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Par : S / Abdessemed
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Le sang, au sortir de l’organisme, est au
contact avec des surfaces mouillables
chargées négativement (comme le verre
non traité). Ce fait entraîne une
activation de l’hémostase avec, pour
issue, la prise en masse des composants
sanguins dans un réseau insoluble de
molécules de fibrine polymérisées.
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Le sang doit donc immédiatement être
prélevé sur anticoagulant si l’analyse
nécessite du sang total ou du plasma.
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Sur le sang total, prélevé sur
anticoagulant et homogénéisé, sont
réalisés :
1) Hémogramme = NFS (Numération-
Formule-Sanguine) Explore l'anémie,
les défenses immunitaires, les
plaquettes, les maladies du sang.
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2) vitesse de sédimentation (VS) = est le
temps nécessaire aux éléments figurés du
sang pour sédimenter, Ce test est non-
spécifique mais il permet d’orienter un
diagnostic de maladies inflammatoires
comme le rhumatisme articulaire, la
péricardite.
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3) Immunophénotypages.
4) Des dosages de composés biochimiques
érythrocytaires (enzymes, hémoglobines,
vitamines, oligoéléments, ions,
médicaments et toxiques).
5) Des identifications microbiologiques
(hémocultures)…
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Le plasma est la fraction acellulaire du
sang. Il est obtenu à partir d’un sang
prélevé sur anticoagulant après
séparation du culot globulaire par
centrifugation.
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Dans la plupart des cas, la centrifugation est réalisée avec une accélération de 2000 g pendant 10 minutes et donne un plasma dépourvu de cellules sanguines (PPP ou plasma pauvre en plaquettes).
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Par contre, pour l’analyse des plaquettes
(thrombocytes), la centrifugation est
effectuée à faible accélération : 200 g
pendant 10 minutes pour obtenir un
plasma riche en plaquettes (PRP)
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A u s o r t i r d e l’organisme, le sang recueilli sur anticoagulant reste liquide (par complexation ou précipitation du calcium ou par amplification d’antithrombines)
Lors du retournement du tube, le sang liquide se positionne sur le bouchon.
Puis, sous l’effet de lapesanteur (accélérée parune centrifugation), deuxphases se dégagent :une phase supérieureliquide jaunâtre : lePLASMAune phase inférieurecomposée des globulesrouges surmontée d’unmince anneau deglobules blancs etplaquettes.
Le plasma séparé, mis en présence d’ions calcium et d'activateur(s) de la coagulation (différents selon le test) va prendre en masse (coaguler) : le caillot plasmatique peut être entrainé par un crochet.
Tube de sang recueilli avec anticoagulant
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Sur le plasma sont réalisés par exemple :
1) Des explorations de l’hémostase :(Taux
de Prothombine, Temps de Howell,
Dosage du fibrinogène…)
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Bilan lipidique (Triglycérides,
Cholestérol total, Cholestérol HDL =
Cholestérol LDL, Apolipoproteine A1
,Apolipoproteine B) Explore le risque
cardiovasculaire
Bilan glycémique (Glycémie à jeun, Hb
A1c (Hémoglobine glyquée)) Explore le
diabète, et le risque cardiovasculaire
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Bilan de la fonction rénale (Créatinine
plasmatique, Urée plasmatique)
Bilan hépatique (bilirubine,
transaminases, Gamma GT,
Phosphatases alcalines…)
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Bilan de la fonction thyroïdienne(Le dosage
de la TSH, de T3 et T4) permet
l'exploration des hypo- et hyperthyroïdies
Des dosages de médicaments et de
toxiques.
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Le sérum est obtenu à partir d’un sang
prélevé sans anticoagulant (en tube sec)
après séparation du caillot par
centrifugation. Celle-ci sera effectuée
une fois la coagulation achevée.
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Au sortir de l’organisme etpendant 10 minutesenviron, le sangmaintenu à37°C resteliquide.
Après rétraction du caillot ou centrifugation (après activation), d’uAprès rétraction du caillot ou centrifugation (après activation), deux phases peuvent être visibles :
une phase supérieure liquide jaunâtre : le SÉRUM
une phase inférieure composée d’un polymère insoluble de fibrine emprisonnant les cellules : le CAILLOT. n polymère insoluble de fibrineEmprisonnant les cellules :le CAILLOT.
Pl Puis, il prend en masse et le tube peut être prend retourné : en
AprèsAprès 48 heures, le sang maintenu à 37°C est redevenu liquide par action de la fibrinolyse
Tube de sang recueilli sans anticoagulant ou avec un activateur de coagulation
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1) De nombreuses recherches
immunologiques (dépistage des
anticorps (anti HIV, anti HCV, TPHA…),
titrages d’anticorps (ASLO…), mise en
évidence d’antigènes (Ag HBS…).
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2) Des dosages biochimiques.
3) Des dosages de médicaments et de
toxiques.
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Avantages Inconvénients
C’est le constituant naturel du sang. L’anticoagulant interfère avec certains dosages, EDTA complexant tous les cations divalents, inhibant, par exemple, les phosphatases alcalines et activant, par exemple, la phosphatase acide.
La séparation rapide de la phase liquide et des La présence des facteurs de la coagulation
cellules du sang par centrifugation évite la introduit une variable interindividuelle surdiffusion de molécules cellulaires vers le plasma
l’absorbance propre du liquide ainsi que sur sa
et permet de l’obtenir plus rapidement (urgence).
fluidité.
Les facteurs protéiques de la coagulation ne sont
La précipitation du calcium, sous forme d’oxalate
pas consommés : exploration possible de la de calcium, interfère dans les dosagescoagulation en différé. spectrophotométriques
Le plasma
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Avantages Inconvénients
La conservation est meilleure et réalisée après Le délai d’obtention est plus grand (possibilitécongélation d’aliquotes (faibles fractions égales)
d’augmenter la surface mouillable pour accélérer
car la richesse en protéines est moindre. la vitesse de coagulation).
La coagulation n’est plus possible d’où une La difficulté de prélever dans le tube est plus
fluidité plus grande dans les tubulures des importante avec un risque plus grand deautomates et l’élimination d’une cause contamination érythrocytaire (utiliser und’obturation. séparateur pour diminuer ce risque).
Il n’y a pas d’ajout de molécules d’interférence
La coagulation utilise des molécules (glucose) et
possible avec les analyses (ex : EDTA et Mg2+).
produit des métabolites (CO2, HCO3-, acides organiques).
Le sérum
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