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Valutazione della funzione linfocitaria in pazienti affetti da sepsi ricoverati in
terapia intensiva
Francesco Liotta
Dipartimento di Medicina Sperimentale e Clinica
XXX Congresso Sezione SIAAIC ToscanaIX Congresso Sezione SIAAIC Toscana,Emilia Romagna e San MarinoII Congresso Sezione SIAAIC Umbria e Marche Novotel, Firenze 10-11 ottobre 2014
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Dall’infezione localizzata alla sepsi
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Toll-like receptors (TLRs)
TLR 2+TLR X
(1, 6, 10)
TLR 4 TLR 5
LPS Gram-HSPs
LipoproteinePeptidoglicani Gram +
Flagellina
MD-2
CD14
TLR1 TLR2 TLR6 TLR10
TLR 3
dsRNA
TLR 9
CpG ODNs
TLR 7
ssRNA (R848)
TLR 8
Endosoma
TLR 11 TLR 12 TLR 13
nel topo
???
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Matsuda A. et al. J Nippon Med Sch 2012;
Inflammasoma 12
NLRs: Nod like receptors ed iflammasomi, P2Rs: Purinergic receptor P2,
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P2 Rs
TLRs
VIE DI ATTIVAZIONE DELLE CELLULE DELL’IMMUNITA’ INNATA
M Φ
TLRs
NLRs
NLRs: Nod like receptors ed iflammasomi, P2Rs: Purinergic receptor P2,
CK PROINFIAMM. (IL-1, TNF-, IL-6, IL-12, IL-18…)CHEMOCHINE
PROTEINE DI FASE ACUTAATTIVAZIONE DELLA COAGULAZIONE
Attivazione esogena
Attivazione endogena
SINDROME DA RISPOSTA
INFIAMMATORIA SISTEMICA
PAMPs
patogeni
NLRs
NLRs
Inflammasoma
DAMPsHSpFibrinogen …
Cellule necroticheTraumi,Ustioni,Chirurgia
ATP
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- Frequenza cardiaca superiore a 90 b.p.m- T.C. < 36 °C o > 38 °C- Tachipnea- GB < 4000 per mm³ o > 12.000 per mm³, oppure > 10% di forme immature di neutrofili
SIRS: definizione
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Evoluzione della SIRS
Systemic inflammatory
response syndrome(SIRS)
Clearance del patogeno
Multiple organ dysfunction
syndrome (MODS)
Persistenza del patogeno e della flogosi sistemica
Guarigione
Exitus
Attivazione dei meccanismi di
immunoregolazione
Compensatory anti-inflammatory response syndrome
(CARS)
INFEZIONI SECONDARIE
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Le cellule del sistema immunitario in corso di CARS
Cavaillon and Adrie : In "Sepsis and Non-Infectious Systemic Inflammation – From Biology to Critical Care“. 2009
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Emergency myelopoiesis
Alex G Cuenca et al. Mol Med. 2011
MDSC
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Valutazione fenotipica e funzionale linfocitaria nei pazienti ricoverati in Terapia Intensiva
• Inizio reclutamento: Luglio 2013 - Luglio 2014
• Composizione della casistica: Sepsi (n 47)
Insufficienza respiratoria (n 37)
Politrauma (n 40)
Anossia cerebrale (n 15)
Altro (n 24)
TOTALE n = 168
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Composizione della casistica
Numero Età (aa)Media±DS
MinMax
Sesso(M/F)
Patogenoidentificato
Totalepazienti
47 69,4±13.91886
30/17 9(19%)
Pazienti guariti
33(70.2%)
73,6±7,96486
23/10 4(12%)
Pazienti deceduti
14(29.8%)
65,6 ±191885
7/7 5(29%)
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CD4+IL-17+CD8+IL-17+
p = 0.01
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
Cellu
le p
osit
ive
(%)
Fenotipo funzionale dei linfociti T nei pazienti con sepsi rispetto a controlli sani (I)
Media controlli sani
Media pazienti
CD8+ CD4+
p = 0.001
CD4+IFN+CD8+IFN+
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
p = 0.03
p = 7x10-5
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CD4+IL-2+CD8+IL-2+
p = 3x10-10
Cellu
le p
osit
ive
(%)
CD4+Foxp3+CD25+
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
CD4+TNFα+CD8+TNFα+
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
Fenotipo funzionale dei linfociti T nei pazienti con sepsi rispetto a controlli sani (II)
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Fenotipo funzionale dei linfociti T nei pazienti con sepsi rispetto a controlli sani (III)
CD4+ perf+ CD8+ perf+
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
p = 2,5x10-7
CD4+ granz+CD8+ granz+
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
p = 0,01
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NK IFN+NK perf+NK granz+
Fenotipo funzionale dei linfociti NK nei pazienti con sepsi rispetto a controlli sani
p = 0.002p = 1,9x10-5
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CD4(%)
CD8(%)
CD4IFN-g
CD8IFN-g
CD4TNF-a
CD8TNF-a
NKIFN-g
CD4granz
CD8granz
CD4perf
CD8perf
CD4IL-2
CD4Foxp3
- - - - -
-
Tabella riassuntiva
I marcatori fenotipico/funzionali valutati hanno un valore predittivo nei pazienti con sepsi?
