![Page 1: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/1.jpg)
Métodos de estudio
Concentración celular bacteriana
1) Concentración celular ó número de células bacterianas por volumen de
cultivo
2) Concentración biomasa o peso seco de células bacterianas por volumen de
cultivo
![Page 2: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/2.jpg)
CONTEO DIRECTO
EN CAMARA
![Page 3: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/3.jpg)
Metodo Aplicación Caract.
Recuento DirectoConteo de bacteria en
leche o vacunasCél viables y no viables
![Page 4: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/4.jpg)
RECUENTO CELULAR DIRECTO
….10-9
Muestra
de cultivo
Suero
Fisiológico
![Page 5: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/5.jpg)
Cámara de Nee Bauer
Promediar
10-5
Muestra
diluida
![Page 6: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/6.jpg)
Ej.: 4 256
(4x4x4x4)
1024
Ej.: 1024 Dilución elegida
(Ej. 105)
Ej.: 1024 x 105
Ej.: 1024 x 105
102
(mm3 a cm3)
1024 x 107 bacterias/cc
1024 x 107 bacterias/mL
![Page 7: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/7.jpg)
Metodo Aplicación Caract.
Recuento DirectoConteo de bacteria en
leche o vacunasCél viables y no viables
Recuento en placas
Conteo de bacteria en
leche, alimento, suelo,
agua, cultivos,
Altamente sensibles en
cond óptimas
![Page 8: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/8.jpg)
RECUENTO EN PLACA
![Page 9: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/9.jpg)
Recuento colonias
UFC/ml. En el ejemplo: 13 x 10 6 ufc/ml
![Page 10: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/10.jpg)
Muestra
diluida
0,1 mL siembra en
Superficie
Agar Nutritivo
1 mL siembra en
Profundidad
37ºC por 24 hr.
10 -3
![Page 11: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/11.jpg)
0,1 mL siembra en
Superficie
1 mL siembra en
Profundidad
Conteo de colonias
Seleccionar placas: ≥50 y ≤ 300 colonias
300
colonias
420
colonias
45
colonias
600
colonias
280
colonias
120
colonias
![Page 12: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/12.jpg)
0,1 mL siembra en
Superficie
1 mL siembra en
Profundidad
Promediar
300
colonias
280
colonias
120
colonias
300 colonias 200 colonias
![Page 13: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/13.jpg)
Siembra en Superficie
Siembra en Profundidad
Realizar cálculos matemáticos
300 colonias
200 x104 UFC/mL
10 3
Factor de
dilución
Factor de
Siembra (tamaño
del inóculo)
1 300 x 103 UFC/mL
200 colonias 10 3 10
![Page 14: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/14.jpg)
Metodo Aplicación Caract.
Recuento DirectoConteo de bacteria en
leche o vacunasCél viables y no viables
Recuento en placas
Conteo de bacteria en
leche, alimento, suelo,
agua, cultivos,
Altamente sensibles en
cond óptimas
Densidad Optica Medios líquidosNo detecta densidad
menor 107 cel por ml
![Page 15: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/15.jpg)
MEDICION DE TURBIDEZ
DO
![Page 16: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/16.jpg)
T
![Page 17: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/17.jpg)
Metodo Aplicación Caract.
Recuento DirectoConteo de bacteria en
leche o vacunasCél viables y no viables
Recuento en placas
Conteo de bacteria en
leche, alimento, suelo,
agua, cultivos,
Altamente sensibles en
cond óptimas
Densidad Optica Medios líquidosNo detecta densidad
menor 107 cel por ml
Nitrogeno ó prot TotalCélulas totales (cultivos
densos)Para investigación
Act bioquimica, O2, CO2,
ATP,Microbiologia Requiere standard
Peso ó Vol
(centrifugación)Células totales Mejor que N y prot Total
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DETERMINACIÓN DEL NMP DE COLIFORMES EN MUESTRAS SOLIDAS O
ALIMENTOS
A B A₊ ₊ ₊
3 1 1
₊C
de caldo lauril sulfato
triptosa (LST)
LST
LST
₊C
PRESUNTIVO
![Page 19: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/19.jpg)
DETERMINACIÓN DEL NMP DE COLIFORMES EN MUESTRAS SOLIDAS O
ALIMENTOS
A B A₊ ₊ ₊
3 1 1
₊C
de caldo lauuril sulfato
triptosa (LST)
LST
LST
₊C
EC ₊C₊A ₊B
3 0 0
CONFIRMATORIO
![Page 20: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/20.jpg)
• Test multitubos; Prueba NMP
• Se cuentan los tubos positivos
(Turbidez) y luego el “código” se
compara con la tabla.
FILTRACIÓN
![Page 21: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/21.jpg)
Recuento electrónico:
Rápido y automático. Cuenta cél. vivas y
muertas
Determinación de ácidos Nucleicos.
Escala de Mac Farland
Poco exacto. Subjetivo
Otros:
![Page 22: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/22.jpg)
Curva de recuento de células Viables (Por cultivos y se expresan en u.f.c.) y no viables (Cámaras de
recuento, DO, Peso seco)
![Page 23: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: Métodos de estudio Concentración celular bacteriana](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022070414/62c0b81519aa54504c6a9f5e/html5/thumbnails/24.jpg)
Cultivo continuo y Cultivo sincronizado:Renovación de nutrientes, ajuste de pH,
proporcionar ambiente óptimo...