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PoliposePoliposeAdenomatosaAdenomatosa
FamiliarFamiliar
Aline FornariAline Fornari
Rafaela de V. Rafaela de V. OrtigaraOrtigara
![Page 2: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/2.jpg)
IntroduçãoIntrodução
• Desenvolvimento precoce de múltiplos pólipos adenomatosos na mucosa do cólon
• Evolução para adenocarcinomas• Mutação no gene supressor de tumor
APC (Adenomatous Polyposis Coli ), região 5q21-q22
• Herança Autossômica Dominante
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Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
• O Gene APC
– Formado por 15 éxons
– 8532 pares de bases
– Codifica uma proteína com 2844
aminoácidos
– Éxon 15 é o maior deles, corresponde a
75% da região codificadora
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Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
• A Proteína APC
– Apresenta 2844 aminoácidos
– Peso molecular pode chegar a 311,8 kDa
– Proteína supressora de tumor
– Se liga a outras proteínas: -catenina, GSK-
3, axina, tubulina, microtúbulos, EB1
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Aspectos GenéticosAspectos GenéticosA Proteína APC• 2 regiões que interagem com a -catenina
– Facilita a fosforilação da -catenina pela GSK-3, inativando-a
• Substrato para fosforilação pela GSK-3 , forma complexo com a axina– Complexo APC-axina se liga à -catenina
e aumenta sua degradação
![Page 8: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/8.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos GenéticosA Proteína APC• 2 regiões que interagem com a -catenina
– Facilita a fosforilação da -catenina pela GSK-3, inativando-a
• Substrato para fosforilação pela GSK-3 , forma complexo com a axina– Complexo APC-axina se liga à -catenina e
aumenta sua degradação
Controla negativamente os níveis de -
catenina
![Page 9: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/9.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
• A -catenina– No citoplasma, um elo com a E-caderina,
-catenina e actina atua na adesão celular
– No núcleo, ativa a transcrição de protooncogenes como c-myc e ciclina D1 (transdução de sinal e ciclo celular)
– Se liga à família TCF – importantes fatores de transcrição ( TCF-4 é o principal no intestino )
![Page 10: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/10.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
A Proteína APC• Região envolvida na ligação com os
microtúbulos – Interação microtúbulos-cinecótoros – Papel na instabilidade cromossômica– Regula duplicação centromérica pela
interação com a tubulina
![Page 11: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/11.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
A Proteína APC• Região envolvida na ligação com os
microtúbulos – Interação microtúbulos-cinecótoros – Papel na instabilidade cromossômica– Regula duplicação centromérica pela
interação com a tubulinaAlterações cromossômicas numéricas
(não-disjunção) e estruturais (translocações)
![Page 12: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/12.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
• A Proteína APC
– Modula a organização dos filamentos de actina - morfologia e migração celular
– Regula a migração das células da mucosa colônica do fundo para a superfície das criptas
– No citoplasma, se acumula nas regiões marginais ou subapicais
![Page 13: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/13.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos
• A Proteína APC– Os enterócitos da base das criptas
praticamente não têm APC ( -catenina ) – A quantidade aumenta nas células da
superfície das criptas, conforme maturação ( -catenina )
– Os enterócitos da superfície luminal são sempre positivos
– Níveis de -catenina variam inversamente com os da APC
![Page 14: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/14.jpg)
![Page 15: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/15.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos• As Mutações
![Page 16: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/16.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos• As Mutações
– Mais de 826 mutações em famílias com FAP
– Em 11 a 30% dos casos ocorre mutação nova
![Page 17: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/17.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos• As Mutações
– Mais de 826 mutações em famílias com FAP
– Em 11 a 30% dos casos ocorre mutação nova
– Geralmente nonsense (28%) ou frameshift (67%)
– Quase sempre ocorre a truncagem da proteína
![Page 18: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/18.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos• As Mutações
– Mais de 826 mutações em famílias com FAP– Em 11 a 30% dos casos ocorre mutação
nova– Geralmente nonsense (28%) ou frameshift
(67%)– Quase sempre ocorre a truncagem da
proteína– Freqüentemente regiões de ligação com a -
catenina ou com o DNA
![Page 19: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/19.jpg)
Aspectos GenéticosAspectos Genéticos• As Mutações
– A mais comum é uma deleção de 5 pares de base nos códons 1061 e 1309 - hot-spots - 11% e 17%
– Não é o suficiente para guiar o diagnóstico molecular, pois mais de 70% das mutações estarão em qualquer outra posição no gene.
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Aspectos GenéticosAspectos Genéticos• As Mutações
O gene APC mutado pode não ser suficientepara originar os tumores.
Mutações adicionais em outros genesprovavelmente são necessárias para que o
desequilíbrio ocorra, como por exemplo no gene supressor tumoral Tp53.
![Page 21: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/21.jpg)
Padrão de HerançaPadrão de Herança
• Herança autossômica dominante
![Page 22: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/22.jpg)
Padrão de HerançaPadrão de Herança
• Herança autossômica dominante
– O fenótipo ocorre em todas as gerações
– A prole de um afetado tem 50% de
chance de ter o fenótipo
– Indivíduos não afetados não transmitem
a doença
![Page 23: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/23.jpg)
Como um Gene Supressor Tumoral,
que atua de modo autossômico recessivo,
pode ter um padrão de herança
Autossômico Dominante ???
