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MICROBIOLOGIA – AULA 6 Bacilos Gram-negativos curvos e
fermentadores oxidase-positivos e Bacilos Gram-
negativos exigentes
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Bacilos curvos
Antecedentes históricos;
Campylobacter jejuni
Campylobacter jejuni são bacilos curvos móveis e microaerofílicos descobertos em 1931 por Jones e colaboradores;
Foram isolados do sangue de crianças com disenteria aguda por King em 1957;
Até que em 1972 foram isolados das fezes de pacientes com enterite aguda;
Bacilos curvos
Antecedentes históricos;
Helicobacter pylori
Helicobacter pylori, anteriormente denominado C. pyloridis e, a seguir, C. pylori, foi descoberto por Warren e Marshall em 1982;
Embora na literatura do início do século XX são encontrados relatos de microrganismos espiralados em amostras de biópsia de mucosa gástrica humana;
Pode constituir a causa mais comum de infecção gastrintestinal humana e a causa mais frequente de gastrite;
Classificação
Espécies de Campylobacter
Necessitam de teor diminuído de oxigênio, ou seja, são microaerofílicas e necessitam de teor aumentado de dióxido de carbono, ou seja, são capnofílicas;
São móveis e possuem um único flagelo polar sem bainha;
Não realizam metabolismo fermentativo e nem oxidativo e obtêm energia pela utilização de aminoácidos e intermediários do ciclo de Krebs;
Espécies de Campylobacter
Vivem numa ampla variedade de nichos ecológicos e meios ambientais;
A maioria das espécies é encontrada em animais (gado bovino, suínos) e provoca infertilidade e aborto;
Campylobacter jejuni
Constitui o patógeno humano mais importante entre os microrganismos do gênero;
Possui distribuição mundial, e nos países mais industrializados é isolado de amostras de fezes diarréicas com frequência duas a sete vezes maior quando comparado com Salmonella ou Shigella;
Importância clínica;
Campylobacter jejuniImportância clínica;
É também encontrado em animais domésticos, que podem ser portadores;
A grande maioria das galinhas, perus e aves aquáticas é colonizada por C. jejuni;
Campylobacter jejuniImportância clínica;
A ingestão de leite cru, de aves parcialmente cozidas ou de água contaminada constitui fonte comum de infecções humanas;
A enterite produzida caracteriza-se por dor abdominal com cólicas, diarreia sanguinolenta, calafrios e febre;
Na maioria dos indivíduos os sintomas desaparecem de 3 a 7 dias;
Campylobacter jejuniImportância clínica;
Porém, os pacientes convalescentes podem continuar excretando o microrganismo durante 2 semanas a 1 mês;
Nos casos de doença grave, o paciente pode ser tratado com eritromicina oral;
Enterite e síndromes diarreicas são as doenças mais comuns, porém surgiram outras:
Campylobacter jejuni
Importância clínica;
Artrite séptica
MeningitesProctocolite secundária
Identificação Presuntiva
É possível estabelecer um diagnóstico de enterite por Campylobacter quando se observa presença de formas gram-negativas curvas, em formato de S, em asa de gaivota ou espiraladas em amostras de fezes diarreicas coradas pelo método de Gram
A partir de amostras de fezes:
Identificação Presuntiva
Pode-se considerar o exame de preparações a fresco ou de esfregaços corados de todas as amostras de fezes diarreicas à procura de leucócitos polimorfonucleares e presença de formas bacterianas sugestivas de Campylobacter
A partir de amostras de fezes:
Em alguns laboratórios, as amostras de fezes para a pesquisa de espécies de Campylobacter não são mais processadas, a não ser que se verifique a presença de leucócitos PMN, pois é pouco provável isolar o microrganismo em amostras de fezes com ausência de leucócitos;
Isolamento laboratorial
O isolamento bem sucedido de C. jejuni a partir de amostras de fezes depende de:
• uso de meios seletivos de cultura Campy-Thio, Campy-BAP;
• Incubação em temperatura elevada (42º C);
