antigene H si ottiene:
a. Mediante l’aggiunta di uno zucchero all’antigene 0
b. Mediante l’aggiunta di uno zucchero alla sostanza precursore
c. Mediante la trasformazione dell’antigene A ad opera di una
trasferasi
![Page 2: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/2.jpg)
3. Il gene B codifica:
a. un enzima che aggiunge D-galattosio allo zucchero terminale
della sostanza H
b. Un polipetide transmembrana con un epitopo molto
immunogeno
c. un enzima che aggiunge N-acetilgalattosammina allo zucchero
terminale della sostanza H
4. Il gene Se:
a. Codifica per la presenza degli antigeni A e B nella saliva
b. È presente sul cromosoma 9 e l’allele amorfo è se
c. Codifica lo stato di secretore, ovvero la presenza di antigene H
nelle secrezioni biologiche c
![Page 3: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/3.jpg)
5. La progenie di genitori entrambi di genotipo A0:
a. Può essere solo A0
b. Può essere A0, AA o 00
c. Sarà solo AA o A0 ma non 00
6. La quantità di sostanza H sulla superficie dei globuli rossi varia nel
seguente modo:
a. A2B >A1B > A1 > 0 >A2>B
b. B>A1>A1B>0> A2 >A2B
c. 0>A2>B>A2B>A1>A1B
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7. Il sistema Rh è particolarmente importante poiché:
a. Tutti i soggetti D negativi presentano anticorpi anti-D
b. Gli antigeni D sono molto immunogeni
c. Gli anticorpi anti-D sono la principale causa di emolisi
intravascolare
8. I più importanti antigeni del sistema Rh sono:
a. Cw, Ew, e, CE
b. D, C, E, c, e
c. D, d, C, c, E, e
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9. Il sistema Rh e trapianti di organi solidi:
a. Il sistema Rh non gioca un ruolo nei trapianti d’organo in
quanto gli antigeni Rh sono espressi solo sui globuli rossi
b. Il sistema Rh gioca un ruolo nei trapianti di rene poiché
l’antigene D è espresso sulle cellule endoteliali
c. E’ sconsigliato trapiantare un organo solido in un ricevente con
anti-D poiché è a maggior rischio di rigetto iper-acuto
10. Un donatore di sangue con espressione debole dell’antigene D:
a. Va considerato come Du
b. Va classificato come D positivo poiché è potenzialmente in
grado di immunizzare un ricevente D negativo
c. Va considerato come D negativo poiché non è in grado di
immunizzare un ricevente D negativo
![Page 6: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/6.jpg)
11. Un ricevente di sangue con la variante DVI:
a. Non dovrebbe ricevere sangue da donatori D+ poiché potrebbe
produrre anticorpi anti-D
b. Può ricevere sangue solo da soggetti D+ poiché altrimenti si
immunizzerà contro gli antigeni d, c ed e
c. Può ricevere sangue solo da donatori DVI
12. La compatibilità trasfusionale nell’ambito del sistema Rh:
a. Prevede che nel modo più categorico NON si possa
trasfondere globuli rossi di donatori D+ a pazienti D-
b. Va sempre garantita la trasfusione di sangue D- a donne D- in
età fertile e ovviamente a tutti i soggetti con anticorpi anti-D
c. Poiché non esistono anticorpi D ‘naturali’ si può tranquillamente
trasfondere sangue D+ a tutti i soggetti D-
![Page 7: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/7.jpg)
Risposte
• a
• b
• a
• c
• b
• c
• b
• b
• a
• b
• a
• b
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• La membrana dei globuli rossi (come altre membrane cellulari) è un insieme di molecole lipidiche e proteiche. • I lipidi costituiscono circa il 50% della massa della membrana e sono suddivisi in fosfolipidi (60%), colesterolo (30%) e glicolipidi (10%). • Le proteine presentano un differente livello di espressione. Infatti, a fianco di proteine espresse con 200.000 copie/GR vi sono altre espresse in misura molto inferiore (50.000 copie/GR). • Le funzioni delle proteine presenti sulla membrana dei GR: recettori per le chemokine, molecole di adesione, proteine di trasporto, enzimi, controllo del complemento.
