Download - Testarea difuzimetrica
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
1/50
Testarea difuzimetrica
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
2/50
Testare discuri
Rezultatenecorespunzatoare
Mediu CitireInterpretare
Discuri
Tulpinabacteriana
Control intern
de calitate
Tehnicade lucru
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
3/50
Crescuta > 18-20h
Flora mixta
Cultura pe mediu inhibant- selectivdiferential
Alt mediu decat Mueller-Hinton
urnat in laborator necontrolat
pH! "rosime! sterilitate
ulpina bacteriana
Mediu
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
4/50
#tili$are discuri fara importanta pentru specia bacteriana%astrare in conditii necorespun$atoare#tili$are peste limita de valabilitate
&nocul bacterian nestandardi$at'eechilibrarea termica a discurilor'erespectare'umarului de discuri( placaimpilor de lucru) 1* minimpului de incubare
ehnica de lucru
+iscuri
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
5/50
Masurare inexacta mm
'erespectarea "hidurilor
'eefectuarea dupa punerea la punct a metodei acontrolului saptamanal
,one mai mici pentru discurile care se inactivea$arepede ex. AMC! &%M! /
Citire &nterpretare
Controlul intern de calitate
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
6/50
Posibilitati de detectare amecanismelor de rezistenta
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
7/50
Determinarea ESBL
Daca se utilizeaza criteriile interpretativeEUCAST !"# si C$SI !"#
%u este necesaraTestarea pentru ES&$
Modificarea rezultatelor pentru 'cefalosporineaztreonam
peniciline
Testarea ES&$ se recomanda( este obli)atorieInvesti)atii in scop epidemiolo)ic(control a
infectiilor
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
8/50
Suspiciune ESBL e efectueaza testare E BL daca la unul dinpreparatele antimicrobiene din tabel zonele deinhibitie corespundUtilizarea mai multor substanteantimicrobiene creste sensibilitatea detectiei
Tehnica standard pentru metodadifuzimetricaIncubare 3510! "tmosfera obisnuita
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
9/50
Control intern de calitate
test screening ESBL
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
10/50
Test confirmare fenotipica ESBL CLSI 2013
Discuri Cefta$idim 0 " Cefta$idim(acid clavulanic 0(10 "
Cefotaxim 0 " Cefotaxim(acid clavulanic 0(10 "
Tehnica standard pentru metoda difuzimetrica &ncubare *320C
Atmosfera obisnuita Citire 14-18 h
Interpretare) est po$itiv - Cresterea $onei deinhibitie 5 *mm pentru combinatia cu acid clavulanic
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
11/50
Provizoriu detectare ESBL%rin metoda difu$imetrica standard
Ase$area discurilor la 2 cm distanta
+e o parte si cealalta a discului cuamoxicilina(acid clavulanic se plasea$a discurile cu
cefta$idim si cefotaxim
Ceftazidim Cefota*im
Amo*icilina(
Acid clavulanic
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
12/50
Se pot utiliza pentru detectarea ESBLDiscuri ceftazidim, cefotaxim, cefepim si aztreonam in jurul
discului cu amoxicilina/acid clavulanicDaca la ! cm distanta intre discuri nu apare zona de in"i#itie
intre $%C si cefalosporine se repeta testul la & cm distanta
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
13/50
ESBL K.pneumoniae
AMP
AMC
SAM
FEP
CAZ
CXM
TZP
CRO
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
14/50
Control intern de calitate
test de confirmare fenotipica
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
15/50
Klebsiella pneumoniae
limita testuluiPot fi identificate rareori tulpini ES&$producatoare fara a se decela marirea zonei deinhibitie la asociatia cefalosporine(acidclavulanic in cazul
- pre$entei mai mult de un tip de 6/7
- producerii de alte lactama$e care maschea$a 6/7-
AmpC- pre$entei 6/7 9 mutatie porine
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
16/50
ChromID ESBL (bioerieu!"
