Download - LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat
![Page 1: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/1.jpg)
Diagnostic de laborator
Coci gram pozitivi
![Page 2: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/2.jpg)
Genul Staphylococcus
• Stafilococi coagulază-pozitivi: S. aureus
• Stafilococi coagulazo-negativi (SCN) cu importanță clinică: ex. S. lugdunensis, S. epidermidis, S. haemolyticus, S. saprophyticus (mai ușor ALB și CITRIN)
Staphylococcus aureusMicroscopie electronicăSursa: CDC/Janice Haney Carr Jeff Hageman, M.H.S.
stafilococul secreta enzima coagulaza: care activează coagularea plasmei Si este un marker al virulentei.
![Page 3: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/3.jpg)
Produs patologic- portaj: cavitatea nazală, faringe, tegumente(zona axilară, perianală)- infecții tegumentare puroiul (⇒ S. aureus)- infecții urinare urină ⇒ (SCN)- pneumonie spută⇒- meningite LCR⇒- sepsis
- toxiinfecții alimentare materii fecale, vomismente, alimente.⇒(provocate de exotoxinele preformate, existente în alimente în
care s-au multiplicat stafilococi enterotoxigeni)
- infecții nosocomiale - S. aureus meticilino-rezistent (MRSA)
![Page 4: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/4.jpg)
Examenul direct al produsului patologic
- macroscopic: puroi cremos, filamentos, gălbui.- microscopic: colorația Gram: coci gram (+), dispuși în grămezi
asemănătoare ciorchinilor de strugure
Staphylococcus spp.Cultură purăColorație Gram, 100x
Staphylococcus spp.
Produs patologic Colorație Gram, 100x
![Page 5: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/5.jpg)
Cultivare pe medii in vederea obtinerii de colonii izolate
- mediul de îmbogățire: mediul hiperclorurat Ex. Chapman- nepretențios, poate fi cultivat pe geloză simplă
Incubare aerobă la 37°C, 18 – 24 ore.
![Page 6: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/6.jpg)
Identificarea bacteriei- Caractere morfotinctoriale: frotiu din cultură pură ⇒
coci Gram (+), în grămezi.- Caractere de cultură: col „S” cu pigment auriu
Staphylococcus aureusCultură pură, geloză simplă Colonii S, pigment galben-auriu
Staphylococcus aureusCultură pură, geloză simplă
![Page 7: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/7.jpg)
- catalază +
- coagulaza liberă +: S. aureus;- coagulaza legată + (clumping factor - CF):
S.aureus, S. Lugdunesis
- producerea de DN-ază: S. aureus
testul DN-azei
(catalaza descompune peroxidul de hidrogen in apa si oxigen)
- Caractere biochimice:
![Page 8: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/8.jpg)
![Page 9: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/9.jpg)
- producere de pigment: - auriu la S. aureus- alb S. epidermidis- citrin S. saprophiticus
- Caractere biochimice:
![Page 10: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/10.jpg)
- producerea de hemolizine – pe geloză-sânge- hemoliza ß (S. aureus, S. haemolyticus, ș.a.)- nu prezintă hemoliză (majoritatea tulpinilor SCN)
Hemoliza ß = zone largi de hemoliză clară.
- Caractere biochimice:
Staphylococcus aureusCultură pură, geloză sânge Colonii S, ß-hemolitice
Staphylococcus aureusCultură pură, geloză sângeLumină incidentă, 2x
Staphylococcus aureusCultură pură, geloză sânge, se evidențiază hemoliza ßLumină transmisă, 2x
![Page 11: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/11.jpg)
Determinarea patogenității
- in vitro: producerea de coagulază
- in vivo: inoculare la animale de laborator
![Page 12: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/12.jpg)
Tipizarea bacteriilor
pentru identificarea sursei de infecție- prin lizotipie (determinarea sensibilității
stafilococului față de bacteriofagi)- prin metode de biologie moleculară
![Page 13: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/13.jpg)
Testarea sensibilității la antibiotice
- Există fenomenul de rezistență- întâi la penicilină (PENICILINAZĂ)- apoi la oxacilină- apoi la meticilină ...
- încă sensibil la Vancomicină (dar nu 100%)
obligatorie se realizeaza prin metode difuzimetrice
stafiloccocul secreta penicilinaze sau beta-lactamaze: enzime care inhiba penicilina si antibioticele beta-lactaminice, ceea ce-i confera rezistenta bacteriei la tratamentul cu penicilina si alte antibiotice similare.
![Page 14: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/14.jpg)
Genul Streptococcus
• S. pyogenes
• S. agalactiae
• S. grup viridans
• S. pneumoniae (Pneumococ)
Streptococcus spp. (SGC) Microscopie electronicăSursa: CDC/Janice Haney Carr
![Page 15: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/15.jpg)
Produs patologic
S. pyogenes:- secreție faringiană (angina eritemato-pultacee) - puroi (leziuni cutanate)S. agalactiae:- secreție vaginală, secreția canalului cervical – la mamă- LCR, sânge, aspirat bronșic – la nou-născut
Pneumococ:- spută, LCR, sânge
![Page 16: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/16.jpg)
Examen directa. Examen macroscopic- S. pyogenes (amigdale cu puroi )- Pneumococ spută ruginie⇒b. Examen microscopic- col GRAM: coci Gram(+)• S. pyogenes: coci rotunzi, dispuși în lanțuri• S. de grup viridans: coci rotunzi sau ovalari
• .