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Membrana eritrocitaria
![Page 11: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/11.jpg)
• Gli antigeni eritrocitari sono caratteristiche strutturali ereditate e polimorfiche, localizzate su proteine, glicoproteine e glicolipidi che si affacciano all’esterno della membrana dei globuli rossi.
• Per definizione gli antigeni sono immunogenici e possono portare alla produzione di allo-anticorpi specifici se introdotti nella circolazione di soggetti le cui cellule non presentano quel particolare antigene.
• Hanno importanza non solo nella trasfusione ma anche nell’ambito della compatibilità materno-fetale in quanto l’alloimmunizzazione verso antigeni presentati dalle cellule fetali può risultare nella malattia emolitica del neonato.
![Page 12: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/12.jpg)
Antigeni eritrocitari
esterno
interno
![Page 13: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/13.jpg)
• Quando una serie di antigeni presenti sulla superficie dei GR si eredita indipendentemente da un’altra serie, gli antigeni appartengono a diversi sistemi di gruppo sanguigno.
• Ad oggi sono noti 29 sistemi di gruppo sanguigno codificati da 39 geni che presentano 1000 alleli
• N. antigeni: 400
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![Page 15: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/15.jpg)
DISTRIBUZIONE DEGLI ANTIGENI (Ag) • Gli Ag che sono rappresentati nella quasi totalità degli individui sono indicati come ag ad alta frequenza
• Gli Ag presenti solo in poche persone sono definiti con il termine di Ag a bassa frequenza
• L’incidenza di questi ag ad alta o a bassa frequenza può anche essere diversa dei differenti gruppi etnici
• Gli Ag che descriveremo sono sono stati identificati, per la prima volta, dall’individuazione in un siero, del loro anticorpo specifico
![Page 16: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/16.jpg)
A PROPOSITO DELLA DISTRIBUZIONE DISTRIBUZIONE DEGLI Ag IN DIVERSI GRUPPI ETNICI
• La glicoproteina Duffy è nota per essere un recettore per il parassita Plasmodium vivax, un agente patogeno della malaria • Nell’Africa Occidentale dove la malaria è endemica, il fenotipo eritrocitario Fy(a-b-), che è estremamente raro tra i bianchi, presenta una frequenza > 80%
![Page 17: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/17.jpg)
Antigeni eritrocitari
Carboidrati • AB0 • P • Le • H • I
Proteine • MNS • Rh • Lu • K • Fy • Jk • Di • Yt • Xg • Sc • Do • Co • LW
• Kx • Ge • Cr • Kn • In • Ok • Raph • JMH • GIL
![Page 18: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/18.jpg)
Principali antigeni eritrocitari rilevanti ai fini trasfusionali
Carboidrati • AB0 • P • Le • H • I
Proteine • MNS • Rh • Lu • K • Fy • Jk • Di • Yt • Xg • Sc • Do • Co
• LW
• Kx • Ge • Cr • Kn • In • Ok • Raph • JMH • GIL
![Page 19: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/19.jpg)
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 20: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/20.jpg)
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 21: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/21.jpg)
SISTEMA MNSs ed U
• Sistema complesso, costituito da oltre 40 Ag • Ag presenti su 2 molecole glicoproteiche • M, N, S, s, U sono gli Ag principali
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 22: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/22.jpg)
SISTEMA MNSs ed U
• I GR privi di S e s possono essere negativi per l’Ag ad alta frequenza U; i soggetti privi di U possono produrre l’anticorpo anti-U, quando esposti a emazie U+
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 23: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/23.jpg)
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 24: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/24.jpg)
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 25: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/25.jpg)
SISTEMA Kell
• Gli Ag del sistema Kell sono espressi con bassa densità sulla membrana eritrocitaria • Vengono indeboliti o completamente distrutti dal trattamento delle emazie con agenti riducenti o con acidi • Sono portati da una proteina e sono codificati da un singolo gene
