![Page 1: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/1.jpg)
José R. RegueiroInmunologíaFacultad de Medicina
Terapia génica en inmunodeficiencias
3ras JORNADAS NACIONALES CONJUNTAS DE ALERGIA E INMUNOLOGIA EN PEDIATRIA Ciudad de Córdoba 21/4/2015, 20:00-20:30. Gracias a Héctor Díaz, Luciano Ianiero, Alejandro y Natalia Lozano, Julio Orellana, Ricardo SaranzMAÑANA EMPIEZA LA SEMANA MUNDIAL DE LAS INMUNODEFICIENCIAS
Facultad de MedicinaUniversidad [email protected]
![Page 2: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/2.jpg)
Tratamiento de las inmunodeficiencias congénitas
• Prevenir o tratar las infecciones Vacunas, antibióticos, antimicóticos, antivirales
• Suplir la molécula afectada Ig, ADA, IFNγ, C1inhIg, ADA, IFNγ, C1inh
• Suplir la célula afectada Trasplante de progenitores hematopoyéticos
• Suplir el gen afectado (si no hay donante)Terapia génica (γc, ADA, WAS…)
![Page 3: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/3.jpg)
Terapia génica en inmunodeficiencias
• ¿Para quién?
• ¿Cómo?
• ¿Para cuándo?
• ¿Dónde?• ¿Dónde?
![Page 4: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/4.jpg)
Necesita citocinas y sus receptores
![Page 5: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/5.jpg)
X XXX
XXX
T NK
![Page 6: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/6.jpg)
γc-/-Jak3-/-
B+ T- NK- SCID
![Page 7: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/7.jpg)
REVERSIÓN NATURAL =TERAPIA GENICA NATURAL
PRECURSORES AFECTADOS(IN VIVO)
FENOTIPOFUNCION
LONGEVIDAD
REVERSIÓNEXPANSIÓN(VENTAJASELECTIVA)
γc, NEJM 335,1563,1996
ADA, Nat Genet 13,290,1996
WASP, PNAS 98,8697,2001
![Page 8: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/8.jpg)
PRECURSORES AFECTADOS(EX VIVO)
TERAPIA GENICA
VECTOR
(30%)
3´LT
R
5´LT
R
FENOTIPOFUNCION
LONGEVIDAD
γc
EXPANSIÓN(VENTAJASELECTIVA)
![Page 9: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/9.jpg)
NORMAL
TIMO SANGRE
SCIDγc
IL7R
JAK3
![Page 10: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/10.jpg)
TIMO SANGRE
NORMAL
LTR LTR
reconstituido
VENTAJA
SELECTIVA
SCID
![Page 11: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/11.jpg)
Terapia génica en inmunodeficiencias
• ¿Para quién? – Para IDP graves (con reversiones naturales)
• ¿Cómo?
• ¿Para cuándo?• ¿Para cuándo?
• ¿Dónde?
![Page 12: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/12.jpg)
![Page 13: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/13.jpg)
EL PROCEDIMIENTO:1- Estimular médula (G-CSF)2- Obtener CD34+ periféricas (o de médula)3- Cultivar y transducir4- Mielosupresión parcial? ADA, CGD5- Reinfusión de precursores 2-5x106 /Kg6- Seguimiento clínico/inmunológico6- Seguimiento clínico/inmunológico
![Page 14: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/14.jpg)
PRECURSORES AFECTADOS(EX VIVO)
LA TERAPIA GENICA ES SUPLEMENTACION GENICA,NO RECOMBINACION HOMOLOGA
FENOTIPOFUNCION
VECTOR
(30%)
3´LT
R
5´LT
R
γc
![Page 15: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/15.jpg)
*
*
LTR: EN 300-4.000SITIOS (MUTAGÉNESIS INSERCIONAL)
*
* ONCOGENES (LMO-2, CCND2)IN T CELL CLONES: ONCOGÉNESIS INSERCIONAL
INSERCIONAL)
Gen γc mutadoautólogo(suplementación génica)
![Page 16: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/16.jpg)
**
Transactivación de oncogenes
LIM domain only-2 (LMO-2) transcription factor- Expressed in early hematopoietic progenitors- Translocated in 10% of T-cell leukemiasWu X. Transcription start regions in the human genome are favored targets for MLV integration. Science 2003; 300:1749-51.
**γcγc
![Page 17: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/17.jpg)
EstromaDESARROLLO
FUNCION
ADA
γc
SCID SCID
Lyst
FUNCION
UNG
IκBα IRAK4IKKγ
TLR4
![Page 18: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/18.jpg)
Limitaciones- ¿Gen conocido? (CVID e IgAD NO)
- Cribado neonatal (prueba del talón)!
- ¿Recesivo? (ALPS NO)
- ¿Selectividad diana? (MHC-II en granulocitos) - ¿Selectividad diana? (MHC-II en granulocitos)
- ¿Regulación transgén? (Rag en T o B maduros)
- Oncogénesis insercional (salvo en ADA SCID)
![Page 19: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/19.jpg)
La oncogénesis insercional no es frecuente en
terapia génica: ¿culpa de la ventaja selectiva en
IDP?
cancer100
80
trials
1500
patients
cancer
hered.
Infect.vasc.
40
60
20
80
500
1000
1992 1994 1996 19981990 2000
![Page 20: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/20.jpg)
Solución: cambiar el vector
RV=RetroViral (dividing cells)SIN=Self-InactivatingLV=LentiViral (quiescent cells)
![Page 21: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/21.jpg)
Los nuevos vectores no transactivan (oncogenes)
![Page 22: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/22.jpg)
Cambiar el vector funciona
+ ADA def
![Page 23: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/23.jpg)
¿Para quién los vectores SIN?