• Atmosfera apropriada de incubação (5% de O2, 10% de CO2, 85% de N2);
Gênero Helicobacter
Compreende 23 espécies formalmente validadas, são microaerófilos estritos, com morfologia espiralada ou helicoidal.;
Muitas espécies exibem uma forte atividade de urease;
As espécies incluídas no gênero Helicobacter possuem flagelos com bainha. Nenhuma espécie de Campylobacter tem flagelos com bainha;
Helycobacter pylori
É encontrado apenas nas células epiteliais secretoras de muco do estômago;
As evidências sugerem que H. pylori constitui o agente etiológico da gastrite antral crônica e é um importante fator na patogenia da doença ulcerosa péptica;
Importância clínica;
Existem fortes evidências de que H. pylori está associado ao adenocarcinoma gástrico e linfoma não-Hodgkin gástrico;
Identificação Presuntiva
As colônias são pequenas, acinzentadas, aspecto de translúcidas e fracamente -hemolíticas. A coloração pelo método de Gram revela bactérias gram-negativas, de coloração pálida e curvas, com morfologia característica em asa de gaivota e em U;
A partir de biópsias gástrica e duodenal:
Reações positivas para oxidase e catalase e reação extremamente rápida para urease;
Isolamento laboratorial
Helycobacter pylori pode ser cultivada em meios não-seletivos contendo sangue, produzindo em 3 a 5 dias pequenas colônias acinzentadas e com aspecto translúcido;
A incubação deve ser feita em temperatura de 35 a 37º C, embora algumas cepas cresçam em 42;
Atmosfera apropriada de incubação (5% de O2, 10% de CO2, 85% de N2);
Gênero Vibrio
As espécies de Vibrio são de interesse tanto histórico quanto contemporâneo. V. cholerae é o agente etiológico da cólera asiática humana;
Ocorreram sete pandemias de cólera desde 1816-1817, a mais recente começou em 1961 na Indonésia;
A maioria das infecções foi observada após a ingestão de frutos do mar contaminados e mal cozidos;
Gênero VibrioForam também relatadas infecções de feridas após traumatismo durante a natação ou trabalho realizado em águas infectadas ou em exposição a animais marinhos;
Taxonomia
As cepas de Vibrio cholerae isoladas de casos clássicos de cólera pandêmica sofrem reação de aglutinação no denominado anti-soro 01;
As cepas que não sofrem aglutinação com esse anti-soro são denominadas V. cholerae não-01 ou designadas com uma variedade de nomes de outras espécies de vibriões;
A diferenciação precoce entre os dois grupos pode ser de considerável importância clínica;
Taxonomia
Embora tenham sido identificadas 35 ou mais espécies distintas de Vibrio, todas elas, com exceção de 11, são microrganismos ambientais, denominados “espécies de vibriões marinhos”, que não foram associadas a infecções humanas;
As espécies que são isoladas de seres humanos e que causam doenças são divididas em dois grupos;
V. cholerae e vibriões não-cólera;
Cólera
Diarreia secretória – consequência da excessiva estimulação do processo normal de secreção no intestino delgado com ou sem deficiência ao nível da reabsorção da água e eletrólitos;
A secreção é superior à absorção;
Depleção de sódio e perda de água + bicarbonato conduzindo a um pH neutro;
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Espécies de Haemophilus
São bacilos gram-negativos pequenos e imóveis que necessitam de fatores presentes no sangue para o seu crescimento;
O nome do gênero deriva de palavras gregas que significam “amantes do sangue”;
Algumas espécies necessitam do fator X, que não é uma substância isolada, mas sim um grupo de compostos tetrapirrólicos termoestáveis;
Espécies de Haemophilus
Esses compostos são utilizados na síntese de catalases, peroxidases e citocromos do sistema de transporte de elétrons;
Também existe uma demanda pelo fator V, que é a NAD ou a NADP;
O aquecimento suave para a adição de sangue ao ágar base na preparação de ágar chocolate acaba em lise dos eritrócitos e liberação dos fatores;