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 26: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/26.jpg)
SISTEMA Kell
• Identificato il primo anti-K nel 1946, causa di una MEFN • L’allele responsabile di K è presente nel 9% dei soggetti caucasici e 2% dei soggetti di origine africana • Kpa espresso in modo predominante nei bianchi, Jsa nei neri
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
NULL
![Page 27: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/27.jpg)
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 28: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/28.jpg)
SISTEMA Duffy
• Gli Ag Duffy sono codificati da un paio di alleli codominanti nel lcus Fy situato sul cromosoma 1 • Ci sono 4 fenotipi (di cui 1 assente nei caucasici) • La glicoproteina espressa dal gene Duffy è espressa anche in altri tessuti: cervello, rene, milza, cuore e polmone
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 29: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/29.jpg)
Antigeni eritrocitari
esterno
interno
![Page 30: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/30.jpg)
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 31: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/31.jpg)
SISTEMA Kidd
• Gli Ag Jka e Jkb sono localizzati sulla proteina di trasporto dell’urea, codificata dal gene HUT1 (cromosoma 18) • il fenotipo Jk(a-b-) è estremamente raro
Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition Tratto da Technical Manual AABB. 15th Edition
![Page 32: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/32.jpg)
Antigeni eritrocitari
esterno
interno
![Page 33: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/33.jpg)
• La rilevanza clinica di un sistema di gruppo sanguigno dipende:
dalla frequenza con cui si osservano alloanticorpi dalla caratteristica degli alloanticorpi (classe Ig, se IgG
sottoclasse, range termico, capacità di fissare il complemento, titolo)
determinano la capacità dell’anticorpo di distruggere i globuli rossi e di passare la placenta e causare MEN
![Page 34: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/34.jpg)
![Page 35: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/35.jpg)
Alloimmunizzazione eritrocitaria
antigeni anticorpi
![Page 36: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/36.jpg)
Risposta alloimmune
cellulare
Epitopi differenti
Risposta Alloimmune
•alloimmunizzazione eritrocitaria
• rigetto acuto trapianti di organi solidi
• eventi sensibilizzanti: gravidanze, trasfusioni, trapianti
• Cellula effetrice: linfocita T citotossico
• responsabile per rigetto acuto trapianti solidi, GVHD, GVL
Risposta alloimmune
innata
Risposta alloimmune
umorale
![Page 37: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/37.jpg)
Antigeni eritrocitari
Carboidrati • AB0 • P • Le • H • I
Proteine • MNS • Rh • Lu • K • Fy • Jk • Di • Yt • Xg • Sc • Do • Co • LW
• Kx • Ge • Cr • Kn • In • Ok • Raph • JMH • GIL
![Page 38: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/38.jpg)
Alloanticorpi eritrocitari
Naturali • prevalentemente IgM, ma possono essere in parte IgG (IgG2 e IgG4) • raramente solo IgG
Definizione: anticorpi che si riscontrano in soggetti che non sono mai stati trasfusi, che non hanno avuto gravidanze o ai quali non siano mai stati iniettati GR con il relativo Ag. CROSSREATTIVITA’ (Ag
batterici)
Immuni • prevalentemente IgG (IgG1 e IgG3) • possono essere IgM • a volte una miscela di IgG e IgM
![Page 39: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/39.jpg)
![Page 40: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/40.jpg)
Formazione alloanticorpi eritrocitari
Indipendente da linfociti T • stimolazione dei linfociti B direttamente, senza l’aiuto di linfociti T
• IgM anti-A o anti-B • solo IgM in quanto
l’assenza dei linfociti T non consente lo switching isotipico
Dipendente da linfociti T • antigeni proteici
• anti-D è il principale esempio • RhD: è l’antigene più
immunogeno (dopo AB0)
![Page 41: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/41.jpg)
Numero antigeni del sistema Rh 49. I più significativi: D,C,E,c,e
Molecole presentanti gli antigeni Proteine RhD e RhCE attraversano
la membrana cellulare a più riprese
(transmembrane, multipass).