E! coli rosu&! pneumoniae ' rd(! mirabilis ca niu
")ar selecti' cuantibiotice
inclusi' cefpodo*ime+etectie rapida aenterobacteriilor
ESBL, in 1%$-. ore+ecelare purtatori
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
17/50
#mpC beta $actamaza
1981 lasa / "mbler 1$ Bush
ene $ parte a unui inte)ron
Localizata in periplasma
"cti'a pe cefamicine 24 2T6
*7imino$cefalosporine "8 T4 96
:onobactame "8T6"finitatea mai mica
cefepim cefpirom carbapeneme
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
18/50
$mpC derepresata/ plasmidica
testare cu discuriSe suspecteaza':e$istenta la a -a "en cefalosporine
:e$istenta la cefoxitin ;$ona < 14 mm=
ipsa siner"ismului cefalosporina(clavulanat
&(: la Amoxcillin9clavulanate
Discuri Cefotaxime ;CA,0=
Cefotaxime 9 Cloxacillin ;CC=Cefta$idime ;CA,0=
Cefta$idime 9 Cloxacillin ;CA,C=
Mueller Hinton a"ar ;McFarland 0*=
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
19/50
'nterpretare test $mpC Cefotaxime9Cloxacillin
+ona inhibitie , - mm decat la
Cefotaxime sin"ursi(sau
Cefta$idime9Cloxacillin
+ona inhibitie , - mm decat la
Cefta$idime sin"ur
indica prezenta unei AmpC
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
20/50
Teste confirmatoare cu discuri pentru E BL si "mpTulpina "T ;00#03 produce E BL si nu "mp /lactamaseTulpina 915. produce "mp $lactamase si nu E BL!"8
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
21/50
Etest#mpC
cefotetan ,?$ clo*acillin cefo*itin ,?$clo*acillin
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
22/50
(ezistenta la car#apenemeClasificarea Ambler
Clasa A Clasa & Clasa D Clasa C
/ensibile la Metalo lactamaze Oxacilinaze AmpC
inhibitori lactam Cefalosporinaze
.PC /IM0 IPM 12A345 Hiperexpresie?6/! &M&! /M6 /%M! /&M! ?&M @ariante A 9alte mecanisme 'MC-A '+M-1 impermeabilitate(
porine sau eflux
Descresterea sensibilitatii sau rezistenta la carbapeneme
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
23/50
Car#apeneme E)C$ST !*&+%unctele de ruptura pentru enterobacterii
deceleaza rezistenta clinica importanta;inclusiv maBoritatea carbapenema$elor=
#nele tulpini care produc carbapenema$a pot fisensibile cf punctelor de ruptura se raporteazacum s3a obtinut prin testare/! & sau :Prezenta carbapenemazelor nu influentea$a
includerea in cate"oriile / sau :Decelarea carbapenemazelor se recomanda
sau este obli)atorie pentru controlulinfectiilor
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
24/50
Enterobactriaceae suspiciunea de
producere car#apenemaza&ntermediar sau re$istent la o carbapenema
Cel mai bun indicator- ertapenemul
:e$istenta la una sau mai multe cefalosporine"eneratia &&&-a
Ceftazidim Cefopera$ona
Cefotaxim Cefti$oximCeftriaxon
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
25/50
Se suspecteaza
Carbapenemaza6rtapenem $ona D 22 mm ;Enterobacteriaceae= sau meropenem $ona
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
26/50
Test confirmator car#apenemaza metoda %-T
.%odified -odge Test CLS' !*&+
Mediu 6 a)ar Mueller 7intonInoculE.coliATCC -8 6 suspensie etalonata !0-
Mc9arland diluata "("! cu ser fiziolo)ic sau bulionInocularea mediuluiMetoda standard difuzimetricaUscarea #3"! minute
Depunerea unui disc de ertapenem "!:) ( meropenem"!:)Inocularea cu ansa perpendicular pe disc 330- cm
3 tulpina se studiat
3 tulpini martor ne)ativ0 martor pozitiv
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
27/50
MartoriPozitiv 6 Klebsiella pneumoniaeATCC &AA3";!-
%e)ativ 6 Klebsiella pneumoniaeATCC &AA3";! *0 en$ime
Confera nivel inalt de re$istenta
Codificate ) plasmide! transpo$oni
ri"inea probabilar"anisme care produc amino"lico$ide
Mutatii "ene care codifica respiratia bacteriana
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
44/50
enotipuri de rezistenta $a amino'$icozide
Enterobacteriacae(e!ceptie Klebsiella sppsi Serratia spp.)
9enotipClasic AAC#FI AAC#FII AAC#FI/ AAC
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
45/50
estu$D dub$u disc di/uzie
&ezistenta LS
Eritromicina 3"- :)Clindamicina 3 :)R"#mmS , "mm
Stafilococi
Streptococi
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
46/50
6ta(ilococisc di((usion test pentru rezistenta inductibila la clindamicina
a!Eritro"icina re#istent si clin$a"icina sensibil (enotip Mb! Eritro"icina re#istent si clin$a"icina sensibil -#ona % la clin$a"icina 7enotipM-6, inductibil.
c! &e#istenta la a"bele 're'arate 7enotip M-6,constituti
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
47/50
Crom ID
MRSA
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
48/50
5ene6pert S7stem
2pert 3 test calitativ real3time PCR 6 detectieautomata a tulpinilor cu )ene de rezistenta
2pertanA 3 )enaanA !8! min
2pertMRSA(SA SSTI 6
2pertMRSA(SA &C 3 -! :l
2pertMRSA 3 )ena mecA
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
49/50
Detectare purtatori naza$i &S#2pertMRSA 3 G* min ) re$ultat
;2 min pre"atire proba=
/ensibilitate KI!1 /pecificitate K4!2
&U?SGn &EAD MRSA cercetare ;'ordia"= ma"netic beads cu afinitate pt M:/A
-
5/25/2018 Testarea difuzimetrica
50/50
Conc$uzii%ecesar ca laboratoarele sa lucreze corect
testarile de sensibilitate
Este posibil la nivelul oricarui laborator sa sestabileasca e*istenta
ES&$
Carbapenemaze
9elul rezistentei M$S