Espécies de Haemophilus
Apesar de a maioria das espécies ser incapaz de crescer em ágar sangue de carneiro, pode-se observar crescimento de minúsculas colônias desses microrganismos ao redor de colônias de outros microrganismos hemolíticos em culturas mistas (p. ex., Staphylococcus aureus);
A lise dos eritrócitos libera o fator X, enquanto o fator V é sintetizado e fornecido aos hemófilos pelos próprios estafilococos;
Espécies de Haemophilus
Embora a maioria dos laboratórios confie no ágar chocolate para o isolamento destas espécies a partir de amostras clínicas, Haemophilus também crescem em ágar contendo 5% de sangue de cavalo ou de coelho;
A hemólise observada nesses meios é útil para a identificação da espécie;
Taxonomia de Haemophilus
O gênero Haemophilus inclui nove espécies encontradas em seres humanos e cinco espécies em animais;
Haemophilus influenzae
As espécies de Haemophilus fazem parte da microbiota normal da orofaringe e nasofaringe em mais de 85% dos adultos;
Os isolados da orofaringe consistem, em sua maioria, em H. influenzae e H. parainfluenzae não-encapsulados, embora H. influenzae com cápsula possa ser encontrado como parte da microbiota normal;
Importância clínica;
Haemophilus influenzae
Na presença de doenças respiratórias crônicas;
Importância clínica;
Haemophilus influenzaeImportância clínica;
O H. influenzae tanto encapsulado quanto não-encapsulado podem causar infecções graves;Porém, a cápsula permite ao microrganismo resistir à fagocitose e à destruição intracelular;
Haemophilus influenzae
Antes da introdução de vacinas efetivas contra H. influenzae tipo b, esse microrganismo era responsável por cerca de 16000 casos de doença invasiva anualmente em crianças com até 5 anos;
Tratamento e Prevenção:
As infecções ocorriam, em sua maioria, em crianças de até 2 anos de idade devido à presença inadequada de anticorpos nessa faixa etária;
Durante o período neonatal a imunidade contra H. influenzae tipo b é adquirida por meio de anticorpos transplacentários que são eliminados dentro dos primeiros meses de vida;
Esses anticorpos reaparecem após exposição a microrganismos tipo b ou a outros antígenos microbianos que desencadeiam a formação de anticorpos de reação cruzada;
Vacinas produzidas apenas com o antígeno capsular de H. influezae tipo b não eram efetivas por falharem na produção de anticorpos em crianças com menos de dois anos de idade, ou seja, o grupo de maior risco para essa doença grave;
Haemophilus influenzae
Assim, foram conduzidos estudos clínicos com quatro vacinas conjugadas de polissacarídeo + proteína;
Tratamento e Prevenção:
Os conjugados consistiram em polissacarídeos nativos conjugados com toxoide tetânico, outro toxoide (diftérico) e outras proteínas, e nesta última década relataram a eficácia de 95-100%, dependendo da dose e dos esquemas;
Outros microrganismos
Brucella sp. Francisella tularensis
Espécies de Bordetella
Os membros do gênero Bordetella consistem em pequenos cocobacilos gram-negativos no isolamento primário;
São aeróbios obrigatórios, apresentam crescimento ótimo a 35 a 37ºC, não utilizam carboidratos e são inativos na maioria das provas bioquímicas;
O gênero inclui espécies isoladas espécies isoladas de seres humanos e de outros animais;
Bordetella pertussis
B. pertussis causa a síndrome conhecida como coqueluche;
A imunização parcial de crianças pode modificar o quadro clínico clássico;
Importância clínica;
Depois de 1947, quando a vacina antidiftérica, antipertussis, antitetânica (DPT) foi licenciada e recomendada;
Coqueluche
O ser humano é o único hospedeiro reconhecido de Bordetella pertussis;
A coqueluche continua sendo uma doença endêmica de importância mundial, com mais de 350.000 mortes atribuídas à doença anualmente;
A transmissão ocorre por contato direto com as gotículas de aerossol de indivíduos infectados e com tosse;
Muito Obrigado!!!