Funzione non nota (forse trasporto
CO2 o NH4)
Base molecolare 2 geni: RHD e RHCE. Delezione
del gene RHD è responsabile del
fenotipo Rh negativo (d).
Frequenza degli antigeni Rh nei
caucasici
D 85%, C68%, E 29%, c 80%, e
98%
Aplotipo Rh più frequente nei
caucasici
DCe (42%)
Antigeni del Sistema di Gruppo Sanguigno Rh
![Page 42: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/42.jpg)
![Page 43: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/43.jpg)
Tipologia Prevalentemente di tipo IgG (misura molto
minore anche IgM)
Reattività Provocano emolisi. Raramente attivano il
complemento. Si legano ai GR ‘marcandoli’
per essere distrutti nella milza (emolisi
extravascolare)
Reazioni trasfusionali SI. Tipicamente reazioni ritardate, severe,
extravascolari.
MEN SI. Sono gli anticorpi più comunemente
implicati.
Anti-D circa il 50% MEN
Anti-D e anti-c forme severe
Anti-C, E, e forme moderate o lievi
Anticorpi prodotti contro gli antigeni del Sistema Rh
![Page 44: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/44.jpg)
• Una percentuale di globuli rossi trasfusi non sarà vitale (in funzione dell’età dell’unità) • Queste cellule vecchie si frammentano mentre passano attraverso la milza, e molte proteine solubili di origine del donatore, vengono riversate nel sangue • I B-linfociti sorvegliano costantemente il sangue alla ricerca di proteine non-self, e quando incontrano proteine specifiche per il loro sito, si legano a loro.
Meccanismo DIRETTO di riconoscimento
![Page 45: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/45.jpg)
• Il legame antigene-immunoglobulina manda un segnale alla cellula per internalizzare il recettore Ig, mediante un processo chiamato endocitosi • Una volta all’interno del linfocita B, l’antigene viene degradato in piccoli peptidi, alcuni dei quali si legano alle molecole MHC di Classe II.
![Page 46: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/46.jpg)
• Le molecole MHC II con il loro peptide specifico vengono quindi portate in superficie dove incontreranno il T-cell receptor specifico dei Linfociti CD4 Helper
![Page 47: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/47.jpg)
• L’interazione MHC-peptide-co-receptor stimola la produzione di Il-1, Il-2, Il-4, che danno il segnale ai linfociti B di proliferare e differenziarsi in plasmacellule e produrre anticorpi specifici per l’antigene presentato ai CD4.
![Page 48: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/48.jpg)
• La classe anticorpale prodotta inizialmente è IgM, ma eventualmente si verifica uno switching ed inizia ad essere prodotto Ab di classe IgG.
• Nei laboratori di immunoematologia, l’anticorpo viene evidenziato mediante lo screening anticorpale oppure tramite il crossmatch indicando che l’alloimmunizzazione post-trasfusionale è avvenuta.
![Page 49: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/49.jpg)
• Il secondo meccanismo di alloimmunizzazione prevede che le vecchie cellule trasfuse siano fagocitate da macrofagi della milza o fegato.
Meccanismo INDIRETTO di riconoscimento
![Page 50: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/50.jpg)
• Una volta fagocitate, le proteine (alcune delle quali rappresentano gruppi sanguigni) vengono ‘digerite’ in molti diversi piccoli peptidi.
