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TECNICAS INMUNOLOGICAS
Dr. Oscar Walter Torres
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Técnicas inmunológicas– Fundamento: Fundamento: reacción específica entre Ags-Acs. – Utilidad :Utilidad :
• Detección, identificación, tipificación y cuantificación de microorganismos, Ags y Acs. de grupos sanguíneos
• Detección y cuantificación de enzimas microbianas y toxinas de origen microbiano
– ClasificaciónClasificación• Lectura directa
– Aglutinación– Precipitación
• Lectura indirecta– Reacción de Fijación de Complemento– Neutralización– Inmunomarcado
» Radioinmunoensayo (RIE)» Enzimoinmunoensayo (ELISA)» Inmunofluorescencia
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Técnicas inmunológicas
• Sensibilidad: capacidad para detectar pequeñas cantidades de Ags ó Acs.
• Especificidad: capacidad para distinguir entre Ags o microorganismos diferentes y no dar falsos negativos
• Uso de Testigos +/-
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Técnicas inmunológicasAglutinación
• Definición: técnica de lectura directa, efectuada “in vitro” en medio líquido o sólido.
• Clasificación– Activa (Ag. particulado natural: GR, virus, bacteria, hongo,
parásito, etc.)– Pasiva (Ag particulado artificial: GR, látex, gelatina)– Reversa pasiva: se adsorbe el Ac a un soporte sólido
• Anticuerpo: aglutinina• Característica: técnica cualitativa y/o cuantitativa (por
titulación)
Título: máxima dilución que da positiva una reacción
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Técnicas inmunológicasAglutinación: etapas
• Sensibilización– Temperatura, afinidad Ag-Ac, pH, tiempo de
incubación, concentración relativa entre Ag y Ac y fuerza iónica del medio
• Aglutinación– Potencial Z, tipo de Ig y densidad del Ag
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AGLUTINACION
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Técnicas inmunológicasPrecipitación
• Definición: técnica de lectura directa, efectuada “in vitro” en medio líquido o semisólido (inmunodifusión).
• Ag: soluble
• Ac: precipitina
• Ejemplos: ID radial, inmunoelectroforesis
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Técnicas inmunológicasPrecipitación
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Técnicas inmunológicasPrecipitación
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Técnicas inmunológicasPrecipitación
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Técnicas inmunológicasReacción de Fijación de Complemento (RFC)
• Definición: técnica de lectura indirecta, efectuada “in vitro” en medio líquido.
• Ag: soluble
• Ac: fijador de complemento
• Fundamento: 2 sistemas Ag-Ac.– Problema– Detector o mezcla hemolítica
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Técnicas inmunológicasReacción de Fijación de Complemento
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Técnicas inmunológicasReacción de Fijación de Complemento
Reacción Positiva Reacción Negativa
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Técnicas inmunológicas
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Técnicas inmunológicas
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Técnicas inmunológicas
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Técnicas inmunológicas
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Técnicas inmunológicas