Oncogénesisa- 25%a- 25%b- 80-100%
En CD34+ o T
![Page 24: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/24.jpg)
Clientes posibles: 10% de las IDP
![Page 25: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/25.jpg)
CELULAS AFECTADAS(EX VIVO)
LA TERAPIA GENICA ES SUPLEMENTACION GENICA,NO RECOMBINACION HOMOLOGA
FENOTIPOFUNCION
VECTOR
(30%)
3´LT
R
5´LT
R
γc
![Page 26: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/26.jpg)
¿Recombinación homóloga? Crispr/Cas9
![Page 27: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/27.jpg)
Zinc finger proteins
![Page 28: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/28.jpg)
Transcription Activator-Like Effector Nuclease
![Page 29: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/29.jpg)
Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats
![Page 30: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/30.jpg)
Terapia génica en inmunodeficiencias
• ¿Para quién? – Para IDP graves (con reversiones naturales)
• ¿Cómo? – Mejor con vectores lentivirales SIN– Mejor con vectores lentivirales SIN
• ¿Para cuándo?
• ¿Dónde?
![Page 31: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/31.jpg)
Pronto: Glybera aprobado en 2012
– 3 x 1012 virus/ml solucio n inyectable
– Gen de la lipoprotei na lipasa humana
– Virus adenoasociado (AAV) serotipo 1
– Promotor del citomegalovirus– Promotor del citomegalovirus
– Regulador postranscripcional virus de la hepatitis de la marmota
– LTR invertidas derivadas del AAV2
– Producido en celulas de insectos con baculovirus recombinantes
![Page 32: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/32.jpg)
Terapia génica en inmunodeficiencias
• ¿Para quién? – Para IDP graves (con reversiones naturales)
• ¿Cómo? – Mejor con vectores lentivirales SIN– Mejor con vectores lentivirales SIN
• ¿Para cuándo?– Para pronto
• ¿Dónde?
![Page 33: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/33.jpg)
¿Dónde?• París
• Milán
• Londres
• Frankfurt, Zurich • Frankfurt, Zurich
• Boston, Los Angeles, Memphis, Bethesda
![Page 34: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/34.jpg)
Terapia génica en inmunodeficiencias
• ¿Para quién? – Para IDP graves (con reversiones naturales)
• ¿Cómo? – Mejor con vectores lentivirales SIN– Mejor con vectores lentivirales SIN
• ¿Para cuándo?– Para pronto
• ¿Dónde?– Europa y USA
![Page 35: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/35.jpg)
¿Dónde?
![Page 36: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/36.jpg)
¿PARA QUIÉN? (γc, ADA)- Sin alternativa (mortal, intratable: TX, ADA)- Con reversiones naturales (γc, ADA, WAS)- Gen conocido y recesivo. Modelo animal.- Sin selectividad de expresión- ¿Eficiencia? VENTAJA SELECTIVA- ¿Eficiencia? VENTAJA SELECTIVA- ¿Estabilidad? LONGEVIDAD T (10 AÑOS)- Sin regulación- Ej: IL7Rα, Jak3, WASP, Zap70, Rag, Artemis, CD45, Lck, Btk, λ5, µ, Igα, BLNK, (CD40L, MHC)
![Page 37: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/37.jpg)
TERAPIA GENICA DE LAS
INMUNODEFICIENCIAS
CONGENITAS: EL FUTURO
- Recombinación homóloga
- Vectores más seguros (suicide, on/off, self-inactiva-- Vectores más seguros (suicide, on/off, self-inactiva-
ting, insulator) ONCORRETRO NO, LENTI SI
- Selectivos de diana y regulables
- Más eficientes y estables
- Sin necesidad de ventaja selectiva natural
- Mapas de inserción, inserción selectiva
![Page 38: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/38.jpg)
Conclusiones
• La terapia génica funciona en IDP
• Puede ser alternativa al trasplante de precursores, cuando no hay donante
• Los problemas técnicos se van • Los problemas técnicos se van solventando
• Las aplicaciones comerciales no tardarán
![Page 39: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/39.jpg)
Más informaciónInmunodeficiencias congénitas• Grupo de ID de la SEI (GISEI)• Registro Español de ID (REDIP) • Sociedad Europea para las ID (ESID) • Fundación Americana para las ID (IDF) • Fundación Jeffrey Modell (JMF) • US ID network• US ID network• RAPID (Asian PID) • World PID week: 22 al 29 abril (day of immunology)• Asociación Española de Deficits Inmunitarios Primarios (AEDIP)• Associació Catalana de Dèficits Immunitaris Primaris (ACADIP)
Terapia génica• Sociedad Española de Terapia Génica• Sociedad Europea de Terapia Génica• Sociedad Americana de Terapia Génica
José R. RegueiroInmunologíaFacultad de MedicinaUniversidad [email protected]
![Page 40: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/40.jpg)
![Page 41: Terapia génica en inmunodeficiencias - sap.org.ar Alergia e Inmunología... · terapia genica natural precursores afectados (in vivo) fenotipo funcion longevidad reversiÓn expansiÓn](https://reader031.vdocuments.pub/reader031/viewer/2022021913/5c699a2f09d3f20c178b48ed/html5/thumbnails/41.jpg)
¿Cómo lo consigo?
1. ¡Es gratis!
2. Entra en www.esteve.org/misterios-sistema-inmunitario/ o en www.interactive-immunity.net/www.interactive-immunity.net/
3. Deja tus datos y descárgate el pdf