![Page 51: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/51.jpg)
• I peptidi vengono trasportati sulla superficie delle cellule (APC) nell’ambito delle proteine MHC di classe II, pronti a essere presentati ai linfociti T helper (CD4)
![Page 52: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/52.jpg)
• Il TCR in combinazione con le proteine CD4, riconosce le proteine ‘estranee’ e manda segnali all’interno della cellula affinché si producano e si secernano Il-2 e Il-4.
![Page 53: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/53.jpg)
• queste citochine inviano segnali ai B-linfociti nelle vicinanze che abbiano riconosciuto lo stesso antigene, di proliferare e produrre anticorpi della medesima specificità
![Page 54: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/54.jpg)
• Il meccanismo DIRETTO entra in gioco principalmente quando il carico antigenico non è eccessivo, come ad esempio nell’alloimmunizzazione materno-fetale
• Il meccanismo INDIRETTO invece, è implicato ad esempio in corso di trasfusione, quando lo stimolo antigenico è più rilevante
Meccanismo DIRETTO vs. INDIRETTO
![Page 55: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/55.jpg)
• Una analisi su 159.262 pazienti ha dimostrato che complessivamente, solo il 2,9% dei pazienti trasfusi ha sviluppato anticorpi (G Hoeltge Arch Pathol Lab Med 1995)
• Uno studio più piccolo, su 2940 pazienti trasfusi, evidenzia una % di immunizzati pari a 2,6% (NM Heddle, BJH 1995)
Alloimmunizzazione eritrocitaria: la dimensione del problema
![Page 56: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/56.jpg)
ricerca anticorpi 2003-2007
TS NEG
105960 (97,3%)
TS POS;
1948 (1,8%)TS senza risultato
979 (0,9%)
IDENTIFICAZIONI 2003-2007
anti-N; 4; 0%
anti-H; 4; 0%
anti-A1; 8; 1%AUTO-PAN TL; 9; 1%
PAN Coombs; 15; 1%
IMPILAMENTO; 10;
1%
anti-Kp a; 27; 2%
anti-Jk b; 5; 0%
ASPECIFICO; 86; 6%
anti-Fy a; 18; 1%
anti-Fy b; 1; 0%
anti-Jk a; 41; 3%
anti-KEL; 220; 15%
anti-Lu a; 24; 2%anti-Lu b; 1; 0%
anti-Lewis a; 58; 4%
anti-Lewis b; 19; 1%
anti-I; 35; 2%
AUTO-PAN Coombs;
35; 2%
anti-M; 72; 5%
anti-S; 21; 1%
anti-P1; 15; 1%
anti-C; 60; 4%
anti-E; 196; 14%
anti-D; 334; 23%
anti-c; 64; 4%
anti-Cw; 34; 2%
anti-e; 12; 1%
Ospedale San Gerardo, Monza
![Page 57: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/57.jpg)
5
5,5
6
6,5
7
7,5
8
8,5
9
9,5
20-nov 22-nov 24-nov 25-nov 26-nov 27-nov 28-nov 30-nov 01-dic 02-dic 03-dic 04-dic
0
5
10
15
20
25
30
Hb
Bil
CD IgG+
TS=neg CD IgG+
TS=neg CD IgG+,
C3d++
TS=neg
CD IgG+,
C3d++
TS=pos,
anti Jka
Caso B.D., ematologia adulti: probabile reazione emolitica ritardata da anti-Jka
36949* 27890 Jka+ 28395 37048 73015 Jka+ 28891 Jka+
Paziente di 68 anni affetto da Linfoma di
Hodgkin, stadio IV, infiltrato midollare.
Recidivato in aprile ’08 dopo 5 anni
- TAC no lesioni focali
- Eco addome: fango e calcoli biliari
- Epatite cronica attiva HBV correlata
- Coombs diretto da IgG e C3d nel 2000;
eluato panagglutinante
Anamnesi trasfusionale positiva
28891 Jka-
* Unità di sangue trasfuse: in nero, tipizzazione Jka non nota, in rosso unità JKa positive e in verde, unità JKa negative
04-12-08
E
m
o
g
l
o
b
i
n
a
B
i
l
i
r
u
b
i
n
a
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20 pazienti, 200 controlli
Responder vs. non-responder
![Page 59: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/59.jpg)
Quali caratteristiche dei pazienti sono predittive
dell’alloimmunizzazione eritrocitaria?