Streptococcus pyogenes Cultură purăColorație Gram, 100x
Streptococcus spp. HemoculturăColorație Gram, 100x
![Page 17: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/17.jpg)
• Pneumococii: coci lanceolați, dispuși diplo, înconjurați de o capsulă proprie
Streptococcus pneumoniae Cultură purăColorație Gram, 100x
Streptococcus pneumoniae HemoculturăColorație Gram, 100x
![Page 18: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/18.jpg)
Izolarea bacteriei
- geloză-sânge- bulion-sânge
Identificare:
- Caractere morfo-tinctoriale- Caractere de cultură- Caractere biochimice (ex. sens. la
bacitracină)- Caractere antigenice (r. Ag-Ac)
![Page 19: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/19.jpg)
Caractere de cultură:Streptococcus pyogenes Geloză sânge; se evidențiază hemoliza ß
![Page 20: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/20.jpg)
Streptococcus pyogenes (SGA)
Hemoliză ßIdentificarea speciei - testul la bacitracină
Streptococcus pyogenes (sus) - sensibil la bacitracinăStreptococcus agalactiae (jos) - rezistent la bacitracină
IDENTIFICARE SGA
![Page 21: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/21.jpg)
Streptococcus agalactiae (SGB)Geloză sânge, test CAMP pozitivHemoliză ß extinsă testul CAMP:- orizontal: S. aureus- verical: S. agalactiae
IDENTIFICARE SGB
Streptococcus spp. (non-B) Geloză sânge, test CAMP negativ Lipsa hemolizei extinse
Streptococcus pyogenes (sus)Streptococcus agalactiae (jos) Geloză sânge, test CAMP
Factorul CAMP: Christie, Atkins, Munch-Petersen
Daca cele doua microorganisme sunt cultivate în 2 striuri perpendiculare (fără să se atingă), acolo unde cele 2 striuri se învecinează, liza hematiilor (de berbec ) apare mărită, în “formă de vârf de săgeată”.
![Page 22: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/22.jpg)
Caractere de cultură:Streptococcus pneumoniae Geloză sânge
Colonii S sau M (capsulă), cu hemoliză alfa
Caractere biochimice• pneumococul SENSIBIL la bilă și optochin• s. viridans REZISTENT la bilă și optochin
Hemoliza α : incompleta, de culoare verde datorita reducerii Hb la MethHb
![Page 23: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/23.jpg)
Streptococcus pneumoniae
Hemoliză alfaIdentificarea speciei - testul la optochin
Streptococcus pneumoniae (sus) - sensibil la optochin Streptococcus grup viridans (jos) - rezistent la optochin
![Page 24: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/24.jpg)
Antibiograma
- Streptococul de grup A și B sensibilitate la penicilină
- nu se efectuează ABG decât în situații speciale, de ex. hipersensibilitate la penicilină)
- Pentru ceilalți streptococi se efectuează ABG
![Page 25: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/25.jpg)
Diagnostic serologic - evidențierea Ac(în bolile post-streptococice)
-
- Streptolizina „O” = SLO (Ag) determină ⇒formarea de Ac anti-SLO = ASLO
- ASLO crește în primele 7 zile până în săptămânile 3-4 când se menține în platou și apoi scade
titrul general acceptat 200-250 unităti ASLO/ml
![Page 26: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/26.jpg)
dg serologic – reactia ASLO
Cand?
Ce determinam?
Cum?
![Page 27: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/27.jpg)
dg serologic – reactia ASLOSe utilizeaza in dg retrospectiv al infectiilor streptococice sau pt dg bolilor
poststreptococice; determinam titrul de anticorpi anti streptolizina O.
PRINCIPIUSLO are efect hemolitic asupra hematiilor de berbec. Daca in serul pacientului exista anti-SLO actiunea hemolitica a SLO e neutralizata.
Prin dilutii in tuburi se determina titrul ASLO.
TEHNICA1. O cantitate constanta de SLO + serul pacientului in dilutii binare in tuburi 2. Incubam 15minute la 37° C3. Se adauga suspensia de hematii 4. Incubam 45 minute la 37° C5. Centrifugam si pastam tuburile la frigider pana a doua zi
![Page 28: LP7 Coci Gram Pozitivi Vazut Si Corectat](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022081413/5489f58db47959f10c8b5b50/html5/thumbnails/28.jpg)
RSN – dg serologic – reactia ASLO
12 50 100 125 166250
INTERPRETARETitrul reactiei ASLO e dat de cea mai
mare dilutie de ser in care lipseste complet hemoliza.
- Dg (+) la titrul de 1/200 UI/ml- Val < 1/200 UI/ml nu există infecție ⇒streptococică- Val > 1/200 UI/ml este infecție ⇒streptococică în evoluție.