Proteina intatta 1 2 3 4 Ala-Leu-Thr-Pro ... ... ... ...
Endoproteinasi Arg-C
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12a) Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg
1 2 3b) Ser-Thr-Val
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10c) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu-Met-Val-Arg
Endoproteinasi Glu-C
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10d) Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg-Ser-Thr-Val
1 2 3 4 5 6 7e) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu
1 2 3 4 5 6 7 8f) Met-Val-Arg-Ile-Lys-Val-Trp-Glu
Allineamento per sovrapposizione zone comuni:
e) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Gluc) Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu-Met-Val-Argf) Met-Val-Arg-Ile-Lys-Val-Trp-Glua) Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Argd) Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg-Ser-Thr-Valb) Ser-Thr-Val
Sequenza: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25Ala-Leu-Thr-Pro-Val-Ser-Glu-Met-Val-Arg-Ile-Lys-Val-Trp-Glu-Gly-Thr-Gly-Leu-Val-Pro-Arg-Ser-Thr-Val____________________________ ___________ ____________________ ___________________________ ___________
Anno Quantita' Tempo
196O 10 g 3 anni
1970 1 g 1 anno
1980 1 mg 1 settimana
1990 0.05 mg 1 giorno
2000 0.02 mg 1 giorno
Quantita' e tempi richiesti negli anni per sequenziareun peptide di 50 residui amminoacidici
-Sequenziatore automatico di peptidi Applied Biosystem Procise 492 che opera secondo il metodo di Edman della degradazione con fenilisotiocianato
Schema di un sequenziatore di peptidi
Spettrometro di massa
Standard PTH-a.acidi Degradazione di Edman
Primo passo degradazione Edman Peptide singolo
Secondo passo degradazione Edman Peptide singolo
Degradazione di Edman su miscela di peptidi Tre passi