![Page 24: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/24.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia
![Page 25: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/25.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia• Efeito dominante negativo
![Page 26: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/26.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia• Efeito dominante negativo
Mutação em 1 dos alelos
![Page 27: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/27.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia• Efeito dominante negativo
Mutação em 1 dos alelos
Altera uma só cadeiapolipeptídica
AlteradaNormal
![Page 28: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/28.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia• Efeito dominante negativo
Mutação em 1 dos alelos
Altera uma só cadeiapolipeptídica
Altera a função de toda a proteína
NormalNormal AlteradaAlterada
![Page 29: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/29.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia• Efeito dominante negativo
Normal Normal
NormalAlterada
Alterada Alterada
AlteradaNormal
25%
![Page 30: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/30.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia
• Efeito da Haploinsuficiência– Quantidade de proteína codificada não é
suficiente para manter a demanda celular
![Page 31: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/31.jpg)
FisiopatogeniaFisiopatogenia
• Efeito da Haploinsuficiência– Quantidade de proteína codificada não é
suficiente para manter a demanda celular
• Hipótese dos dois eventos– Mutação germinativa herdada e segundo
evento mutacional em célula somática
![Page 32: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/32.jpg)
Polipose Adenomatosa Polipose Adenomatosa FamiliarFamiliar
• Penetrância– Completa– Chega a 100% em torno dos 40 anos
![Page 33: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/33.jpg)
Polipose Adenomatosa Polipose Adenomatosa FamiliarFamiliar
• Penetrância– Completa– Chega a 100% em torno dos 40 anos
• Expressividade– Variável entre famílias com mutações
diferentes e até dentro da mesma família
![Page 34: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/34.jpg)
Relação Genótipo-FenótipoRelação Genótipo-Fenótipo• Há evidências de que há relação direta
entre as diferentes mutações com seus respectivos fenótipos:– Mutação extremidade 5’ do gene >>
forma atenuada– Mutação exon 4 >> forma clássica– Mutação entre extremidade 3’ exon 9 e 5’
do exon 15 >> forma extremamente agressiva ( início precoce, + 5000 pólipos)
– Mutações metade 3’ do 15 >> forma atenuada com aumento das manifestações extra-colônicas
![Page 35: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/35.jpg)
![Page 36: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/36.jpg)
Relação Genótipo-FenótipoRelação Genótipo-Fenótipo• Entretanto, há variabilidade de
manifestação entre portadores de uma mesma mutação:– Interferência de vários ainda indeterminados
fatores genéticos e ambientais.
• Estudo com modelos animais demonstrou:– Mutações mais severas > PTC estáveis >
multiplicidade tumoral– Mutações extremidade 5’ e metade 3’ do gene
> menores níveis de PTC – Hipótese de um gene modificador do loci Min
> perda de PLA2 tumorigênese
![Page 37: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/37.jpg)
Diagnóstico MolecularDiagnóstico Molecular• Seqüenciamento completo do gene
sensibilidade 95%– mutações novas– dificultado pelo tamanho do gene e pelo
alto custo– não há screening para hotspots– aumento da sensibilidade quando se
rastreia uma mutação conhecida na família
![Page 38: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/38.jpg)
Diagnóstico MolecularDiagnóstico Molecular
• PTT sensibilidade 80%– baseia-se na alta freqüência de
proteínas truncadas– método indireto
eletroforese de PTC
• Combinação de scanning da mutação e PTT sensibilidade 80-90% – eletroforese do DNA e da PTC
![Page 39: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/39.jpg)
Diagnóstico MolecularDiagnóstico Molecular
![Page 40: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/40.jpg)
Diagnóstico MolecularDiagnóstico Molecular
• Estudo de ligação – Sensibilidade >95% apesar de ser um
método indireto– Mais de um indivíduo afetado de
gerações distintas– Contra-indicado para mutação nova– Somente para famílias informativas– Alternativa de menor custo
![Page 41: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/41.jpg)
Diagnóstico Pré-NatalDiagnóstico Pré-Natal• Gestações com risco de 50% para a
doença• Estudo de ligação se houver
marcador• Amniocentese ( 16-18 semanas Vilosidades coriônicas ( 9-11
semanas)Detecção de mutação no
feto não prevê a idade de início, nem a severidade da doença!
![Page 42: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/42.jpg)
Diagnóstico Pré-NatalDiagnóstico Pré-Natal
• Não há indicação formal
• Depende de iniciativa da família
• Requer aconselhamento genético prévio
![Page 43: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/43.jpg)
Testes preditivosTestes preditivos• Rastreamento de portadores pré-
sintomáticos crianças com risco 50%
• Diagnóstico precoce permite intervenção oportuna e melhora resultados finais:
– sobrevida
![Page 44: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/44.jpg)
Testes preditivosTestes preditivos• Testes moleculares X Exames
endoscópicos Diagnóstico certeza
Custos
Necessidade de teste invasivo em indivíduos que não herdaram a mutação!
![Page 45: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/45.jpg)
Aconselhamento GenéticoAconselhamento Genético• Informar risco de pais, irmãos e filhos
do probando• Rastrear portadores pré-sintomáticos
a partir do diagnóstico molecular do probando
• Educar e instruir a família acerca do seguimento antes da realização dos testes
![Page 46: PoliposeAdenomatosaFamiliar Aline Fornari Rafaela de V. Ortigara](https://reader035.vdocuments.pub/reader035/viewer/2022062223/552fc0fd497959413d8bac06/html5/thumbnails/46.jpg)
Aconselhamento GenéticoAconselhamento Genético• Considerar riscos, benefícios e limitações
dos testes moleculares• Indicar corretamente cada teste
disponível• Informar prognóstico
– FAP não tratada expectativa vida 42 anos
– Colectomia aumenta consideravelmente a sobrevida
– Riscos cumulativos de CA extra-cólon aumentam para 52% aos 75 anos.