Conoscere le condizioni cliniche che predispongono
all’alloimmunizzazione è importante per 2 motivi:
- consente una migliore gestione trasfusionale del paziente
(ad esempio somministrare trasfusioni più compatibili)
- migliora la conoscenza sulla eziologia di questa reazione
trasfusionale
![Page 60: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/60.jpg)
Disegno dello studio: la scelta dei pazienti e dei controlli
Bauer et al. Transfusion 2007
Alloimmunizzazione: riscontro di un NUOVO alloanticorpo contro Ag eritrocitari al di fuori del
D e AB0. Solo le alloimmunizzazioni primarie sono prese in considerazione, e solo in
seguito a trasfusioni. L’alloimmunizzazione è attribuita alla ultima trasfusione prima
dell’evidenziazione del nuovo alloanticorpo.
![Page 61: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/61.jpg)
Bauer et al. Transfusion 2007
Fattori predisponenti: sesso femminile, diabete mellito, neoplasia solida,
precedente trapianto di CSE.
• Le donne sono esposte ad alloantigeni durante la gravidanza ed il parto
• Diabete: nessuna spiegazionje apparente
• Neoplasia (nonostante chemioterapia): stato infiammatorio, attivazione del
sistema immunitario (Hendrickson Transfusion 2006)
• Trapianto CSE: stato infiammatorio
Fattori protettivi: malattie linfoproliferative, aterosclerosi sintomatica
• Malattie linfoproliferative: clone maligno può alterare la funzionalità dei T e B.
Chemioterapia può provocare immunosoppressione
• aterosclerosi: nessuna spiegazione
![Page 62: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/62.jpg)
Il ruolo dell’infiammazione nell’alloimmunizzazione eritrocitaria
The role of inflammation in alloimmunization to antigens on transfused blood cells
J C Zimring, J E Hendrickson
Curr. Opin Hematol 2008
• Un vaccino proteico è solo debolmente immunogenico se somministrato senza
un adiuvante infiammatorio
• La patologia di base del ricevente una trasfusione potrebbe influenzare la
capacità di immunizzarsi
• casi di pazienti affetti da artrite reumatoide che sviluppano multipli
anticorpi dopo una singola trasfusione
• pazienti affetti da drepanocitosi sviluppano anticorpi con maggiore
frequenza rispetto ad altri pazienti: stato infiammatorio cronico?
• Uso di modelli animali: topi transgenici che esprimono antigeni eritrocitari
umani
• Induzione di uno stato infiammatorio (con un RNA a doppia elica)
• Aumentata produzione di alloanticorpi correlata allo stato infiammatorio
![Page 63: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/63.jpg)
• 98 pazienti D- hanno
ricevuto in totale 445 unità D+
• 24 riceventi hanno formato
44 nuovi anticorpi di cui 22
(22%) anti-D
• dati di precedenti lavori
riferivano una percentuale
molto più elevata (80%)
• 98 pazienti D- hanno
ricevuto in totale 445 unità D+
• 24 riceventi hanno formato
44 nuovi anticorpi di cui 22
(22%) anti-D
• dati di precedenti lavori
riferivano una percentuale
molto più elevata (80%)
![Page 64: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/64.jpg)
Transfusion 2003
• 8 pazienti affetti da AIDS RhD- hanno ricevuto unità di GRC
D+, media per paziente 6,25
• Nessuno ha sviluppato anti-D
• Nello stesso periodo dello studio, 6 pazienti D- affetti da altre
patologie e trasfusi con GRC D+ hanno tutti sviluppato anti-D
• Possibile spiegazione: riduzione dei linfociti T CD4+ tipica della
patologia
![Page 65: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/65.jpg)