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Parametri di gravità di malattia utilizzati nei pazienti ricoverati in ICU: Simplified Acute Physiology Score (SAPS)
II
- Age- Heart Rate- Systolic Blood Pressure-Temperature- Glasgow Coma Scale- Mechanical Ventilation or CPAP- PaO2- FiO2- Urine Output- Blood Urea Nitrogen- Sodium- Potassium- Bicarbonate- Bilirubin- White Blood Cell- Chronic diseases- Type of admission
SAPS
IIPazienti dimessi
Pazienti deceduti
p = 0.005
Pazienti ricoverati per politrauma
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SAPS
II
Confronto tra la popolazione dei pazienti dimessi (n=33) rispetto ai pazienti deceduti (n=14 )
p = 0.14
Lin
foci
ti/m
m3
Pazienti dimessi
Pazienti deceduti
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Pazienti dimessi
Pazienti decedutiCe
llule
pos
itiv
e (%
)
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
Confronto tra la popolazione dei pazienti dimessi rispetto ai pazienti deceduti
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Pazienti dimessi
Pazienti deceduti
Cellu
le p
osit
ive
(%)
p = 0.006
p = 0.0001
p = 0.01
Cel
lule
po
siti
ve (
%)
p = 0.03 p = 0.08
Confronto tra la popolazione dei pazienti dimessi rispetto ai pazienti deceduti (II)
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Frequenza dei soggetti con esami oltre i limiti di riferimento nel gruppo dei soggetti dimessi rispetto a quelli deceduti
CD8+IFN-g+
CD4+TNF-a+
CD8+TNF-a+
CD4+IL-17+
CD4+Foxp3+
CD4+Foxp3+
Pazienti dimessi
4/33(12%)
3/33(9%)
0 1/33(3%)
5/33(15%)
4/33(12%)
Pazienti deceduti
7/14(50%)
4/14(28,5%)
3/14(21,4%)
3/14(21,4%)
0 5/14(35,7%)
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Frequenza dei soggetti con esami oltre i limiti di riferimento nel gruppo dei deceduti
CD8+IFN-g+
CD4+TNF-a+
CD8+TNF-a+
CD4+IL-17+
CD4+Foxp3+
# 1
# 2 Si Si Si
# 3 Si Si Si
# 4 Si Si Si
# 5
# 6 Si
# 7 Si Si Si
# 8 Si Si Si
# 9 Si
# 10
# 11 Si Si
# 12 Si
# 13 Si
# 14 Si
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Conclusioni
1. I pazienti con sepsi presentano un profilo funzionale linfocitario caratteristico
2. Tra i parametri studiati quelli che si associano in modo diretto alla prognosi
sono: TCD8+IFN+, TCD4+TNFα+, TCD8+TNFα+, TCD4+IL-17+. La frequenza dei
linfociti TCD4+CD25+Foxp3+ ha una tendenza ad una correlazione inversa con
la prognosi sebbene non si raggiunga la significatività statistica
3. L’individuazione di una adeguata formula matematica che tenga in
considerazione tutti i parametri sopraindicati potrebbe permettere di definire
maggiore accuratezza la prognosi dei pazienti settici
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Ringraziamenti
DAI-Emergenza Accettazione e Accoglienza Anestesia e Rianimazione
Adriano PerisManuela Bonizzoli
Lucia PerrettaPeggy Ruggiano
Laura Maggi Veronica SantarlasciManuela CaponeValentina QuerciMaria Caterina RossiAlessio Mazzoni
Paola ParronchiLucia Filì
Alessandra VultaggioAndrea Matucci
Sergio RomagnaniEnrico MaggiFrancesco AnnunziatoLorenzo Cosmi