• L’immunogenicità dei diversi antigeni dei gruppi sanguigni può essere stimata in base alla frequenza dei relativi anticorpi (Giblett 1961) • Obiettivo dello studio: identificare i fattori che incidono sulla frequenza e specificità dell’alloimmunizzazione • Disegno dello studio: retrospettivo, 19 ospedali, 5 anni • Sono stati considerati anticorpi contro: Rh, Kell, Duffy, Kidd, MSs • Esclusi: anti-D, anticorpi contro Ag a bassa o alta frequenza • Solo pazienti con storia trasfusionale nota sono stati considerati • Dati raccolti: età, sesso, storia trasfusionale, intervallo tra trasfusione e screening Ab
![Page 66: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/66.jpg)
N. Ab di interesse Probabilità di esposizione all’Ag K N. di Ab anti-K Probabilità di esposizione all’Ag d’interesse
X
Potenza relativa degli antigeni, confrontati all’antigene K, è stata determinata con l’equazione di Giblett:
![Page 67: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/67.jpg)
• 1778 pazienti, 2177 anticorpi
• 284 pazienti con specificità
multiple (2-5)
• Rapporto femmine: maschi=2.2
• Età media 64 anni
• Totale 12.379 trasfusioni,
mediana 4 unità
![Page 68: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/68.jpg)
• anti-C più frequente negli anziani, anti-M e anti-S più frequente nei giovani
• anti-Jka predominano nei pazienti di sesso maschile e dopo poche sacche
• anti-K più frequente nei politrasfusi
![Page 69: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/69.jpg)
Anti-Jkb Anti-Jka Anti-Fya
Anti-K
Anti-c
Anti-E
• anti-E più frequente fino a 5 anni dall’evento sensibilizzante
• anti-Jka e anti-Jkb riscontrati nei primi 3 mesi, poi si riducono
![Page 70: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/70.jpg)
Intervallo dalla trasfusione
• 0.3-0.4 % dei pazienti ha sviluppato anticorpi ENTRO 3 giorni dalla trasfusione
• Implicazioni per la regola dei 3 giorni di validità della richiesta trasfusionale
![Page 71: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/71.jpg)
• Potenza immunogena degli Ag relativa al K: anti-K 1.3 volte più immonogeno del E,
3.5 volte Jka, 4.9 volte c, 11.6 volte il Fya
• anti-Jka e anti-Jkb riscontrati nei primi 3 mesi, poi si riducono
![Page 72: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/72.jpg)
Considerazioni conclusive
• E’ importante conoscere i fondamenti immunobiologici dell’alloimmunizzazione anche per la pratica quotidiana • I grandi studi sull’alloimmunizzazione eritrocitaria ci danno indicazioni cliniche che potrebbero essere importanti per prevedere quali pazienti sono più a rischio di alloimmunizzazione • L’alloimmunizzazione eritrocitaria è una complicanza trasfusionale sottovalutata e sottoriconosciuta
![Page 73: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/73.jpg)
SHOT Cumulative data 1996 – 2007 (4335 cases)
![Page 74: Lezione 4 alloimmunizzazione eritrocitaria dic 2010](https://reader033.vdocuments.pub/reader033/viewer/2022052403/568c37f41a28ab02359d5e0b/html5/thumbnails/74.jpg)
Transfusion reactions 2007-2009
FNHTR 195
Allergy (urticaria) 140
TACO 20
Significant hypotension 14
Severe bronchial spasm 4
DHTR 6
Anaphylactic shock 6
TA-GVHD 1
Transfusion errors
(acute hemolysis)
7
(2)
TRALI 2
Other 77
Total 472
Total N. transfused units 219,129
Frequency of transfusion
reactions/transfused unit
0.22%
Hemovigilance data from Friuli Venezia Giulia 2007-2009